免疫增强剂十篇

免疫增强剂篇1

科学家认为，提高人体免疫力，有两条路：一是在日常生活中自己创造免疫增强剂；二是从外界补充免疫增强剂。而蜂王浆无愧于“天然免疫增强剂”的称号。

蜂王浆，又名蜂皇浆、蜂乳，蜂王乳。蜂王浆是高蛋白，并含有维生素B类和乙酰胆碱等。它是蜜蜂巢中培育幼虫的青年工蜂咽头腺的分泌物，质地粘稠，营养丰富，是供给将要变成蜂王的幼虫的食物，是“蜂”专门用来哺育蜂王幼虫的浆液，所以称为——蜂王“浆”。那么，蜂王浆为什么那么受人们的追捧，它到底有什么营养呢？对我们的身体有什么好处呢？一起往下看——

1.优质的蛋白质：

氨基酸是蛋白质的组成单位，其人体必需氨基酸组成的蛋白质比例适当，称作优质蛋白，利于人体吸收利用。蜂王浆的王浆蛋白可称为优质蛋白，且含量丰富，在蜂王浆特有的蛋白中，有某些特异性氨基酸对于人体肝功能有促进的作用，同时具有保护肝细胞的作用、抗炎的作用。

蜂王浆除去水分其蛋白质占36%～55%，其中60%为清蛋白，30%为球蛋白，这种比例更利于人体吸收利用。

2.独有的脂肪酸：

蜂王浆是短链羟基脂肪酸的集合，含有20多种游离脂肪酸，其中有一种叫“10-羟基-2-癸烯酸“的脂肪酸，是自然界中在蜂王浆中独有的脂肪酸，至少目前在其他食物当中没有被发现，含量在总脂肪酸的50%以上，被称为“王浆酸”。在人体当中具有很好的杀菌、抗炎、抗癌、抗氧化、预防心脑血管疾病等功效。它和蜂王浆中的蛋白质共同作用，相互协调，对人体有着延缓衰老的作用。

3.特有的低聚糖：

蜂王浆中有很多种糖类物质，其中有一种叫做“龙胆二糖”的物质，是一种低聚糖，也称益生元，它是肠道中益生菌的食物，可以让肠道中的益生菌更好地维持肠道的健康。

4.很好的抗氧物：

蜂王浆中含有丰富的酶类蛋白，其中一种叫做“超氧化物歧化酶”（简称SOD）的物质是非常好的抗氧化物质，具有保护机体，清除自由基的功效，保护机体减少自由基的伤害，起到抗辐射、延缓衰老的作用。

5.丰富的多酚类：

研究发现，蜂王浆中含有非常丰富的多酚类物质，主要黄酮及类黄酮物质，这些物质对于人体抗衰老、抗炎症、抗氧化、预防心脑血管疾病等，有很大的帮助。

6.其他：

蜂王浆中含有的一些维生素、矿物质、乙酰胆碱结合10-羟基-2-癸烯酸，对于血压、血脂的调控有着重要意义。在某些保健品、药品、化妆品中蜂王浆也有着重要的应用价值。

蜂王浆怎么吃

提起蜂王浆，朋友们一定都非常的熟悉，它在人们的生活中很常见，不仅味道鲜美，营养价值也是最吸引朋友的地方。它的最大优点就是绿色、健康、天然，所以很多亲朋好友之间也会用蜂王浆互赠礼物。那么买来蜂王浆后，人们应该怎样食用呢？如果食用方法不正确，很有可能会破坏它的营养成分，下面本栏目为大家详细介绍：

据了解，蜂王浆一般在早晨饭前空腹服用或晚上就寝前服用比较好，因为饭前空腹服用可以让蜂王浆中的蛋白质和多肽等大分子成分易被消化、分解和吸收，也便于蜂王浆里其他各种小分子成分更快、更充分地被吸收。

饭后服用会由于腹内有大量食物存在，占用大量的消化液，食物也会阻碍蜂王浆成分与肠壁的接触；另外，蜂王浆与胃中存留食物相混合也会破坏其中的营养成分。由于蜂王浆有怕光怕热的特性，所以最忌讳开水冲服。

每天早晚各一次，空腹服用。如用于保健，每次3～5克（塑料勺1勺），如用于对某种疾病的辅助治疗，每次用塑料勺吃两勺。

其实，专家对于“蜂王浆怎么吃”这个问题，是建议采用舌下含服的方法，这样可以首先通过舌下腺吸收其中一部分，慢慢咽下，使人体充分吸收，或者用温开水送服，这样可以避免大量营养成分遇热损失。

另外，想要服用蜂王浆养生的朋友，专家建议坚持服用，间断服用效果不明显，需要注意的是蜂王浆性属热，上火的人或身体火性大的人要注意适量食用。

蜂王浆的保存方法：因为蜂王浆对温度、阳光、空气等比较敏感，必须要放在避光的低温下保存，最好放在冰箱的冷冻室里保存，所存放王浆的容器最好不要使用金属类或透光的玻璃类容器，服用时不能放在开水里面。

蜂王浆的适用人群

对大家来说，蜂王浆是很熟悉的，无论是营养价值还是性价比，都是朋友们能够承受的，大家都知道蜂王浆具有美容养颜、减肥瘦身、增强抵抗力、预防癌症的功效，所以纷纷效仿食用，但并不是人人都适合食用的。

适宜人群：

1.体质虚弱、多病、衰老的老年人。

2.祛斑祛皱、滋润皮肤的女性。

3.精力不足、容易疲劳的上班一族。

4.体虚的高血压患者。

哪些人不宜喝蜂王浆

1.过敏体质者。即平时吃海鲜易过敏或经常对药物过敏的人。因为蜂王浆中含有激素、酶、异性蛋白。

2.长期患低血压与低血糖者。蜂王浆中含有类似乙酰胆碱的物质，而乙酰胆碱有降压、降血糖的作用。

3.肠道功能紊乱及腹泻者。因蜂王浆可引起肠管强烈收缩，诱发肠功能紊乱，导致腹泻、便秘等症。

4.手术初期及妇女怀孕时。术后病人失血过多，身体严重虚弱，此时服用蜂王浆，易致五官出血。蜂王浆还能刺激子宫收缩，影响胎儿的正常发育。

5.凡肝阳亢盛及湿热阻滞者，或是发高热、大吐血、黄疽性肝病者，均不宜服用蜂王浆。

6.10岁以下儿童不宜饮用。儿童处于发育高峰周期，体内的激素分泌处于复杂的相对平衡状态，而且供应较为充足，蜂王浆内含有极少量的激素，如果饮用，有可能导致儿童微妙平衡的激素分泌失衡，进而影响到儿童的正常发育，可能导致巨人症。但是如果儿童自身发育不全可少量饮用，以促进平衡发育，一旦平衡后即可停止饮用。成人属于激素缺乏状态，同时发育停止，饮用蜂王浆则属于补充不足。

注意事项

蜂王浆贮存需冷藏或冰冻，贮存温度以-5～-7℃为宜。实践证明，在这样的温度条件下，存放一年，其成分变化甚微，在-18℃的条件下可存放数年，不会变质。胶囊和片剂在常温下可保存2年。4℃左右冷藏期为3个月，-5℃左右冷冻保存一年，-18℃以下保存两年以上。没有冷藏、冷冻条件的，可掺入蜂蜜在室温条件下供临时食用和保存。

蜂王浆不能用开水或茶水冲服，因温度过高易破坏其活性物质，茶水中的鞣酸与铁，会降低其疗效。还有一点就是必须长期服用，才能见效。

延伸阅读>>

免疫增强剂篇2

摘 要：目的：探讨小儿复感宁合剂对机体免疫功能的影响。方法：将50只小鼠随机分为5组，A，B组灌蒸馏水，C组予贞芪扶正胶囊，D，E组予小儿复感宁合剂。给药第8 d皮下注射环磷酰胺造模，分别观察小儿复感宁合剂对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、2，4-二硝基氯苯（DNCB）所致迟发性超敏反应、鸡红细胞（CRBC）致敏小鼠溶血素抗体生成的影响。结果：小儿复感宁合剂能增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能；增强DNCB所致迟发性超敏反应；提高小鼠血清溶血素抗体水平。结论：小儿复感宁合剂能增强环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠非特异性免疫功能和特异性免疫功能。

关键词：小儿复感宁合剂；免疫功能；实验研究

小儿复感宁合剂由黄芪、太子参、红枣、女贞子、玉竹等药组成，具有补肺健脾、益气固本功效。临床用于治疗小儿反复呼吸道感染（体虚感冒）有显著疗效。为了探讨该药的治疗机制，我们从非特异性免疫功能和特异性免疫功能方面进行了实验研究。

1 实验材料

1.1 药品与试剂

小儿复感宁合剂（含原生药0.76 g/mL），甘肃省中医医院提供，临用前80 ℃水浴浓缩，配成体积分数为684 %和342 %备用；贞芪扶正胶囊，国药准字Z62020414，甘肃扶正药业科技股份有限公司生产，批号：040625；环磷酰胺，苏卫药准字（1996）第403501号，江苏恒瑞医药股份有限公司生产，批号：010323；Alsever’s溶液、鸡红细胞（CRBC）悬液、姬姆萨染液按文献[1]方法配制；氯化钠，天津市塘沽化学试剂厂；葡萄糖，上海化学试剂公司；柠檬酸钠，天津市化学试剂一厂;柠檬酸，天津市化学试剂一厂；2，4-二硝基氯苯（DNCB），北京化工厂；丙酮，天津化学试剂有限公司;甲醇，西安化学试剂厂。豚鼠血清(-20℃保存，临用时生理盐水1∶10稀释)。

1.2 实验仪器

VIS7220型分光光度计(北京第二光学仪器厂)、BS110S型sartorius电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）、隔水式恒温培养箱、水浴锅、冰箱、96孔微量血凝板、olympus显微镜、打孔器。

1.3 实验动物

昆明小鼠，雌雄兼用，质量18～22 g，由兰州大学医学院实验动物室提供，合格证号：医动字第14-005号。

2 实验方法

2.1 对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响[1-2]

小鼠50只，按体重性别随机分为A，B，C，D，E 5组，每组10只。A、B组灌蒸馏水0.02 mL/g，C组灌贞芪扶正胶囊混悬液8.33 g/kg（相当临床用量20倍），D组灌小儿复感宁合剂136.8 g/kg（相当临床用量20倍），E组灌小儿复感宁合剂68.4 g/kg（相当临床用量10倍）。各组每天给药1次，连续给药10 d。给药第8 d起除A组外，其他各组均皮下注射环磷酰胺40 mg/(kg・d)[1]，共3次。末次给药后第2 d，各组小鼠腹腔注射5 ％CRBC悬液0.4 mL／只。8 h后将小鼠断颈处死，仰位固定于鼠板上，腹部消毒，剪开皮肤，腹腔注射生理盐水2.5 mL，轻揉小鼠腹部后，抽取腹腔冲洗液滴片，将载玻片放在垫有湿纱布的搪瓷盘中，置于37 ℃孵育箱中温育30 min，取出玻片，放入生理盐水中漂洗，以除去未贴片的细胞，晾干后以丙酮甲醇液（1∶1）固定5 min，用姬姆萨染液染色3 min，蒸馏水漂洗，晾干后油镜观察，每片计数200个巨噬细胞，按以下公式计算吞噬百分率与吞噬指数：

吞噬百分率＝吞噬CRBC的巨噬细胞数[]200个巨噬细胞×100%

吞噬指数＝被吞噬的CRBC总数[]200个巨噬细胞

2.2 对DNCB所致迟发性超敏反应的影响[1，3]

小鼠50只，分组及给药剂量同前。各组每天给药1次，连续给药12 d。各组动物首次给药后即于用硫化钡脱毛的小鼠颈部皮肤上涂抹50 ％DNCB丙酮溶液2 μL／只致敏。给药第8 d起除A组外，其他各组均皮下注射环磷酰胺40 mg/(kg・d)，共3次。第12 d给药后，在各组小鼠右耳两侧均匀涂抹2.5 %DNCB丙酮溶液20 μL／只进行攻击。24 h后，处死各组小鼠，用打孔器（直径7 mm）在左右耳相同部位打下耳片，以左右耳片重量差（肿胀度）表示迟发型过敏反应强度，并进行组间t检验。

2.3 对CRBC致敏小鼠溶血素抗体生成的影响[1-2]

小鼠50只，分组及给药剂量同前。连续给药10 d。给药第4 d，各组小鼠腹腔注射5 ％CRBC悬液0.2 mL／只进行免疫。给药第8 d起除A组外，其他各组均皮下注射环磷酰胺40 mg/(kg・d)，共3次。末次给药后第2 d，各鼠股动脉取血于离心管中，室温下放置1 h后2000 r/min离心。取血清用生理盐水稀释100倍，取稀释血清1 mL，与5 ％CRBC悬液0.5 mL、10 ％补体(豚鼠血清)0.5 mL混合，在37 ℃恒温箱中保温30 min后，0 ℃冰箱终止反应。离心，取上清液于分光光度计540 nm处比色，另用生理盐水代替血清做空白对照，取其上清液作为比色时调零的基准。以光密度（OD）值作为判定血清溶血素的指标，并进行组间t检验。

3 实验结果

3.1 对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

实验结果表明，小儿复感宁合剂对环磷酰胺引起的免疫功能低下小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能有明显促进作用。D组和E组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率及吞噬指数明显上升，与B组比较，有显著性差异(P

3.2 对DNCB所致小鼠迟发性超敏反应的影响

实验结果表明，小儿复感宁合剂能促进DNCB所致小鼠迟发型超敏反应，与B组比较，差异非常显著(P

3.3 对CRBC致敏小鼠血清溶血素抗体生成的影响

实验结果表明，小儿复感宁合剂对环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠血清溶血素抗体生成有明显促进作用。D，E组与B组比较差异显著（P

4 讨论

《内经》曰：“正气存内，邪不可干，邪之所凑，其气必虚。”中医认为反复呼吸道感染多为肺卫不足，不能抵御外邪入侵所至。现代医学也认为反复呼吸道感染与机体的免疫功能低下有密切关系，也可引起继发性免疫功能下降。小儿复感宁合剂中君药黄芪，能补气升阳，益卫固表，是治疗表虚证的要药，与太子参、红枣同用，能增强补肺健脾、益气固本功效。再配伍玉竹、女贞子清虚热，滋阴润燥，兼治燥热咳嗽、口干舌燥之证。本研究结果表明，小儿复感宁合剂能够提高机体非特异性免疫功能和特异性免疫功能，为其临床治疗小儿因体虚所致的反复呼吸道感染提供了药理学基础。

参考文献

[1]陈奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社，1993:315-317，747，750.

免疫增强剂篇3

目的: 研究内源性危险信号分子低分子量透明质酸作为天然佐剂对hav抗原诱导小鼠体液免疫应答的影响。方法: 将icr小鼠分成9组, 分别设生理盐水对照组、 hav抗原组、 hav抗原+铝佐剂组、 hav抗原+低分子量透明质酸50 μg组、 hav抗原+低分子量透明质酸100 μg、 hav抗原+低分子量透明质酸200 μg、 hav抗原+低分子量透明质酸300 μg、 hav抗原+低分子量透明质酸500 μg、 hav抗原+低分子量透明质酸1 mg组, 皮下免疫小鼠。分别在4、 8、 12 、 16周用elisa法检测小鼠血清抗hav igg水平。结果: （1）空白对照组在4、 8、 12 和16周未见抗hav ig生; 各实验组抗hav igg水平在8周时达到最高; 12周和16周时各免疫组的抗hav igg水平逐渐下降, 尤以铝佐剂组下降明显; （2）与hav抗原组相比, 低分子量透明质酸各免疫组小鼠血清抗hav igg水平明显升高（p<0.05）; 与铝佐剂组相比, 低分子量透明质酸免疫组明显增强特异性抗hav igg水平（p<0.05或p>0.05）; （3）低分子量透明质酸安全无毒, 无过敏反应。结论: 低分子量透明质酸能够明显增强灭活hav抗原的体液免疫应答, 具有强的免疫佐剂作用。其免疫佐剂效应优于铝佐剂。

【关键词】 透明质酸 危险信号 佐剂

免疫佐剂对辅助抗原诱导机体产生持久高水平的免疫应答十分重要[1], 透明质酸（hyalouronan acid, ha）是从动物组织提取的一种黏多糖, 由（1?β?4）d?葡糖醛酸和（1? β?3）n?乙酰基?d?氨基葡糖双糖单位重复连接组成。透明质酸是细胞外基质的重要成分而广泛分布于细胞外基质, 它是构成皮肤、 玻璃体、 关节滑液和软骨组织的重要成分, 具有独特的理化性质和生物学功能。近年研究表明, 低分子量透明质酸是免疫系统的一种重要内源性危险信号, 与tlr?2作用后, 以依赖于myd88、 il?1r相关激酶、 tnfr相关因子?6、 蛋白激酶cζ、 nf?κb的方式进行信号传导, 激活机体的天然免疫应答[2]。因此我们推测低分子量透明质酸可能具有免疫佐剂的特性。本研究中以低分子量透明质酸作为疫苗佐剂, 与hav抗原混合后皮下免疫接种小鼠, 观察内源性危险信号分子低分子量透明质酸对hav抗原诱导小鼠体液免疫应答的影响, 以探讨低分子量透明质酸作为疫苗佐剂的可行性。

1 材料和方法

1.1 材料 icr健康小鼠(spf级, 雌性, 6～8周龄, 质量18～20 g), 由中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所灵长类实验动物中心提供, 并按实验动物中心的方法饲养。酶标仪（bio?rad microplate reader model 550）购自美国bio?rad公司。抗hav igg elisa检测试剂盒购自kpl公司, 酶标板购自美国ebioscienc公司。灭活hav抗原和al(oh)3佐剂均由本室保存。低分子量透明质酸（相对分子量（mr）为10000以下）购自江苏镇江东元生物科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 低分子量透明质酸的制备 用电子天平称取适量低分子量透明质酸, 用蒸馏水溶解配制成浓度为5 μg/l。

1.2.2 免疫动物 将icr雌性小鼠随机分成9组, 分别设生理盐水空白对照组、 hav抗原200 μg免疫组（hav）、 hav抗原200 μg+300 μg铝佐剂免疫组（haval）、 hav抗原200 μg+50 μg透明质酸免疫组（havha1）、 hav抗原200 μg +100 μg透明质酸免疫组（havha2）、 hav抗原200 μg +200μg透明质酸免疫组（havha3）、 hav抗原200μg +300μg透明质酸免疫组（havha4）、 hav抗原200 μg +500 μg透明质酸免疫组（havha5）和hav抗原200 μg +1 mg透明质酸免疫组（havha6）, 每组6只。免疫途径为皮下免疫, 共免疫1次。

1.2.3 血清抗hav igg水平检测 分别于免疫后4、 8、 12和16周对小鼠尾静脉采血, 血样37℃放置1 h后, 4℃过夜, 分离血清, 用elisa试剂盒检测抗hav的特异性igg水平, 具体操作方法按照试剂盒说明书。

1.2.4 低分子量透明质酸安全性检测 （1）低分子量透明质酸的异常毒性试验: 实验组选用icr小鼠10只, 雌雄各1半, 每只小鼠皮下注射5 mg低分子量透明质酸, 同时设立生理盐水对照组, 连续观察7 d。（2）低分子量透明质酸的刺激性试验: 取icr小鼠2只, 分别在一侧后肢股四头肌注射低分子量透明质酸（5 μg/l） 1 ml, 另一侧注射等量生理盐水。另取icr小鼠2只, 分别在一侧后肢脚掌注射低分子量透明质酸（5 μg/l） 1 ml, 另一只注射等量生理盐水。48 h后处死, 解剖观察局部组织变化。（3）低分子量透明质酸的过敏试验: 取icr小鼠10只, 雌雄各1半, 皮下注射50 μg低分子量透明质酸, 2周后再尾静脉注射50 μg低分子量透明质酸, 立即观察有无过敏反应。

1.2.5 统计学分析 采用spss11.5统计软件进行单因素方差分析, 并进行levene方差齐性检验, 如方差齐, 则进行单因素方差分析; 而方差不齐则采用kruskal?wallis h test, p<0.05具有统计学意义。

2 结果

2.1 低分子量透明质酸安全性 （1）低分子量透明质酸的异常毒性试验: 试验期内所有动物均未出现松毛、 缩团、 发抖等异常反应; 进食、 饮水、 粪便和精神等均正常。实验结束后所有动物均健在且质量增加, 说明低分子量透明质酸安全无毒。（2）低分子量透明质酸的刺激性试验: 在小鼠股四头肌注射低分子量透明质酸48 h后解剖观察局部组织无充血、 水肿及硬结等异常变化; 小鼠后掌注射48 h后解剖观察局部也无异常变化。表明低分子量透明质酸剂量为5 mg时安全无毒性。（3）低分子量透明质酸的过敏反应: 小鼠在过敏试验中未出现蜷缩、 竖毛、 流泪、 喷嚏、 搔鼻、 抽搐、 痉挛、 呼吸困难、 水肿及休克等过敏反应。

2.2 不同剂量低分子量透明质酸免疫增强效应 初免后4、 8、 12、 16周检测抗hav igg水平, 结果显示生理盐水空白对照组检测不到抗hav igg, 各实验组小鼠在4周内均产生抗hav igg; 随着时间推移呈上升趋势, 到第8周达到抗体滴度的峰值, 此后逐渐下降; 但是不同剂量透明质酸免疫组的抗体水平仍然明显高于hav单独抗原免疫组以及铝佐剂组。不同剂量低分子量透明质酸免疫组在同一时间的抗体水平不同, havha4、 havha5和havha6组在8周时产生的抗hav igg的水平较高, 分别为1∶(359.19±2.25)、 1∶(320±3.46)、 和1∶(285.09±3.10); 且havha5和havha6组的抗体水平能够长时间维持在较高水平, 至16周时两组的抗hav igg水平分别为1∶(160±1.55)和1∶(113.13±2.25), 而其他实验组抗hav igg水平均已明显下降。提示低分子量透明质酸的免疫增强效应在一定范围内可能与免疫剂量成量效依赖性。

各低分子量透明质酸免疫组的免疫效应与hav抗原单独免疫组的免疫效应相比较, 结果显示, 4周、 8周、 12周和16周时结果显示不同剂量低分子量透明质酸免疫组的抗hav igg水平均明显高于hav抗原单独免疫组, 在4周时havh6免疫组的抗hav igg水平最高, 为1∶(201.59±3.10), 约为hav抗原单独免疫组的7倍, 二者相比有统计学意义（p<0.05）。8周时havha1组、 havha4组、 havha5组、 havha6组与hav抗原单独免疫组相比有统计学意义（p<0.05, 图1）。至12周和16周时, 所有剂量的低分子量透明质酸免疫组的抗hav igg水平与hav抗原单独免疫组相比有统计学意义（p<0.05, 图1）。这些结果表明, 低分子量透明质酸能够增强hav抗原的特异性体液免疫应答, 具有免疫佐剂效应。

各低分子量透明质酸免疫组的免疫效应与铝佐剂组的免疫效应相比较, 结果显示, 除havh3免疫组的抗hav igg水平在4周时低于铝佐剂免疫组以外, 其他各低分子量透明质酸免疫组的抗hav igg水平在4、 8、 12和16周时均要明显高于铝佐剂组。虽然在4周和8周时各低分子量透明质酸免疫组的抗体水平明显高于铝佐剂免疫组, 但是无统计学意义。在12周时结果显示, havha1组、 havha4组、 havha5组和havha6组与铝佐剂组的抗hav igg水平相比, 具有统计学意义（p<0.05, 图1）; 而havha2免疫组、 havha3免疫组的抗hav igg水平与铝佐剂组相比无统计学意义。至16周时, havha2组、 havha3组和havha5组与铝佐剂组的抗hav igg水平相比, 具有统计学意义（p<0.05）; 而其余低分子量透明质酸免疫组的抗hav igg水平与铝佐剂组相比无统计学意义。这表明低分子量透明质酸不仅具有免疫佐剂作用, 增强特异性的抗hav igg水平, 而且其佐剂效应在一定剂量范围内和一定时间内优于铝佐剂。

图1 不同时间小鼠血清抗hav igg水平（略）

ap<0.05与hav组; cp<0.05与haval组.

3 讨论

目前铝佐剂是惟一批准应用于人的疫苗佐剂, 但是铝佐剂存在诱导体液免疫应答, 而细胞免疫很弱, 与ige型过敏性疾病有关等弊端等[3]。理想疫苗佐剂应该是既能增强体液免疫应答, 又能诱导细胞免疫应答, 且无毒副作用[1]。因此, 研究开发新型疫苗佐剂, 以替代铝佐剂成为疫苗佐剂的研究热点。研究发现, 细胞损伤释放的内源性危险信号分子具有刺激树突状细胞成熟, 增加共刺激分子如cd86和cd83等的表达, 促进细胞因子的分泌; 介导t细胞免疫应答的作用[4, 5]。提示内源性危险信号分子可能作为有效的内源性免疫佐剂, 增强t淋巴细胞对外来抗原的免疫应答。

为了探讨内源性危险信号分子低分子量透明质酸作为疫苗佐剂的可行性, 本研究中采用灭活hav抗原和低分子量透明质酸进行不同剂量配比, 通过免疫小鼠观察了抗hav igg水平的变化, 并对低分子量透明质酸作为佐剂与铝佐剂的效应比较进行了初步探讨。研究证实, 低分子量透明质酸联合灭活hav抗原进行免疫, 有效地诱导了抗hav igg的产生。与单独灭活hav抗原组相比, 不同剂量低分子量透明质酸免疫组其产生的特异性抗体水平均明显高于hav抗原单独免疫组, 其差异性有统计学意义（p<0.05）, 提示低分子量透明质酸具有免疫佐剂效应; 与铝佐剂组相比, 不同剂量的低分子量透明质酸免疫组其诱导产生的免疫增强效应在不同时期显示优于铝佐剂或与铝佐剂相当; 且本研究结果还提示在一定范围内随着低分子量透明质酸的剂量的增加, 抗hav igg的水平逐渐增高, 即其抗hav igg水平与低分子量透明质酸在一定范围内可能呈量效依赖性。低分子量透明质酸是细胞外基质成分, 属于内源性危险信号分子, 具有无毒安全性高、 结构明确、 易于生产和价格便宜等特点, 符合理想疫苗佐剂的特点。本实验结果也证实了低分子量透明质酸安全无毒。

综上所述, 本实验以低分子量透明质酸作为新型疫苗佐剂,能够有效地增强灭活hav抗原的体液免疫应答, 而且不同剂量低分子量透明质酸免疫增强效应显示相当于或优于铝佐剂, 且低分子量透明质酸的免疫增强作用持续时间要长于铝佐剂。因此, 通过本研究提示, 低分子量透明质酸可以作为一种潜在的新型人用疫苗佐剂。同时, 随着许多重大疾病如hbv、 hiv、 肿瘤等严重危害着人类的健康, 开发新型治疗性疫苗迫在眉睫, 而寻找一种佐剂能够协同疫苗抗原诱导产生ctl免疫效应, 达到治疗疾病的作用是一种非常有潜力的策略。因此, 我们下一步的工作将进一步研究低分子量透明质酸是否能够诱导强的ctl免疫反应。

【参考文献】

[1] 周 伊, 齐 旭, 肖菊香, 等. 新型佐剂swzy对弱免疫原性小鼠黑色素瘤瘤苗的免疫增强作用[j]. 细胞与分子免疫学杂志, 2006, 22(4): 526-529.

[2] scheibner ka, lutz ma, boodoo s, et al. hyaluronan fragments act as an endogenous danger signal by engaging tlr2[j]. j immunol, 2006, 177(2): 1272-1281.

[3] 王 健, 冷 静, 王启辉. lps辅佐hbsag诱导机体产生特异性抗体的机制[j]. 细胞与分子免疫学杂志, 2007, 23(6): 559-561.

[4] shi y, evans je, rock kl. molecular identification of a danger signal that alerts the immune system to dying cell[j]. nature, 2003, 425(6957): 516-521.

免疫增强剂篇4

目的 研究人工合成的cpg odn对乙肝表面抗原的免疫增强效应，评价cpg odn的佐剂效应。方法 将不同剂量特定的cpg odn与乙肝表面抗原联合免疫小鼠，用elisa检测小鼠乙肝表面抗体的滴度。结果 cpg odn联合乙肝表面抗原免疫小鼠，在短期检测中，高剂量组能较快的达到检测阈，各剂量组间抗体滴度检测值差异有显著性(p<0.05)，在长期检测中，各剂量组间抗体滴度检测值差异有显著性(p<0.05)，检测值随cpg剂量的增高而增大。结论 cpg odn增强乙肝表面抗原的免疫反应短期和长期都具有剂量效应。

【关键词】  cpg odn 乙肝表面抗原 免疫佐剂 体液免疫

study of the immunological enhancement of hbv vaccine with cpg odn

dai fan,dong bing,guo xiaolei,shi bizhu,fang lijuan,mo jialin,tian sujuan, meng minjie

(school of life sciences and biopharmaceutics,guangdong pharmaceutical college,guangzhou,guangdong 510006,china)abstract:objective to investigate the effects of immunological enhancement of hbsag with synthetic cpg oligodeoxynucleotides,evaluate the adjuvant effect of cpg odn. methods mice were vaccinated with cpg oligodeoxynucledtides and hbsag at different doses,and then titers of hbsab in the blood serums of mice were detected with elisa. results cpg odn and hbsag immunize the balb/c mice,the highdose group could be detected quickly in shot term,the levels of antibodies in groups which use different doses of cpg odn and hbsag were different in statics(p<0.05),in long term the levels of antibodies in groups which use different doses of cpg odn and hbsag were different in statics(p<0.05),the levels of antibodies were corresponded with the levels of cpg odn (p<0.05).conclusion the immunological effect of hbsag was enhanced with cpg odn as adjuvant in short and long terms.

key words:cpg odn; hbsag; immunoadjuvant; humoral immunity

cpg基序是一种具有非特异性免疫刺激能力的dna序列，为非甲基化的胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸重复序列。cpg odn (unmethylated cpg motifbased oligodeoxynucleotide)是人工合成的含未甲基化cpg基序的寡核苷酸序列。cpg odn可刺激人类和多种动物产生自然免疫和获得性免疫，主要通过tlr9信号系统活化免疫系统，最终促使多种免疫细胞的成熟分化和增殖，包括b淋巴细胞、t淋巴细胞、nk细胞、单核细胞、巨噬细胞和dc细胞。cpg odn能快速活化t、b细胞，诱导th1型免疫反应并能促进抗原递呈细胞的增生和成熟[1]。现阶段我国对乙型肝炎的预防主要是通过注射乙型肝炎疫苗，但接种免疫过程中和接种免疫后会出现免疫较弱和不免疫现象[2,3]。所以，选择一种安全有效的免疫佐剂是增强免疫效果的有效途径。本文通过测定不同时间段的小鼠注射cpg odn和乙肝表面抗原后的抗体滴度，评价cpg odn作为免疫佐剂增强乙肝疫苗的免疫效果。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物 bal b/c小鼠，雄性，6周龄，体质量18～22 g，spf级，购自中山大学实验动物中心，许可证号：scxk(粤)20040011。

1.1.2 试剂 血源性乙肝表面抗原购自上海前尘生物，cpg odn 由本实验室保存。

1.2 动物分组及免疫方案

1.2.1 动物分组 50只bal b/c小鼠根据随机分配表，随机平均分成5组：第1组为hbsag和高剂量cpgodn联合免疫组，第2组为hbsag和中剂量cpgodn联合免疫组，第3组hbsag和低剂量cpgodn联合免疫组，第4组为hbsag单用组，第5组为生理盐水对照组。各组饲养条件相同。

1.2.2 动物免疫 分别于第0、2、4周免疫bal b/c小鼠，每次免疫剂量相同。第1组：尾静脉注射含2 μg hbsag 和100 μg cpgodn生理盐水溶液，100 μl/只;第2组：尾静脉注射含2 μg hbsag 和1 μg cpgodn生理盐水溶液，100 μl/只;第3组：尾静脉注射含2 μg hbsag 和10 ng cpgodn生理盐水溶液，100 μl/只;第4组：尾静脉注射含2 μg hbsag生理盐水溶液，100 μl/只;第5组：100 μl生理盐水/只。

1.3 乙肝表面抗原检测

1.3.1 血清采集 断尾后玻璃毛细管采血，室温自然凝固，常温离心后取上清，-20 ℃保存。

1.3.2 抗原检测 96孔板用碳酸氢钠缓冲液(15 mmol/lna2co3，355 mmol/lnahco3，ph 9.6)适当稀释的乙肝表面抗原包被，4 ℃过夜孵育。用含tween20的pbs(0.1 mol/lpbs,0.1% tween20)洗涤3次，每次间隔3 min，每孔加入100 μl经pbs(0.1 mol/l pbs,1% bsa)适当稀释的待测血清， 37 ℃孵育90 min。 pbs洗涤5次， 每孔加入100 μl

1 000倍稀释的hrp标记的乙肝表面抗原，37℃孵育40 min。pbs洗涤5次，每孔加入100 μl tmb底物(含0.1 mg/ml 3’3’5’5’四甲基联苯胺的磷酸盐柠檬酸缓冲液，ph 5.4，用前加5 ml 30% h2o2 10 ml)，37 ℃孵育1 h。每孔加入100 μl h2so2(0.2 mol/l)终止显色反应。biorad 680 测定a450/630读数。

1.4 统计学分析

应用spss统计软件，采用重复测量方差分析对数据进行分析，p<0.05为差异有显著性。

2 结 果

2.1 小鼠免疫后7～28 d外周血中乙肝表面抗体的平均滴度变化

乙肝表面抗原单用组的抗体在7～17 d时间段内检测不到，乙肝表面抗原和低剂量cpg odn联合免疫的抗体在第14天检测到，乙肝表面抗原和中剂量cpg odn联合免疫组的抗体在第10天检测到，乙肝表面抗原和高剂量cpg odn联合免疫的抗体出现时间较早，在第7天即可检测到。在第14～28天的各个时间点上，乙肝表面抗原和高剂量cpg odn联合免疫组的抗体滴度均显著高于乙肝表面抗原和中剂量cpg odn联合免疫组、乙肝表面抗原和低剂量cpg odn联合免疫组(p<0.05);在第14、17、21天时间点上，乙肝表面抗原和中剂量cpg odn联合免疫组、乙肝表面抗原和低剂量cpg odn联合免疫组之间差异无显著性(p<0.05)，在第24、28天时间点上，两组差异有显著性 (p<0.05);在第21、24、28天时间点上，乙肝表面抗原和中剂量cpg odn联合免疫组、乙肝表面抗原和低剂量cpg odn联合免疫组的抗体滴度均显著高于乙肝表面抗原单用组(p<0.05)。见图1和表1。表1 免疫7～28 d hbsab滴度对数转换数据

2.2 小鼠免疫后3～8周外周血中乙肝表面抗体的平均滴度变化

在第3～8周时间内，第4周乙肝表面抗原和高剂量cpg odn联合免疫组、疫苗和中剂量cpg odn联合免疫组之间的抗体滴度差异有显著性(p<0.05);在其他时间点上，乙肝表面抗原和高剂量cpg odn联合免疫组的抗体滴度与其他组别差异均有非常显著性(p<0.01)，并持续快速升高。乙肝表面抗原和中剂量cpg odn联合免疫组、乙肝表面抗原和低剂量cpg odn联合免疫组的抗体滴度从第3周之后均逐渐升高，在第3、4、5、6周时间点上，只有第4周两组之间差异有显著性 (p<0.05)，其他时间点差异均无显著性 (p<0.05);到第7、8周时两组差异有显著性(p<0.05)。对于乙肝表面抗原单用组，虽然抗体滴度有逐渐升高的趋势，但却一直处于比较低的水平，除了第4周与乙肝表面抗原和低剂量cpg odn联合免疫组之间的抗体滴度差异无显著性外(p>0.05)，其他时间点上与其他各组差异均有显著性(p<0.05)。见图2和表2。表2 免疫3～8周hbsab滴度对数转换数据

3 讨 论

对于cpg odn的免疫刺激作用人们已经进行了大量的研究。在应用方面，人们较为关注其安全、有效的佐剂特性。因为cpg odn能同时增强抗原特异性体液免疫应答和细胞免疫应答，尤其对细胞免疫应答具有更突出的增强作用[4]。本实验发现,应用cpg odn作为乙肝表面抗原的佐剂，能较早较快地刺激机体产生乙肝表面抗体，cpg odn作为佐剂使用增强乙肝表面抗原的免疫效应，cpg odn的使用量在实验的剂量范围内具有一定的剂量效应关系，高剂量的cpg odn的使用对增强乙肝表面抗原的免疫效应效果更早更好。由实验数据观察来看，单纯的乙肝表面抗原抗原性是较弱的，搭配佐剂使用，才能有效地提高乙肝表面抗原的免疫原性[5]，提高乙肝表面抗原的免疫效果。实验剂量范围内，增强乙肝疫苗抗原抗体反应是显著的，并且动物也无逆毛、腹泻、发热或其他中毒现象等任何异常，表明cpg odn的使用是安全可靠的。

cpg odn的作用是通过有toll样受体家族的细胞，主要是tlr9受体识别cpg的基序，从而通过若干信号传递途径活化转录因子，启动相关细胞因子的基因转录[6]。本实验所用的cpg odn是将60 bp磷酸二脂修饰的odn与puc18载体体外连接构建的重组质粒puc18odns，更真实地模拟了天然的包含cpg基序的非甲基化的odn。在免疫过程中，cpg odn以模拟细菌感染的方式激活了细胞经由tlr9通道的固有免疫[6]，由于cpg odn仅仅是一段dna序列，在激活免疫的同时不具有感染性，小鼠未发生任何炎性反应[7,8]。同时，cpg odn激活了体内的免疫细胞，调动了免疫系统，使乙肝疫苗能够较早较快的产生免疫反应[7,8]。由于cpg odn的免疫刺激作用，小鼠的机体可以较长时间的处于免疫活化状态，免疫细胞免疫活性高，乙肝表面抗体得以长期高水平的经由b细胞分泌[7,8]。在有的实验中，大量的细菌dna产生抗双链dna的自身抗体，加重小鼠的自身免疫性疾病;在本实验中使用cpg odn，乙肝表面抗体产生早，滴度高，持续久，并且安全可靠。在应用cpg odn作为乙肝疫苗佐剂的临床试验中，首次和第2次免疫后抗体水平甚至可以提高13～45倍[9];同时，由于cpg对cd8+t细胞刺激作用，诱导的ctl细胞在细胞免疫作用杀伤肿瘤以及治疗胞内感染也具有很好的应用前景[10]。但是对长期性观察的缺失，还不能够全面反映cpg odn的作用效果，长期效应的机制也未被揭开。

本研究结果表明，本实验室制备的cpg odn作为乙肝表面抗原的佐剂能较早较快地促进乙肝表面抗原的抗原抗体反应，并且安全可靠。在长期效应上，cpg odn作为佐剂对维持乙肝表面抗体的有效滴度具有长期效应。

【参考文献】

 

[1] yamamoto m,sato s,mori k,et al. cutting edge: a novel toll/il1 receptor domaincontaining adapter that preferentially activates the ifnbeta promoter in the tolllike receptor signaling[j].j immunol,2002,169:6668-6672.

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[3] 冯春颜,汪宇婴,赵详胜.乙肝疫苗接种后无弱应答分析[j].热带医学杂志,2005,3: 405-406.

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[8] klinman d m. cpg dna as a vaccine adjuant[j]. expert rev vaccine,2003,2:305-315.

免疫增强剂篇5

新冠疫苗加强针要和前面的是一个品牌吗

最好是同一厂家同一品牌的疫苗。

在疫苗选择方面，目前专家给出的建议是使用原疫苗接种企业生产的疫苗。例如，使用相同的新冠灭活疫苗完成2剂接种人群，原则上使用原灭活疫苗增强免疫力1倍。原则上已完成两剂不同灭活疫苗接种者，优先接种与第二剂灭活疫苗相同的疫苗进行一剂加强免疫；如果第二剂不能提供同一种疫苗，可以用与第一剂灭活疫苗相同的疫苗进行一剂加强免疫；接种腺病毒载体疫苗的人群应当接种原疫苗。

根据新冠疫苗的研发进展和相关部门的研究论证，目前可加强免疫的疫苗包括中药北京公司灭活疫苗、北京科兴公司、武汉中药中间体公司，以及天津康信公司的腺病毒载体疫苗。

新冠疫苗加强注射什么时候打

如果要接种新冠疫苗的加强针，建议间隔半年以上。与常规接种法相同，接种6个月后综合抗体水平会下降1.4-12.4倍，这是人体免疫系统的自然反应。

抗体水平在很短的时间内显着增加。结果还表明，接种新冠疫苗的加强针后，人体产生的抗体数量会大大增加（5-10倍甚至更多），可以对突变株起到很好的预防作用。

从长远来看，如果条件允许，接种加强针确实可以增强抗击新冠病毒的能力，但对于群众来说，还是要做好前期的接种工作，响应国家号召注射新冠疫苗，在体内建立免疫屏障。

谁需要加强注射新冠疫苗

目前研究表明，国药中盛和北京科兴疫苗在接种后6个月内抗体均有不同程度下降，与常规接种相同。专家研究是否进行加强免疫，发现从免疫原性角度可以提高加强免疫对疫苗的保护作用。目前建议高危人群可接种一剂加强针：

1、目前我国疫情防控形势很好，重点是外防输入。海关、边检、航空、隔离点、定点医疗机构等高输入风险人群，可在完成免疫程序后6个月进行强化接种。

2、免疫功能相对较低的60岁以上人群，接种疫苗后的免疫效果不如18-59岁人群，但恰恰是感染后的高危人群，有患重症、危重症的风险死亡率高于其他群体。因此，建议此类人群可在接种后6个月进行加强注射。

3、由于工作、学习和交流的需要，也建议接种6个月后加强免疫。

免疫增强剂篇6

关键词 扶正消炎散 免疫 抗应激

扶正消炎散是由女贞子、黄芪等中药组成的复方制剂，具有扶正祛邪、抗炎消肿等功效。对其药效学进行初步研究，现将实验结果报告如下。

试验材料

动物：昆明种小鼠，雌雄兼用，体重18～22g，由吉林大学基础医学院动物室提供。

试验用药：扶正消炎散，浅棕色粉末，由长春中医药大学提供，临用前以蒸馏水配制成所需浓度。环鳞酰胺注射液，恒瑞医药股份有限公司生产，批号05060821。

试验用仪器：722型光栅分光光度计，高密彩虹分析仪器有限公司产品。岛津电子分析天平，型号LIBROR，AEL-200。

方法及结果

扶正消炎散对二甲苯引起小鼠耳肿胀的影响[1]：取28g±2g雄性小鼠60只，随机分成四组，分别为对照组(蒸馏水)、扶正消炎散高(15g/kg)、中(7.5g/kg)、低(3.75g/kg)三个剂量组。连续灌服给药(水)3天，末次给药后1小时于鼠右耳涂抹二甲苯0.1ml/只，涂后4小时处死小鼠，沿耳廓基线用直经为9mm的锋利打孔器在相同部位打下双耳片，分别称重，计算其差值作为肿胀度，结果见表1。

结果表明：扶正消炎散高、中剂量组对二甲苯所致的小鼠耳肿胀具有明显的抑制作用，作用强度随剂量增大而增强。

扶正消炎散对正常小鼠网状内皮系统(RES)吞噬功能的影响[2]：将48只小鼠随机分成四组，每组12只，雌雄各半，分别为对照组、扶正消炎散高、中、低三个剂量组，其剂量分别为15、7.5、3.25g/kg，连续灌胃给药7天，对照组给予等体积蒸馏水。末次给药后30分钟，尾静脉注射“一得阁”墨汁(0.1ml/10g体重)，并分别于注射后2分钟、15分钟眶静脉采血20μl，置2ml0.1%NaHCO3溶液中摇匀，在722分光光度计上于650nm处比色，计算吞噬指数及吞噬系数。结果表明：扶正消炎散高、中剂量组具有显著增强小鼠网状内皮系统吞噬功能的作用，作用强度随剂量增大而增强。

扶正消炎散对环鳞酰胺所致免疫功能低下小鼠免疫器官重量的影响[3]：将60只小鼠随机分成五组，每组12只，雌雄各半，分别为对照组，模型对照组，扶正消炎散高、中、低三个剂量组。除对照组外，其余四组均腹腔注射环鳞腺胺(50mg/kg)造成免疫低下模型。除模型对照环磷酰胺组外，其余高、中、低三组均同时灌服扶正消炎散，其剂量分别为15、7.5、3.75g/kg，对照组给予等体积蒸馏水。连续给药7天，末次给药后半小时称体重，取脾脏及胸腺，称重，计算脏器指数。

结果表明：扶正消炎散高、中剂量组具有增加环鳞腺胺所致免疫功能低下小鼠免疫器官重量的作用。

扶正消炎散抗疲劳作用[4]：将48只小鼠随机分成4组，每组12只，雌雄各半，分别为对照组、扶正消炎散高、中、低三个剂量组，其剂量分别为15、7.5、3.75g/kg。每日灌胃给药1次，连续7天，对照组给予等体积蒸馏水。末次给药后半小时，将小鼠置于30±2℃、深35cm的恒温水槽中游泳，截至小鼠自然沉降并不向上挣扎的时间为小鼠在水中的游泳时间。结果表明：扶正消炎散高、中剂量能明显延长小鼠在常温条件下的游泳时间。

扶正消炎散对小鼠常压耐缺氧的影响[5]：将48只小鼠随机分成4组，每组12只，雌雄各半，分别为对照组、扶正消炎散高、中、低3个剂量组。其剂量分别为15、7.5、3.75g/kg。每日灌服给药1次，连续7天，对照组给予等体积蒸馏水。末次给药后半小时，将小鼠单放入盛有钠石灰的200ml广口瓶内，涂抹凡士林上盖封口，立刻记时，记录封口至瓶中小鼠因窒息而死亡的时间。结果表明：扶正消炎散高剂量组能明显提高小鼠常压耐缺氧能力。

讨 论

上述试验结果表明，扶正消炎散高、中剂量组可显著增强正常小鼠网状内皮系统(RES)的吞噬功能，说明其具有提高机体防御能力的作用；对由免疫抑制剂环磷酰胺所致的免疫功能低下小鼠，扶正消炎散高、中剂量能使其胸腺及脾脏指数均明显提高，说明其对免疫功能低下小鼠的免疫器官具有恢复作用；同时，扶正消炎散高、中剂量对二甲苯所致的炎症模型具有明显的抑制作用，说明其具有一定的抗炎作用。其表现出的抗疲劳与耐缺氧能力，说明其在抗应激方面也具有一定的作用。总之，我们的初步药理试验表明，扶正消炎散具有一定的扶正祛邪、抗炎消肿、提高机体免疫功能的作用。

参考文献

1 刘永刚，罗佳波，贺丰，等.麻黄汤及拆方抗炎作用的研究.中药材，2005，26(5)：413.

2 陈奇.中药药理研究方法学.第2版.北京：人民卫生出版社，2006：759.

3 叶丽卡，等.龟叶草免疫作用的实验研究.中药材，2003，26(1)：33.

免疫增强剂篇7

1材料与方法

1.1外周血淋巴细胞增殖的测定MTT法。将抗凝血用Hanks’液稀释1倍，小心加在淋巴细胞分离液上层，2000r/min离心20min，吸取中间云雾状白细胞层，用无血清RPMI1640营养液洗2遍，1500r/min离心10min。活细胞计数后，RPMI1640培养液调整细胞浓度为5×106个/mL，加入到96孔细胞培养板中，80μL/孔，每孔再加20μLConA作为刺激原，每个样品重复4孔，同时设细胞调零孔对照，然后置于37℃、5%CO2条件下培养44h，取出每孔加MTT20μL，继续培养4h后，吸去上清液，每孔加DMSO100μL，将细胞板置于微量震荡器上震荡5min使沉淀完全溶解，用酶联免疫仪上在570nm处检测其吸光度(A570值)，作为T淋巴细胞增殖的指标。

1.2血清抗体效价测定β－微量法。在96孔微量血凝板上，先每孔加50μLPBS液，然后每排的第1孔加入50μL待检血清，依次倍比稀释至第11孔，每孔加入50μL4单位新城疫抗原和50μL1%鸡红细胞悬液，震荡混匀后置37℃温箱中感作30min。同时设阳性血清、阴性血清及空白对照孔。红细胞沉淀时观察，以100%抑制凝集的血清最大稀释度为该血清的HI抗体效价。1.5数据分析数据以Means±SD表示，用SPSS软件进行Duncan''''s多重分析。

2结果

2.1淋巴细胞增殖试验在D7和D14，各APS组和专用稀释液组的A570值显著高于对照组，0.5%APS组显著高于0.25%APS组和专用稀释液组(P＜0.05);在D21，各APS组和专用稀释液组的A570值显著高于对照组，0.5%APS组显著高于其他APS组和专用稀释液组(P＜0.05)。见表1。

2.2血清抗体的变化在D7、D14和D21，0.5%APS组的血清特异性抗体显著高于0.25%APS组和专用稀释液组(P＜0.05)，0.5%APS组与1%APS组的血清特异性抗体差异不显著(P＞0.05)。见表2。

2.3血清IL－2的变化在D7和D21，0.5%APS组的血清IL－2含量显著高于0.25%APS组和专用稀释液组(P＜0.05)，0.5%APS组与1%APS组含量差异不显著(P＞•102•AnimalHusbandry＆VeterinaryMedicine2014Vol.46No.60.05);在D14，0.5%APS组的血清IL－2含量显著高于0.25%APS组、1%APS组和专用稀释液组(P＜0.05)。见表3。

3讨论

目前市场上的疫苗稀释液产品较多，但大多数产品的主要成分仅为缓冲剂和染色指示剂，不能很好地保护疫苗中的抗原活性，使畜禽在免疫接种过程中抗原活性损失过快，甚至导致免疫失败。本研究采用黄芪多糖作为新城疫疫苗稀释剂取得了较好的免疫效果。抗感染免疫是动物机体抵抗病原体感染的能力，特异性免疫(疫苗接种)在消除病原体作用中占重要的地位。特异性免疫包括体液免疫和细胞免疫，其中体液免疫的抗感染作用是通过抗体来实现的，抗体在体内可发挥中和作用、对病原微生物生长的抑制作用、抑制病原体黏附细胞的作用、免疫溶解作用、免疫调理作用、抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用。

淋巴细胞增殖及其分泌细胞因子含量是反映细胞免疫的指标之一。T细胞的功能与机体的抗病能力有相关性，能促进白介素和干扰素等细胞因子的生成，辅助B细胞的抗体生成;IL－2主要由TH1型细胞分泌产生，可以辅助CTL细胞表达杀伤功能。本试验结果显示，黄芪多糖疫苗稀释液组在免疫后各时间点的淋巴细胞增殖、IL－2含量均高于专用疫苗稀释液组，表明黄芪多糖有较强增强细胞免疫的作用，这与APS用于猪瘟活疫苗稀释液提高细胞免疫的研究结果是一致。也有研究证明APS对IL－2、IFN－γ和TNF－α的mRNA表达有显著增强作用，APS能促进脾淋巴细胞Th1型细胞因子mRNA表达来整体调节促进细胞免疫。

免疫增强剂篇8

科学养殖是推进社会经济和发展的一大前提，也是农村致富的道路之一。在畜牧兽医这一门专业上，怎样对疫苗的科学使用更是我们授教者的教育重心。

1对猪养殖常用疫苗的种类

基因缺失疫苗、弱毒活疫苗、灭活疫苗 、多价疫苗、联合疫苗等。 基因缺失疫苗是用基因工程技术将强毒株毒力相关基因切除后构建的活疫苗。本疫苗的特点是：安全性好，不易返毒；免疫原性好，产生免疫力坚实；免疫期长，尤其是适于局部接种，诱导产生粘膜免疫力。

弱毒活疫苗是指通过人工致弱或筛选的自然弱毒株，但仍保持良好的抗原性和遗传特性的毒株，用以制备的疫苗，如猪瘟兔化弱毒疫苗及猪蓝耳病弱毒疫苗。弱毒活疫苗的特点是：疫苗能在动物体内繁殖，接种少量的免疫剂量即可产生坚强的免疫力，接种次数少，不需要使用佐剂，免疫产生快，免疫期长。其缺点是：稳定性较差，有的毒力可能发生突变，储存与运输不方便。

灭活疫苗是将病原微生物经理化方法灭活后，仍然保持免疫原性，接种动物后能使其产生自动免疫，这类疫苗称为灭活疫苗。本疫苗的特点是：疫苗性质稳定，使用安全，易于保存与运输，便于制备多价苗或多联苗。其缺点是：疫苗接种后不能在动物体内繁殖，因此使用时接种剂量较大，接种次数较多，免疫期较短，不产生局部免疫力，并需要加入适当的佐剂以增强免疫效果。本疫苗包括组织灭活疫苗和培养物灭活疫苗，加入佐剂后又称氢氧化铝胶灭活疫苗和油佐剂灭活疫苗等。

多价疫苗是指将同一种细菌或病毒的不同血清型混合而制成的疫苗。其特点是：对多血清型的微生物所致疫病的动物可获得完全的保护力，而且适于不同地区使用。

联苗疫苗是指由两种以上的细菌或病毒联合制成的疫苗。其特点是：接种动物后能产生相应疾病的免疫保护，减少接种次数，使用方便，打一针防多病。但当前在猪病的免疫预防上还是使用单苗免疫效果好，多联苗免疫效果不确切，尽可能少用。

除此之外，还有类毒素疫苗、亚单位疫苗、基因工程重组活载体疫苗、核酸疫苗、合成肽疫苗、抗独特型疫苗及转基因植物疫苗等，部份有待于进一步开发，才能用于猪病的防制实践。

2养殖时疫苗的保存特点

蜂胶佐剂灭活疫苗、冷冻真空干燥疫苗、铝胶佐剂疫苗、油佐剂灭活疫苗等。 蜂胶佐剂灭活疫苗是以提纯的蜂胶为佐剂制成的灭活疫苗，蜂胶具有增强免疫的作用，可增加免疫的效果，减轻注苗反应。这类灭活疫苗作用时间比较快，但制苗工艺要求高，需高浓缩抗原配苗。2～8℃保存，不宜冻结，用前充分摇匀。

冷冻真空干燥疫苗大多数的活疫苗都采用冷冻真空干燥的方式冻干保存，可延长疫苗的保存时间，保持疫苗的效价。病毒性冻干疫苗常在-15℃以下保存，一般保存期2年。细菌性冻干疫苗在-15℃保存时，一般保存期2年；2～8℃保存时，保存期9个月。

铝胶佐剂疫苗是以铝胶按一定比例混合而成，大多数细菌性灭活疫苗采用这种方式，疫苗作用时间比油佐剂疫苗快。2～8℃保存，不宜冻结。

油佐剂灭活疫苗为灭活疫苗，以白油为佐剂乳化而成，大多数病毒性灭活疫苗采用这种方式。油佐剂疫苗注入肌肉后，疫苗中的抗原物质缓慢释放，从而延长疫苗的作用时间。这类疫苗2～8℃保存，禁止冻结。

3疫苗的接种方法和稀释液的选择与使用

使用疫苗时要注意免疫接种的方法，如疫苗的接种方法不当，有时会造成严重的后果。当前猪用疫苗无论是活疫苗，还是灭活疫苗，最常用的疫苗接种方法是肌肉或皮下注射法，如猪瘟兔化弱毒疫苗和猪蓝耳病灭活疫苗等皮下或肌肉注射接种。其次是滴鼻免疫接种，如伪狂犬病疫苗和猪传染性萎缩性鼻炎灭活疫苗等可用于滴鼻接种。再就是口服免疫接种，如仔猪副伤寒活疫苗和多杀巴氏杆菌活疫苗等可经口服免疫接种疫苗。有的疫苗也有经穴位注射接种的，如猪传染性胃肠炎和流行性腹泻疫苗采用猪后海穴接种，效果较好。

4在疫苗免疫过程中应该把握的几点

疫苗接种前，要认真阅读瓶签及使用说明书，严格按照规定稀释疫苗和使用疫苗，不得任意变更；仔细检查疫苗的外包装与瓶内容物，变质、发霉及过期的疫苗不能使用。

注射病毒性活疫苗的前后各4d内不准使用抗病毒药物和干扰素等，两种病毒性活疫苗一般不要同时接种，应间隔7～10d，以免产生相互干扰；病毒性活疫苗和灭活疫苗可同时使用，分别肌注，注射活菌疫苗前后7d不要使用抗生素，两种细菌性活疫苗可同时使用，分别肌注；抗生素对细菌性灭活疫苗一般没有影响，可以同时使用，分别肌注；正在潜伏期的猪接种弱毒活疫苗后，可能会激发疫情，甚至引起猪只发病死亡；妊娠母猪尽可能不要接种弱毒活疫苗，特别是病毒性活疫苗，避免经胎盘传播，造成仔猪带毒；发高烧、老弱、病残猪只不要接种疫苗；疫苗稀释后其效价会不断下降，在气温15℃以下4h失效、15～25℃ 2h失效、25℃以上1h内失效。因此，稀释后的疫苗要在规定的时间内用完，不能过夜，否则废弃；抗体水平的高低与疫苗注射剂量有正相关性，但是免疫接种时一定要按规定的免疫剂量注射，不要人为的随意增大剂量，超大剂量的接种会导致免疫麻痹，使免疫细胞不产生免疫应答。同时免疫接种的次数也不宜过多，一定要科学合理，接种次数过多，对猪只的应激越大，有时当抗体水平高时再接种疫苗会发生中和反应，反而导致猪体免疫力下降。

不要随意联合使用疫苗：从当前情况来看，灭活疫苗联合使用出现相互影响的现象比较少，有的还有促进免疫的作用。

注射接种疫苗时，要做到一头猪一个针头，消毒后使用；注射部位先用碘酊消毒，后用酒精棉球擦干再注入疫苗，防止通过注射而发生交叉感染。

接种疫苗后，要认真观察猪群的动态，发现问题及时处理。疫苗免疫接种反应有：一般反应、急性反应、急性反应三种。

免疫增强剂篇9

关键词：非特异性免疫；特异性免疫；健康养殖

中图分类号：S858.28 文献标识码：B 文章编号：1007-273X（2014）07-0045-01

收稿日期：2014-07-21

作者简介：曹灿华（1972-），男，云南曲靖人，畜牧师，主要从事乡镇畜牧兽医工作。

当前，养猪业最大挑战是传染性的疫病，而传染性疫病的核心就是病毒病。以病毒感染为主，同时混合感染多种细菌是当前猪病的主要表现形式，比如非典型猪瘟、流感、圆环病毒病继发大肠杆菌、传染性胸膜肺炎以及副猪嗜血杆菌等都是养殖户不得不面对的现实问题。

如何通过提高机体自身免疫力来增强其抗病力是健康养殖需解决的问题。

1 免疫调节的重要性

动物机体的第一道天然防护屏障是非特异性免疫。如果动物的非特异性免疫被各种不良因素破坏掉，就会出现亚健康体质，最后产生免疫抑制病。一旦免疫抑制，就会导致动物机体的第二道人工防护屏障――特异性免疫，无法起到良好的免疫应答保护。通过提高机体的非特异性免疫力，才能有效的保护机体。

免疫抑制对健康养猪的危害主要体现为抵抗力降低，易感性增强。免疫抑制在临床表现为混合感染多见；隐形感染常见，带毒普遍；注射疫苗后易复发；发病后难于治疗，不易康复；仔猎、母猪淘汰率高。猪病治疗成本大，防控难度大，死淘率增加。免疫抑制猪只的生产和生长性能得不到充分挖掘和发挥，经济效益受到影响。目前，有些产生免疫抑制的因素，如环境中的粪污，重金属污染，霉菌毒素，饲养管理的应激等在生产管理中无法避免。因此，除了尽可能消除造成猪群免疫抑制产生的原因外，适当的应用免疫调节增强剂是有必要的。

猪进行免疫调节和干预可解除猪的免疫抑制，促进仔猪免疫器官的发育，提高猪群的抗体水平和整齐度，降低料肉比，缩短饲养周期，提高出栏率。

其中，在仔猪阶段进行必要的干预和调节是十分重要的。原因是两方面的：一方面，猪的发育呈现一定的年龄特点，仔猪先发育内脏，然后发育骨骼，再就是发育肌肉，接着就是发育脂肪和生殖系统。因此，哺乳仔猪和断奶仔猪是免疫器宫发育的关键时期；另一方面，哺乳仔猪和断奶仔猪是免疫和应激很频繁的时期，极易发生免疫器官发育不全和缺失。

2 免疫调节剂的分类

目前，常用的免疫调节剂包括多肽、植物多糖和非多糖多肽类这三类。

多肽类作为一种小分子蛋白，在机体生长发育、细胞分化、免疫防御等方面起着重要的作用，在机体中扮演着调节免疫、修复肝脏、杀灭病毒等极其重要的角色。临床证明多肽具有良好的调节免疫、抗疲劳作用。

多糖类能明显促进淋巴细胞的分化与增殖，提高机体的抗病能力；多糖具有双向调节功能，能阻断炎症的发生过程，使因免疫功能异常亢进引起的一些疾病得到控制和恢复；多糖还能机械性或化学性地包裹病毒和细菌与机体的结合位点，使机体细胞免受病毒和细菌的攻击，提高机体抵御感染性疾病的能力。因此，服用多糖类产品是提高免疫力的有效方法之一。

同时，研究还证实氨基酸（苏氨酸、色氨酸）、维生素和矿物质是提高机体免疫力不可缺少的物质。

鉴于免疫抑制病多发、频发，建议对养殖过程中采取免疫调节（免疫保健），保持良好的免疫力和抵抗力，增强对疾病的抵抗力，保证其发挥正常的生产潜力。

3 免疫调节剂的用法

免疫调节剂在猪日常保健中的应用如下：

第一，周期性的利用免疫调节剂做免疫系统保健和免 疫力调节。

第二，在猪的不同生长阶段，根据猪免疫器官的发育特征，有针对性的使用免疫调节剂。

第三，在转群、换料、高温等有应激的时候，增强猪体 的抵抗力。

第四，在周围发生疾病的时候，使用免疫增强剂。

免疫增强剂篇10

鸡新城疫，是由鸡新城疫病毒引起的鸡的一种急性、热性、高度接触性传染病。其主要特征是呼吸困难，严重下痢，粘膜和浆膜出血，病程较长的伴有神经症状。目前该病尚无特效治疗药物，防制该病发生的最有效措施，就是严格按免疫程序进行接种。但在实际生产中，对新城疫免疫失败的事例屡见不鲜，现就其免疫失败的原因及对策简述如下。

一、免疫失败的原因

1.鸡母源抗体的因素

新城疫免疫失败，与雏鸡母源抗体的干扰有一定的关系。雏鸡母源抗体是指种鸡接种新城疫疫苗后，所产生的抗体由卵黄传给雏鸡，使雏鸡出生就带有的抗体为母源抗体。母源抗体可保护雏鸡不受强毒攻击，也可抑制疫苗对鸡产生免疫力，母源抗体越高，其保护力和抑制力愈强。

2.免疫接种途径的因素

疫苗的接种途径与免疫效果高低有直接关系。新城疫的免疫接种方法，常用点眼法、滴鼻法、注射法、饮水法、气雾法等。新城疫病毒是一个亲呼吸道的病毒，在自然条件下，主要是从呼吸道进入鸡的体内。一些养殖户为减少劳动强度和抓鸡次数，除首免滴鼻、点眼外，二免就开始饮水或注射，使鸡的呼吸道黏膜免疫能力薄弱。当新城疫病毒从呼吸道进入鸡体后，由于养殖户高频率地使用饮水免疫，鸡的血液中抗体很高，病毒不会侵入到神经系统，而侵入呼吸系统出现呼吸症状。所以养殖户不能怕麻烦，多采用滴鼻、点眼免疫途径。

3.某些疫苗的因素

雏鸡在育雏阶段，使用各种疫苗频繁，其先后顺序和间隔时间都会对免疫力产生一定的影响，如传支、新城疫，如果是单苗，它们之间间隔必须在7天以上，以免免疫效果会受到影响。联苗不受影响。

4.机体免疫功能下降的因素

雏鸡的免疫力主要由法氏囊产生，凡是损害法氏囊的疾病都会造成免疫抑制。目前常用中等毒力偏强的传染性法氏囊病病毒疫苗，也能引起免疫抑制，某些药物氯霉素、磺胺类药物、皮质激素，以及饲喂发霉变质的饲料，也能导致机体免疫力下降，免疫功能减退，对疾病易感性增加。

5.疫苗种类的因素

新城疫免疫通常用的有灭活苗及活苗二种，灭活苗又分单纯灭活苗和油佐剂灭活苗，但应用较广的是油佐剂灭活苗。此苗对鸡应用安全，免疫效果好。但是，接种油佐剂灭活苗，必须先接种弱毒活苗，再接种油佐剂灭活苗，活苗分强毒和弱毒两种。即Ⅰ系属中发型毒株的强毒苗，一般用于2个月以上的鸡。Ⅱ系、Ⅳ系和克隆-30等疫苗属缓发型毒株的弱毒苗，可用于雏鸡。在多年的实际笔者发现，应用中雏鸡免疫力较好的是克隆-30，其次是Ⅳ系、Ⅱ系。同时仅用冻干苗免疫效果差，并且抗体水平不整齐，冻干疫苗配合油苗才能取得较好的免疫效果。

6.饲养管理的因素

鸡营养不良，卫生条件差及高温、寒冷、噪音、缺水等各种应激因素，都将影响鸡体免疫应答能力，降低其新城疫的免疫效果。

二、对策建议

1.制定合理的免疫程序

严格执行科学的免疫程序，是防制本病发生的有效措施。制定一个合理的免疫程序，必须从多方面因素考虑，要根据本地区或本场疫病流行的情况及规律、病史、鸡的品种、日龄、母源抗体水平，结合本场饲养规模、饲养方式等制定出合理科学的免疫程序。

2.选择最佳的接种时机

接种时一定要在鸡群健康状态时进行，在免疫前对鸡群健康状况进行详细调查。若有严重传染病流行，则应停止接种。若是个别鸡，应该剔除、隔离后，然后接种健康鸡。对可疑有疫病流行的地区，在严格消毒条件下，对未发病的鸡只作紧急预防接种。免疫接种的时间应根据传染病的流行状况和鸡群的抗体水平确定，一般鸡群的清晨接种效果好。笔者在实践中发现，1日龄注射油苗免疫效果差，可于9～10日龄颈部皮下注射鸡新城疫油乳苗，但不能再迟。注射剂量不应低于0.4ml/只，因30日龄内雏鸡免疫系统不完善，注射足够剂量的油苗才能更好地刺激机体产生良好地免疫应答。

3.采取正确的接种方法

疫苗接种操作方法正确与否直接关系到疫苗免疫效果的好坏。饮水免疫不得使用金属器皿，饮水免疫必须用蒸馏水或冷开水，水中不得有消毒剂、金属离子，可在疫苗溶液中加入0.3%脱脂奶粉做保护剂。在疫苗饮水前限水2～4小时，保证疫苗在稀释后2小时内饮完，停水时间视季节而定，炎热夏季应适当缩短停水时间，并设置足够的饮水器，以保证2/3以上的鸡有饮水的位置。气雾免疫疫苗的稀释应用蒸馏水，不得用自来水或井水，稀释液中应加0.1%的脱脂奶。疫苗的剂量应增加1倍，一般1000羽份所需水量200～300ml，严格控制雾滴大小，雏鸡雾滴的直径为30～50μL，成鸡为5～10μL。雾滴过大，鸡无法吸入而直接坠落地面。雾滴过小，则直接经呼吸进入肺部而不能刺激呼吸道黏膜，从而无法产生免疫力。实施气雾时，喷头应离鸡群上方50～80cm外，使鸡群的气雾后头背部羽毛略有湿润，气雾期间，应关闭鸡舍所有门窗，停止使用风扇等通风设备。气雾后鸡舍再封闭20～30min，方可开启门窗。鸡舍内的相对湿度，对气雾免疫影响较大，一般要求相对湿度为70%左右。点眼、滴鼻免疫，要保证疫苗进入眼内和鼻腔。注射免疫时，用连续注射器接种疫苗，注射剂量的校正，误差应小于0.01ml，针头不可太粗，以免拨针后疫苗流出。

4.采取综合措施，减少应激反应

在接种的前后三天内为了减少应激反应，要在饮水中添加电解多维、VC等，在此段时间内，不改变饲料的品质，不转群、断喙、减少意外噪音，控制好温度、湿度、饲养密度、饮水、保证营养。

5.应用免疫增强剂

在接种前后三天内使用免疫增强剂，可使免疫效果提高2～3倍，该方法的实施对提高免疫水平，提高群体保护率有意义。