丹芩颗粒提取工艺分析论文

1材料

高效液相色谱仪：LC－6AHPLC（SCL－6A系统控制器，LC－6A恒流泵，SPD－6AC紫外检测器，威玛龙色谱工作站）；KQ218型超声清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；AR2140型电子分析天平（上海奥豪斯公司）。

所有中药材由安徽省亳州市药材总公司提供，均符合《中国药典》2005版及相关地方标准；黄芩苷和丹酚酸B对照品由中国生物制品检定所提供，批号分别为110715－200212和111562－200302，供含量测定用。

甲醇、乙腈为色谱纯，其它试剂均为分析纯。

2方法与结果

2．1醇提工艺条件的优化以药材黄芩中有效成分黄芩苷的提取转移率和提取液的出膏率作为测定指标，采用正交实验的方法对乙醇提取工艺进行了优选。

2．1．1醇提液中黄芩苷的测定方法色谱条件：色谱柱为DiomandTM（200mm×4．6mm，5μm）；流动相为甲醇－水－磷酸（47∶53∶0．1）；紫外检测波长280nm；柱温为室温；流速1ml／min；进样量：10ml［1］。在上述色谱条件下供试品溶液中黄芩苷能与其它组分达到基线分离。

2．1．2因素水平表的设计与正交实验取影响该提取过程的4个主要因素：乙醇浓度、溶媒量（加水倍量）、提取次数、提取时间，按L9（34）正交实验表进行实验，每个因素设计3个水平。因素水平表见表1。结果见表2。

表1醇提工艺的因素水平（略）

表2黄芩等醇提工艺正交实验及结果（略）

*综合评分为出膏率＋提取率

结果分析：各因素水平之间的极差大小依次为A＞D＞B＞C，表明乙醇浓度对实验结果影响最大，其次是煎煮次数、溶剂用量，提取时间对实验结果的影响最小，最佳条件为A1B3C2D3。但B3与B2相差极小，而若选择B2可较B3节约资源，并减小需浓缩的药液体积，大大节约能源，降低成本，故选择A1B2C2D3作为提取过程的工艺参数。经3批验证实验，黄芩苷的提取率平均为95．51％，出膏率的平均为17．01％，表明该工艺基本合理可行。

2．2水提醇沉工艺的优化以药材丹参中有效成分丹酚酸B的提取转移率和提取液的出膏率作为评价指标，采用正交实验的方法对水煎煮的提取工艺进行优化。

2．2．1水提液中丹酚酸B的测定方法色谱条件：色谱柱为DiomandTM（200mm×4．6mm，5μm）；流动相为甲醇－乙腈－水－甲酸（30：10∶58∶2）；紫外检测波长286nm；柱温为室温；流速1ml／min；进样量10μl。在上述色谱条件下供试品溶液中丹酚酸B能与其它组分达到基线分离。

2．2．2水提过程因素水平的选择及统计结果取影响水提取工艺的3个主要因素：水的用量、提取次数、提取时间，按L9（34）正交实验表进行实验，每个因素设计3个水平。因素水平见表3，结果见表4，方差分析见表5。

表3丹参等水提工艺因素水平（略）

表4丹参等L9（34）水提工艺正交实验及结果（略）

*综合评分为出膏率＋提取率

表5丹参等水提工艺实验结果的方差分析（略）

结果分析：由表4数据可以看出，各因素对实验影响的大小依次为C＞B＞A，即煎煮次数影响最大，其次为煎煮时间，最小为加水量。由表5可以看出，影响因素A和B影响不显著，C因素影响较显著，最佳实验条件为A3B2C3，但A3与A2相差较小，而若选择A2可较A3少节约水资源，并减小需浓缩的药液体积，大大节约能源，降低成本，节省时间，故应选择A2B2C3，即正交表实验，丹酚酸B的提取率平均为91．36％，出膏率平均为20．37％，表明该工艺基本合理可行。

2．2．3醇沉工艺因素水平表的设计取影响该过程的3个主要因素：浸膏相对密度、醇沉液的乙醇浓度、醇沉时间，按L9（34）正交实验表进行实验，每个因素设计3个水平。因素水平表见表6，结果见表7～8。

表6丹参等醇沉工艺因素水平（略）

表7丹参等醇沉工艺正交实验及结果（略）

丹酚酸B转移率=醇沉后丹酚酸B含量醇沉前丹酚酸B的含量×100%

杂质去除率（%）=醇沉前的固体量-醇沉后的固体量醇沉前的固体量×100%

综合评分（%）＝丹酚酸B的转移率＋杂质去除率

表8丹参等醇沉工艺实验结果的方差分析（略）

结果分析：各因素对实验影响的大小依次为C>A>B，即醇沉时间影响最大，其次为浸膏密度，最小为乙醇浓度，最佳实验条件为A3B2C1，但B1与B2相差极小，而若选择B1可较B2则乙醇的用量减少，并减小需浓缩的药液体积,大大节约能源，降低成本，节省时间，而且由方差分析结果可知，3个因素均影响不显著，故应选择A3B1C1，即：醇沉前的浸膏相对密度为1.20，醇沉后乙醇浓度为60%，醇沉时间为12h。经3批验证实验，丹酚酸B的转移率平均为91.60%，杂质去除率的平均为41.42%，表明该工艺参数基本合理可行。

3讨论

本品为中药复方制剂，药味多，成分复杂。根据各药材的理化性质，将22种药材分成3部分，分别采用醇提、水提醇沉的提取方法。

通过正交优化实验，以有效成分转移率和出膏率为评价指标，确定了最佳工艺参数。经过3批验证实验，结果合理可行，且可控性强。

【参考文献】

［1］国家药典委员会.中国药典［S］.北京：化工出版社，2005：211.

【关键词】丹芩颗粒正交优化提取工艺