提取工艺范文10篇

提取工艺范文篇1

1.1仪器日本岛津高效液相色谱仪（N2000色谱工作站）；UV－1700紫外分光光度计（日本岛津公司）；超声波发生器（昆山市超声仪器有限公司）；HHSY21-Ni4-C型电热恒温水浴锅（北京长源实验设备厂）。

1.2材料飞蓬干燥全草（采自长白山，经长春中医药大学邓明鲁教授鉴定）；野黄芩苷对照品，芦丁标准品（供含量测定用）购于中国药品生物制品检定所；其余试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1飞蓬总黄酮含量测定

2.1.1对照品溶液制备精密称取干燥至恒重的无水芦丁对照品5.05mg置于25ml容量瓶中，加适量70%的乙醇超声处理5min，用乙醇定容至刻度，摇匀，得浓度为0.202mg/ml的对照品储备液。

2.1.2供试品溶液制备精密称取样品干燥粉末1g，置于50ml容量瓶中，加适量70%的乙醇超声处理5min，用乙醇定容至刻度，摇匀，作为供试品液。

2.1.3测定波长选择精密吸取芦丁对照品溶液0.5ml和样品溶液1ml于具塞试管中，精密加入5%亚硝酸钠溶液0.3ml，摇匀，放置6min，再加入10%硝酸铝0.3ml，摇匀，放置6min，加4%NaOH溶液4ml，用70%的乙醇定容至10ml，摇匀，放置10～15min。以相同试剂为空白。在400～900nm波长范围内扫描，记录最大吸收波长为510nm，见图1。

图1芦丁和飞蓬样品最大吸收波长图

2.1.4标准曲线制作精密吸取标准芦丁溶液0.0，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml分别加入6支具塞试管中，按照“2.1.3”项操作，于510nm处测定吸光度。并以吸光度（A）为纵坐标，芦丁对照品溶液浓度（C,mg/ml）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：A＝11.227C-0.013，r＝0.9999（n=6），见图2。结果表明：在0.101～1.01mg范围内芦丁对照品显色后的吸光度与浓度呈良好线性关系。

图2芦丁标准曲线图

2.1.5供试品含量测定取供试品溶液0.2ml于具塞试管中，按照“2.1.3”项下操作，于510nm处测定吸光度,然后根据线性方程计算其总黄酮的含量。

2.2飞蓬灯盏乙素含量测定

2.2.1色谱条件ChmmasilC18柱(5μm，4.6mm×150mm)；测定波长λ＝335nm（依卫生部颁发的药品标准）；流动相：甲醇－0.1％磷酸（40：60）；流速1.0ml／min。

2.2.2对照品溶液制备精密称取野黄芩苷对照品1.05mg，置10ml容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，过滤，摇匀，制成浓度为0.105mg/ml的标准储备液。

2.2.3供试品溶液制备精密称取样品干燥粉末1g，置于50ml容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，过滤，摇匀，作为供试品液。

2.2.4标准曲线制作精密量取对照品溶液2，4，6，8，10，12，14，16μl注入液相色谱仪，测定野黄芩苷色谱峰的面积。并以吸收峰面积（A）为纵坐标，进样量（C,μg）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：A=1359349.2409C-68257.6517，r=0.9999（n=8），结果表明野黄芩苷浓度在0.21～1.68μg范围内与峰面积具有良好的线性关系。

2.2.5供试品含量测定精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得，见图3。

2.3提取工艺的优选

2.3.1提取溶剂的优选称取100g飞蓬，分别加入14倍量不同的提取溶剂，80℃水浴恒温提取2h，抽滤，定容，分别按“2.1”测定总黄酮含量，按“2.2”项中方法测定灯盏乙素含量，结果见表1。表1不同提取溶剂的总黄酮和灯盏乙素含量

从表1可知，碱液提取虽然得膏率很高，但是总黄酮和灯盏乙素含量低，且碱液提取加热容易破坏黄酮类化合物的母核。用水和乙醇作为提取溶剂，虽然得膏率相同，但是水提取的总黄酮和灯盏乙素含量较低，且由于其极性大，易把蛋白质、糖类等溶于水的成分浸提出来，使得提取液存放时，易腐败变质。乙醇提取的总黄酮和灯盏乙素含量高，因此为这3种溶剂中的最佳提取溶剂。下面的实验均采用乙醇作为提取溶剂，分别选取乙醇浸渍法、渗漉法、回流提取法、索氏提取法、超声波法进行提取。

2.3.2提取方法的优选称取100g飞蓬，分别选取乙醇浸渍法、渗漉法、回流提取法、索氏提取法、超声波法进行提取，提取液抽滤，定容，分别按“2.1”项中方法测定总黄酮含量，按“2.2”项中方法测定灯盏乙素含量。不同方法提取的飞蓬总黄酮和灯盏乙素含量测定结果见表2。表2不同提取方法的总黄酮和灯盏乙素含量

经过实验证明，不同提取方法直接影响着醇提工艺中的总黄酮和灯盏乙素的测定结果。综合考虑，用回流法提取飞蓬中的总黄酮和灯盏乙素是比较合适的方法。为此，设计正交，进一步优化采用乙醇回流法进行提取的最佳醇提工艺。

2.3.3正交实验法优选飞蓬乙醇回流提取工艺根据实际情况，选择乙醇浓度、溶媒量、提取时间、提取次数作为考察因素，每个因素选择3个水平，因素水平表见表3。表3正交实验设计因素水平按均匀取样的规则取飞蓬100g，按L9（34）正交实验表安排实验，每组两次平行实验，以总黄酮和灯盏乙素含量为评价指标，测定结果取平均值。结果见表4。表4正交实验方案与结果表5方差分析

以总黄酮提取率为考察指标，直观分析结果表明A2>D3>C1>B2；以灯盏乙素提取率为考察指标，直观分析结果表明A2>D3>C3>B3，方差分析（表5）结果表明A因素和D因素对总黄酮及灯盏乙素的提取均具有显著性影响，而B因素及C因素对提取结果没有影响，为了节省时间和能源，最终确定工艺条件为A2B1C1D3，即以70%乙醇回流提取3次，1h/次，加醇量为每次14倍量。

2.4验证实验称取药材按最佳工艺进行验证实验，结果表明总黄酮和灯盏乙素含量与正交实验结果吻合，取得较好的结果，说明该工艺可行。

3讨论［4］

目前，提取工艺筛选试验中常用化学法、生物学法及有效浸出物综合评价的方法，因此实验中仅用一种评价指标筛选提取工艺条件往往不够全面。而且飞蓬中含有多种黄酮类化合物，采用紫外分光光度法测得结果通常是总黄酮的含量，并不能准确反映灯盏乙素的含量，本实验经研究建立了灯盏乙素含量测定的HPLC法，提高了准确度，稳定可靠。

在实验中，曾试用了甲醇－0.5％磷酸溶液(45∶55)、甲醇－1％磷酸溶液(35∶65)、乙腈－1％冰醋酸(25∶75)为流动相条件，经反复比较，以正文所选流动相重复性最佳，出峰时间较快，峰形尖锐、对称，且灯盏乙素主峰与杂质峰明显分离。

通过L9（34）正交实验，最终确定了飞蓬中总黄酮和灯盏乙素醇提工艺的最佳条件，并通过验证实验证明该工艺，稳定可靠，有效富集了飞蓬中总黄酮和灯盏乙素的含量，为进一步开发飞蓬中总黄酮有效部位奠定基础。

【参考文献】

［1］林容,陈艺林.中国飞蓬属及其邻属的研究［J］.植物分类学学报,1973,11：399.

［2］吉林省中医中药研究所,长白山自然保护区管理局,东北师范大学生物系.长白山植物药志［M］.长春：吉林人民出版社，1982：1177.

［3］胡宇慧,张浩,张志锋.飞蓬属多种植物的化学成分含量研究［J］．药物分析杂志,2005,25(1)：21.

［4］谢秀琼.中药新制剂开发与应用［M］.北京：人民卫生出版社,2000：14.

提取工艺范文篇2

此工艺采用醇提法进行，生产过程中使用的酒精需要回收并循环使用，其具体工艺流程为：首先将原药材进行预处理后，投入到提取罐中，加入一定量酒精回流提取，然后收集提取液；提取液再经过浓缩器进行浓缩，将浓缩液进行喷雾干燥后即制成中间体。物料衡算是设备选型的依据，决定生产空间大小，在物料衡算基础上进行合理生产安排，是防止多品种生产时产生交叉污染的基本手段之一。进行物料衡算之前，首先应了解车间的年生产任务、生产班制、每班工作时间以及年生产时间等，根据计算可以得出此工艺原材料消耗量以及每个阶段中间品的产量，最后选择适合生产能力的设备（提取罐、浓缩设备、干燥设备等）进行匹配。

2平面布局工艺设计

以某中药提取车间为例，根据提取车间的自身特点，将车间平面设计成矩形，这样便于工艺设备的合理布置，便于安排通道及出入口，且能提供较多自然采光和自然通风的墙面。

2.1垂直布局设计，节省占地面积，合理利用空间

从整体布局上考虑，以提取罐为中心，采用垂直布局模式，将整个车间分为3层（局部有4层），第1层主要由酒精回收间、出渣间以及公用工程房间组成，第2层主要为前处理间、提取操作间及生产辅助间，第3层为喷雾干燥区（D级洁净区），主要进行浸膏处理操作。提取车间所使用的酒精回收装置尺寸较大，高度较高，因此将酒精回收单元分3层布置，第1层布置酒精回收釜，第2层布置酒精储罐，第3层夹层布置冷凝器、冷却器等。在提取与出渣的设计上也采用垂直布局的方式，将提取操作区与出渣区分层布置，一方面保证出渣口的高度，便于药渣的清除和转运，另一方面减少出渣操作对整个生产区的污染。

2.2人、物流分开设置，避免交叉污染

物流主入口设在东侧，靠近前处理区，原药材通过货梯运至第2层切断、净制、挑拣间进行前处理，然后至提取操作间进行提取，提取液经浓缩、喷雾干燥后制成中间体。如此将人、物流分开设置，有利于避免造成污染和混淆。

3工艺管道布置

提取车间的工艺管道包括提取罐料液自循环管道、提取液输送管道、浓缩液输送管道、酒精输送管道等。提取车间的工艺管道布置在符合GMP要求的前提下进行设计。管道设计可以采用明敷方式，以减少投资，并有利于安装、操作和检修。设计时，尽量做到管线短捷，管道必须有交叉和拐弯时，应避免产生死角和盲管等。图3为某提取车间的工艺管道布置图，提取设备、泵以及储罐分别沿南北两侧墙布置，中间留出运输通道和操作空间，其工艺管道大多沿墙、地面或楼面进行敷设，多条管路集中布置，并平行敷设，做到整齐、美观、易操作。管道上标注有管道等级、管道号、标高、物料名称等。不同管道的相互位置，管道与墙壁、管道与管道之间的距离均参照化工管道相关设计规范进行确定。

4具体问题及解决方案

4.1投料操作不方便及解决方案

提取操作间的常规做法是将提取罐的罐耳挂在楼板上，投料口高出地面的高度给投料操作带来了困难，需要搭建钢平台作为投料层，每次进行提取操作前，操作人员先上至钢平台，再将物料投入提取罐，这种做法的缺点是操作不方便，且操作周期长。为了解决上述问题，在设计时可考虑在提取操作间局部做降板，如图4所示，使提取罐的投料口处基本与地面平齐，这样操作人员可直接将物料投入其中。改进后的操作层兼顾了2种功能，即投料和操作可以同时进行，这样使操作更加快捷，效率得到提高。

4.2出渣间污染及解决方案

中药提取后的药渣排放是中药提取车间的一大难题。2010版GMP中指出：中药提取后的药渣如需暂存、处理时，应当有专用区域。为了更好地避免出渣间出现污染问题，设计时应注意以下几点：

（1）出渣间与其他功能间最大限度隔离，直接对外开门，将其对生产区的污染风险降至最低。

（2）出渣间不再设计贮渣功能，药渣卸下后立即运走，每次出渣后立即进行全面彻底清洗。借助药渣压缩设备，将药渣卸到料斗内，由压缩机挤压至原体积的1/2，挤压所产生的污水由排污管道排入污水管，这样不仅避免了药渣和药渣滴水造成的二次污染，同时由于药渣体积压缩而大幅降低了运输费用。

（3）出渣间的墙面、地面宜采用瓷器类物质贴面，既便于清洗，又能避免提供霉菌附着基。

（4）在满足出渣口能打开及方便出渣车进出的前提下，出渣高度尽可能降低，避免飞溅的渣水造成二次污染。

5结语

提取工艺范文篇3

1.1仪器

UV-VIS8500分光光度计；电子天平BP121S；欧前胡素对照品（供含量测定用，批号为110826-200511，由中国药品生物制品检定所提供）；其它试剂均为分析纯。

1.2药材

本实验所用白芷药材购于四川省中药材公司，经成都中医药大学中药鉴定教研室鉴定为伞形科植物白芷Angelicadahurica(Fisch.exHoffm.)Benth.etHook.f.的干燥根。

2方法与结果

2.1粉碎度的考察

2.1.1样品溶液的制备取白芷适量，粉碎，分别称取过10目，20目，30目的样品各20g，分别加入8倍量75%乙醇，提取3次，3h/次，药液滤过，分别定至500ml，备用。

2.1.2白芷总香豆素含量测定照紫外分光光度法（《中国药典》2005年版Ⅰ部附录IVA）测定。

精密量取欧前胡素对照品溶液（0.0522mg/ml）1.0，1.5，2.0，2.5，3.0ml，分别置于10ml量瓶中，用甲醇定容至刻度，以甲醇作为空白液。于300nm处测定A值，以浓度（C）对吸收度（A）回归。得回归方程：A=47.3953C+0.01659（r=0.9999）。精密量取上述备用液各0.8ml于100ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，作为供试品液，测定计算即得［2］。

2.1.3实验结果见表1。

2.2乙醇提取工艺研究［3～6］

2.2.1样品溶液的制备取白芷，粉碎，过20目筛，按所选因素及水平(见表2)，采用L9(34)正交表设计实验(见表3)进行白芷提取，得9号样品溶液，备用。表1粉碎度考察实验结果（略）

2.2.2水浸出物量（干膏率）的测定精密吸取上述备用液30ml，分别置于已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，置烘箱中干燥3h（105℃），取出，置于干燥器中放置30min，称重，计算干膏收得率。

2.3白芷总香豆素含量测定照紫外分光光度法（《中国药典》2005年版Ⅰ部附录IVA）测定精密量取备用液0.8～1.6ml于100ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，作为供试品液，测定，代入上述回归方程，计算，即得。

2.4实验结果采用中国医统软件包（PEMS）进行处理分析，结果见表2～4。表2因素水平（略）表3正交实验设计及结果（略）

3结论

从以上粉碎度考察实验结果可以看出，采用过20目筛的白芷粗粉进行提取，提取效果较好；从正交实验方差分析结果可以看出，B因素有显著的影响，影响因素B>C>A>D；且B3，C3，A2，D1为最佳，故白芷乙醇提取最佳工艺为：加8倍量75%乙醇，提取3次，3h/次。表4方差分析（略）

4讨论

在粉碎度考察实验中，发现粉碎度过细，提取率反而下降，故白芷提取过程中不宜粉碎过细，避免提取过程中产生糊化现象，影响提取效果。

【参考文献】

［1］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2000：69.

［2］马逾英，钟世红，贾敏如，等.紫外分光光度法测定川白芷中总香豆素类成分的含量［J］.华西药学杂志，2005，20(2)：159.

［3］陈贤春，王玉蓉，路世鹏.白芷提取工艺的研究［J］.中成药，2005，27（2）:145.

［4］梁明金，杨广德，贺浪冲.白芷中欧前胡素的提取方法研究［J］.中成药，2000，22(12):829.

［5］王希，陈秀芳.正交试验法优选白芷的提取工艺［J］.中药材，2001，24(8)：591.

［6］贾英，孙振蛟，包文芳.正交设计法优选白芷的提取工艺［J］.沈阳药科大学学报，2005，22(3)：217.

提取工艺范文篇4

药物的临床应用中首先要做的就是根据不同情况选择剂型。一般来说，剂型选择时需要考虑以下几个方面的需要：首先，需要考虑病情相关状况。这需要分析病人发病特点、发病症状、病情严重程度和紧急程度，病灶的具体部位等等。这些因素都会影响到剂型的选择，急症患者需要吸收快释放快的剂型，慢性病患者需要释放缓慢的剂型，局部病症比如肿瘤等病症需要靶向给药等等，总之要综合考虑患者状况和病症的需要来选择合适的剂型。第二，剂型选择时要充分考虑药物的理化性质。中药的品种很多，而且化学成分较为复杂，多属于复方中药，少则几种化学成分，多达几百种，这就给剂型选择带来了很大的困难。选择剂型要结合临床需求，为了使得药剂能够最大限度地发挥功效直达病灶，首先就要弄清药剂成分属于水溶性成分、脂溶性成分还是挥发性成分，只有了解这些成分特点才能有的放矢地选择合适的剂型达到治疗的目的。第三，剂型选择要全面考虑患者的具体情况，比如患者的性别、年龄、身体状况等等。儿童用药我们一般选择糖浆剂和注射剂，咽喉病的患者一般不采用口服固体制剂，慢性病患者一般不适宜选择注射剂。第四，要成分考虑处方剂量的要求。虽然我们的有效成分提取工艺取得了长足的进步和发展，但是依然不可能实现0无效成分，甚至不少药物的无效成分比例很高，药物精制纯化方面还有很大的亟待进步的空间，因此，如果处方量大的话不适宜做成胶囊、片剂。

2工艺设计路线的确定

工艺设计路线的确定要遵循相关的中医理论，要考虑实践用药需要和药剂化学成分。例如有的药物的化学成分既包括了脂溶性的成分，也包括了水溶性的化学成分，丹参就属这种情况，治疗不同疾病的时候需要考虑的成分会有所不同，因此在工艺路线设计时要考虑到处方主治病。总之，在工艺路线设计时，要细致分析药性、有效成分的厉害性质，还有生产条件、生产成本，设计所得的提取路线要经过仔细论证，严密论证路线可行性，并进行预试验来把关。工艺路线设计的原则就是既要保证有效成分的提取效率，又要简化工艺步骤追求生产的经济性。在遵守上述原则的前提下，制药企业需要提高认识，引入先进技术和设备，不断努力以期提高新药研制开发的技术要求，必要时还需考虑单提或特殊的提取路线。

3提取工艺设计条件的优选

确定工艺路线之后，就要考虑优选提取工艺条件。工艺条件也是影响提取效果和药效的关键因素之一。所谓优选提取工艺条件，就是为药剂有效成分提取寻找最佳的可以获得高提取率、高质量、好疗效的工艺条件，常用的方法有均匀设计法、正交法等等。值得注意的是，优选时要选中控制目标，不能舍本逐末，比如一般我们不以出膏量的多寡来判断提取物的质量优差，而是以目标药剂的主要化学成分或者有效成分来作为控制目标。部分特殊的药物和处方，可能需要考虑其他重要指标，比如毒副作用大小等等。

4分离与纯化工艺设计研究

提取工艺范文篇5

高效液相色谱仪：LC－6AHPLC（SCL－6A系统控制器，LC－6A恒流泵，SPD－6AC紫外检测器，威玛龙色谱工作站）；KQ218型超声清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；AR2140型电子分析天平（上海奥豪斯公司）。

所有中药材由安徽省亳州市药材总公司提供，均符合《中国药典》2005版及相关地方标准；黄芩苷和丹酚酸B对照品由中国生物制品检定所提供，批号分别为110715－200212和111562－200302，供含量测定用。

甲醇、乙腈为色谱纯，其它试剂均为分析纯。

2方法与结果

2．1醇提工艺条件的优化以药材黄芩中有效成分黄芩苷的提取转移率和提取液的出膏率作为测定指标，采用正交实验的方法对乙醇提取工艺进行了优选。

2．1．1醇提液中黄芩苷的测定方法色谱条件：色谱柱为DiomandTM（200mm×4．6mm，5μm）；流动相为甲醇－水－磷酸（47∶53∶0．1）；紫外检测波长280nm；柱温为室温；流速1ml／min；进样量：10ml［1］。在上述色谱条件下供试品溶液中黄芩苷能与其它组分达到基线分离。

2．1．2因素水平表的设计与正交实验取影响该提取过程的4个主要因素：乙醇浓度、溶媒量（加水倍量）、提取次数、提取时间，按L9（34）正交实验表进行实验，每个因素设计3个水平。因素水平表见表1。结果见表2。

表1醇提工艺的因素水平（略）

表2黄芩等醇提工艺正交实验及结果（略）

*综合评分为出膏率＋提取率

结果分析：各因素水平之间的极差大小依次为A＞D＞B＞C，表明乙醇浓度对实验结果影响最大，其次是煎煮次数、溶剂用量，提取时间对实验结果的影响最小，最佳条件为A1B3C2D3。但B3与B2相差极小，而若选择B2可较B3节约资源，并减小需浓缩的药液体积，大大节约能源，降低成本，故选择A1B2C2D3作为提取过程的工艺参数。经3批验证实验，黄芩苷的提取率平均为95．51％，出膏率的平均为17．01％，表明该工艺基本合理可行。

2．2水提醇沉工艺的优化以药材丹参中有效成分丹酚酸B的提取转移率和提取液的出膏率作为评价指标，采用正交实验的方法对水煎煮的提取工艺进行优化。

2．2．1水提液中丹酚酸B的测定方法色谱条件：色谱柱为DiomandTM（200mm×4．6mm，5μm）；流动相为甲醇－乙腈－水－甲酸（30：10∶58∶2）；紫外检测波长286nm；柱温为室温；流速1ml／min；进样量10μl。在上述色谱条件下供试品溶液中丹酚酸B能与其它组分达到基线分离。

2．2．2水提过程因素水平的选择及统计结果取影响水提取工艺的3个主要因素：水的用量、提取次数、提取时间，按L9（34）正交实验表进行实验，每个因素设计3个水平。因素水平见表3，结果见表4，方差分析见表5。

表3丹参等水提工艺因素水平（略）

表4丹参等L9（34）水提工艺正交实验及结果（略）

*综合评分为出膏率＋提取率

表5丹参等水提工艺实验结果的方差分析（略）

结果分析：由表4数据可以看出，各因素对实验影响的大小依次为C＞B＞A，即煎煮次数影响最大，其次为煎煮时间，最小为加水量。由表5可以看出，影响因素A和B影响不显著，C因素影响较显著，最佳实验条件为A3B2C3，但A3与A2相差较小，而若选择A2可较A3少节约水资源，并减小需浓缩的药液体积，大大节约能源，降低成本，节省时间，故应选择A2B2C3，即正交表实验，丹酚酸B的提取率平均为91．36％，出膏率平均为20．37％，表明该工艺基本合理可行。

2．2．3醇沉工艺因素水平表的设计取影响该过程的3个主要因素：浸膏相对密度、醇沉液的乙醇浓度、醇沉时间，按L9（34）正交实验表进行实验，每个因素设计3个水平。因素水平表见表6，结果见表7～8。

表6丹参等醇沉工艺因素水平（略）

表7丹参等醇沉工艺正交实验及结果（略）

丹酚酸B转移率=醇沉后丹酚酸B含量醇沉前丹酚酸B的含量×100%

杂质去除率（%）=醇沉前的固体量-醇沉后的固体量醇沉前的固体量×100%

综合评分（%）＝丹酚酸B的转移率＋杂质去除率

表8丹参等醇沉工艺实验结果的方差分析（略）

结果分析：各因素对实验影响的大小依次为C>A>B，即醇沉时间影响最大，其次为浸膏密度，最小为乙醇浓度，最佳实验条件为A3B2C1，但B1与B2相差极小，而若选择B1可较B2则乙醇的用量减少，并减小需浓缩的药液体积,大大节约能源，降低成本，节省时间，而且由方差分析结果可知，3个因素均影响不显著，故应选择A3B1C1，即：醇沉前的浸膏相对密度为1.20，醇沉后乙醇浓度为60%，醇沉时间为12h。经3批验证实验，丹酚酸B的转移率平均为91.60%，杂质去除率的平均为41.42%，表明该工艺参数基本合理可行。

3讨论

本品为中药复方制剂，药味多，成分复杂。根据各药材的理化性质，将22种药材分成3部分，分别采用醇提、水提醇沉的提取方法。

通过正交优化实验，以有效成分转移率和出膏率为评价指标，确定了最佳工艺参数。经过3批验证实验，结果合理可行，且可控性强。

【参考文献】

提取工艺范文篇6

1.1仪器Agilent1100Series高效液相色谱仪（安捷伦公司）；SartoriusBP211-D电子天平（德国赛多利斯公司）。

1.2试药

麻黄、芍药、细辛、干姜、甘草、桂枝、半夏和五味子药材（均购于成都市荷花池中药材市场）；磷酸二氢钾、磷酸；甲醇和乙腈为色谱纯。

2方法［2，3］

2.1指标及含量测定方法《中国药典》2005版收载的小青龙汤现有制剂均只以方中的芍药苷为质量控制指标，因此本方保留该质量控制指标。复方中麻黄为君药，因此增加盐酸麻黄碱为质量控制指标。

2.1.1盐酸麻黄碱含量测定方法盐酸麻黄碱对照品溶液的制备：精密称取盐酸麻黄碱对照品10.83mg于100ml容量瓶中，以甲醇定容，摇匀，精密吸取2ml于25ml量瓶中，甲醇定容，摇匀，过0.45μm微孔滤膜，取续滤液备用。

麻黄供试品的制备：精密量取复方提取液适量（相当于麻黄生药0.2g）于已干燥的锥形瓶中，低温挥干，以25ml甲醇溶解，称定重量，超声处理45min，放冷，再称定重量，以甲醇补足减少量，摇匀，滤过，精密量取续液1ml，置中性氧化铝柱（100～200目，内径1cm，1.5g）上，以50%甲醇洗脱，收集洗脱液约9ml于量瓶中，加磷酸1滴，以50%甲醇定容摇匀，过0.45μm微孔滤膜，取续滤液备用。

测定方法：C18柱（250mm×4.6mmDiamonsil5μm），流动相为乙腈-0.1%磷酸（9∶90），以三乙胺调节pH=4.5，检测波长207nm，流速1ml/min，柱温25℃，理论板数以盐酸麻黄碱峰计，不得低于3000。

盐酸麻黄碱标准曲线的绘制：分别吸取盐酸麻黄碱对照品溶液2，4，6，8，10，12，16，20，24μl进样，按照测定方法测定，绘制标准曲线。结果见图1。回归曲线Y=1722.7X+39.103，R2=0.9998，盐酸麻黄碱进样量在0.017288～0.207456μg间具有良好的线性关系。

2.1.2芍药苷含量测定方法

芍药苷对照品溶液的制备：精密称取芍药苷对照品适量，加入量瓶中，甲醇定容，制成60μg/ml的甲醇对照品溶液，过0.45μm微孔滤膜，取续滤液备用。

白芍供试品溶液的制备：精密量取复方提取液适量（相当于白芍生药0.1g），水浴挥干，以35ml稀乙醇转移至50ml量瓶中，超声处理30min，冷却至室温，稀乙醇定容，摇匀，过0.45μm微孔滤膜，取续滤液备用。

测定方法：C18柱（250mm×4.6mm,Diamonsil5μm），流动相为乙腈-0.1%磷酸（14∶86），检测波长230nm，流速1ml/min，柱温25℃，理论板数以芍药苷峰计，不得低于2000。

芍药苷标准曲线的绘制：分别吸取芍药苷对照品溶液1，2，3，4，6，8μl进样，按照测定方法测定，绘制标准曲线，（见图2）。回归曲线Y=15414X+2.5391，R2=0.9998，芍药苷进样量在0.006～0.048μg间具有良好的线性关系。

2.26种提取工艺的优化研究及结果

2.2.1不同提取溶剂回流提取工艺研究及结果以水、60%乙醇、95%乙醇为提取溶剂，按L9（34）正交表进行实验。因素水平安排按照表1执行，实验按各正交表实施，结果用SPSS11.5作方差分析，确定优化工艺。结果见表2～7。表1不同溶液回流提取工艺因素水平（略）表2以水为溶剂回流提取考察结果（略）表3以水为溶剂回流提取方差分析结果（略）表4以60%乙醇为溶剂回流提取考察结果（略）表5以60%乙醇溶剂回流提取方差分析结果（略）表6以95%乙醇为溶剂回流提取考察结果（略）表7以95%乙醇为溶剂回流提取方差分析结果（略）

由方差分析结果分析得，影响因素大小为：提取次数（C）＞提取溶剂量（A）＞提取时间（B），3个因素均具有显著性影响，优化工艺为A2B2C3。

由方差分析结果得，影响因素大小为：提取时间（B）＞提取溶剂量（A）＞提取次数（C），3个因素均具有显著性影响，优化工艺为A3B2C2。

由方差分析结果分析得，影响因素大小为：提取次数（C）＞提取溶剂量（A）＞提取时间（B），3个因素均具有显著性影响，优化工艺为A3B2C3。

2.2.2不同提取溶剂渗漉提取工艺研究及结果以水、60%乙醇、95%乙醇为提取溶剂，按L9（34）正交表进行实验。因素水平安排按照表8执行，实验按各正交表实施，结果用SPSS11.5作方差分析，确定优化工艺。结果见表9～14。表8不同溶剂渗漉提取工艺因素水平（略）表9以水为溶剂渗漉提取考察结果（略）表10以水为溶剂渗漉提取方差分析结果（略）表11以60%乙醇为溶剂渗漉提取考察结果（略）表12以60%乙醇溶剂渗漉提取方差分析结果（略）表13以95%乙醇为溶剂渗漉提取考察结果（略）表14以95%乙醇为溶剂渗漉提取方差分析结果（略）

由方差分析结果分析得，影响因素大小为：渗漉液量（A）＞渗液速度（C）＞药材粒度（B），A和C因素具有显著性影响，优化工艺为A3B2C3。

由方差分析结果得，影响因素大小为：药材粒度（B）＞渗漉液量（A）＞渗漉速度（C），B因素具有显著性影响，优化工艺为A1B3C1。

由方差分析结果分析得，影响因素大小为：渗漉液量（A）＞药材粒度（B）＞渗漉速度（C），A因素具有显著性影响，优化工艺为A2B2C1。

2.3不同提取工艺及提取溶剂对提取工艺的影响对比研究

2.3.1不同正交实验因素分析结果见表15。表15不同正交实验结果分析（略）

2.3.2不同优化提取工艺的对比研究按照上述各种优化工艺，分别称取复方药材进行提取试验，以提取液中盐酸麻黄碱和芍药苷的含量为指标加权（权重系数依次为0.6和0.4），综合评价提取工艺。对比不同提取工艺的差异。结果见表16。表16不同工艺验证结果(略)

2.3.3相同方法不同溶剂对提取工艺的影响研究结果见表17。表17不同溶剂时间的比较结果（略）

2.3.4相同溶剂不同提取方法间的比较研究结果见表18。表18不同提取方法比较结果（略）

2.3.5综合评价结果实验表明，在考察范围内，小青龙汤提取工艺优劣顺序为60%乙醇回流提取＞水回流提取＞60%乙醇渗漉＞95%乙醇回流提取＞水渗漉；提取方法对比研究结果表明，回流提取方法效果较渗漉提取方法效果好；提取溶剂对比研究表明60%乙醇为提取溶剂较其他两种溶剂效果好。

3讨论

现有小青龙汤成方制剂只选择了芍药苷为含量控制指标，对于复方制剂的多指标多成分而言，显得质量控制过于单一。本研究从处方构成出发，增加君药麻黄的指标成分盐酸麻黄碱为指标，更多的注重全方的系统性。

实验结果均反应回流提取法较渗漉法的提取效果好，其中提取溶剂又以60%乙醇为佳，这与控制指标的选择有一定的关系，但是是否在药效方面有正变的关系，还需要进行药效学研究。

小青龙汤整体提取的不同工艺比较结果得出，优化提取工艺为12倍量60%乙醇回流提取2次，1.5h/次。所得优化提取工艺合理可行，可作为小青龙汤的提取工艺。

【参考文献】

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提取工艺范文篇7

【关键词】小檗碱提取工艺黄连黄柏三颗针正交实验

Abstract:Beingthecommonmedicine,berberinehasextensiveapplicationsinclinicalpharmacy.Therehavebeenmanystudiestoimprovetheyieldingrateofberberineinrecentyears.Thearticlesumsupstudiesontheextractingtechnologyofberberine.

Keywords：Berberine;Extractiontechnology；RhizomaCoptidis；PhellodendronamurenseRupr；Berberis；Orthogonaltest

小檗碱又称黄连素，广泛分布在植物界，大约有4个科10个属植物都已发现有小檗碱存在。小檗碱是黄色针状晶体，表现为季铵型、醇型3种互变异构体，其中以季铵碱型最稳定。小檗碱能缓慢溶解于冷水（1∶20）或冷乙醇（1∶100），在热水或热乙醇中溶解度比较大，难溶于丙醇、氯仿或苯，盐类的溶解度都比较小，硫酸盐在水中的溶解度约为1∶30，盐酸盐微溶于冷水。小檗碱可从三颗针、黄连、黄柏等植物中提取。由于黄连生长缓慢，价格较高，黄柏来源也较少，现我国主要应用三颗针作为提取原料。

小檗碱是临床上一种常用的广谱抗菌药，主要用于菌痢、胃肠炎、痈肿等细菌性感染。现代研究证明小檗碱有抗肿瘤、抗心率失常、降压、降血糖等作用，在临床上有越来越广泛的应用，需求量日益增加。为提高小檗碱提取效率，近些年来对小檗碱提取工艺的研究很多，本文对这一方面作一综述。

1酸水法提取小檗碱

酸水法是目前工业生产提取小檗碱常用的方法。从三颗针中提取小檗碱,常用多倍量的0.3%硫酸水溶液浸泡24h，滤液用石灰乳调pH值至12，过滤，滤液用盐酸调pH值到2～3,再加入6%左右的精制食盐,使食盐完全溶解,放置过夜,抽滤得盐酸小檗碱粗品［1］。或用0.5%的硫酸水溶液冷浸提取,酸水液用石灰乳调pH值到7左右,滤液浓缩用盐酸调pH值到2～3，再加入6%左右的精制食盐,使食盐完全溶解,过滤，沉淀溶于热水，加石灰乳调pH值到8.5～9趁热过滤,滤液再用盐酸调pH值到2～3，放冷过滤得盐酸小檗碱粗品［2］。廖志新等［3］以产于青海等地的三颗针为原料，采用正交实验法，对酸水法提取盐酸小檗碱的生产工艺进行研究，找出了最佳的提取工艺。根据实验结果，盐酸用量达到pH=1，浸提剂量也应在浸透材料量之上超出两倍，食盐用量应使提取液浓度达到5%～7%；浸提总时间应达到12～24h，浸提剂温度控制在80℃至沸点之间；浸提剂浓度（即硫酸浓度）为0.5%～0.7%最佳。黄祖良等［4］报道从十大功劳根粗粉中提取小檗碱,用0.5%左右硫酸溶液浸泡24h,次日,把浸泡液倾出,浸泡液(收集8～10倍量浸泡液,后50%留作下一批套用),用浓盐酸调pH值到1.5左右,按10%(W/V)的量加入精制食盐放置过夜,滤取析出的盐酸小檗碱粗品晒干,盐酸小檗碱提取率为1.23%。据庞小雄等［5］报道，采用正交实验优选三颗针中小檗碱的提取工艺，根据盐酸小檗碱的提取条件，选定浸泡时溶剂的用量，稀硫酸的浓度，石灰乳沉淀的pH值两个因素，确定最佳工艺溶剂的量是药材的16倍，稀硫酸浓度为0.2%,加石灰乳沉淀杂质时的pH值为9,精制时调酸的温度是60℃。肖美凤等［6］报道,用正交实验法对黄连中小檗碱提取工艺进行优选,采用分光光度法测定盐酸小檗碱的含量,其最佳提取工艺是0.4%硫酸水溶液,16倍量的溶剂,石灰乳调pH值到10,精制时加入酸的温度不低于50℃,该工艺经济实用,小檗碱提取率较高。孙波等［7］就水提法部分进行正交优选，确定水提法用水煎煮3次，3.5h,加水量14倍为最佳工艺。预实验中,结果表明用0.5%酸水作溶媒提取最佳。吕霞［8］报道用0.5%硫酸水溶液提取黄连中小檗碱，分别采用索氏提取、超声提取和浸渍提取，HPLC法分析小檗碱浓度分别为16.401，14.246，13.415μg/ml。方阵等［9］优选黄连的最佳酸水提取工艺为2%的盐酸,12倍量的水，回流3次，1.5h/次。

2石灰乳法提取小檗碱

石灰乳法也是当前工业生产上常用的方法。如用渗漉法从黄柏中提取小檗碱，称取黄柏粗粉200g置大蒸发皿中，加入石灰乳搅拌均匀，常法装渗漉桶，加入饱和石灰水浸泡6h后渗漉（pH值在10以上），控制流速5～6ml/min，收集渗漉液2000ml，加入渗漉体积7%（质量浓度）的固体食盐，搅拌后放置过夜，过滤，沉淀，用热水溶解，趁热过滤。滤液加盐酸调pH值为2，放置过夜，过滤，沉淀用蒸馏水洗至中性，抽干后于80℃下干燥，即得盐酸小檗碱粗品［10］。黄祖良等［4］从十大功劳中提取小檗碱，用石灰乳适量搅拌均匀，用水浸渍24h后用水渗漉，收集渗漉液适量，用浓盐酸调pH值为1.5左右，按10%（W/V）加入食盐放置过夜，滤取析出的盐酸小檗碱粗品晒干，盐酸小檗碱提取率为1.17%。石灰乳法用大量的石灰乳可能引起成分损失，也浪费盐酸，增加了生产成本。尹蓉莉等［11］从黄柏中提取盐酸小檗碱,比较几种传统的提取方法,有酸水法、石灰乳法和醇提法等,并加以改进,结果证明,石灰乳法提取效率优于其他方法。

3乙醇法提取小檗碱

通常黄连根粉用乙醇温浸，回收大部分乙醇，剩余乙醇浓缩液放置，过滤，滤液加盐酸、沉淀、放置，过滤得黄色沉淀为盐酸小檗碱粗品［12］。或用加热回流提取，称取一定量的黄连切碎，放入250ml圆底烧瓶中用100ml乙醇作提取溶媒，热水浴加热回流30min，放置浸泡1h，抽滤，滤渣重复上述处理两次，合并3次滤液，减压蒸出乙醇直到为棕红色糖浆状。在棕红色糖浆状物中加入1%醋酸（约30～40ml）加热使溶解，抽滤以除去不溶物，然后于溶液中滴加浓盐酸至溶液浑浊为止，放置冷却，最好用冰水冷却，即有盐酸小檗碱析出，抽滤，结晶用水洗涤两次，再用丙酮洗涤一次，干燥，烘干称重。席国萍等［13］报道，设计用乙醇法提取小檗碱的正交实验方案，通过方差分析，得到黄连中小檗碱最佳提取工艺为：温度为60℃，9倍体积50%乙醇，提取两次，1h/次，小檗碱提取率为91%以上，平均回收率为97.38%，相对标准偏差为1.48%。黄祖良等［4］研究用75%乙醇回流提取十大功劳根茎粗粉至无色，提取液减压回收乙醇后，用热水溶解，趁热过滤，滤液中加浓盐酸调pH值为1.5左右，按10%（W/V）加入食盐放置过夜，滤取析出的盐酸小檗碱粗品晒干，盐酸小檗碱粗品提取率为3.47%，粗品中盐酸小檗碱含量为38.96%，盐酸小檗碱的提取率为1.35%。吕霞［7］报道用95%乙醇为溶媒，采取索氏提取法，HPLC法分析小檗碱浓度为17.504μg/ml，用95%乙醇、75%乙醇浸渍提取，所得小檗碱的浓度分别为12.120，14.465μg/ml，可见索氏提取明显优于浸渍。刘圣等［14］用正交实验法考察黄连中小檗碱最佳提取工艺为：溶剂为6倍量80%乙醇，乙醇中硫酸加入量为0.25%，提取时间为1.5h/次，提取次数为3次，以该工艺制备的盐酸小檗碱精制品含量在90%以上,适合工业化生产。张乐佳等［15］报道黄连总碱的浸出量与溶剂量，溶剂种类，浸提时间等因素有关,黄连最佳提取工艺是：50%乙醇回流提取3次,每次10倍量溶剂，提取2h。罗音久等［16］用正交设计筛选醇提工艺的最佳条件是黄连须粗粉中加入5%的中药提取因子，37℃恒温浸泡6h，乙醇连续回流3次，1h/次，总加醇量22倍，所得盐酸小檗碱总量最高，为3.81%。黄传俊等［17］采用正交实验法，以黄连提取的收膏率和盐酸小檗碱提取量为考察指标，利用HPLC法测定盐酸小檗碱的含量，结果表明最佳提取工艺是黄连粗粉加8倍量60%的乙醇回流提取3次，1h/次。邢俊波等［18］报道用正交法优选黄柏中小檗碱的提取工艺是7倍量的70%乙醇热回流提取两次，2h/次提取率最好。张学顺等［19］报道比较黄连不同提取方法所得提取液的整体成分及小檗碱的含量，确定最佳提取条件，采用反向色谱柱，以乙腈磷酸二氢钾溶液（47∶53）1000ml加入SD1.7g为流动相，结果显示，75%乙醇索氏提取法所得小檗碱含量最高。

4超声波提取小檗碱

常规提取小檗碱一般费时费力，效率低，而借助于超声技术却可得到显著效果。超声波提取技术是利用超声波产生的强烈振动，高的加速度，加速药物有效成分进入溶剂，从而提高了提出率，缩短了提取时间，并且免去了高温对提取成分的影响。

郭孝武［20］报道应用超声技术从黄连根茎中提取黄连素的工艺参数与常规浸泡法相比，超声提取具有省时、提出率高等优点。在研究从黄连根茎中提取小檗碱时，分别对超声波处理、超声波频率及硫酸浓度等进行了观察，结果表明用20kHz超声波提取30min浸泡24h，提取率相同（8.12%）。核磁共振波仪对提取产物研究说明超声波对小檗碱结构无影响。超声波用于从黄连中提取小檗碱的常规碱性浸泡工艺中，超声波提取30min所得到的小檗碱提取率比碱液浸泡24h高50%以上［21］。吕霞［7］报道用超声波提取法从黄连中提取小檗碱，称取黄连粗粉2.0g四份，分别用纯水，95%乙醇，75%乙醇，0.5%H2SO4溶液超声提取30min，过滤，滤渣按上述方法再重复提取两次。实验结果用HPLC法分析了各提取液的小檗碱浓度表明用75%乙醇超声提取所得的小檗碱浓度最高（15.642μg/ml），0.5%H2SO4溶液处理次之，95%乙醇超声提取小檗碱浓度最低（11.3426μg/ml）。为了考察超声提取的小檗碱结构是否有变化，以常规浸泡法提取小檗碱成分作对照，用红外谱仪扫描，核磁共振波谱仪测得两种提取法所得的小檗碱样品的光谱和氢图谱图一致，说明超声波提取未破坏小檗碱成分的结构［22］。吴宝华［23］报道，黄柏用甲醇煮后用超声波处理提取小檗碱，时间短，产率高。鲁云博等［24］用HClCH3OH(1∶10)溶液超声20min的提取方法，可以获得较高的盐酸小檗碱提取率。岑志芳等［25］采用超声波法考察川黄柏中小檗碱的提出率，优选最佳的超声频率。以饱和的石灰水为溶媒，分别以不同频率的超声波从川黄柏中提取盐酸小檗碱并与浸渍法比较，结果用50kHz超声波提取3次，20min/次，提取率最高，比浸渍高近1倍。

5微波法提取小檗碱

微波指频率在300～300000MHZ之间的电磁波，其提取机制是，一方面通过微波照射，使植物细胞破裂，细胞内的有效成分自由流出转移至温度较低的提取介质中；另一方面，微波产生的电磁场加速被提取组分由物料内部向提取溶剂界面的扩散速率。邓远辉等［26］用微波法提取黄连中的小檗碱，以干固物和小檗碱含量测定值为指标，比较微波和回流两种方法。干固物测定结构显示，在单位时间内微波处理较回流好，具有明显优势；以小檗碱含量为指标，结果显示回流提取小檗碱含量高于微波提取。郭锦棠等［27］用微波索氏联合工艺提取小檗碱。选用不同粒度的黄连药材，精确称量10g，加入一定量的蒸馏水，混合均匀，在变频微波炉中，以不同水平的微波功率，辅助时间进行微波照射，每份样品待其冷却后，重复照射1次。微波预处理后，在索氏提取器中以不同水平的提取溶剂用量与提取时间进行提取，将提取液静置过夜，取上清液加盐酸调pH值为2，然后加入18%的食盐水，将生成的沉淀静置一段时间后过滤，水洗后放入电热鼓风干燥箱，在60～80℃加热干燥，得到盐酸小檗碱粗品，计算收率。通过正交实验优选条件为，微波功率520W，（80%功率档），辐照时间1.5min×2次，基质含水量20ml，粒度为中粒，提取溶剂用量100ml，提取时间4h，重复实验3次，盐酸小檗碱粗品平均收率5.634%。实验表明，微波-索氏联合工艺比单用索氏提取得到的小檗碱收率明显要高，与传统提取方法比，提取效率高，无需过滤，工艺简单。

张海容等［28］用正交法优化微波萃取条件，与传统的酸碱法浸提小檗碱比较研究，确定工艺条件：80℃萃取温度，固液比为1∶15,时间1.5min,传统溶剂法萃取温度70℃，固液比为1∶20,时间24h,与稀硫酸浸泡提取比，微波萃取工艺提取时间大大缩短，产量可提高30%，操作简便，省时节能易于控制。

6酶法提取小檗碱

酶工程技术是近几年来用于重要工业的一项生物工程技术。通过酶反应温和地将植物组织分解，加速有效成分的释放提取，选用相应的酶可将影响液体制剂澄清度的杂质如淀粉、蛋白质、果胶等分解去除，并且针对根中含有脂溶性成分多，通过葡萄糖苷酶或转糖苷酶，使脂溶性成分转化成水溶性糖苷类，酶反应提取温度低，可较大幅度地提高得率。例如，马田田［29］用黄柏提取小檗碱之前用纤维素酶进行预处理，可提高小檗碱收率，与未加酶的提取进行比较，有显著性差异。张福维等［30］报道用纤维素酶预处理黄柏提取盐酸小檗碱，收率比不加酶时高28%，其最佳的实验流程为：10g黄柏加入80mlpH4.5柠檬酸缓冲溶液，50℃恒温6h酶解，过滤，滤液中加入0.3mlH2SO4放置10h过滤，滤液中加入石灰乳调pH8～9，过滤，滤液用盐酸调pH值到1.5，向溶液中加入食盐至8%，放置5h，过滤得盐酸小檗碱粗品。梁柏林，周民杰［31］用正交实验法研究酶法提取小檗碱的最佳工艺条件，确定酶解黄连的最佳工艺条件：温度40℃，时间90min，pH4.0,酶用量30mg/g；酶提取工艺比传统乙醇法提小檗碱产率提高49%。马桔云等［32］选用黄连提取小檗碱研究了加酶组和未加酶组对有效成分小檗碱提取的影响，新工艺比原工艺只是多了一个向其中加入纤维素酶的酶解过程，但这两种工艺提取的小檗碱含量有显著差异，而提取的成分一致，因此，考虑是否将新工艺用于黄连提取的工业化中。

7微量法提取小檗碱

微型化学实验是近年来国内外迅速发展的一种实验新方法，有用量少，经费少，环境污染小，安全性好，时间短等优点。据报道［33］用微量法提取黄柏中的小檗碱与常规化学实验相比，只是产率略低。具体数据见表1。表1常规化学实验与微型化学实验比较（略）

8半仿生提取小檗碱

半仿生提取法，是指从生物药剂学的角度，模仿口服药物及其在胃肠道的转换过程，采用一定pH的酸水和碱水依次连续提取，目的是提取含指标成分高的活性混合物，它与纯化学观点“酸碱法”是等同的，又因为此种提取方法的工艺条件要适应工业化生产的实际，不能完全与人体条件完全相同，仅半仿生而已，故称“半仿生提取技术”。这种提取方法的特点是可以提取和保留更多的有效成分，能缩短生产周期，降低成本。

林慧彬等［34］以小檗碱的含量为指标，采用半仿生提取法，对黄连解毒汤的最佳药材组合方式进行筛选，优化了组合配伍。张学兰等［35］以小檗碱，总生物碱，干浸膏量为指标对黄柏做半仿生提取法和水提取法相比较，结果表明，半仿生提取液明显优于水提取液。

9超临界萃取提取小檗碱

超临界萃取是今年来逐步发展起来的一种现代提取分离技术，主要是利用二氧化碳在超临界温度下具有流体的性质来提取低极性成分，通过加入少量极性稍大的溶剂作为夹带剂，提高溶剂的极性扩大提取成分的极性范围。日本学者系川秀治等［36］早在20世纪80年代就以TLC为指标，用超临界萃取的方法对黄连有效成分进行了提取。齐艳宁［37］也报道，通过实验研究，超临界萃取的方法与传统溶剂的提取方法相比，有效成分高度浓缩，收率高，药理效果好，且毒性降低。

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［18］邢俊波，刘云.正交设计优选黄柏中小檗碱的提取工艺［J］.时珍国医国药，2003,14(3)：129.

［19］张学顺，赵晓义，郭仲平.RP-HPLC法分析优选黄连提取方法［J］.齐鲁药事，2005：5.

［20］郭孝武.超声提取对黄连素提出率的影响［J］.中国中药杂志，1995，20（11）：673.

提取工艺范文篇8

【关键词】舒督丸提取溶剂提取工艺柚皮苷

StudiesontheExtractionProcessofShuDuPill

Abstract：ObjectiveToselecttheextractionsolventandconditionsofShuDuPill.MethodsAceticacidwrithingmethodonmicewasusedtocomparetheanalgesiceffectsofthewaterextractandthealcoholextractorthogonaldesignwasusedtooptimizethereasonableextractionconditionswiththeevaluationmarkerssuchasnaringinextractionrateandwaterextract.ResultsTheanalgesiceffecttreatedwiththewaterextractismoresignificant.Theextractionconditionswereasfollows：themedicalmaterialwassoakedin6，4，4，2timeswaterandboiled4times,3，2，1，1hoursforeachtime.ConclusionTheextractionconditionsestablishedcanmaketheextractionrateofactivecomponentshighandmakethetherapyandqualityoptimal.

Keywords：ShuDuPill；Theextractionsolvent；Theextractionprocess；Naringin

舒督（浓缩）丸是治疗强直性脊柱炎的中成药，由骨碎补、桑寄生、狗脊、络石藤、牛膝等药味组成。根据强直性脊柱炎的病因与临床症状，方剂中药物的抗炎镇痛、活血祛瘀、调节免疫功能等是其主要药理作用。据文献报道［1～3］，骨碎补中的柚皮苷与络石藤中的木犀草素等有抗炎作用；桑寄生中的槲皮素等具有镇痛作用；牛膝中的多糖等成分有改善机体免疫功能等多种药理活性。这些成分的溶解性较复杂。根据强脊炎疼痛症状突出的临床表现，本研究以小鼠镇痛药效试验为指标，对该方剂的提取溶剂进行了筛选，并以柚皮苷提取率和水总浸出物提取率为评价指标，采用正交设计优选其提取工艺条件。

1器材

1.1仪器与试药

Agilent1100高效液相色谱。柚皮苷中国药品生物制品鉴定所（批号：110722200309，含量测定用）。所用试剂均为分析纯，含量测定试剂为色谱纯。药材购于河南省药材公司，骨碎补药材中柚皮苷含量为0.75%。

1.2实验动物

昆明种小鼠，河南省实验动物中心提供（许可证号：SYXK（豫）20050012），雌雄各半，体重18～22g。河南省食品药品检验所动物室许可证号：SYXK（豫）20050011。动物饲料为标准颗粒饲料，购自北京科奥协力饲料有限公司（许可证号：SCXK（京）20050007）。

2方法与结果

2.1提取溶剂的选择

2.1.1供试样品的制备

按处方比例称取药材两份，一份水煎煮两次（6倍量/2h，4倍量/1h），另一份75%乙醇回流2次（6倍量/2h，4倍量/1h）过滤，合并药液，减压浓缩，分别制成1.0g原生药/ml的流浸膏，密封，灭菌，备用。

2.1.2药效试验

取小鼠60只，雌雄各半，随机分组，灌胃给药，用醋酸扭体法比较不同溶剂提取物的镇痛效果［4］。结果见表1。表1舒督丸不同溶剂提取物对小鼠疼痛的抑制作用（略）

药效试验结果显示，舒督丸不同溶剂提取物均可抑制小鼠疼痛，其中以水提物镇痛效果最好。因此，确定以水为提取溶剂。

2.2提取工艺因素的优选

2.2.1柚皮苷的含量测定方法［5］

2.2.1.1色谱条件

ZOPBOXISBC18（4.6mm×200mm，5μm）色谱柱；流动相甲醇醋酸水（35∶4∶65）；检测波长283nm。

2.2.1.2对照品溶液的制备

精密称取柚皮苷对照品20mg，甲醇定溶于100ml量瓶中，精密量取3ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得（每毫升含柚皮苷60μg）。

2.2.1.3供试品溶液的制备与测定

取含相当于骨碎补0.3g的提取液，稀硫酸调pH值3～4,水浴蒸干，加甲醇溶解并转移至10ml量瓶中至刻度，摇匀，即得供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入液相色谱仪,于283nm处测定并计算柚皮苷含量，计算提取率。

2.2.2水总浸出物的测定方法

分别精密量取水提药液各25ml，按浸出物测定法（《中国药典》2005年版Ⅰ部附录XA）操作，以25ml提取液相当于原药材量作为分母，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的浸出率。

2.2.3提取工艺因素与水平的正交实验选择加水量、提取时间和提取次数3个因素，每个因素选择3个水平，见表2。用L9（34）正交表进行正交实验设计。表2实验因素水平表（略）

取复方饮片9份，每份354g，按表3正交表设计方案进行回流煎煮提取，合并提取液，滤过，吸取药液适量，测定柚皮苷含量和水总浸出物量，计算提取率，见表3。表3舒督丸提取工艺正交实验方案与结果（略）

2.2.4舒督丸提取工艺因素的正交试验结果与分析结果见表3～4。表4舒督丸提取工艺正交试验结果方差分析（略）

由综合评分直观分析可知，上述因素中，B因素影响最明显，应取3水平；C因素次之，应取3水平；A因素应取2水平。

由上表可看出，显著影响提取效率的工艺因素是B。取重要因素较高水平的组合，得到最佳工艺条件为：A2B3C3。即提取4次，每次分别为3，2，1，1h，每次加水量分别为6，4，4，2倍。

2.3验证实验

取复方饮片，按最佳工艺条件重复提取3次，测定柚皮苷和水总浸出物得率。结果见表5。表5验证实验结果（略）

从上述试验结果可以看出:所筛选出来的工艺合理可行,稳定可靠,具有可操作性和重现性。

3讨论

3.1舒督丸方剂中有效成分既有水溶性，也有脂溶性的，理论上既需要用亲脂性溶剂也需要用水提取，才能使有效成分充分溶出。但是复方中各药材成分间在提取时往往会发生复杂的相互作用，从而使有效成分溶解度及存在状态发生变化影响到药效。因此，采用药效学方法筛选提取溶剂,与常规的化学法相比,其筛选结果与临床用药效果更为接近。本实验以小鼠醋酸扭体法比较该方剂水和乙醇为溶剂的提取物的镇痛效果，结果表明以水为溶剂效果优于乙醇，与该药原配制用溶剂产生的疗效一致。

3.2由药材成分浸出原理可知，溶剂对药材的浸润与渗透、溶解与解吸和成分扩散置换过程，在第1次提取即已经完成，后续的多次提取，主要是更换溶剂，保持浓度差。所以，在本研究中，每个煎煮时间和加水量水平设计为依次递减。结果证明优化出的提取工艺参数可以使有效成分达到较高的提取率，节省了大量的工时，降低了水和能耗。

3.3在柚皮苷含量测定时发现复方提取物中柚皮苷提取率很低，与其溶解性能不符。通过对方中骨碎补与其他药材两两配伍提取实验发现，是由于其与桑寄生中某成分形成了水溶性络合物，影响了柚皮苷的含量测定。实验发现该络合物在酸性溶液中能够迅速解离，可以避免对柚皮苷含量测定的干扰，故在测定复方中柚皮苷含量时，需用稀硫酸调节溶液pH至酸性。

【参考文献】

［1］国家医药管理局中草药情报中心站.植物药有效成分手册［M］.北京：人民卫生出版社，1986：761，680.

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［3］赵兴梅，徐光忠，李建利，等.川牛膝和怀牛膝的现代药理研究概况［J］.华西药学杂志，2004，19(3)：205.

提取工艺范文篇9

【关键词】银翘合剂提取工艺

Abstract:ObjectiveToresearchtheextractionprocessofYinqiaoMixture.MethodsThreefactors，includingthewatervolume,thetimeofdistillation,thetimesofdistillationwerestudiedwithorthogonaldesign〔L9（34）〕.Eachfactorhadthreelevels.Totalextractandchlorogenicacidweremarkers.Theextractingtimeforvolatileoilfromherbaschizonepetae，herbamenthaeandfructusforsythiaewasstudlied.ResultsTheoptimalwaterextractionprocesswasthatherbsweredistilledforthreetimesbyaddingwater，whichwas6timesamountoftheherbs，40minutesonceatime.ConclusionThismethodcanbeusedastheextractionprocessforYinqiaoMixture.

Keywords:YinqiaoMixture；Extractionprocess

银翘合剂由金银花、连翘、甘草等中药组成，具有辛凉解表、清热解毒的作用，用于感冒、咳嗽、发热、口干、头痛、咽痛等治疗。本实验用不同指标对其提取工艺进行了研究。结果如下。

1仪器与试药

1.1仪器

Agilent1100高效液相色谱仪：四元泵（G1311A）；柱温箱（G1316A）；VWD检测器（G1314A）；紫外检测器软件：AgilentChemstation；101-1A型电热鼓风干燥箱，南通沪通制药机械设备厂；KQ-1000E型医用超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司；1/10万电子分析天平(BP-211D型，德国Sartorius)。

1.2试剂与药品

绿原酸对照品（含量测定用，批号0805-9703），购自中国药品生物制品检定所；高效液相色谱所用试剂为色谱纯；水为超纯水；其他试剂为分析纯。所用中药材均购于江苏省药材公司，并由本室专家鉴定。

2方法与结果

2.1色谱条件［1］

色谱柱为Aps-2HYPERSILThermo；VWD检测器；流动相为乙睛∶0.4%磷酸溶液=9∶91；检测波长327nm；柱温30℃；流速1ml/min；进样量10.0μl。

2.2对照品溶液的制备及回归方程精密称取绿原酸对照品6.77mg，加50%甲醇溶解制成每毫升含绿原酸0.2708mg的对照品溶液。用50%甲醇分别稀释为0.1354，0.0677，0.03385，0.01693，0.00846，0.00423，0.00213，0.00106μg/μl的对照品溶液。各浓度对照品溶液10.0μl，按以上色谱条件进行分析，以进样量为横坐标X（μg），峰面积积分值（mAu）Y为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程为：Y=4104.23650X-2.98105，r=0.99998。绿原酸的量在0.0106～1.354μg范围内呈良好的线性关系。

2.3样品处理及实验结果影响提取效果的主要因素有提取加水量，提取时间，提取次数3个因素，每个因素选择3水平，以绿原酸的量及浸膏量为指标（权重值分别为70%，30%）进行正交实验，优选出最佳工艺条件。因素水平见表1。表1因素水平（略）

按处方比例称取金银花，连翘等药材56g按表2进行正交实验，合并各次提取液浓缩并定容至100ml，作为供试品溶液。取供试品溶液2ml，加50%甲醇稀释定容至50ml，超声10min，离心10min，取上清液2ml，加50%甲醇稀释定容至10ml，微孔滤膜（0.45μm）滤过，取10.0μl进样。利用回归方程计算出绿原酸的进样量（μg），绿原酸量（mg）=绿原酸的进样量×1250。在上述供试品溶液取2ml，恒重，得干浸膏量m（mg），浸膏量（mg）=m×50。方差分析结果见表3。（注：m即为2ml药液恒重所得干浸膏重）。表2正交实验设计方案及数据分析（略）

表3方差分析（略）

2.4挥发油提取工艺的研究用挥发油测定法分别对荆芥穗、薄荷、连翘三药材对提取时间进行研究。分别称取药材500g，加6倍水量，加热回流，考察。结果见表4。表4挥发油提取率-时间（略）

2.5优选工艺验证按处方比例称取各药材56g，平行两份，加6倍量水，加热回流提取3次，40min/次，合并各次提取液浓缩并定容至100ml，作为供试品溶液。取供试品溶液2ml，加50%甲醇稀释定容至50ml，超声10min，离心10min，取上清液2ml，加50%甲醇稀释定容至10ml，经微孔滤膜（0.45μm）滤过，取10.0μl进样。利用回归方程计算出绿原酸的进样量（μg），绿原酸量（mg）=绿原酸的进样量×1250。在上述供试品溶液取2ml，恒重，得干浸膏量m（mg），浸膏量（mg）=m×50。结果见表5。表5优选工艺验证（略）

3讨论

从方差分析的结果表明，提取的次数有显著差异，其它两因素无显著差异，结合直观分析，确定工艺为A3B3C3，但加水量、提取时间对提取效果影响不大。考虑节约成本，缩短工艺时间，拟考虑为A1，C1。

分别对3味有挥发油的药材进行了考察，结果在两小时内其挥发油均能较完全提取，提取率达90%以上。其提取时间与水提工艺时间相同即可。

验证实验结果表明，该工艺可行。即以加6倍量水，加热回流提取3次，40min/次，为最佳提取工艺。

提取工艺范文篇10

1.1材料

干燥菊花（购于江苏省射阳县洋马菊花基地），为菊属植物杭白菊的干燥花蕾；氯化钠，无水硫酸钠，正己烷均为分析纯。

1.2仪器

挥发油提取器（南京金正玻璃仪器厂）；万能粉碎机；电子分析天平；标准筛（浙江上虞市道墟张兴沙筛厂）；调温试电热套（通州市申通电热器厂）；水浴锅。

2方法与结果

2.1菊花挥发油的提取取一定粉碎度的菊花50g，精密称定，置2000ml圆底烧瓶中，参照《中国药典》Ⅰ部附录XD［1］并作改进，加一定量饱和氯化钠溶液与数粒玻璃珠，振摇混合后，连接挥发油测定器与回流冷凝管，自冷凝管上端加水使充满挥发油测定器的刻度部分，并溢流入烧瓶时为止，再从冷凝管上端加入2ml正己烷，然后将烧瓶置电热套中加热至沸，调温并保持微沸一定时间，停止加热，放置片刻，开启测定器下端活塞将水缓缓放出，收集挥发油，无水硫酸钠脱水，50℃水浴3h挥去正己烷，得到淡黄色挥发油，精密称重，计算提取率。

挥发油提取率（%）=菊花中挥发油含量/菊花重量×100%

2.2不同浸泡液对菊花挥发油得油量的影响称取粉碎菊花50g，加入500ml饱和氯化钠/蒸馏水，在浸泡2h、蒸馏5h下进行提取，实验重复3次，对比两条件下的提取率（见表1）。结果表明，使用饱和氯化钠可以提高提取率，这可能与加NaCl溶液促进油水分离、减少菊花挥发油在水中的溶解度有关［6］，所以在正交实验中采取用饱和氯化钠溶液浸泡菊花。表1不同浸泡液对菊花挥发油得油量的影响（略）

2.3菊花挥发油提取的单因素实验前期预实验研究发现，菊花挥发油得率与其粉碎度、加水量、浸泡时间、蒸馏时间有关系，因此首先通过单因素实验考察提取菊花挥发油的工艺条件。

2.3.1粉碎度对菊花挥发油提取率的影响按照“2.1”项方法，设菊花粉碎度为整棵、剪段、20～40目、40～60目、60～80目、80～100目、100目以上，10倍加水量，2h浸泡时间，5h蒸馏时间下进行水蒸气蒸馏提取，称量并计算提取率。结果见图1。

根据扩散定律：药材粉碎度愈细，浸出效果愈好，成分得率愈高［7］。在图1中发现：菊花挥发油提取率随着粉碎度的增加而增大，但粉碎度达到100目以上时，菊花容易糊化并产生很多泡沫，溶液易暴沸，导致挥发油溢出，以致收集量很少，究其原因为粉碎越细，挥发油含量越低［8］。过细的粉末加水加热时成糊状，容易引起焦化和暴沸现象，故实验选择80～100目的粉碎度作为最佳粉碎度。

2.3.2加水量对菊花挥发油提取率的影响按照“2.1”项方法，设加水量为8，10，12，14，16，18，20倍，粉碎度为粉碎的混合颗粒，浸泡2h，蒸馏5h下进行水蒸气蒸馏，称重并计算提取率。结果见图2。

由图2可知，加水量在14倍时菊花挥发油的提取率为最高，可以认为加水量过多导致溶液易暴沸，影响提取效果，导致挥发油溢出，水量过少又不能充分浸润菊花，故选择14倍为最佳加水量。

2.3.3浸泡时间对菊花挥发油提取率的影响按照“2.1”项方法，设浸泡时间为0,2，4，6，8，10，12h，粉碎度为粉碎的混合颗粒，10倍加水量，蒸馏5h下进行水蒸气蒸馏，称重并计算提取率。结果见图3。

由图3实验结果可知，菊花挥发油提取率随着浸泡时间的延长而增大，在10h达到最大值并保持至24h，浸泡理论认为浸泡可使植物细胞间隙变大，组织细胞充分膨胀，加速细胞内、外液动态交换而有利于挥发油的提取［9］。因此，可以认为菊花浸泡10h组织已经充分膨胀，本着工业生产节约时间原则，浸泡时间选择10h为最佳提取时间。

2.3.4蒸馏时间对菊花挥发油提取率的影响按“2.1”项方法，设蒸馏时间为3.5，5，7，9，10，11，13，15h，粉碎度为粉碎的混合颗粒，10倍加水量，2h浸泡时间下进行水蒸气蒸馏，称重并计算提取率。结果见图4。

观察图4提取过程可以看出，蒸馏13h前挥发油蒸馏出的比较多，后来随着蒸馏的继续，蒸馏出来的挥发油量增加缓慢。这是由于随时间推移，料液中油类组分减少，因此菊花挥发油蒸馏出的量减少。从图4中可以看出，在蒸馏13h达到最大值并保持至15h，故选择13h为最佳蒸馏时间。

2.4提取工艺参数的优化-正交实验

2.4.1正交实验设计根据单因素结果，以挥发油提取率为评定指标，选择菊花粉碎度（A）、浸泡时间(B)、加水量(C)和蒸馏时间(D)为考察因素，每个因素3个水平，选用L9（34）正交表，实验安排见表2。表2菊花挥发油提取工艺因素水平（略）

2.4.2正交实验结果按照表2正交实验设计，如“2.1”项方法进行实验，计算提取率，结果见表3～4。

表3正交实验结果（略）表4方差分析表（略）

由表3中极差直观分析，各因素作用主次顺序为A>D>C>B,表4方差分析结果表明：A，D因素的影响具有非常显著性意义(P<0.01)，B，C因素具有显著性（P<0.05），最优水平为A3B3C3D3，即粉碎度80～100目，蒸馏时间13h，加水量14倍，浸泡时间10h。此结果与单因素实验结果一致。

2.5验证实验为进一步验证正交实验结果的可靠性与重现性，按最佳工艺条件如“2.1”项方法进行3次平行实验，挥发油得量分别为0.279，0.274，0.272g，挥发油平均得量为0.275g，在该条件下挥发油提取率为0.55%。

3讨论

饱和氯化钠和蒸馏水作为浸泡液体的对比实验认为饱和氯化钠对菊花挥发油在水中溶解度有降低作用，但在单因素试验中，考虑节约生产成本，浸泡时未加入饱和氯化钠，仅仅加了蒸馏水，故提取率小于正交试验中的组合提取率。

本次实验所用菊花产自江苏省射阳县洋马菊花基地的杭白菊，在实验中蒸馏出的菊花挥发油油滴散布在水中，有些密度大的成分甚至降至挥发油提取器的刻度下端，导致无法聚集，故实验中采取加入少量正己烷的方法以促进菊花挥发油的聚集。

实验过程中发现粉碎的菊花质轻，漂于水面上不易浸透，因此加入饱和氯化钠浸泡时应注意搅拌，使菊花浸泡时能够充分浸润。

通过正交实验和验证实验表明菊花挥发油的提取工艺是科学的、可行的，影响菊花挥发油提取的主要因素为粉碎度，其次是蒸馏时间、加水量、浸泡时间。最佳提取工艺条件为A3B3C3D3，即粉碎度80～100目，浸泡时间10h，加水量14倍，蒸馏时间13h。在此工艺条件下菊花挥发油提取率为0.55%，与按照《中国药典》方法提取杭白菊挥发油的提取率0.1632%［10］、0.300%［11］相比，提取率有所上升。此最佳工艺条件简单安全，不污染环境，适用于工业生产。

【参考文献】

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