提取范文10篇

提取范文篇1

【关键词】草珊瑚；总黄酮；提取工艺；含量

［Abstract］ObjectiveTooptimizetheextractionprocessoftheflavonoidsfromsarcandraglaber.MethodsUsedsarcandraglaberasrawmaterials，tookethanolextractionmethodsandusedultrasonicwaterbathtoextracttheflavonoids，thenusedL9（33）orthogonalexperimenttooptimizetheextractionprocessofflavonoids.Oneoftheexperimentsisthesinglefactorexperiment.Accordingtothegivenconditionsandmeasuredflavones，whatwewilldoistohavesinglefactorexperimentsaboutdifferentconcentrationsofethanol，feedratio，extractiontimeandtemperature.Accordingtotheremarkableconditionsfromsinglefactorexperiments，wewillhaveanorthogonaldesignandthenselectthebestconditions.ResultsTheoptimumconditionsofultrasonicmethodsarefortheconcentrationof50percentethanol，feedrate1∶15，theextractedtime45minutes，theflavonesin69.25mg/g.Theoptimumconditionsofwaterbathforethanolmethodsareforconcentrationof50percent，feedrate1∶20，theextractedtemperature80℃andtheflavonesin49.60mg/g.ConclusionThetimeusedinultrasonicextractionisgreatlyshorterthanthatofwaterbathandtheexperimentiseasiertocontrolthanthatofwaterbath，andtheextractionrateofflavonoidsalsoraise28.38%thanthatofwaterbath.

［Keywords］sarcandraglaber；flavonoids；extractionprocess；content

随着草珊瑚在医药、兽药、保健食品及保健用品领域中的应用越来越广泛，对其有效成分的提取分离显得越来越重要。黄酮类化合物是草珊瑚中含量最多、最主要的活性成分之一。目前，对草珊瑚总黄酮的提取分离工艺技术研究尚未见有详细报道，本学位论文拟对草珊瑚总黄酮提取分离工艺技术进行较系统的研究并筛选最佳新技术新工艺。采用正交实验方法考察沸水提取法及乙醇提取法对草珊瑚总黄酮提取效果的影响；采用中药高新工程技术大孔吸附树脂对草珊瑚总黄酮进行分离纯化研究，以确定草珊瑚总黄酮最佳提取分离工艺条件及方法。以确定的草珊瑚总黄酮最佳提取工艺对不同季节采收的草珊瑚中总黄酮含量的动态变化，草珊瑚自然存放时间不同对总黄酮含量的影响，贵州草珊瑚根、茎、叶中总黄酮的不同含量进行动态变化研究，以确

定草珊瑚原料的最佳利用时机。从而为生产中最有效的开发利用草珊瑚，获得草珊瑚总黄酮的最大提取率，发挥草珊瑚的最大经济效益提供实验依据及指导，以达到提升草珊瑚药、食用产品的质量档次，使其更具三效（高效、速效、长效），三小（剂量小、毒性小、不良反应小），三便（便于贮藏，便于携带，便于服用）的特点，使其产品能走出国门、出口创汇，有着重要的经济和社会意义［1］。

1材料与方法

1.1实验材料原料：草珊瑚购于贵阳花果园药材市场；NaNO2（固体）（重庆北碚精细化工厂）；95%的乙醇溶液（分析纯）（遵义国营化学试剂厂）；Al（NO3）3（固体）（汇源化工有限公司）；NaOH（固体）（天津市化学试剂六厂三分厂）。

1.2实验器材HH-S2s型恒温水浴锅（金坛市环保仪器厂）；UV2755B紫外可见分光光度计（上海分析仪器总厂）；抽滤机（金宇机械有限公司）；JY88（96）-IIN型数控超声波细胞粉碎机（宁波新芝生物科技有限公司）；FA1004型电子分析天平（上海天平仪器厂）。

1.3实验方法

1.3.1黄酮类化合物的超声波法提取研究超声波提取方法：取原料草珊瑚5g按实验要求的料液比加入乙醇，放入准备好的烧杯中，超声波提取，抽滤液体，取0.3ml加入25ml容量瓶中，再在25ml容量瓶中加入1ml5%的NaNO2溶液，等待6min后，再在25ml容量瓶中加入0.5ml5%的Al（NO3）3溶液，等待6min后，再在25ml容量瓶中加入10ml5%NaOH溶液，并加入60%乙醇溶液定容。等待15min后在500nm处检测吸光度，然后记录数据［做空白对比的不加Al（NO3）3］。

超声波提取过程：（1）称取草珊瑚5g分别装入准备好了的烧杯中，在烧杯上填上编号，并记录好数据。（2）用95%乙醇分别配制50%、60%、70%、80%的乙醇，按正交实验设计搭配装入对应号的锥形瓶中。（3）根据以上配置好的原料，放入超声波仪器中进行提取。（4）将以上提取物过滤，将滤液按照实验方法测出吸光度，并记录好数据。

1.3.2黄酮类化合物的水浴提取研究取原料草珊瑚5g按实验要求的料液比加入乙醇，放入锥形瓶中，水浴锅加热，抽滤液体，取0.3ml加入25ml容量瓶中，再在25ml容量瓶中加入1ml5%的NaNO2的乙醇溶液，等待6min后，再在25ml容量瓶中加入0.5ml5%的Al（NO3）3的乙醇溶液，等待6min后，再在25ml容量瓶中加入10ml5%NaOH的乙醇溶液，并加入60%乙醇溶液定容。等待15min后在500nm处检测吸光度，然后记录数据［作空白对比的不加Al（NO2）3］。

水浴提取的实验过程为：（1）称取草珊瑚5g分别装入准备好了的锥形瓶中，在锥形瓶上填上编号，并记录好数据；（2）用95%乙醇分别配制50%、60%、70%、80%的乙醇，按正交实验设计搭配装入对应号的锥形瓶中，并用保鲜膜密封好；（3）把锥形瓶放入已准备好的一定温度的水浴中加热，2h后取出抽滤液体转入干净的烧杯中，并用保鲜膜密封好；（4）将以上的提取物过滤，将滤液按照实验方法测出吸光度，并记录好数据。

2实验结果与讨论

2.1标准曲线的制备见图1。从芦丁对照储备液中分别吸取1ml，放入1号、2号容量瓶中（25ml），各加60%乙醇至5ml，加5%NaNO2溶液1.0ml，摇匀放置6min，再加10%Al（NO3）3溶液0.5ml（空白对照不加），摇匀再放置6min，加4%NaOH溶液10ml，摇匀放置15min，从400～600nm处测吸光值：可得出芦丁在500nm处存在最大吸收峰。

回归方程：A=0.0095C+0.0016,线性范围为0～59.82μg/ml，相关系数R2=0.9991

图1标准工作曲线

首先，精密称取芦丁对照品18.6mg，置于100ml量瓶中，加60%乙醇溶解至刻度，摇匀即得对照品溶液。然后，分别精密吸取1.0、2.0、3.0、4.0和5.0、6.0、7.0、8.0ml对照品溶液置于25ml容量瓶中，各加60%乙醇至5ml，加5%NaNO2溶液1.0ml，摇匀放置6min，再加10%Al（NO3）3溶液0.5ml，摇匀再放置6min，加4%NaOH溶液10ml，摇匀放置15min，在500nm波长处测定吸光度值，以同法配制空白（不加硝酸铝）对照。显色剂的配置：含量测定，标准曲线的绘制。所用试剂均为分析纯，4%NaOH乙醇溶液（200ml）：称取8gNaOH置入烧杯中，用200ml60%乙醇溶解。10%Al（NO3）3乙醇溶液（25ml）：称取2.5gAl（NO3）3置于烧杯中，用25ml60%乙醇溶解。5%NaNO2乙醇溶液（50ml）：称取2.5gNaNO2置于烧杯中，用50ml60%乙醇溶液溶解［2］。

2.2黄酮提取过程

2.2.1提取方法（1）超声波提取：精密称取干燥、粉碎的草珊瑚粉末5g置于烧杯中，按实验要求的料液比加入乙醇溶液浸泡，然后用超声波提取。

（2）水浴法提取：精密称取干燥、粉碎的草珊瑚粉末5g置于锥形瓶中，按实验要求的料液比加入乙醇溶液浸泡并用保鲜膜密封好，然后放在水浴锅上加热2h，滤去残渣。

2.2.2样品测定精密吸取黄酮提取液0.3ml于25ml容量瓶中，分别加入60%的乙醇6ml，再加入5%NaNO21.0ml，摇匀放置6min，加入10%Al（NO3）30.5ml（做空白对照的不加），摇匀放置6min，加入4%NaOH10.0ml，加入60%的乙醇定容至刻度。摇匀放置15min在500nm处测吸光度，利用标准回归方程计算出浓度。得到标准曲线回归方程：A=0.0095C+0.0016，相关系数R2=0.9992，根据标准方程可以推导出C=（A-0.0016）/0.0095，C为物质浓度（单位为μg/ml），提取黄酮的质量（mg）=C·25/3·10·V·10-3,提取总黄酮含量=提取黄酮的质量（mg）/原料草珊瑚质量（g）。

2.3超声波法提取黄酮的单因素实验设计及正交实验数据处理

2.3.1乙醇浓度对超声波法提取效果的影响在五个烧杯中各取5g草珊瑚放入，分别用40%、50%、60%、70%、80%乙醇溶液50ml浸泡后超声波萃取15min，按以上的含量测定方法测定吸光度值。见表1。表1表明：随着乙醇浓度的增加，黄酮的提取率也逐渐增加，但是当乙醇浓度超过60%的时候，黄酮的提取率反而降低，是因为随着乙醇浓度的增大，会使提取粗品中杂质含量增加，黄酮成分含量反而降低。表1乙醇浓度对草珊瑚黄酮提取的影响

2.3.2料液比对黄酮提取效果的影响在四个烧杯中各取5g草珊瑚放入，用60%的乙醇，料液比分别1∶5、1∶10、1∶15、1∶20浸泡后超声波萃取15min，按含量测定方法测定吸光度值。见表2。表2料液比对草珊瑚黄酮提取的影响表2可见，浸提固液比在1∶10至1∶20的范围内，浸提固液比在1∶15时提取率最高，但随后增加溶剂的量对提取率的变化不大，在实际操作中，当浸提固液比过小时，提取液偏少，不利于过滤分离，因此选择浸提固液比在1∶15较为合适。

2.3.3超声波萃取时间对黄酮提取效果的影响在四个烧杯中各取5g草珊瑚放入，在料液比1∶10，60%乙醇条件下选择时间分别为15min、30min、45min、60min进行超声波萃取，按含量测定方法测定吸光度值。见表3。表3提取时间对黄酮提取的影响由表3可见，随超声波提取时间15~30min，吸光度增长0.046，增长程度一般，而提取时间30~45min时，吸光度增加了0.102，幅度大增，而提取时间45~60min时，吸光度增长了0.012，增长程度大大降低。由此可以看出，再增加超声波提取时间，吸光度增速出现先增强再逐渐减缓趋势。造成提取物在超声作用达到一定时间后，提取率增加缓慢或呈下降趋势的原因可能是在长时间超声作用下，提取率逐渐向极限值靠近，致使提取率增幅降低。同时超声作用时间太长，会使提取粗品中杂质含量增加，有效成分含量反而降低，影响提取物有效含量。故45min提取时间是最好的工艺条件。

由以上单因素实验可得出几个在实验过程中，对实验结果有显著作用的因素，他们分别是乙醇浓度50%、60%、70%，料液比1∶10、1∶15、1∶20，提取时间15min、30min、45min，运用这些条件做出提取工艺参数设计表（表4），为下面的正交实验做好准备条件。见表5、6。

由表5可看出R料液比＞R乙醇浓度＞R提取时间，所以本实验料液比作为主要因素，K1、K2、K3中数据最大者对应的水平为最佳水平，即转化率最高。本实验的最佳水平组合是A1B2C3，即最佳工艺条件为乙醇浓度50%、料液比1∶15、提取时间45min。表4提取工艺参数设计表表5L9（33）提取工艺条件正交实验结果表表6最佳工艺条件提取由表6可看出黄酮含量69.25mg/g，比正交实验中的A1B2C2（乙醇浓度50%、料液比1∶15、提取时间30min）所提取出的黄酮含量还高，证明本次正交设计实验结论是合理的。

2.4水浴法提取黄酮的单因素实验设计及其正交实验数据处理

2.4.1乙醇浓度对水浴法提取效果的影响在四个锥型瓶中各取5g草珊瑚放入，分别用50%、60%、70%、80%乙醇溶液75ml浸泡后，水浴提取2h，按以上的含量测定方法测定吸光度值（表7）。表7乙醇浓度对水浴法提取效果的影响由表7可看出：随着乙醇浓度的增加，黄酮的提取率也逐渐增加，但从60%～70%，吸光度增长幅度变小即提取的黄酮含量增长幅度变小，当乙醇浓度超过80%的时候，黄酮的提取率反而降低，提取的黄酮含量变小，是因为随着乙醇浓度的增大，会使提取粗品中杂质含量增加，有效成分含量反而降低，影响提取物有效含量。

2.4.2提取温度对水浴法提取黄酮效果的影响在四个锥形瓶中各取5g草珊瑚放入，在料液比1∶20，60%乙醇条件下选择60℃、70℃、80℃、85℃进行水浴法提取，按含量测定方法测定吸光度值（表8）。

由表8可看出在乙醇浓度60%、料液比1∶20的不变条件下，随着提取温度的升高，吸光度值也在不断的增长，60℃~70℃的增长程度是最大的，吸表8提取温度对水浴法提取黄酮效果的影响光度增长最大，但随着温度的继续升高，吸光度的增长程度越来越小，是因为随着温度的增加，提取出来的黄酮参与了其他的反应，故提取的增长率变小了（温度也不易太高，体积将会大量减少）。

2.4.3料液比对水浴法总黄酮提取效果的影响在四个锥形瓶中按料液比各取草珊瑚放入，在提取温度70℃、乙醇浓度60%条件下选择料液比分别为1∶15、1∶20、1∶25、1∶30进行水浴法提取，按含量测定方法测定吸光度值（表9）。表9料液比对水浴法总黄酮提取效果的影响表9可见，浸提固液比在1∶15至1∶20的范围内，吸光度最高，但随后增加溶剂的量对吸光度的变化不大，在实际操作中，当浸提固液比过小时，提取液偏少，不利于过滤分离，因此选择浸提固液比在1∶20较为合适。

由以上单因素实验可得出几个在实验过程中，对实验结果有显著作用的因素，他们分别是乙醇浓度50%、60%、70%，料液比1∶15、1∶20、1∶25，提取温度60℃、70℃、80℃，运用这些条件做出提取工艺参数设计表（表10），为下面的正交实验做好准备条件，见表11、12。表10提取工艺参数设计表表11水浴法提取黄酮L9（33）实验表表12最佳工艺条件确定表由表11可看出R料液比＞R提取温度＞R乙醇浓度，所以本实验料液比作为主要因素，K1、K2、K3中数据最大者对应的水平为最佳水平，即转化率最高。本实验的最佳水平组合是A1B2C3，即最佳工艺条件为乙醇浓度50%、料液比1∶20、提取温度80℃。

由表12可看出黄酮含量49.60mg/g，比正交实验中的A1B2C2（乙醇浓度60%、料液比1∶20、提取温度80℃）所提取出的黄酮含量还高，证明本次正交设计实验结论是合理的。

3结论

本文是通过对两种不同的提取方法对草珊瑚进行总黄酮的提取的研究，以便为以后的提取研究找出合适的实验条件及设计。两种不同的方法，同样的浸提试剂，所提取的黄酮量是超声波法提取的多于水浴法提取的，实验得出结果：超声波法的最佳工艺条件为乙醇浓度50%、料液比1∶15、提取时间45min，根据确定的最佳工艺条件，按实验中的测定方法测得提取的总黄酮含量为69.25mg/g。水浴法的最佳工艺条件为乙醇浓度50%、料液比1∶20、提取温度80℃、提取2h，按实验中的测定方法测得提取的总黄酮含量49.60mg/g。

超声波辅助提取的优点有：（1）所用的提取时间较水浴法缩短了两倍多；（2）实验过程中不用像水浴法一样，要注意温度的控制［3］；（3）所提取的黄酮含量比水浴提取高了28.38%。

提取黄酮量,超声波法提取的多于水浴法,分析原因可能是：（1）超声波的空化作用对细胞膜的破坏有助于总黄酮的释放与溶出；（2）超声波使浸提剂和提取物不断震荡，有助于溶质的扩散；（3）超声波的热效应使介质温度基本维持在60℃，对草珊瑚有水浴效果；草珊瑚分布广泛，资源丰富，成分多样。药理作用广泛、毒性小，用于治疗多种疾病，无明显副作用。目前已有厂家生产了针、片等剂型，日用化工厂以此为原料，制成草珊瑚牙膏。产生了较好的社会和经济效益。从文献资料［4］看来，尽管已进行了生药学、化学成分、药理、临床等方面的研究，但是仍有许多问题有待进一步深入研究。

【参考文献】

1郁建生，李英伦.草珊瑚研究进展.安徽农业科学，2005，33（12）：2390-2392.

2江苏新医学院.中药大辞典.上海：上海科学技术出版社，1997，57.

提取范文篇2

【关键词】生物碱;分离;提取;纯化

生物碱是植物中含氮的碱性有机化合物，大都有明显的生理活性，所以常常是很多中草药的有效成分。生物碱大多数来自植物界，以罂粟科、豆科、防己科、毛莨科等科的植物中分布较多。生物碱含量一般都较低，大多少于1%，长春花中的长春新碱含量只有百万分之一［1］。而中草药所含成分十分复杂，既有有效成分，又有无效成分和有毒成分。为了提高中草药的治疗效果，就要尽最大限度提取有效成分，去除无效成分及有毒成分。因此，如何从天然产物中提取与分离生物碱，吸引了人们的广泛关注，其提取与分离方法也不断地改进和发展。

1生物碱的提取方法

1.1传统的提取法

生物碱大都能溶于氯仿、甲醇、乙醇等有机溶剂，除季铵碱和一些分子量较低或含极性基团较多的生物碱外，一般均不溶或难溶于水，而生物碱与酸结合成盐时则易溶于水和醇。基于这种特性，可用不同的溶剂将生物碱从中药中提取［2，3］。包括有溶剂提取法、直接提取法（水溶性生物碱、季铵碱）、离子交换树脂法（如麦角新碱类、东莨菪碱、咖啡因等）和沉淀法。

1.2超声波提取法

声化学的研究发展很快，已遍及到化学化工、药物提取等领域，受到了普遍的重视，已证实超声辐射可增强提取成分的产额。药材在溶剂中受到超声波特有的作用——振动时产生的空化效应，使生药粉中的细胞受空化泡瞬间崩溃所产生的力量，致使细胞壁破裂，加速了溶剂进入细胞内部，在超声振动作用下，损伤细胞中的生物碱成分直接快速向溶剂中溶解［4］。如用超声提取药材中的小檗碱，与常规的煎煮、浸泡提取法相比，超声的空化作用大大加速了小檗碱成分的提取速度，还很好地保持了生物碱的特性和品质，同时，也提高了小檗碱成分的提取［5，6］。

1.3微波萃取微波萃取技术作为一种新型的萃取技术，有其独特的特点。主要是对极性分子的选择性加热从而对其选择性的溶出。同时降低了萃取时间，提高了萃取速度。范志刚等［7］比较了微波提取与常规煎煮方法，结果微波法麻黄碱的浸出量明显优于煎煮法。邓远辉等［8］用微波提取黄连中小檗碱，结果表明在单位时间内微波处理较回流提取具有明显优势。

1.4酶法中药制剂的杂质大多为淀粉、果胶、蛋白质等，针对杂质可选用合适的酶予以分解除去。酶反应较温和地将植物组织分解，可以较大幅度提高收率，故酶解不失为一种最大限度从植物体内提取有效成分的方法之一。目前，用于中药提取方面研究较多的是纤维素酶，大部分的中药材的细胞壁是由纤维素构成，植物的有效成分往往包裹在细胞壁内；纤维素则是由β-D-葡萄糖以1，4-β葡萄糖苷键连接，用纤维素酶酶解可以破坏β-D-葡萄糖键，使植物细胞壁破坏，有利于对有效成分的提取。马桔云等［9］选用黄连提取小檗碱，研究了其加酶组和未加酶组对有效成分小檗碱提取的影响，两种工艺提取的小檗碱含量有显著差异，而提取的成分一致。

1.5半仿生提取法半仿生提取法简称SBE法，是将整体药物研究法与分子药物研究法相结合，从生物药剂学的角度，模拟口服给药及药物经胃肠道转运的原理，为经消化道给药中药制剂设计的一种新的提取工艺。即将药料先用一定pH的酸水提取，继以一定pH的碱水提取，提取液分别滤过、浓缩，制成制剂。这种新提取法可以提取和保留更多的有效成分，能缩短生产周期，降低成本。张兆旺等［10～12］比较SBE法和水提取法的提取工艺，结果表明SBE法可以提取和保留更多的有效成分，有可能替代水提取法。

2生物碱的分离和纯化

一种植物中往往含有几种或几十种生物碱。因此，提取出来的总生物碱还需进一步分离，去除杂质、排除干扰物，保证分析结果的准确性。

2.1一般纯化的方法可析出结晶的生物碱用重结晶法；挥发性生物碱可用水蒸气蒸馏法；易升华的生物碱用升华法提取得到单体。由不同沸点组成的液体生物碱总碱，往往可通过常压或减压分馏分离。如毒芹中的毒芹碱和羟基毒芹碱，石榴皮中的伪石榴皮碱、异石榴皮碱和甲基异石榴皮碱等都可通过减压分馏法分离出来［3］。许多生物碱的盐比游离碱更易于结晶。因此，可利用其在各种溶剂中的不同溶解度进行分离，之后再转变成游离碱［3］。

2.2色谱法色谱法利用混合物组分在固定相中吸附和分配系数的微小差别，达到各组分彼此分离的目的。优点是分离效率高，它能把各种性质极相似的组分彼此分离，而后分别加以测定，因而是一类重要而常用且发展最快的分离手段，且对于那些用传统的分离方法难以分离的物质以及热敏性物质，该方法具有明显的优越性。对苷类生物碱或极性较大的生物碱，可用反相色谱或葡聚糖凝胶进行分离［13，14］。对于PKα较大的生物碱，一般多用离子对色谱，通过离子对试剂和生物碱形成中性络合物达到分离的目的［3］。

2.3树脂吸附分离技术

树脂吸附是一种有效分离有效成分的途径。大孔吸附树脂是20世纪60年代末发展起来的一类有机高聚物吸附剂，它具有多孔网状结构和较好的吸附性能。在对某些中药材或者中药复方制剂中的有效成分进行定性、定量检测时，使用大孔吸附树脂可有效的除去某些干扰成分，而取得较好的效果［15］。用大孔吸附树脂提取中草药有效成分优势显著，提取苦豆子生物碱具有吸附快、解吸易、流体流动性能好,树脂寿命长,对环境、产品无污染等独特优势,有利于规模化生产。

2.4超滤法

超滤法是20世纪60～70年展起来的一种以多孔性半透膜——超滤膜作为分离介质的膜分离技术。具有分离不同分子量分子的功能。超滤法优点在于不耗任何溶剂，操作简单。虽然总生物碱纯度较低，但超滤液可以直接结合阴离子交换树脂进一步对生物碱进行进一步纯化，减少了纯化过程中的许多中间步骤，且总生物碱的纯度高，树脂的污染小。彭国平等［16］研究各材质超滤膜对不同中药成分的影响，结果表明生物碱类成分对膜超滤有较强的选择性，可适用于水溶性较大成分的分离。

2.5超临界萃取技术基于超临界流体的优良特性发展起来的超临界流体萃取（SFE）技术被列为中药药效最佳提取分离技术，兼有精馏和液-液萃取的特点，操作参数易于控制，溶剂可循环使用，特别适合于分离热敏性物质。虽然SFE技术也存在缺乏对超临界流体状态本身的透彻理解，高压设备目前较昂贵，商业利益促使的专利保护等因素制约着该技术的发展等，但超临界萃取技术仍是一种符合当代绿色潮流的洁净、高效提取技术。已报道采用SFE技术萃取秋水仙根和光菇子（秋水仙碱）、益母草、荜茇（胡椒碱）等生物碱［17，18］。

3结束语

生物碱大多具有天然的生理活性，是多种中草药及药用植物的有效成分，对生物碱提取、分离和纯化的研究，具有非常重要的意义。一方面，更多的具有独特药用价值的生物碱不断被发现和应用；另一方面，伴随着科学技术的不断进步和发展，各种高效的、方便快捷的方法不断涌现，各种生物碱独特效能的不断发掘及广泛应用。根据生物碱的性质，选择具体的提取、分离和纯化方法，灵活运用各种提取、分离和纯化的原理，不断探索新的提取、纯化的最佳条件，生物碱的提取分离技术将会得到更加深入的研究和开发。

【参考文献】

［1］汪洪,孙敏,伍春莲.长春花生物碱生物合成途径中关键步骤与代谢调控研究进展［J］.中国中药杂志，2001,26(10)：656.

［2］姚新兰，吴立军.天然药物化学，第4版［M］.上海：人民卫生出版社，2004：380.

［3］中国科学院上海药物研究所.中草药有效成分提取(第2版)［M］.上海：上海技术出版社，1998：263.

［4］郭孝武.一种提取中草药化学成分的方法-超声提取法［J］.天然产物研究与开发,1999,11(3):37.

［5］赵兵,伍志春,王玉春，等.超声波在植物提取中的应用［J］.中草药,1999,30(9)：附1.

［6］冯若,赵逸云,李化茂，等.超声波在生物技术中应用的研究进展［J］.生物化学与生物物理进展,1994,21(6):500.

［7］范志刚.微波技术对麻黄中麻黄碱的浸出量影响［J］.中成药,2000,22(7):520.

提取范文篇3

岛津LC-10A高效液相色谱仪(LC-10ATVP泵，SCL-10AVP控制器，SPD-10AVP紫外检测器，CTO-10AVP柱温箱)；紫外分光光度计(岛津UV3101PC)；分析天平（Mettler,AE240）；旋转蒸发仪（上海申越科学仪器公司）；四用紫外分析仪（上海顾村科学器材厂）。芹菜素和木犀草素标准品购于天津尖峰植物提取物公司，甲醇为色谱纯（TEDIACompanyInc.USA），提取及精制用乙醇、氯仿、醋酸乙酯均为分析纯（广州大华试剂公司），其他化学试剂均为分析纯。半边旗植物采收于广东湛江郊区，经广东海洋大学杨燕君副教授鉴定为半边旗。

2方法与结果

2.1半边旗总黄酮的测定

2.1.1标准曲线绘制参照文献［5］，采用紫外分光光度计法并适当调整。精密称定干燥至恒重的芦丁对照品2mg，加适量甲醇溶解，定容到10ml即得对照品储备液。精密吸取0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml对照品储备液于50ml容量瓶中，加甲醇至20ml，加入5%亚硝酸钠溶液2ml，摇匀，放置5min，加入10%硝酸铝溶液2ml，摇匀，放置6min，加入新配制的5%氢氧化钠溶液20ml，用甲醇定容至50ml，用分光光度计于500nm处测定吸光度。以浓度(C)与相应的吸光度(A)进行回归分析，得回归方程A=0.1632C+0.0564，r=0.9976。

2.1.2样品总黄酮的测定称取干燥半边旗粗粉10g，加入含溶剂的圆底烧瓶中，按表1的实验设计进行回流提取，过滤，取滤液挥干溶剂，残留物用甲醇溶解，定容到50ml，即得样品溶液，用分光光度计测定500nm处的吸光度值，由标准曲线计算样品总黄酮溶出量。

2.2半边旗总黄酮的提取工艺考察

2.2.1筛选因素水平半边旗总黄酮采用醇提法。经预试验研究，提取过程中可能的影响因素包括溶剂用量（A）、乙醇浓度（B）、提取次数（C）以及提取时间（D）。以半边旗总黄酮溶出量为考核指标，按4因素3水平进行正交实验，因素水平见表1。表1因素水平表（略）

2.2.2正交实验设计及结果按L9(43)正交表对半边旗进行提取并测定总黄酮量。结果见表2～3。表2正交实验结果及分析（略）表3最佳工艺验证实验（略）

由表2和表3分析结果可知，在半边旗总黄酮的提取工艺中，各因素对提取效果的影响程度依次为B>C>A>D，且因素B（乙醇浓度）和C（提取次数）的影响具有统计意义，因此应选B2和C2，确定最优水平组合为A3B2C2D3，即溶剂为12倍量的80%乙醇回流提取2次、2h/次。

2.2.3放大的提取工艺验证实验称取3份半边旗干燥粗粉各500g，采用A3B2C2D3最佳工艺条件提取，按“

2.1.2”方法测定提取液总黄酮含量平均为1.68mg/g生药。提取液减压蒸去溶剂，所得浸膏60℃真空干燥72h，称重得22.9g棕黑色固体，计算得此提取物中总黄酮质量分数为11%。

2.3半边旗黄酮的精制半边旗黄酮的精制采用溶剂抽提法。称取上述粗黄酮适量，按重量比3∶2混入硅藻土，依次用石油醚、氯仿、醋酸乙酯进行索氏抽提，分别抽提至无色，取醋酸乙酯溶液，减压蒸干得棕黄色固体即为精制的半边旗黄酮。

2.4半边旗精制黄酮的测定采用峰面积归一化法。以木犀草素和芹菜素混合溶液为对照品，以半边旗精制黄酮为供试品，分别进样高效液相色谱。以供试品中木犀草素与芹菜素的面积和与供试品出峰总面积的比值确定供试品中的黄酮含量。

色谱条件：色谱柱DiamonsilC18(150mm×4.6mm，5μm)；紫外检测波长283nm；流动相为甲醇-水溶液，按照甲醇含量0～100%梯度洗脱；流速0.2ml/min；柱温为35℃。

对照品溶液的配制：精密称取木犀草素和芹菜素对照品各1mg，置10ml容量瓶中，加甲醇超声溶解，定容至刻度，即为对照品溶液。

供试品溶液制备：称取精制的半边旗黄酮约2mg，置10ml容量瓶中，加甲醇超声溶解，定容至刻度，即为供试品溶液。

吸取上述溶液5μl，分别进样高效液相色谱。色谱图见图1～2。经峰面积归一化法计算供试品中木犀草素与芹菜素的面积和与供试品出峰总面积的比值，计算得供试品中已知黄酮含量占84.3%。

3讨论

以总黄酮溶出量为考核指标，半边旗用乙醇提取有利于黄酮类化合物的溶出，提高溶剂乙醇的浓度，可加快半边旗中总黄酮的溶出速度，从而使溶出量增加。但溶剂乙醇浓度过高时，黄酮物质的溶出量下降，这可能是溶剂乙醇浓度增加，反而使植物细胞脱水、皱缩，不易于溶胀破裂及总黄酮的溶出。

结合正交设计得出优选的最佳因素水平为12倍用量的80%乙醇溶剂回流提取2次，2h/次。正交统计结果表明，提取时间因素的水平对总黄酮含量影响最小，从节能、经济考虑，样品的提取工艺最终采用每次提取1.5h为佳。

采用最佳工艺条件放大提取半边旗，所得提取物中总黄酮溶出量达1.68mg/g生药，总黄酮的质量分数占11%。进一步的研究表明该提取物中还含有脂溶性色素及萜类物质，其质量分数分别占5%和78%。

半边旗黄酮物质主要是木犀草素、芹菜素及其结合的糖苷［6］，精制后的半边旗黄酮成分含量占84.3%，达到新药开发的要求。有关药理及临床实验的结果表明木犀草素在体内具有抗菌、抗病毒及降低血脂和胆固醇的作用［7］，芹菜素具有抗炎、降血压、抗动脉硬化和血栓症、抗菌、抗病毒以及抗氧化作用等多方面的生物学活性［8］。因此开展半边旗黄酮的研究，为从该植物中开发新型中药提供了依据，有利于天然植物资源的综合利用。

【摘要】目的确定提取半边旗总黄酮的最佳工艺条件，并精制以提高黄酮的含量。方法采用正交实验法，考察溶剂用量、乙醇浓度、提取时间以及提取次数对半边旗中总黄酮溶出量的影响，确定最佳提取条件，然后对半边旗总黄酮进行精制，用高效液相色谱测定已知黄酮的含量。结果在所考察的因素中，对半边旗总黄酮提取影响程度为乙醇浓度>提取次数>溶剂用量>提取时间，半边旗总黄酮最佳提取条件为12倍用量80%乙醇回流提取2次、每次回流2h，精制后半边旗黄酮含量达到84.3%以上。结论该工艺设计合理，操作简单，生产成本低廉，有较高的工业生产应用价值。

【关键词】半边旗黄酮正交实验精制

【参考文献】

［1］谢宗万.全国中草药名鉴［M］.北京：人民卫生出版社,1996：53.

［2］MaurakamiT,TanakaN.Occurrence,structureandtaxonomicapplicationsoffermconstituents［J］.ProgChemOrganicNatProd,1988,54：1.

［3］张晓,崔燎，田中信寿，等.半边旗有效成分及抗肿瘤活性研究［J］.中国药学杂志，1997，32（1）：37.

［4］LiJH,CuiL.EffectsofantitumorcompoundsisisolatedfromPterissemipinnataLonDNAtopoisomerasesandcellcycleofHL-60cells［J］.ActaPhamacolSin,1999,20(6)：541.

提取范文篇4

1.1仪器日本岛津高效液相色谱仪（N2000色谱工作站）；UV－1700紫外分光光度计（日本岛津公司）；超声波发生器（昆山市超声仪器有限公司）；HHSY21-Ni4-C型电热恒温水浴锅（北京长源实验设备厂）。

1.2材料飞蓬干燥全草（采自长白山，经长春中医药大学邓明鲁教授鉴定）；野黄芩苷对照品，芦丁标准品（供含量测定用）购于中国药品生物制品检定所；其余试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1飞蓬总黄酮含量测定

2.1.1对照品溶液制备精密称取干燥至恒重的无水芦丁对照品5.05mg置于25ml容量瓶中，加适量70%的乙醇超声处理5min，用乙醇定容至刻度，摇匀，得浓度为0.202mg/ml的对照品储备液。

2.1.2供试品溶液制备精密称取样品干燥粉末1g，置于50ml容量瓶中，加适量70%的乙醇超声处理5min，用乙醇定容至刻度，摇匀，作为供试品液。

2.1.3测定波长选择精密吸取芦丁对照品溶液0.5ml和样品溶液1ml于具塞试管中，精密加入5%亚硝酸钠溶液0.3ml，摇匀，放置6min，再加入10%硝酸铝0.3ml，摇匀，放置6min，加4%NaOH溶液4ml，用70%的乙醇定容至10ml，摇匀，放置10～15min。以相同试剂为空白。在400～900nm波长范围内扫描，记录最大吸收波长为510nm，见图1。

图1芦丁和飞蓬样品最大吸收波长图

2.1.4标准曲线制作精密吸取标准芦丁溶液0.0，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml分别加入6支具塞试管中，按照“2.1.3”项操作，于510nm处测定吸光度。并以吸光度（A）为纵坐标，芦丁对照品溶液浓度（C,mg/ml）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：A＝11.227C-0.013，r＝0.9999（n=6），见图2。结果表明：在0.101～1.01mg范围内芦丁对照品显色后的吸光度与浓度呈良好线性关系。

图2芦丁标准曲线图

2.1.5供试品含量测定取供试品溶液0.2ml于具塞试管中，按照“2.1.3”项下操作，于510nm处测定吸光度,然后根据线性方程计算其总黄酮的含量。

2.2飞蓬灯盏乙素含量测定

2.2.1色谱条件ChmmasilC18柱(5μm，4.6mm×150mm)；测定波长λ＝335nm（依卫生部颁发的药品标准）；流动相：甲醇－0.1％磷酸（40：60）；流速1.0ml／min。

2.2.2对照品溶液制备精密称取野黄芩苷对照品1.05mg，置10ml容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，过滤，摇匀，制成浓度为0.105mg/ml的标准储备液。

2.2.3供试品溶液制备精密称取样品干燥粉末1g，置于50ml容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，过滤，摇匀，作为供试品液。

2.2.4标准曲线制作精密量取对照品溶液2，4，6，8，10，12，14，16μl注入液相色谱仪，测定野黄芩苷色谱峰的面积。并以吸收峰面积（A）为纵坐标，进样量（C,μg）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：A=1359349.2409C-68257.6517，r=0.9999（n=8），结果表明野黄芩苷浓度在0.21～1.68μg范围内与峰面积具有良好的线性关系。

2.2.5供试品含量测定精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得，见图3。

2.3提取工艺的优选

2.3.1提取溶剂的优选称取100g飞蓬，分别加入14倍量不同的提取溶剂，80℃水浴恒温提取2h，抽滤，定容，分别按“2.1”测定总黄酮含量，按“2.2”项中方法测定灯盏乙素含量，结果见表1。表1不同提取溶剂的总黄酮和灯盏乙素含量

从表1可知，碱液提取虽然得膏率很高，但是总黄酮和灯盏乙素含量低，且碱液提取加热容易破坏黄酮类化合物的母核。用水和乙醇作为提取溶剂，虽然得膏率相同，但是水提取的总黄酮和灯盏乙素含量较低，且由于其极性大，易把蛋白质、糖类等溶于水的成分浸提出来，使得提取液存放时，易腐败变质。乙醇提取的总黄酮和灯盏乙素含量高，因此为这3种溶剂中的最佳提取溶剂。下面的实验均采用乙醇作为提取溶剂，分别选取乙醇浸渍法、渗漉法、回流提取法、索氏提取法、超声波法进行提取。

2.3.2提取方法的优选称取100g飞蓬，分别选取乙醇浸渍法、渗漉法、回流提取法、索氏提取法、超声波法进行提取，提取液抽滤，定容，分别按“2.1”项中方法测定总黄酮含量，按“2.2”项中方法测定灯盏乙素含量。不同方法提取的飞蓬总黄酮和灯盏乙素含量测定结果见表2。表2不同提取方法的总黄酮和灯盏乙素含量

经过实验证明，不同提取方法直接影响着醇提工艺中的总黄酮和灯盏乙素的测定结果。综合考虑，用回流法提取飞蓬中的总黄酮和灯盏乙素是比较合适的方法。为此，设计正交，进一步优化采用乙醇回流法进行提取的最佳醇提工艺。

2.3.3正交实验法优选飞蓬乙醇回流提取工艺根据实际情况，选择乙醇浓度、溶媒量、提取时间、提取次数作为考察因素，每个因素选择3个水平，因素水平表见表3。表3正交实验设计因素水平按均匀取样的规则取飞蓬100g，按L9（34）正交实验表安排实验，每组两次平行实验，以总黄酮和灯盏乙素含量为评价指标，测定结果取平均值。结果见表4。表4正交实验方案与结果表5方差分析

以总黄酮提取率为考察指标，直观分析结果表明A2>D3>C1>B2；以灯盏乙素提取率为考察指标，直观分析结果表明A2>D3>C3>B3，方差分析（表5）结果表明A因素和D因素对总黄酮及灯盏乙素的提取均具有显著性影响，而B因素及C因素对提取结果没有影响，为了节省时间和能源，最终确定工艺条件为A2B1C1D3，即以70%乙醇回流提取3次，1h/次，加醇量为每次14倍量。

2.4验证实验称取药材按最佳工艺进行验证实验，结果表明总黄酮和灯盏乙素含量与正交实验结果吻合，取得较好的结果，说明该工艺可行。

3讨论［4］

目前，提取工艺筛选试验中常用化学法、生物学法及有效浸出物综合评价的方法，因此实验中仅用一种评价指标筛选提取工艺条件往往不够全面。而且飞蓬中含有多种黄酮类化合物，采用紫外分光光度法测得结果通常是总黄酮的含量，并不能准确反映灯盏乙素的含量，本实验经研究建立了灯盏乙素含量测定的HPLC法，提高了准确度，稳定可靠。

在实验中，曾试用了甲醇－0.5％磷酸溶液(45∶55)、甲醇－1％磷酸溶液(35∶65)、乙腈－1％冰醋酸(25∶75)为流动相条件，经反复比较，以正文所选流动相重复性最佳，出峰时间较快，峰形尖锐、对称，且灯盏乙素主峰与杂质峰明显分离。

通过L9（34）正交实验，最终确定了飞蓬中总黄酮和灯盏乙素醇提工艺的最佳条件，并通过验证实验证明该工艺，稳定可靠，有效富集了飞蓬中总黄酮和灯盏乙素的含量，为进一步开发飞蓬中总黄酮有效部位奠定基础。

【参考文献】

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［2］吉林省中医中药研究所,长白山自然保护区管理局,东北师范大学生物系.长白山植物药志［M］.长春：吉林人民出版社，1982：1177.

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［4］谢秀琼.中药新制剂开发与应用［M］.北京：人民卫生出版社,2000：14.

提取范文篇5

第一条为完善住房公积金制度,规范住房公积金提取管理,维护住房公积金缴存者的合法权益,根据国务院《住房公积金管理条例》和《青岛市住房公积金管理实施办法》的规定，制定本办法。

第二条本办法适用于青岛市辖区范围内职工及其直系亲属提取住房公积金的管理。

第三条本办法所称直系亲属是指职工本人的配偶、父母和子女。

第四条本办法所称房屋产权证是指区(市)级以上房屋产权主管部门发放的房屋所有权证或房地产权证。

第五条青岛市住房公积金管理中心(以下简称市公积金管理中心)负责住房公积金提取的审核、管理工作。

第二章提取条件

第六条职工有下列情形之一的，可以提取本人住房公积金账户内的存储余额：

(一)购买、建造、翻建、大修具有产权的自住住房的；

(二)离休、退休和达到法定退休年龄的；

(三)完全丧失劳动能力，并与单位终止劳动关系的；

(四)出境定居的；

(五)偿还购房贷款本息的；

(六)房租超出家庭工资收入的规定比例的；

(七)享受城市居民最低生活保障的；

(八)职工死亡或者被宣告死亡的；

(九)农村进城务工人员与单位解除劳动关系的；

(十)与单位终止劳动关系未再就业3年以上(含3年)的。

第七条职工购买、建造、翻建、大修具有产权的自住住房的，在提取本人的住房公积金账户存储余额不足时，可以提取其直系亲属的住房公积金账户存储余额。

第八条职工偿还购房贷款的，只能提取职工本人及其配偶的住房公积金账户存储余额。

第九条房租超出家庭工资收入的规定比例的，在提取职工本人的住房公积金账户存储余额不足时，可以提取其直系亲属的住房公积金账户存储余额。

第三章提取证明材料

第十条职工提取住房公积金，应提供提取人的身份证复印件、青岛市住房公积金提取凭证，并应根据不同的提取情况分别提供以下证明材料：

(一)职工购买、建造、翻建、大修具有产权的自住住房的，应提供下列材料：

1.职工购买具有产权的自住住房的，应提供购房合同原件和相关的购房付款证明原件或提供房屋产权证原件。

(1)购买商品房未办妥房屋产权证的，应提供《商品房销售合同》原件和全额购房发票原件；已办妥房屋产权证的，应提供房屋产权证原件。

(2)购买二手房未办妥房屋产权证的，应提供《房屋买卖契约》原件或《青岛市已购公有住房出售合同》原件和契税完税凭证原件；已办妥房屋产权证的，应提供过户后的房屋产权证原件。

(3)根据房改政策有关规定购买已租住公有住房未办妥房屋产权证的，应提供《公有住房买卖合同》原件和全额缴款凭证原件；已办妥房屋产权证的，应提供房屋产权证原件。

(4)购买拆迁安置住房的，应提供拆迁安置补偿协议原件和补缴差价发票原件。

2.职工建造、翻建具有产权的自住住房的，应提供规划行政主管部门批准的建设工程规划许可证、房屋产权人与施工单位签定的建筑工程施工合同、工程决算和付款发票原件(翻建还应提供原房屋产权证原件)；农村进城务工人员在户口所在地建造、翻建自住住房的，应提供集体土地建设用地使用证原件或房屋所有权证原件。

3.职工大修具有产权的自住住房的，应提供房地产行政主管部门的有关质量监督机构办理的质量监督手续证明(建设部颁发的《城市房屋修缮管理规定》)、房屋产权人与施工单位签定的建筑工程施工合同、工程决算、付款发票及原房屋产权证原件。

4.职工购买、建造、翻建、大修具有产权的自住住房的，其直系亲属提取住房公积金账户存储余额时，除提供购买、建造、翻建、大修住房的有关证明外，还应提供其相互关系的证明文件。属于夫妻关系或同一户口的直系亲属，应提供结婚证原件或户口簿原件；不属于同一户口的直系亲属应提供提取人户籍管理部门出具的直系亲属关系证明原件。

(二)职工离、退休的，应提供离、退休证原件。未取得离、退休证的，应提供区(市)级以上劳动、人事部门审批的离、退休手续原件。

(三)完全丧失劳动能力，并与单位终止劳动关系的，应提供劳动鉴定委员会出具的完全丧失劳动能力鉴定结论通知书原件、与单位终止劳动关系的证明原件。

(四)职工出境定居的，应提供其移民批准文件原件或定居国(地区)长期居住证明原件。

(五)职工偿还住房公积金贷款的，应提供住房借款合同原件；偿还商业性住房贷款或组合贷款的，应提供住房借款合同原件和银行出具的还款凭证原件。

职工提前偿还部分(或全部)购房贷款的，应提供借款合同原件、市公积金管理中心或银行出具的提前还款凭证原件。

其配偶提取住房公积金账户存储余额，除提供上述证明材料外，还应提供结婚证原件或同住户口簿原件。

(六)职工租住公房交纳房租超过家庭工资收入规定比例的，应提供户口簿原件、房管部门出具的租住公房房租计租表原件和承租人及其同住直系亲属单位出具的年工资收入证明原件，失业人员应提供失业证原件。

其直系亲属提取住房公积金账户存储余额，除提供上述证明材料外，还应提供其相互关系的证明文件。属于夫妻关系或同一户口的直系亲属，应提供结婚证原件或户口簿原件；不属于同一户口的直系亲属应提供提取人户籍管理部门出具的直系亲属关系证明原件。

(七)享受城市居民最低生活保障的，应提供城市居民最低生活保障证原件。

(八)职工死亡或者被宣告死亡的，合法继承人或受遗赠人提取其住房公积金账户存储余额，应提供合法继承人或受遗赠人的身份证原件及复印件、经公证的公积金继承书或遗赠书原件及复印件。有多个继承人或受遗赠人的，还应提供经公证的其他继承人或受遗赠人的授权委托书原件及复印件。对继承或遗赠有争议的，还应提供法院的判决书、裁定书或调解书等法律文件原件及复印件。

(九)农村进城务工人员与单位解除劳动关系的，应提供与单位解除劳动关系证明原件。

(十)与单位终止劳动关系未再就业3年以上(含3年)的，应提供失业证原件。

第四章提取额度

第十一条职工购买、建造、翻建、大修具有产权的自住住房的，职工本人及其直系亲属可提取最后一次付款发票所载明日期或房产证发证日期当月的住房公积金账户存储余额，但职工本人及其直系亲属合计提取金额不得超过实际发生的住房支出。

第十二条职工偿还购房贷款的，职工本人及其配偶在偿还购房贷款期间可提取住房公积金账户内的存储余额，但夫妻双方合计提取金额不得超过年度实际偿还的贷款本息总额。若职工本人及其配偶在还款期间有年度未提取住房公积金的，则在本年提取时可累加提取以前年度可提取但未提取的住房公积金存储余额。

职工提前偿还部分(或全部)购房贷款的，职工本人及其配偶可提取提前还款凭证所载明日期当月的住房公积金账户存储余额，但夫妻双方合计提取金额不得超过提前还款金额。

职工未按借款合同约定按期偿还住房公积金贷款的，职工本人及其配偶不得提取住房公积金账户存储余额。

第十三条职工租住公房交纳房租超过家庭工资收入规定比例提取住房公积金的，职工本人及其直系亲属合计提取金额不得超过该家庭当年实际交纳的房租超过家庭工资收入规定比例的部分。

第十四条依照本办法第六条第(二)、第(三)、第(四)、第(七)、第(八)、第(九)、第(十)项规定，提取职工本人住房公积金账户内的全部存储余额，同时注销职工住房公积金账户。

第五章提取程序

第十五条在一个会计年度内，每位职工的住房公积金账户最多允许提取两次住房公积金。提取两次后符合销户支取的，可以办理销户支取。

第十六条职工提取住房公积金账户存储余额，应向单位提出申请，所在单位应当予以核实，并由单位经办人代职工统一办理住房公积金提取手续。

第十七条凡符合提取住房公积金条件的职工,应由单位经办人持职工身份证复印件及相关提取证明材料、填写青岛市住房公积金提取凭证，向市公积金管理中心申请提取住房公积金。单位经办人在办理住房公积金提取业务时，应出示本人身份证原件。

第十八条市公积金管理中心应当自受理申请之日起3日内作出准予提取或者不准提取的决定，并通知单位经办人；准予提取的，在青岛市住房公积金提取凭证上加盖业务章，单位经办人到受托银行的住房公积金存取专柜办理提取手续，领取银行存折。

第十九条单位经办人将银行存折交给职工，职工凭存折和身份证原件到受托银行提取住房公积金。

第六章监督

提取范文篇6

（一）在1999年1月1日以后经当地职能部门批准新建、翻建自住住房；

（二）大修自住住房；

（三）在1999年1月1日以后，购买自住住房（包括商品房、经济适用房、拆迁安置房、二手房、房改房）；

（四）偿还住房贷款；

（五）离、退休；

（六）与所在单位终止劳动合同关系未重新就业满五年；

（七）工作调动，户口迁出余杭区或经批准出国、出境定居；

（八）在职期间死亡或被宣告死亡；

（九）其他。

二、住房补贴资金提取额度

（一）在1999年1月1日以后经当地职能部门批准新建、翻建自住住房，可提取本人一次性住房补贴（含工龄补贴）或住房公积金补贴。一次性住房补贴提取额度为当前的账户余额，住房公积金补贴提取额度不得超过相应批准日期后二年的账户余额。

（二）大修自住住房的，须提供危房鉴定部门出具的危房鉴定报告后，可以提取一次性住房补贴或住房公积金补贴。一次性住房补贴提取额为当前账户余额，住房公积金补贴提取额度按住房公积金提取相关规定执行。

（三）在1999年1月1日以后，购买自住住房的，可提取一次性住房补贴（含工龄补贴）或住房公积金补贴。一次性住房补贴提取额度为当前账户余额，住房公积金补贴提取额度：未申请住房贷款的，不得超过购房合同签订后一年的账户余额；申请住房贷款的，截止签订购房合同的当月账户余额。

（四）偿还住房贷款的，每年可提取一次性住房补贴或住房公积金补贴。一次性住房补贴可以提取当前账户余额，住房公积金补贴提取额度按住房公积金提取相关规定执行。

（五）职工符合上述（一）、（二）、（三）条提取条件的，按规定可以申请提取本人的住房补贴，但提取的住房补贴总额不得超过购、建房款总额。

三、其他事项

提取范文篇7

SCL-10AVP型高效液相色谱仪及UV-2201型紫外分光光度计为日本Shimadzu产品，旋转蒸发器为上海青浦沪西仪器厂产品，循环水式多用真空泵为郑州长城科工贸有限公司产品；电子恒温水浴锅为深圳国华仪器厂产品；高山红景天药材购自于延边土特产品经销公司，红景天苷对照品由中国药品生物制品检定所提供;ZTC1+1澄清剂为天津正天成澄清技术公司产品，大孔吸附树脂为天津市海光华工有限公司产品，其他化学试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1红景天苷含量测定方法的建立与评价

2.1.1色谱条件色谱柱为HypersilODS2C18（5.0mm×150mm，5μm），流动相为甲醇-水（20∶80），流速为0.5mL/min，柱温为25℃，检测波长为280nm，进样量为5μL。

2.1.2标准曲线的绘制精密称取红景天苷标准品2.2mg，置于10mL容量瓶中，加入甲醇溶解并定容至刻度，分别精密吸取75，100，125，175，225，250，300，500μL置于5mL容量瓶内，加入甲醇定容至刻度，所得溶液浓度分别为3.3，4.4，5.5，7.7，9.9，11.0，13.2，22.0mg/L，用0.45μm微孔滤膜过滤，分别进样.以峰面积为纵坐标，红景天苷浓度为横坐标，得回归方程Y=1212.2X-2567（r=0.9996），提示红景天苷溶液的浓度在3.3～22.0mg/L范围内浓度（Y）与峰面积（X）呈良好的线性关系。

2.1.3精密度试验取红景天苷对照品适量，加入甲醇配制成11mg/L溶液，连续进样5次，结果示峰面积分别为11025，11108，11358，11267，11149，RSD为1.178%，提示此方法精密度良好。

2.1.4稳定性试验将供试品制备后分别在0，24，48，72，96h给供试品溶液行进样测定，结果示溶液峰面积分别为13478，13349，13258，13186，13269，RSD为0.838%，提示供试品溶液在96h内稳定。

2.1.5重复性试验取同一批次红景天药粉5份，分别加入甲醇制备溶液，进样测定，结果示红景天苷含量的RSD为2.02%.。

2.1.6加样回收试验分别吸取红景天苷对照品溶液，加入已知含量的供试品溶液，测定峰面积，计算回收率，结果示平均回收率为99.45%，RSD为0.876%（Table1）。

2.2红景天苷提取工艺优化

2.2.1提取方法的考察因素与水平根据红景天所含成分的物理化学性质及预实验结果采用回流提取法进行提取，确定3个因素，即乙醇浓度（A）、加入溶剂量（B）及提取时间（C）.提取效率的影响因素与水平安排见Table2，以提取液中红景天苷的含量作为考察指标。

2.2.2样品测定粉碎红景天，精密称取10.0g，浸泡12h，分别按Table3条件进行提取，回收乙醇浓缩至浸膏，用甲醇溶解并定容至25mL.精密吸取0.25mL置于5mL容量瓶中，加甲醇至刻度，用0.45μm微孔滤膜过滤，按上述2.1.1项下色谱条件进行测定，计算出红景天苷含量，结果见Table3，Table4。实验结果表明，因素A对红景天苷的提取有显著影响，因素B和C对红景天苷的提取无影响。按A2B1C1方案进行提取，即10倍量700mL/L乙醇，回流提取2次，每次1h，所测得样品中红景天苷含量为4.862g/kg。

2.3红景天苷的精制

2.3.1醇沉法取6份红景天粉，每份为10g，按A2B1C1提取工艺进行提取，制成浸膏，加入10mL蒸馏水溶解，加入无水乙醇，使乙醇浓度达到700mL/L，放置24h，过滤，回收乙醇制成干浸膏，称其质量，加入甲醇溶解并定容至25mL，精密吸取0.25mL置于5mL容量瓶中，加甲醇至刻度，进样测定红景天苷含量。

2.3.2大孔吸附树脂法取6份红景天粉，每份为10g，按A2B1C1提取工艺进行提取，制成浸膏，加入25mL蒸馏水溶解，过滤，通过D101大孔树脂柱（14mm×200mm，树脂高度为80mm），流速控制在0.5mL/min，先用蒸馏水洗脱至流出液无色，再用700mL/L乙醇洗脱至洗脱液无色为止，回收乙醇;制成干浸膏，称其质量，加入甲醇溶解，并定容至25mL，称取0.25mL，加入甲醇定容至5mL，进样测定红景天苷含量。

3讨论

正交分析结果示，乙醇浓度对高山红景天中红景天苷的提取影响较大，而溶剂用量和提取时间无明显影响。从节约成本等因素考虑，本实验最终确定高山红景天苷的最佳提取工艺为A2B1C1，即10倍量700mL/L乙醇，回流提取2次，每次1h.验证性试验结果示，按此工艺进行提取，所测得高山红景天中红景天苷的含量为4.862g/kg，高于其他工艺提取的测定值。本实验结果表明，将ZTC1+1吸附法用于提取高山红景天中红景天苷可得到满意效果，且得率与醇沉法及大孔吸附树脂法相比有显著性差异。综上所述，A2B1C1可作为高山红景天苷的最佳提取工艺，以ZTC1+1吸附法进一步精制，具有稳定、安全、高效、不破坏有效成分、使用方便且成本低廉等优点。

提取范文篇8

此工艺采用醇提法进行，生产过程中使用的酒精需要回收并循环使用，其具体工艺流程为：首先将原药材进行预处理后，投入到提取罐中，加入一定量酒精回流提取，然后收集提取液；提取液再经过浓缩器进行浓缩，将浓缩液进行喷雾干燥后即制成中间体。物料衡算是设备选型的依据，决定生产空间大小，在物料衡算基础上进行合理生产安排，是防止多品种生产时产生交叉污染的基本手段之一。进行物料衡算之前，首先应了解车间的年生产任务、生产班制、每班工作时间以及年生产时间等，根据计算可以得出此工艺原材料消耗量以及每个阶段中间品的产量，最后选择适合生产能力的设备（提取罐、浓缩设备、干燥设备等）进行匹配。

2平面布局工艺设计

以某中药提取车间为例，根据提取车间的自身特点，将车间平面设计成矩形，这样便于工艺设备的合理布置，便于安排通道及出入口，且能提供较多自然采光和自然通风的墙面。

2.1垂直布局设计，节省占地面积，合理利用空间

从整体布局上考虑，以提取罐为中心，采用垂直布局模式，将整个车间分为3层（局部有4层），第1层主要由酒精回收间、出渣间以及公用工程房间组成，第2层主要为前处理间、提取操作间及生产辅助间，第3层为喷雾干燥区（D级洁净区），主要进行浸膏处理操作。提取车间所使用的酒精回收装置尺寸较大，高度较高，因此将酒精回收单元分3层布置，第1层布置酒精回收釜，第2层布置酒精储罐，第3层夹层布置冷凝器、冷却器等。在提取与出渣的设计上也采用垂直布局的方式，将提取操作区与出渣区分层布置，一方面保证出渣口的高度，便于药渣的清除和转运，另一方面减少出渣操作对整个生产区的污染。

2.2人、物流分开设置，避免交叉污染

物流主入口设在东侧，靠近前处理区，原药材通过货梯运至第2层切断、净制、挑拣间进行前处理，然后至提取操作间进行提取，提取液经浓缩、喷雾干燥后制成中间体。如此将人、物流分开设置，有利于避免造成污染和混淆。

3工艺管道布置

提取车间的工艺管道包括提取罐料液自循环管道、提取液输送管道、浓缩液输送管道、酒精输送管道等。提取车间的工艺管道布置在符合GMP要求的前提下进行设计。管道设计可以采用明敷方式，以减少投资，并有利于安装、操作和检修。设计时，尽量做到管线短捷，管道必须有交叉和拐弯时，应避免产生死角和盲管等。图3为某提取车间的工艺管道布置图，提取设备、泵以及储罐分别沿南北两侧墙布置，中间留出运输通道和操作空间，其工艺管道大多沿墙、地面或楼面进行敷设，多条管路集中布置，并平行敷设，做到整齐、美观、易操作。管道上标注有管道等级、管道号、标高、物料名称等。不同管道的相互位置，管道与墙壁、管道与管道之间的距离均参照化工管道相关设计规范进行确定。

4具体问题及解决方案

4.1投料操作不方便及解决方案

提取操作间的常规做法是将提取罐的罐耳挂在楼板上，投料口高出地面的高度给投料操作带来了困难，需要搭建钢平台作为投料层，每次进行提取操作前，操作人员先上至钢平台，再将物料投入提取罐，这种做法的缺点是操作不方便，且操作周期长。为了解决上述问题，在设计时可考虑在提取操作间局部做降板，如图4所示，使提取罐的投料口处基本与地面平齐，这样操作人员可直接将物料投入其中。改进后的操作层兼顾了2种功能，即投料和操作可以同时进行，这样使操作更加快捷，效率得到提高。

4.2出渣间污染及解决方案

中药提取后的药渣排放是中药提取车间的一大难题。2010版GMP中指出：中药提取后的药渣如需暂存、处理时，应当有专用区域。为了更好地避免出渣间出现污染问题，设计时应注意以下几点：

（1）出渣间与其他功能间最大限度隔离，直接对外开门，将其对生产区的污染风险降至最低。

（2）出渣间不再设计贮渣功能，药渣卸下后立即运走，每次出渣后立即进行全面彻底清洗。借助药渣压缩设备，将药渣卸到料斗内，由压缩机挤压至原体积的1/2，挤压所产生的污水由排污管道排入污水管，这样不仅避免了药渣和药渣滴水造成的二次污染，同时由于药渣体积压缩而大幅降低了运输费用。

（3）出渣间的墙面、地面宜采用瓷器类物质贴面，既便于清洗，又能避免提供霉菌附着基。

（4）在满足出渣口能打开及方便出渣车进出的前提下，出渣高度尽可能降低，避免飞溅的渣水造成二次污染。

5结语

提取范文篇9

1.1仪器

UV-VIS8500分光光度计；电子天平BP121S；欧前胡素对照品（供含量测定用，批号为110826-200511，由中国药品生物制品检定所提供）；其它试剂均为分析纯。

1.2药材

本实验所用白芷药材购于四川省中药材公司，经成都中医药大学中药鉴定教研室鉴定为伞形科植物白芷Angelicadahurica(Fisch.exHoffm.)Benth.etHook.f.的干燥根。

2方法与结果

2.1粉碎度的考察

2.1.1样品溶液的制备取白芷适量，粉碎，分别称取过10目，20目，30目的样品各20g，分别加入8倍量75%乙醇，提取3次，3h/次，药液滤过，分别定至500ml，备用。

2.1.2白芷总香豆素含量测定照紫外分光光度法（《中国药典》2005年版Ⅰ部附录IVA）测定。

精密量取欧前胡素对照品溶液（0.0522mg/ml）1.0，1.5，2.0，2.5，3.0ml，分别置于10ml量瓶中，用甲醇定容至刻度，以甲醇作为空白液。于300nm处测定A值，以浓度（C）对吸收度（A）回归。得回归方程：A=47.3953C+0.01659（r=0.9999）。精密量取上述备用液各0.8ml于100ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，作为供试品液，测定计算即得［2］。

2.1.3实验结果见表1。

2.2乙醇提取工艺研究［3～6］

2.2.1样品溶液的制备取白芷，粉碎，过20目筛，按所选因素及水平(见表2)，采用L9(34)正交表设计实验(见表3)进行白芷提取，得9号样品溶液，备用。表1粉碎度考察实验结果（略）

2.2.2水浸出物量（干膏率）的测定精密吸取上述备用液30ml，分别置于已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，置烘箱中干燥3h（105℃），取出，置于干燥器中放置30min，称重，计算干膏收得率。

2.3白芷总香豆素含量测定照紫外分光光度法（《中国药典》2005年版Ⅰ部附录IVA）测定精密量取备用液0.8～1.6ml于100ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，作为供试品液，测定，代入上述回归方程，计算，即得。

2.4实验结果采用中国医统软件包（PEMS）进行处理分析，结果见表2～4。表2因素水平（略）表3正交实验设计及结果（略）

3结论

从以上粉碎度考察实验结果可以看出，采用过20目筛的白芷粗粉进行提取，提取效果较好；从正交实验方差分析结果可以看出，B因素有显著的影响，影响因素B>C>A>D；且B3，C3，A2，D1为最佳，故白芷乙醇提取最佳工艺为：加8倍量75%乙醇，提取3次，3h/次。表4方差分析（略）

4讨论

在粉碎度考察实验中，发现粉碎度过细，提取率反而下降，故白芷提取过程中不宜粉碎过细，避免提取过程中产生糊化现象，影响提取效果。

【参考文献】

［1］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2000：69.

［2］马逾英，钟世红，贾敏如，等.紫外分光光度法测定川白芷中总香豆素类成分的含量［J］.华西药学杂志，2005，20(2)：159.

［3］陈贤春，王玉蓉，路世鹏.白芷提取工艺的研究［J］.中成药，2005，27（2）:145.

［4］梁明金，杨广德，贺浪冲.白芷中欧前胡素的提取方法研究［J］.中成药，2000，22(12):829.

［5］王希，陈秀芳.正交试验法优选白芷的提取工艺［J］.中药材，2001，24(8)：591.

［6］贾英，孙振蛟，包文芳.正交设计法优选白芷的提取工艺［J］.沈阳药科大学学报，2005，22(3)：217.

提取范文篇10

1.1仪器精密天平BS224S（德国塞多利斯）；UV-4501S紫外分光光度计(天津市港东科技发展有限公司)；超声清洗机SK8210LHC（上海科导超声有限公司）。

1.2试药知母（产地河北，河南，安徽）；芒果苷为对照品（中国生物制品检验所，批号111607－200301）；乙醇、甲醇均为分析纯。

2方法与结果

2.1实验条件与方法的建立

2.1.1对照品的选择很多文献报道中药制剂中总黄酮的含量测定多数采用芦丁作为对照品。采用芦丁作为对照品，解决了部分中药或中药制剂中本身缺少黄酮对照品的问题，在没有合适的对照品情况下，也不失一种测量总黄酮的可行的方法。芒果苷是知母中含量较高的黄酮类化合物，是其清热作用的有效成分，同时还具有抗炎、抗病毒、抗氧化、免疫抑制、利尿、预防肥胖等作用。因此，用知母中含量较高且具有抗病毒作用的专属性活性成分作为对照品来测定知母总黄酮的含量更加有意义。

2.1.2最大吸收波长的选择NaNO2-Al（NO3）3-NaOH比色法测定总黄酮的原理［6］，是黄酮母核所含有的游离羟基在NaNO2-Al（NO3）3存在的条件下与金属铝离子形成络合物而显色，在波长500nm左右有最大吸收。本实验中所用的对照品是知母中主要黄酮类成分芒果苷对知母总黄酮进行含量测定。因此将芒果苷溶液及知母总黄酮提取液显色后在200～400nm处用可见-紫外分光光度计扫描，知母总黄酮和芒果苷均在258nm有最大吸收波长，结果见图1。故选择含量测定的检测波长为258nm。

Ⅰ知母总黄酮紫外吸收波谱图Ⅱ芒果苷的紫外吸收波谱图

图1知母总黄酮、芒果苷的最大紫外吸收波谱图

2.2对照品溶液的制备取芒果苷适量，于60℃减压干燥至恒重，精密称定，加70％乙醇溶解，制成每毫升含32μg溶液，即得。

2.3线性关系实验精密吸取混合对照品溶液贮备液1，2，5，10，15，25ml，分别置于50ml量瓶中，加70％乙醇稀释到刻度，摇匀，即得。分别取上述溶液，进行测定，以溶液浓度与吸收度比值进行回归，分别得到回归方程为：芒果苷：Y=0.2309X-0.0031（r=0.9993），表明芒果苷在0.26～3.57μg/ml，范围内线性关系良好，芒果苷线性关系见图2。

图2芒果苷线性关系图

2.4提取方法的选择

2.4.1回流提取法取知母粗粉1g，精密称定，置100ml圆底烧瓶中，加甲醇80ml，水浴回流提取3h，滤过，用少量甲醇洗涤药渣及容器，滤液置于同一100ml量瓶中，放冷，用甲醇补足至刻度，摇匀，取溶液5ml，置于50ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

2.4.2超声提取法取知母粗粉1g，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇至刻度，超声提取30min，放冷，用甲醇补足至刻度，摇匀，过滤，取续液5ml，置于50ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。按“2.3项下分别取上述溶液”起，依法操作，测定各供试品溶液的吸收度。结果见表1。表1不同提取方法对知母总黄酮含量的影响

表1表明以上两种提取方法差别不大，回流提取法方法繁琐，耗时，能耗大；而且知母含有较多的黏液质，提取液较难过滤。而超声提取法的方法更方便、简单、快速，易于过滤。因此,选择超声提取法提取知母总黄酮。

2.5提取溶剂的考察按照上述优选的方法，分别以甲醇和70％乙醇作为提取溶剂，提取知母总黄酮，并进行含量测定，（见表2）。表2表明甲醇、70％乙醇提取知母总黄酮差别不大，由于甲醇有毒，对环境有污染，选择70％乙醇作为知母总黄酮提取溶剂。表2不同溶剂对知母总黄酮含量的影响

2.6提取时间的考察分别取知母粗粉1g，精密称定，置于100ml量瓶中，加70％乙醇，稀释到刻度，分别超声20，30，40min，分别按“2.4.2项下放冷处理”起，依法操作,分别制备供试品溶液，并分别测定（见表3）。表3表明超声30min，知母总黄酮含量不再提高，因此，选择超声提取时间为30min。

表3超声时间对知母总黄酮的影响

时间t/min吸收度A202.0076302.1388402.1387

n＝3

2.7供试品溶液的制备按照上述优选的工艺参数制备供试品溶液，取知母粗粉1g，精密称定，置100ml圆底烧瓶中，加70％乙醇至刻度，超声提取30min，放冷，用70％乙醇补足至刻度，摇匀，滤过，取续液5ml，置于50ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

2.8精密度实验取“2.7”项下溶液，在258nm波长下，连续测定5次，其吸收度的RSD=0.09％，表明仪器精密度良好。

2.9样品溶液稳定性考查取“2.7”项下溶液，每隔2h测定1次，测定5次，其吸收度的RSD=0.09％，表明溶液稳定性良好。

2.10重现性实验取同一批的知母粉末5份，分别按“2.7”项下制备样品溶液，并按样品测定方法，测定5次，芒果苷含量9.57mg/g，RSD=1.72%，表明样品重现性良好。

2.11加样回收率实验取已知含量的供试品5份，分别精密加芒果苷一定量，依法制备供试品溶液，照含量测定法测定，加样回收率为101.01％，相对标准偏差1.27%。结果见表4。表4芒果苷回收率实验

2.12样品的测定按上述方法，对3个不同产地知母药材进行了总黄酮的含量测定。结果见表5。表5不同知母总黄酮的含量测定

从表2可以看出，不同的产地知母总黄酮含量有较大的差异，其功效也必然有一定的差别，河北知母是道地药材，其功效差别是由于内在的化学成分引起的，通过该实验，证实了河北知母的有效成分含量较高。

3讨论

在研究知母总黄酮含量测定方法时，最初选用芦丁为对照品，但实验结果并不好，而且未见文献报道知母中含有芦丁。由于知母中黄酮类成分较多，同时芒果苷是知母中含量较高的一种黄酮类化合物，且芒果苷紫外吸收波谱图和知母总黄酮的紫外吸收波谱图呈现一致性，因此用其作为知母药材中总黄酮含量测定的对照品更有意义，同时也更能真实反应总黄酮的含量。在知母总黄酮和芒果苷最大紫外吸收波谱图，二者最大吸收波长分别在240，258nm呈一致性。原则上，二者均可作为知母总黄酮最大吸收波长，但是由于波长越长，其他杂质干扰就越小，故本次最大吸收波长选定为258nm。在知母总黄酮的提取方法上，还考察了以甲醇为溶剂，索氏提取知母总黄酮，结果其提取效果和超声提取相差不大，但是其耗时、方法也很繁琐。因此，所选定的知母总黄酮的提取方法具有简便、快速、准确，可以作为知母总黄酮的提取方法及含量测定方法。

【参考文献】

［1］中国药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京:化学工业出版社,2005：148.

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［5］徐冬英,谢崇源,韦衮政.知母的研究进展［J］．广西中医学院学报,1999,16(4):93.

［6］郭亚健,范莉,王晓强,等.关于NaNO2-Al（NO3）3-NaOH比色法测定总黄酮方法的探讨［J］.药物分析杂志,2002,22(2):97.