色谱柱十篇

色谱柱篇1

关键词 离子色谱法；色谱柱；性能比较

中图分类号O657 文献标识码A 文章编号 1674-6708（2013）102-0126-02

0 引言

离子色谱是高效液相色谱的一种，主要用于阴离子、阳离子的分析。对难以用其他仪器和方法分析的常见阴离子、阳离子、有机酸和有机胺类等组分的分析，离子色谱法也具有选择性好，灵敏、快速、简便，同时测定多组分的优点。

离子色谱的最重要的部件是分离柱。柱管材料应是惰性的，一般均在室温下使用。分离柱的填料由基质和功能基两部分组成。作为填料的基质可分为有机聚合物基质和无机（硅胶、氧化铝）基质两大类。其中有机聚合物离子交换树脂应用较广，是目前商品化分离柱的主要填料。高性能分离柱的有效性，是离子色谱发展的关键。

本实验是针对国产的阴离子柱对于常见七种阴离子的分离效能与美国戴安公司的阴离子柱的柱效进行比较，藉以了解国内与国外离子色谱技术的水平。

1试验部分

1.1仪器和试剂

1.2溶液和淋洗液的配置

1.2.1浓度为1000ppm储备液的配置

1.2.2浓度为10ppm单标的配置

1.2.3混标的配置

1.2.4淋洗液的配置

1.3色谱条件

2 结果与建议

2.2 结果

从图1与图2中能看出国产SH-AC-1样品的保留时间要大于戴安色谱柱。SH-AC-1需要22min才能完全出峰，戴安的15min能完全出峰。从表1与表2中能看出国产色谱柱对各峰的保留时间长和理论塔板数偏低。国产SH-AC-1色谱柱F离子和水负峰分离不开，H2PO4与Br分离度小于1.5，戴安的色谱柱的柱效要比国产色谱柱的柱效要好。

2.3 建议

1）与国外的色谱柱的柱填料相比国产柱的柱填料应做哪些改进；

2）与国外的色谱柱的柱内径相比国产柱的柱内径能更小为好；

3）若国产柱的柱压与总电导与戴安的离子柱一样，这样对F离子与水负峰的分离与H2PO4与Br分离度是否会更好，柱效会有所提高。

参考文献

[1]ISO/IEC17025-1999.General Requirement for the Competence of Galibration and Testing Laboratories [S].

色谱柱篇2

柱状田头菇（茶树菇）； 干品； 馏分； 挥发性成分； 顶空固相微萃取； 气相色谱-质谱法

柱状田头菇（Agrocybe cylindracea）又名茶树菇、杨树菇等，是一种木腐药食两用真菌，生长于温带至亚热带地区，气味香浓, 营养丰富, 富含多糖、蛋白质和矿物质［1］。目前关于柱状田头菇的栽培、活性成分研究已有报道［2-6］。

食用菌因含有挥发性芳香物质而风味独特，香气可以增强食欲，刺激消化液的分泌和促进人体对营养成分的消化吸收［7］。食用菌风味物质的开发利用也日渐受到研究者关注，但关于柱状田头菇风味物质的研究还少有报道。

相对于传统挥发性成分分析技术，顶空固相微萃取采用一根聚合物涂层的熔融石英纤维从样品基质中或样品上方的顶空气体中直接吸附萃取待测物，然后在色谱进样口解吸、分析，可以克服使用有机溶剂萃取带来的污染，同时减少被分析成分的损失，集采样、萃取、浓缩、进样于一体，可与气相色谱、液相色谱联用，简单、快速地分析样品［7］。笔者利用顶空固相微萃取技术对柱状田头菇干品和经水汽蒸馏萃取法获得的馏分中的挥发性成分进行提取，应用气相色谱-质谱法分析化学组成，旨在研究柱状田头菇中的挥发性成分组成和探讨萃取方法对其挥发性成分的影响，为柱状田头菇风味物质的开发利用提供参考。

1 材料与方法

1.1材料

柱状田头菇（A. cylindracea）子实体干品购自上海百信生物科技有限公司。子实体干品于60 ℃烘干48 h，粉碎，过200目筛。

1.2仪器

Supelco固相微萃取装置，配有65 μm PDMS/DVB萃取纤维头（Supelco公司，美国）；DJ-10A中药粉碎机（上海淀久中药机械制造有限公司，中国）；FA2004N电子分析天平（上海精密科学仪器有限公司，中国）；Agilent 7890A /5975C气相色谱/质谱联用仪（Agilent公司，美国）。

1.3挥发性成分测定

1.3.1固相微萃取样品制备

称取2 g子实体干粉，作为固相微萃取干品样品，置于15 mL专用采样瓶中；称取25 g子实体干粉于蒸馏萃取装置，加水250 mL，浸泡 0.5 h，100 ℃水浴常压蒸馏，蒸馏萃取2 h，取 8 mL馏分于15 mL专用采样瓶中，此为固相微萃取馏分样品［8］。

1.3.2固相微萃取条件

将固相微萃取装置的萃取纤维头分别插入装有干品样品或馏分样品采样瓶中，50 ℃下顶空萃取40 min，萃取后立即将其插入气相色谱仪进样口，250 ℃解析2 min［9,10］，进行GC-MS检测。

1.3.3GC-MS检测

1.3.3.1 色谱条件

色谱柱：HP-INNOWAX毛细柱（30 m × 0.25 mm，0.25 μm）；升温程序：40 ℃保持 3 min，以5 ℃/min升至150 ℃，保持1 min，以 10 ℃/min升至220 ℃，保持10 min；载气(He)流速： 1.0 mL/min，进样口温度：250 ℃，不分流模式。

1.3.3.2 质谱条件

电子轰击（EI）离子源，电子能量70 eV，传输线温度280 ℃，离子源温度230 ℃，质量扫描范围m/z 40～400。

1.4数据分析

挥发性成分经质谱扫描后，在色谱工作站得到总离子流量图，经MAINLIB、NISTDEMO、WILLEY 3个标准谱库检索，进行特征离子及相对丰度比较，确定各色谱峰对应的化学成分。挥发性成分的相对质量分数采用峰面积归一化法进行计算。

2 结果与分析

柱状田头菇干品固相微萃取样品和馏分固相微萃取样品经GC-MS分离鉴定出的挥发性成分总离子流图谱分别如图1-A和图1-B所示。可以看出，柱状田头菇干品和馏分中的挥发性成分实现有效分离，化合物出峰时间集中在15～ 40 min之间；柱状田头菇馏分的挥发性化合物响应值高于干品。

经过质谱数据谱库检索，鉴定出干品和馏分中挥发性成分共99种（包括同分异构体），表明柱状田头菇挥发性成分复杂，干品中挥发性成分有59种，馏分中挥发性成分有55种，主要成分相对质量分数有显著差异（表1）。

李 文，等：顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱法分析柱状田头菇挥发性成分

图1 柱状田头菇干品（A）和馏分(B)固相微萃取后GC-MS总离子色谱图

Fig. 1 GC-MS total ion chromatograms of volatile components extracted using HS-SPME from dried fruit bodies (A)

色谱柱篇3

关键词：毛细管柱气相色谱法；顶空气相色谱法；苯系物测定

中图分类号：X703

文献标识码：A文章编号：16749944（2017）12009702

1引言

苯系物在水中通常表现为甲苯、苯、乙苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯、苯乙烯、异丙苯等化合物。目前已经确定的是苯能够致癌，但是其它几类化合物也能对人体和其他生物造成不同程度的毒害。苯系物主要来源于焦化厂、石油化工厂所排放的废水当中。为此需要通过一定的技术来测定饮用水中苯系物的含量，从而采取进一步的改善措施，保证人们饮用水的安全。

2毛细管柱气相色谱法概述

现代实验室所用的气相色谱仪大都既可用作填充柱气相色谱，又可用作毛细管色谱仪。毛细管色谱仪应用范围广，可用于分析复杂有机物，如石油成分、水质监测、环境污染、农药残留等。固定液直接涂在管壁上，因为柱内壁面积比较大，所以涂层可以很薄，能够降低组分在气相和液相之间的传质阻力，因此使得毛细管柱的柱效比填充柱更好。

3顶空气相色谱法概述

顶空气相色谱法英文简写为HS-GC，也常被称为液上气相色谱分析，它是一种联合的操作技术。一般采用进样针在特定条件下对固体、气体、液体等进行萃取吸附，然后在气相色谱分析仪上进行脱附注射，其萃取过程通常在固相微萃取平台上进行。对于水质监测来说，顶空气相色谱法是一种比较重要的测试方法，它利用气相色谱分析与液相达到动态平衡的项空蒸汽，气相中挥发性组份的浓度代表原始样品的组成。

4顶空气相色谱法优势

顶空气相色谱法采用气体直接进样的方式，能够排除大量基体的干扰，使得其对色谱柱的污染较小，生成的谱图比较简单，因此在痕量挥发性组份的研究当中有着重要的作用。

同时顶空色谱进样器还能够同国内外各种气相色谱仪完美的连接，是目前最为理想的将液体和固体样品中挥发性组分直接导入气相色谱仪进行检测和分离的装置，它通过气体进样，能够专一性的收集样品中易挥发成分，比液液萃取、固相萃取更有优势，能有效的避免因除去溶剂所引起的挥发物损失，还能降低共提物引起的噪音，并且具有更高的灵敏度以及分析速度，对分析人员和环境的危害比较小，是一种绿色分析化学方法。

5气相色谱分析条件

因为物质物性不同，试样中各组分在气相、固相、液相之间的分配系数也不同，汽化后的试样被载气带入色谱柱中运行时，组分就在其中的两相间进行反复多次分配，经过一定时间的流动后，便彼此分离，按顺序离开色谱柱进入检测器，产生的讯号经放大后，在记录器上描绘出各组分的色谱峰，根据出峰位置，确定组分名称，根据峰面积确定浓度的大小。分析条件主要包括：载气对柱效的影响、载气流速对柱效的影响、固定液的配比、柱温的选择、气化温度的选择、色谱柱长和内径的选择、进样时间和进样量的选择、燃气和助燃气的比例等。

6实验部分

6.1方法原理

该实验建立了顶空-毛细柱气相色谱法测定水中苯胺的方法，在密闭的顶空瓶内，将水样中苯胺从液相逸入液上空间的气相中。并且在一定的温度下，苯胺在气、液两相间会达到动态的平衡，此时它们在气相中的浓度和在液相中的浓度成正比，取液上气相样品进行色谱分析[1]。

6.2主要仪器与试剂

Agilent7890A气相色谱仪（具FID检测器）；AgilentG1888自动顶空进样器；HP-5色谱柱；SE-30通用型石英毛细管柱。

浓度为100mg/L的苯胺标准储备液；纯水；二次蒸馏水；氢氧化钠溶液。

6.3顶空进样器条件

顶空瓶加热温度为75℃，加热时间为20 min，载气压力为15磅/平方英寸。传输线的温度为150℃，压力化时间为1 min，顶空进样时间为60 s，进样针的温度为105℃。

6.4气相色谱分析条件

柱箱温度：柱箱起始温度为45℃，保持1 min；然后以每分钟20℃的速度升至120℃，并保持2 min。进样口温度为200℃；柱流量为1 mL/min；采取分流进样的进样方式，分流比为1∶1[2]。

6.5样品分析

在顶空样品瓶中缓慢注入10 mL水样，并加入加入5 g氢氧化钠，然后盖上硅橡胶垫和铝盖，并用封口工具封装，最后放到顶空进样仪中测定。

7结果与讨论

7.1标准曲线及方法检出限

结果采用5点法的标准曲线，并使用蒸馏水稀释标准储备溶液，然后分别配制为20 mg/L、50 mg/L、100 mg/L、200 mg/L、500 mg/L的标准浓度溶液。同时每份溶液中各加入5.0 g NaOH ，然后加盖压紧并摇匀，直到NaOH完全溶解在溶液中，最后放入自动顶空进样器内。设定合理的加热平衡温度，并确定适当的平衡时间，然后对标准溶液浓度系列进行分析并绘制曲线图，曲线图的横坐标为各组分的质量浓度，纵坐标为对应的化合物峰面积。实验结果显示，在20～500 mg/L范围之内的苯胺响应值与浓度有着较好的线性关系[3]。

本实验分析了7个接近检出限浓度的实验室空白加标样品，计算其标准偏差S。方法检出限按照MDL=S×t（n-1，0.99）来计算。该公式中t（n-1，0.99）是置信度为99%、自由度为n-1的t值；n是重复分析的样品数。通过该公式计算出苯胺的方法检出限，检出限为13 mg/L。将该数值与《地表水环境质量标准》（GB3838-2002）对比，能够满足相关规定的特定标准限值要求[4]。

7.2精密度和加标回收率试验

向空白水样中分别加入苯胺的标准储备溶液，配置成低浓度（50 mg/L）、高浓度（200 mg/L）的标准溶液，加碱后进行加标回收率和精密度试验。通过分析的结果可知，该方法的平均回收率为92.5%～116%，RSD为5.8%～7.2%。

7.3结论

本实验建立了测定水中苯胺的顶空/气相色谱法检测条件，分析时间缩短，分析过程大幅度简化，方法检出限降到13mg/L、线性相关性、加标回收率和精密度经证明可以满足环境监测地表水分析的要求，具有广阔的应用前景。

2017年6月绿色科技第12期

包跃宇：顶空-毛细管柱气相色谱法测定水中苯系物方法研究

环境与安全

8结语

顶空-毛细管柱气相色谱法测定水中苯系物方法具有较好的优势，灵敏度更高，样品前处理技术更简便，其方法检出限、精密度、回收率测定结果都能满足水分析的需要。

参考文献：

[1]

向传宝，孙力平，高士奇，等. 空-毛细管柱气相色谱法测定水中八种苯系物的研究[J]. 天津城市建设学院学报，2011（1）：44～47.

[2]眭世闺，薛金花，何爱桃，等. 静态顶空-毛细管柱气相色谱法检测水中甲基叔丁基醚[J]. 中国卫生检验杂志，2010（3）：525～526+540.

色谱柱篇4

关键词 毛细柱；气相色谱法；有机氯；测定

中图分类号 X833 文献标识码 A 文章编号 1673-9671-(2012)021-0165-01

1 有机氯农药的危害

有机氯农药大量残留在土壤当中，或者存留的时间较长，会通过挥发扩散到周围的空气当中造成大气污染，并且还会随着雨水渗入到地表造成地表水和地下水污染。如果人们直接饮用这些污染的水以及食物后，就会造成有机氯农药中毒，严重情况下还会危及人们的生体健康。因此进一步完善土壤中有机氯农药残留量的测定方法对于日后治理有机氯农药所造成的污染有着非常重要的意义。

2 实验设计

本实验使用的仪器是GC-14C相测谱仪、CEM密闭微波萃取仪、

Ni-ECD检测器、N-2000双通道色谱工作站、恒温水浴氮吹浓缩仪、TDL-40B离心机以及LABORRTA-4000旋转蒸发器等。使用的试剂有石油醚、正己烷、丙酮、无水硫酸钠、六六六（六氯代苯），DDT混合标准液、浓度100 mg/L。实验中使用的试剂均为分析纯，实验使用的水为去离子水，石油醚细石为所需浓度的标准混合工作液。以下为本次实验的具体操作步骤。

2.1 实验方法

首先将10.5 g土样放于锥形瓶中，加30ml石油醚在电动振荡器上振荡60 min后取下沉淀，将上清液过滤到玻璃浓缩器中，余下的沉淀加石油醚20 mL重复振荡30 min后过滤，最后用20 mL石油醚分三次清洗使用过的实验仪器，并且收集清洗液在50℃加压浓缩。

将上述的样品放入10 mL离心管中，用5ml石油醚清洗蒸发瓶，然后在离心管中加1 mL浓硫酸，振荡 1min后置于离心机中（3 000 r/min离心

15 min）。得到的上清液移到试管中，用石油醚分两次清洗离心管后将清洗液定容至10 mL。最后进行气相测谱分析。

2.2 柱层析净化测定

色谱柱为OV-1701（30 m×0.53 mm×1.0 μm）弹性石英毛细管柱，柱温微程序升温，温度保持210℃，进样口以及检测器温度为250℃，柱前压65 kPa，载气流速4 mL/min，尾吹速为40 mL/min，载气、尾吹气均为高纯氮气（纯度≥99.999%），不分流进样，进样量为2 μl。

2.3 实验结果分析

通过对土壤样品中有机氯农药的气相色谱测定进行分析，体实验效果如表1所示。

2.4 标准曲线与检出限

将有机氯混合工作液分别稀释成不同浓度，进样量1ml分别上机测定以峰高（Y）对相应组分的质量浓度（X）进行线性回归，得到回归方程、相关系数和检出限结果如表2所示。

然后将六种有机氯土样样品进行六次连续测定，得到的精密度和回收率分别如表3所示。

从以上结果中可以看出毛细柱气相色谱法对土壤中有机氯农药的相对标准偏差在4.11%～5.86%之间，平均回收率在86%～97%之间，因此能够满足土壤有机氯农药残留量的测定要求。

综上所述，本文主要研究了毛细柱气相色谱分析土壤中有机氯农药残留量的测定方法。通过实验结果分析表明，毛细柱气相色谱分析土壤中有机氯农药残留量的测定方法具有高精度、高精密度以及低检出限等优势，因此可以在土壤中有机氯农药残留量的测定方面进行推广使用。

参考文献

[1]冯铁,路秀平,陈宝兰.顶空气相色谱法测定空气中亚硝酸盐[J].中国卫生检验杂志,2010,01.

[2]陈璞,顾书生,吕永鹏,马志春.气相色谱法测定饮用水中痕量溴酸盐[J].品牌与标准化,2010,02.

[3]肖艳.原子吸收光谱联用技术的建立及应用研究[D].广西师范大学,2008.

色谱柱篇5

Abstract: OBJECTIV: To optimize the extraction and purification process of curcumin. METHODS:The optimum extraction of ethanol refluxing method conditions were investigated by orthogonal design and purification of curcumin solution by silica gel column chromatography method with chloroform-methanol solution, and the content of curcumin was detectd by HPLC. RESULT: The optimum extraction condition obtained was: 75% ethanol, temperature of 90℃ with the volume of 10 folds of curcuma longa, refluxing and extracting for 3 hours. After purification by gel column chromatography method, the purity of curcumin powder was 81.8%. CONCLUSION: The optimized process is feasible for the extraction and purification of curcuma longa.

关键词: 姜黄素;乙醇回流法;提取;纯化;HPLC

Key words: curcuma longa;ethanol refluxing process;extraction;purification;HPLC

中图分类号:R28文献标识码:A文章编号:1006-4311(2010)16-0241-02

0引言

姜黄素(curcumin)是从中药姜黄、郁金、莪术等根茎中提取的一种小分子量多酚类化合物,研究发现姜黄素具有降糖、降脂、抗氧化、抗炎、抗癌[1-4]等多方面的药理作用。目前姜黄素提取常见的方法有碱水提取法和酶法等[5,6],但这些传统方法操作过程复杂,提取率不高,而新技术成熟的提取条件不易掌握且造价比较昂贵,因而在中药成分提取应用中受到限制,不适合向中小企业推广应用。本研究通过正交设计试验探讨乙醇回流法提取姜黄素的最佳条件,并建立硅胶柱色谱层析技术对姜黄素提取液进行分离、纯化。

1仪器和试剂

姜黄素标准品购自美国Sigma,编号28260,纯度≥95%(TLC),中药姜黄购自哈尔滨市中药材市场天然药业经销部,Waters 2695高效液相色谱仪:美国Waters 公司;甲醇:山东禹王实业有限公司。

2材料与方法

2.1 姜黄粉的制备称取一定量的姜黄中药材,放置在60℃烘箱中干燥5h,然后用粉碎机将其粉碎,过30目筛子即可得到姜黄粉。

2.2 姜黄素提取液的制备分别准确称取经干燥过筛的姜黄粉末20mg,置于500ml烧瓶中,以不同乙醇溶液浓度,温度,料液比,时间为考察因素,进行正交设计实验,然后用高速离心机将提取液进行离心(10000r/min,10min),离心后的上清液移入砂芯漏斗抽滤,然后用乙醇定容到500ml,混匀备用。

2.3 姜黄素提取液的纯化按照正交设计实验获得的最佳工艺条件提取姜黄素,将姜黄素提取液置于旋转蒸发器中浓缩至一定程度备用。

2.3.1 柱色谱展开剂的选择采用薄层色谱分离法选择合适的姜黄素洗脱溶剂,共选择三种展开剂,氯仿-甲醇溶液,氯仿-乙醇溶液,氯仿-乙酸乙酯溶液,通过计算比移值(Rf)以确定分离效果,选择分离效果最好的展开剂作为柱色谱分离所用的洗脱剂。

2.3.2 姜黄素的硅胶柱色谱分离称取 100-200目硅胶100g置于1200C烤箱活化1h,用氯仿:甲醇(75:25)作洗脱剂,装20*1.8cm高的硅胶柱,上样后以氯仿-甲醇为流动相进行洗脱,分步收集洗脱液,每管5mL,共收集13管,对所得到的洗脱液进行液相分析。

2.4 姜黄素HPLC检测方法的建立

2.4.1 色谱条件色谱柱HypersilODSC18柱,流动相:甲醇-1%冰醋酸水溶液(70:30),流速1ml/min,进样量10ul,检测波长424nm,柱温30℃。

2.4.2 标准曲线的制备精确称量姜黄素标准品100μg置于10ml容量瓶中,用甲醇溶解,制成0.5、1、5、10和20μg/ml的姜黄素标准溶液。混匀后进样,测定峰面积,计算回归方程。

2.4.3 HPLC法检测姜黄素条件的验证:通过精密度试验,稳定性试验,回收率实验验证上述色谱条件是否稳定。

2.4.4 样品的检测根据上述色谱条件,分别吸取一定体积的姜黄素标准品溶液和样品待测溶液,以10μl体积进样,测定姜黄素峰面积,按照峰面积计算姜黄素提取液中总姜黄素的含量,姜黄素提取量按照下述公式计算:

姜黄素提取量=X标准品浓度

3结果

3.1 姜黄素检测方法的建立

3.1.1 标准曲线的制备:以峰面积为纵坐标,进姜黄素浓度为横坐标,绘制标准曲线,如图:

求得回归方程及线性系数分别为:y=7.9995x+3866.6,R=0.9999,在0.5-20μg/ml范围内线性良好。

3.1.2 HPLC法检测姜黄素条件的验证:通过精密度试验,稳定性试验,回收率实验证实上述色谱条件稳定,可以用来检测溶液中姜黄素的含量。

3.2 正交设计优化姜黄素的提取条件以姜黄素的浓度为考察指标,对乙醇浓度,料液比,温度,提取时间进行考察,每个因素取三个水平(见表1),应用L9(34)正交设计表(见表2)来安排实验。

3.3 姜黄素提取液硅胶柱色谱纯化将姜黄素提取液在旋转蒸发仪上浓缩后放入硅胶柱内,以氯仿-甲醇溶液洗脱,控制洗脱液流速,每5ml洗脱液收集一管,并采用HPLC检测不同管内洗脱液中姜黄素的含量。姜黄素含量较高的洗脱液主要集中在5～9号管中,因此主要收集第5～9号管的洗脱液。纯化后的液体经低温冷冻干燥后得到一定纯度姜黄素的样品,计算其纯度。

3.3.1 姜黄素含量的测定收集第5～9管的姜黄素洗脱液合并后共约24mL,低温冷冻干燥后取一定量的姜黄素粉末用甲醇溶解到100ml容量瓶中制备成样品溶液进样,按上述的色谱条件进行测定,根据标准曲线计算的24ml姜黄素洗脱液浓度为425.628μg/mL。

3.3.2 姜黄素纯度的计算收集第5～9管的姜黄素,合并后共24mL,测得其浓度为425.628μg/mL,将洗脱液蒸干,测得其重为0.0125g。

姜黄素的纯度=浓度×体积/重量×100%

=4.26×10-4×24/0.0125×100%

=81.8%

4讨论

由于姜黄素不耐高温,见光易分解,不溶于水的特性,本研究采用乙醇低温回流的方法进行提取,以姜黄素提取液中总姜黄素含量作为考察指标,并综合考虑了节省能源和时间。以温度,料液比,乙醇浓度,提取时间为考察因素,通过正交设计实验来探讨最佳提取条件。由统计结果可以看出,在A3B2C3D3 条件下提取效果最好,即温度90℃,乙醇浓度75%,料液比10倍,提取时间3h提取率最高。通过比较各因素与提取率的相关系数,可知影响姜黄素提取的各因素作用大小顺序是乙醇浓度>提取时间>温度>料液比,乙醇浓度和提取时间为主要的影响因素。因此从节约能源和节省时间的角度综合考虑最终确定乙醇浓度75%,提取时间2小时,温度75℃,料液比8倍为最佳提取条件。

在姜黄素的纯化过程,采用色谱柱吸附的原理去除姜黄素提取液中的脂类物质,从而使提取物纯度增高并且容易干燥。本实验采用硅胶极性吸附的原理,以氯仿与甲醇的混合液(75:25)作为洗脱剂,经两次洗脱,效果较好,能得到纯度较高的总姜黄色素。

综上所述,采用本研究所获得的姜黄色素提取条件并对提取液进行硅胶柱色谱分离纯化,实验工艺简单,节省能源和节约时间,提取效率较高,分离完全,总姜黄色素的得率和纯度都较高,应用价值较高,适合推广到企业应用。

参考文献:

[1]Weber W. M, Hunsaker LA, Roybal CN, et al. Curcumin (diferuloylmethane) inhibits consititutive NF-kB activation, induce G1/S arrest, suppresses proliferation, and induces apoptosis in mantle cell lymphoma. Bioorganic & Medicinal Chemistry. 2006,14:2450.

[2]Chen A, Xu J, Johnson AC. Curcumin inhibits human colon cancer cell growth by suppressing gene expression of epidermal growth factor receptor through reducing the activity of the transcription factor Egr-1.Oncogene. 2006,25:278.

[3]Shen SQ, Zhang Y, Xiang JJ, et al. Protective effect of curcumin against liver warm ischemia/ reperfusion injury in rat model is associated with regulation of heat shock protein and antioxidant enzymes [J]. World J Gast roenterol. 2007,13(13):1953-1961.

[4]麦国丰,简燕婷,杨玉捷等.姜黄素对肠炎大鼠肠黏膜基质金属蛋白酶-9的调控[J].第四军医大学学报,2005,26(14):1257-1260.

色谱柱篇6

关键词 同位素稀释； 蛋白质定量； 电感耦合等离子体质谱； 转铁蛋白； 白蛋白

1引言

蛋白质组学的快速发展，不但需要准确鉴定蛋白质，还要求对处于动态变化的蛋白质进行定量分析[1～4]。目前比较成熟的定量方法多是基于稳定同位素标记的生物质谱[5，6]，但是生物质谱的信号响应与蛋白质或肽段含量间的关系十分复杂，没有蛋白质标准作归一化处理，很难对蛋白质或肽段定量。与生物质谱不同，电感耦合等离子体质谱（ICPMS）分析中元素的响应与原子所处的分子环境无关[7]，而且样品处理简单，易于色谱联用，可进行同位素分析[8]。因此，利用ICPMS对蛋白质中的元素定量分析，是近年来蛋白质定量技术研究的热点。硫是最适合作为蛋白质定量分析的元素[9]。根据SwissProt蛋白质数据库的统计分析，分别有96.6%、98.8%的蛋白质含有半胱氨酸、甲硫氨酸等含硫氨基酸[10]。如果蛋白质的氨基酸序列已知，就能确定其中的硫原子数；那么通过ICPMS测定硫的含量来实现蛋白质的定量是完全可行的[11]。但是，目前ICPMS直接测定硫来定量的蛋白，主要是标准蛋白，涉及基体样品的很少，因为ICPMS测量硫存在一些困难：需使用碰撞池技术或高分辨ICPMS克服O+2对硫的谱线干扰[12]。常见的ICPMS对蛋白质定量研究集中在金属蛋白上[13，14]，定量原理与含硫蛋白相同。

为保证定量分析的准确度，需使用与待测蛋白匹配的标准物质来保障质控与量传，但由于蛋白质种类繁多、结构复杂，目前可获得的蛋白标准十分匮乏。同位素稀释法（ID）是国际公认的具有权威性化学计量方法，只需硫或金属的浓缩同位素即可实现不同基体蛋白的定量分析[15]。

高效液相色谱（HPLC）的同位素稀释法分为特异性、非特异性形态[16]。前者在前处理时就将稀释剂加入到样品中，具有传统同位素稀释法的优点；但是必须开发针对目标蛋白的特异性稀释剂制备方法，目前商品化或人工合成的稀释剂非常有限，直到2005年才有文献报道第一次应用到蛋白质的定量分析[17]。而非特异性形态同位素稀释（也称柱后同位素稀释）对蛋白质的种类、结构没有要求，同位素稀释剂常为某元素的简单离子，基本都有商品化的产品，适合于蛋白质的定量分析。

目前，文献报道了高效液相色谱柱后同位素稀释质谱法（HPLCIDICPMS）， 通过测硫定量标准蛋白[11]和测铁定量转铁蛋白[14]，但是未见对硫、铁共同定量蛋白的比较及人血清中多种蛋白的定量。本研究采用液相色谱分离混合蛋白，ICPMS测硫、铁分别定量的标准蛋白结果与天平称量结果比较，验证了HPLCIDICPMS方法，并对硫、铁定量分析进行比较。在此基础上，将方法应用到人血清中转铁蛋白、白蛋白的定量分析，测定了血清中两种蛋白的含量。本方法体系可应用在食品安全、环境监测、临床检验的化学计量、相关实验室认证等生命科学研究的重要领域，促进我国生命科学测量水平的不断提高和测量溯源性研究的深入发展。

2实验部分

2.1仪器、试剂与样品

Element 2扇形磁场电感耦合等离子体质谱仪（美国ThermoFisher Scientific公司）；高效液相色谱系统（日本Shimadzu公司）：含LC30AD泵、LC20AD泵、SIL30AC自动进样器、CTO20A柱温箱、SPD20A紫外检测器；Toledo型电子天平（瑞士Mettler公司）；MillQ超纯水系统（美国Millipore公司）；TSKGel G3000SWxl凝胶柱（300 mm×7.8 mm，日本Tosoh公司）；Shodex QA825 IEC色谱柱（75 mm×8.0 mm， 日本Shodex公司）

Tris、人血清转铁蛋白Transferrin（Tf，75.2 kDa，每分子含47个S原子）、白蛋白Albumin（Alb，66.4 kDa，含41个S原子）、牛β乳球蛋白Lactoglobulin（Lacb，18.36 kDa，含9个S原子）、鸡溶菌酶Lysozyme（Lys，14.31 kDa，含12个S原子），均购自Sigma公司；甲酸铵、乙酸铵，购于Fisher Scientific公司；马心肌红蛋白Myoglobin（Myo，16.95 kDa，含3个S原子）、人血清样品来自中国计量科学研究院；其它试剂均为国产分析纯；实验用水为超纯水（18.2 MΩ·cm）。

4种标准蛋白Tf， Lacb， Myo和 Lys用天平准确称量后混合，溶于超纯水中备用；人血清样品不经任何处理，直接进入液相色谱进行分析。

34S浓缩同位素（美国橡树岭实验室）：同位素32S/34S丰度比为0.01417；54Fe浓缩同位素（中国计量科学研究院）：同位素56Fe/54Fe丰度比为0.11313。

2.2电感耦合等离子体质谱仪条件

仪器工作参数为：功率 1300 W，样品气流速1.05 L/min，辅助气流速0.87 L/min，冷却气流速16.0 L/min， 分辨率（m/Δm） 4000；扫描次数 700×1。

2.3高效液相色谱分离条件

2.3.1尺寸排阻色谱（SEC）分离混合标准蛋白尺寸排阻液相色谱常用的流动相中高浓度盐（如NaCl等）在质谱锥上的堆积会影响ICPMS测量；文献[18]研究发现，0.2 mol/L乙酸铵作为流动相时既能保证分离效果，又不会引入高浓度盐；而且质谱连续工作8 h，没有发现明显的碳堆积。本实验所用的流动相为0.1 mol/L 乙酸铵溶液，流速为0.4 mL/min， 紫外检测器波长280 nm，分析时间40 min，等度洗脱。

2.3.2阴离子交换色谱（IEC）分离人血清由于转铁蛋白与白蛋白分子量接近，尺寸排阻色谱柱分离人血清时，两者的保留时间重合，不能达到分离效果，因此采用阴离子交换柱Shodex QA825 IEC分离人血清。液相分离条件为 A相： 0.02 mol/L TrisHCl（pH 8.6）； B相： A+0.5 mol/L甲酸铵溶液，流速为0.7 mL/min， 时间程序： 0～30 min， 0～100% B； 梯度洗脱。 紫外检测器波长为280 nm。

2.4HPLCIDICPMS分析

柱后同位素稀释时，稀释剂通过岛津液相系统自带的LC20AD泵加入，与液相色谱的洗脱液经过三通混合后在线进入ICPMS检测。液相色谱实现混合蛋白分离，ICPMS检测对蛋白定量分析。

质谱得到的同位素比值谱图，根据同位素稀释公式（1），转化为元素的质量流（Mass flow）谱图。积分质量流谱图中的峰面积可得到相应蛋白中该元素的绝对含量，依据液相进样体积及蛋白所含元素个数，就可计算出蛋白的绝对浓度。

MFs=cspdspfspMsMspAbspAbs（Rm-Rsp）（Rs-Rm）（1）

式中， csp， dsp和fsp分别代表同位素稀释剂的浓度（ng/g）、密度（g/mL）和流速（mL/min）； Ms和Msp分别表示样品和稀释剂中元素的原子量； Abs和Absp分别表示样品和稀释剂中核素b的丰度； Rm， Rsp和Rs分别表示混合样品、稀释剂和样品中核素a与核素b的丰度比。

血清中目标蛋白的正常含量范围不同：转铁蛋白2.35～3.00 g/L，白蛋白35～50 g/L；导致两种蛋白中硫含量差别很大，为保证Rm比值合适，采用改变稀释剂流速的方法，在液相时间程序的前15 min（转铁蛋白出峰部分），34S同位素稀释剂的流速为0.03 mL/min；之后白蛋白出峰时间段，流速提高到0.2 mL/min。[TS（][HT5”SS]图14种混合标准蛋白的液相色谱图

Fig.1Liquid chromatogram of mixed standard proteins[HT5][TS）]

3结果与讨论

色谱柱篇7

关键词：离子对色谱； 间接紫外检测； 吡咯烷离子液体阳离子； 整体柱； 对氨基苯酚盐酸盐

1引言

离子液体是一种在室温或接近室温下呈液态的低温熔盐，在催化、有机合成、电化学以及分析化学等领域具有广泛的应用[1～4]，因此对离子液体的分离检测就显得尤为重要[5]。目前，文献报道分离测定离子液体阳离子的方法主要有反相液相色谱法[6～8]、离子对色谱法[9～11]、离子色谱法[12，13]和亲水相互作用液相色谱法[14]等，分析的对象主要是分子中具有紫外光吸收基团， 可以进行直接紫外检测的咪唑和吡啶类离子液体阳离子，而对于无紫外光吸收的离子液体阳离子（如吡咯烷类离子液体阳离子），其分离测定的相关报道几乎没有。间接紫外检测法是在流动相中加入具有紫外光吸收的物质作为背景紫外吸收试剂，用于检测无紫外光吸收的物质。用高效液相色谱间接紫外检测法的分析报道比较少，分析的对象主要是脂肪烃和无机阴离子[15～18]。本研究组曾采用间接紫外检测法分析四甲基铵根离子，获得了较好的结果[19]。与传统色谱柱相比，整体柱以其独特的优点，提高了色谱分离速度，迅速成为近年来色谱分析中的重要分离介质[20]。

本研究发展了无紫外光吸收的吡咯烷类离子液体阳离子的整体柱离子对色谱间接紫外检测分析方法。利用具有紫外光吸收的对氨基苯酚盐酸盐作为背景紫外吸收试剂，在反相硅胶整体柱上，以对氨基苯酚盐酸盐离子对试剂有机溶剂为流动相，实现了无紫外光吸收的吡咯烷类离子液体阳离子的分离和间接紫外检测。

2实验部分

色谱柱篇8

关键词：柱前衍生化；低分子羰基化合物；高效液相色谱法；2，4-二硝基苯肼

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.12.017

中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2013）12-0046-03

1995年版《中华人民共和国药典》（一部）首次收载了酸败度检查法，此后历版药典均有收载[1-3]，其中羰基值测定的方法为比色法，测定原理为：在酸性条件下，羰基化合物与2，4-二硝基苯肼（DNPH）反应，生成2，4-二硝基苯腙，再与氢氧化钾作用，生成酒红色共振型离子，在453 nm波长下，测定吸光度，计算出样品中的羰基值。

比色法的准确性及重现性差，影响因素较多[4-5]，其中2，4-二硝基苯肼溶液加入量的准确性、测定方法的反应条件、所用试剂的杂质等直接影响该方法的准确性。另外，该方法使用溶剂量大，毒性大，且操作繁琐、时间长等因素，不仅影响结果准确性，且效率低下、不环保。本研究拟克服现有测定方法的弊端和不足，以建立客观、专属的测定方法，对羰基值测定方法

进行探索研究。考虑到酸败的产物中主要生成低分子的醛类、酮类化合物，本研究建立含油脂类中药材中甲醛、乙醛、丙酮、丙烯醛、丙醛、巴豆醛、丁酮和丁醛等羰基化合物衍生物的高效液相色谱（HPLC）测定方法，为控制本类产品质量提供依据。

1 仪器与试药

Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪，二极管阵列检测器（日本岛津），XS205电子天平（梅特勒-托利多仪器有限责任公司），KQ-300E型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），TW20恒温水浴锅（Julabo仪器公司）。

乙腈为色谱纯，水为超纯水，其余试剂为分析纯。甲醛、乙醛、丙酮、丙烯醛、丙醛、巴豆醛、2-丁酮、丁醛的DNPH衍生化合物（批号189048，纯度分别为99.9%、99.7%、98.0%、95.0%、99.9%、99.0%、99.0%、99.5%，上海安谱试剂公司）。

苦杏仁（批号130205）、炒苦杏仁（批号130214）、桃仁（批

号121220）、桃仁（批号130105），均购自北京绿野饮片公司。经鉴定，分别来源于蔷薇科植物杏Prunus armeniaca L.及山桃Prunus davidiana （Carr.） Franch.的干燥成熟种子。

2 方法与结果

2.1 色谱条件及系统适用性试验

色谱柱：Kromasil KR100-5 C18（250 mm×4.6 mm，5 ?m）；以水-乙腈-四氢呋南-异丙醇（59∶30∶10∶1）为流动相A，以水-乙腈（35∶65）为流动相B，按表1进行梯度洗脱；流速：0.8 mL/min；柱温：30 ℃；检测波长：365 nm；进样量10 ?L。在上述色谱条件下，各色谱峰分离良好，测定组分均能达到基线分离（见图1）。

2.2 对照品溶液的制备

分别精密称取甲醛、乙醛、丙酮、丙烯醛、丙醛、巴豆醛、2-丁酮、丁醛的DNPH衍生物对照品适量，加乙腈制成每1 mL各含0.02 mg的混合溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备

精密称取药材粉末15 g，精密称定，加水30 mL，超声处理（功率300 W，频率40 kHz）1 h，离心，精密吸取澄清液10 mL至25 mL具塞刻度管中，精密加入1 mL 3.0 g/L的DNPH溶液、4 mL醋酸盐缓冲溶液（pH 4.8），加乙腈至刻度，在40 ℃恒温水浴锅中水浴加热90 min，取出放至室温，滤过，取续滤液，即得。

2.4 线性关系考察

分别精密称取甲醛DNPH衍生物对照品50.67 mg、乙醛DNPH衍生物对照品49.12 mg、丙酮DNPH衍生物对照品49.60 mg、丙烯醛DNPH衍生物对照品49.14 mg、丙醛DNPH衍生物对照品49.14 mg、巴豆醛DNPH衍生物对照品51.18 mg、2-丁酮DNPH衍生物对照品48.91 mg，丁醛DNPH衍生物对照品49.20 mg，置100 mL量瓶中，加乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，得到对照品储备液。精密吸取1.0 mL置25 mL量瓶中，加乙腈稀释至刻度。分别精密吸取此混合对照溶液1、2、5、10、15、20、30 ?L，注入高效液相色谱仪，按色谱条件测定，以进样量（?g）为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。结果见表2。

1.甲醛DNPH衍生物；2.乙醛DNPH衍生物；3.丙酮DNPH衍生物；

4.丙烯醛DNPH衍生物；5.丙醛DNPH衍生物；6.巴豆醛DNPH衍生物；

7.2-丁酮DNPH衍生物；8.丁醛DNPH衍生物

2.5 精密度试验

精密吸取对照品溶液，连续进样6次，每次进样10 ?L，测定各峰峰面积，计算得甲醛、乙醛、丙酮、丙烯醛、丙醛、巴豆醛、2-丁酮、丁醛的DNPH衍生化合物RSD分别为0.07%、1.2%、0.26%、0.11%、0.48%、0.40%、1.9%、0.58%。

2.6 稳定性试验

取混合对照品溶液，在室温下贮存，每隔一定时间进样1次，每次10 ?L，测定各峰面积，计算得甲醛、乙醛、丙酮、丙烯醛、丙醛、巴豆醛、2-丁酮、丁醛的DNPH衍生化合物RSD的分别为0.16%、4.7%、0.35%、0.27%、2.8%、3.0%、0.48%、3.6%。结果表明，对照品溶液中8种化合物在8 h内均具有良好的稳定性。

2.7 检出限和定量限

以信噪比（S/N）为3作为检出限（LOD），信噪比为10作为定量限（LOQ），8种化学组分的检出限和定量限结果见表3。

2.8 加样回收率试验

取苦杏仁药材，研细，分别加入8种对照品，加甲醇溶解，平行制备6份，测定，结果见表4。

2.9 样品含量测定

分别取苦杏仁（批号130205）、炒苦杏仁（批号130214）、桃仁（批号121220）、桃仁（批号130105）等样品粉末15 g，按上述方法进行测定，计算含量，结果见表5。

3 讨论

本研究对《中华人民共和国药典》附录中酸败度测定项下供试液的测定方法进行了改进，原方法先用索氏提取法提取油脂，再用比色法测定油脂中的羰基值。因甲醛等小分子醛、酮类化合物易溶于水，因此，本研究采用药材直接以水超声提取、衍生化，用HPLC直接测定的方法，操作更简便，且液相测定方法比原紫外方法影响因素更小。用所建立的方法对常用含油脂类药材中小分子羰基化合物含量进行了测定，结果表明，乙醛、甲醛和丁醛是该类药材中含量较多的羰基化合物，其中，乙醛的含量更高。

本研究对衍生化条件进行了比较优化，包括溶液的pH值范围、反应温度和衍生化时间等，最终确定在弱酸性缓冲液条件下，40 ℃水浴加热90 min即可。

油脂发生酸败的结果是产生了一些小分子的醛酮类化合物，但通过测定该类化合物含量能否准确地反映或代表样品酸败的程度，有待进一步探讨。

参考文献：

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].北京：化学工业出版社，1995：附录59.

[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].北京：化学工业出版社，2000：附录59.

[3] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：附录56.

[4] 裘汉幸.对《中国药典》酸败度检查法中羰基值测定方法的探讨[J].中国药事，1998，12（2）：98-99.

色谱柱篇9

【关键词】气相色谱;白酒;分析方法

在白酒产品质量检验中，为了更好地评价白酒的质量，除了感官评价外，分析其微量成分也是一个重要方面。目前，白酒中微量成分检测主要采用气相色谱[1]。气相色谱分析白酒中微量成分产生误差的原因很多。为此，笔者探讨了一些采用气相色谱测定白酒中微量成分产生误差的原因及控制方法。

1．色谱柱选用

气相色谱分析法仪器是气相色谱仪，其核心是色谱柱。色谱柱主要分为填充柱和毛细管柱两类。在选用色谱柱时，应保证所测主要组分完全分离。在白酒检测中，填充柱应用较为普遍。填充柱根据固定液不同分为DNP[2]（邻苯二甲酸二壬酯）柱和PEG[3]（聚乙二醇）柱两种。

1.1 DNP和PEG填充柱比较

在白酒主要微量成分分析时，采用PEG填充柱。由于己酸乙酯先于乳酸乙酯通过填充柱，特别是做快速分析时，己酸乙酯容易成为乙醇拖尾上的峰，造成较大的分析误差。使用DNP填充柱，己酸乙酯后通过填充柱，克服了使用PEG填充柱的弊端。所以在分析检测浓香型白酒时，宜选用DNP填充柱，可获得较好地分析结果。

1.2毛细管色谱柱

毛细管色谱柱在白酒微量成分检测愈来愈发挥重要作用。比如PEG-20m聚乙二醇石英毛细管柱，FFAP（ 聚乙二醇20M与对苯二甲酸的反应物）可分析检测出白酒中50多种微量成分。毛细管色谱柱对色谱仪要求较高，必须配有分流装置和程序升温装置。并且PEG-20M色谱柱甲醇与乙酸乙酯合峰，这是其弊端。

2.气相色谱分析定量方法

气相色谱分析白酒微量成分主要有3种定量分成方法：外标法、归一化法和内标法。这三种方法各有其优缺点。分述如下：

2.1外标法

又称已知样品校正法或标准曲线法。具体方法为配制已知浓度地标注样品进行色谱分析，计算出校正因子。然后与标准样品在相同条件下，注入同体积地被分析样品，根据已求校正因子求得被测分析样品中微量成分含量。该方法操作简单，分析方法准确，主要取决于样品进样地重复性和操作条件的稳定程度。

2.2归一化法

当被测样品中所有组分都能流出色谱柱，并且在色谱图上都显示色谱峰时，可采用此法直接进样计算各组分地百分含量。此方法简便、准确。进样量地变动与结果无关。仪器与操作条件稍有变动时，对结果影响也较小。不需标准物质。缺点是要求被测样品中组分不能太多，而且必须都能得到有效分离且流出色谱柱显示色谱峰才能定量测定。

2.3内标法

当式样中所有组分不能全部出峰或只要求测定试样中部分组分时，可采用此法。此法优点时进样量不要求严格控制，可有效避免进样量变化造成的分析误差，由于每次分析都要准确向被测试样中加入内标物，并且一般很难找到合适的内标物。这是该法一缺点。

3.定量分析方法的合理选用

在实际分析过程中，应根据不同的分析需要合理选用定量分析方法，最大限度的降低分析误差。

3.1主要酯类物质的测定

在日常检测时，如果只检测白酒中主要酯类物质，宜选用外标法，使用同一台气相色谱仪，采用外标法和内标法分析同一白酒样品。

3.2主要的醇、醛、酯成分的检测

当分析白酒中主要的醇、醛、酯指标时，色谱柱应选用DNP填充柱。分析方法宜选用以乙酸正丁酯为内标的内标法，该方法可准确定量检测白酒中15种醇、酯类物质。用PEG-20M毛细管色谱柱会产生甲醇与乙酸乙酯分离不开的问题，影响甲醇和乙酸乙酯测定。

4.气相色谱法检测白酒成分误差分析

4.1载气气体对分析影响

载气（一般为氮气）中的水分能对色谱柱特别是毛细管柱造成较大损害，燃气（氢气）中水分及烃类等杂质易引起基流增大，噪声增大，降低灵敏度。为减少分析误差，载气气体必须净化。一般使用分子筛，硅胶，氧肼作干燥剂脱水。

4.2汽化室硅胶垫对分析影响

汽化室硅胶垫使用一段时间后容易漏气。特别是开机起始，更容易产生漏气现象，一旦出现色谱峰异常或峰高突然降低，应检查漏气与否普通白色硅橡胶垫一般进样50次须更换新垫。

4.3空气、氢气流速对分析影响

对于用气相色谱检测白酒中微量成分，采用的FDI（氢气焰离子检测器）。FID对氢气、空气比例要求较严一般选择流速空气：氢气=10：1.只有在最佳流速时，FID检测器有较高的灵敏度，否则会使色谱峰高降低，导致较大的分析误差。

4.4进样准确性对分析影响

气相色谱分析一般采用微量注射器（手工进样），每次进样前，应将进样针用被测样品抽洗至少5次以上并排掉气泡。保证所测样品浓度不发生变化。

4.5进样速度对分析影响

汽化室温度一般比柱温高几十度。为保证所有组分瞬间汽化。试样进入色谱柱后仅占柱端的一小段。即以“塞子”的形式通过色谱柱，如果进样太慢，试样起始宽度增加，出峰时导致色谱峰严重扩张。反之，如果进样速度太快，导致色谱峰过窄，会影响相邻组分峰的分离。一般要求在1s内完成。

4.6 色谱柱对分析影响

长期使用的色谱柱容易产生高沸点组分在色谱柱内的残留，导致检测器噪声变大，适当对色谱峰进行老化：通以载气。在高于使用温度20℃以上，低于色谱柱最高使用温度。不接检测器保持恒温10h左右，以使残留高沸点组分流出。同时，要定期清理色谱柱头和衬管。

5.结语

为最大限度地降低色谱分析误差，提高色谱分析数据的准确性，除保证气相色谱仪的稳定性和合理选用色谱柱之外，还要根据分析需求选择合适的定量分析方法，并严格操作。控制各种人为因素及外界因素的影响。才能获得准确的分析数据。　[科]

【参考文献】

［1］GB/T10345-2007．白酒分析方法[S]．

色谱柱篇10

气相色谱法（gaschromatography简称GC）是色谱检测方法其中的一种。在色谱检验方法中有两个相，一个相是流动相，另一个相是固定相。气相色谱检验方法由于所用的固定相不同，可以分为两种，用固体吸附剂作固定相的叫气固色谱，用涂有固定液的单体作固定相的叫气液色谱。按色谱分离原理来分，气相色谱检验方法也可分为吸附色谱检验法和分配色谱检验方法两类，在气固色谱检验方法中，固定相为吸附剂，气固色谱属于吸附色谱，气液色谱属于分配色谱。按色谱检验操作的形式来分，气相色谱属于柱色谱，根据所使用的色谱柱粗细不同，可分为一般填充柱和毛细管柱两类。一般填充柱是将固定相装在一根玻璃或金属的管中，管内径为2～6毫米。毛细管柱则又可分为空心毛细管柱和填充毛细管柱两种。空心毛细管柱是将固定液直接涂在内径只有0.1～0.5毫米的玻璃或金属毛细管的内壁上，填充毛细管柱是近几年才发展起来的，它是将某些多孔性固体颗粒装入厚壁玻管中，然后加热拉制成毛细管，一般内径为0.25～0.5毫米。在实际检验工作中，气相色谱法是以气液色谱为主。

2气相色谱在食品检验中的应用

2.1农药残留的分析

2.1.1毛细血管柱。对农药残留的检验最常用的毛细血管柱是10-50米，0.05-1μm液膜厚度的WCOT弹性石英毛细血管柱。这种毛细血管柱的优点是分离度高、灵敏度强和分析时间短等优点。但也存在一定的缺点：不挥发性共萃取物进入毛细血管柱容易造成比填充物堵塞的问题，如蜂拖尾和定量误差增大。

2.1.2检测器。最常用的有ECD、NPD和FPD，是农药残留物分析GC的检测仪。最通用，最灵敏的检测仪是MSD。ECD对卤代农药的灵敏度比较高，但是需要对样品进行很好的净化。NPD最适用于检测含氮和含磷品种的农药检测，FPD大多适用于含硫和含磷品种的农药检测。

2.2有机氯农药残留的检测。一般采用GC对有机氯农药进行分析，还可以对多氯联苯（PCB）、氯代苯呋喃等化工产品进行分析。样品一般采用固液萃取，在使用GC/MS鉴定色谱峰时，常用化学电离源和选择离子检测模式，采用此法可以分离和鉴定环境水萃取物中19种pg/g量级的有机氯农药和多氯联苯。

2.3有机磷农药残留的分析。有机磷农药残留物的分析一般采用填充柱和ECD、FPD或者NPD。在使用EPD时，对样品的要求比较严格，纯净度要高，而采用FPD和NPD进行检验时，对样品纯净度的要求可以低一些。固定液多采用DEGS、DC-200、SE-30、QF-1、OV-17等。2.4胺甲基酸脂杀虫剂残留检测。根据N-甲基氨基甲酸酯杀虫剂热稳定差的性质，不适合采用填充柱进行分析，可以采用毛细血管柱直接进行分析测定。采用ECD检测时可通过衍生反应提高灵敏度，目前大多采用NPD，如对涕灭威及其氧化产物的分析采用SE-54毛细血管柱、NPD等方法。

3结束语