屈洛昔芬研究论文

关键词：屈洛昔芬

屈洛昔芬(droloxifene''''''''DRL)是一个雌激素激动/拮抗的内分泌治疗新药，它在化学结构与性质上和三苯氧胺(他莫昔芬，tamoxifen''''''''TAM''''''''TX)非常相似。此药可使晚期乳腺癌的内分泌疗效有一定的提高；它对骨骼具有雌激素样作用，而对子宫内膜和乳腺无刺激作用，可使其成为防治骨质疏松的理想制剂。DRL由Roos等人于1983年开始筛选并进入临床前研究〔1〕，目前此药已完成临床前研究和对乳腺癌Ⅰ期临床研究。

1理化性质

DRL化学名为E-1-〔4’-(2-二甲胺乙氧基)苯基〕-1-(3’-苯酚基)-2-苯基-1-丁烯。分子式为C26H29NO2。

DRL为无色透明粉剂，熔点(乙酸盐)为140℃，pH值(溶于1%甲醇溶液中)为4～6。不溶于氯仿，微溶于水和乙醇，少量溶于甲醇。

临床试验所用制剂为屈洛昔芬枸橼酸盐，其薄膜封装片剂在室温(15～25℃)可贮藏4年。

2药理学特性

2.1屈洛昔芬对雌激素受体的亲和力DRL及它的主要氧化代谢产物氮-脱甲基-屈洛昔芬对雌激素受体(ER)阳性的人乳腺癌MCF-7细胞株的亲和力比TAM至少高10倍；对ER-阳性的人乳腺癌标本的亲和力较TAM高60倍〔1〕。DRL取代ER上的17β-雌二醇的IC50(半数抑制浓度)约为0.01μmol/L，而DRL在人体的血浓度约为0.1～0.4μmol/L。因而其抗雌激素作用足以保证乳腺癌患者的治疗。

此外，给幼大鼠口服DRL和TAM，DRL使幼大鼠子宫重量增加的作用明显低于TAM〔2，3〕，即DRL的雌激素样作用低于TAM。

2.2体外试验屈洛昔芬人肿瘤细胞的影响在约0.05～5μmol/L的浓度范围内，DRL抑制ER-阳性的乳癌细胞(MCF-7，MCF-7M1，ZR-75和T-47D)的生长比TAM更有效〔4〕。因而在0.1μmol/L即二药在人血清的浓度水平，DRL对癌细胞的抑制明显高于TAM。只有当药物浓度超过1μmol/L时，ER-阴性的MDA-MB-231细胞株的生长才受抑制。因而DRL和TAM主要通过ER的效应机制而起作用。DRL生长抑制的IC50值约为0.05μmol/L，TAM和toremifene(托瑞米芬，抗雌激素药)的浓度较此高20倍方能达到同样效果。

0.1μmol/L的DRL作用2h可完全抑制细胞的生长，0.5μmol/L的DRL作用1h就可达到最大的生长抑制效果，其作用明显大于TAM，而作用时间短于TAM〔5〕。

DRL与TAM一样特异地作用于细胞周期的G1期，与细胞毒化疗药物完全不同。

转化生长因子β(TGF-β，属于生长因子的多肽族)可抑制ER-阳性人乳癌细胞株MCF-7和ER-阴性细胞株MDA-MB-231细胞的生长。DRL、TAM和糖皮质激素均可强烈刺激MCF-7细胞分泌TGF-β。同浓度的DRL比TAM和toremifene的诱导分泌作用更明显〔6〕。

胰岛素样生长因子I(IGF-I)可刺激乳癌细胞的生长，DRL与TAM可抑制IGF-I对癌细胞的刺激生长作用，并且具有浓度依赖性。DRL比TAM作用更强〔4〕。

雌激素对乳癌细胞的刺激可增加原癌基因c-myc的表达水平(mRNA升高)。在雌二醇作用前，1μmol/L的DRL预处理30min，c-myc的mRNA即剧烈下降。而1μmol/L的TAM无此作用。

0.03～1μmol/L的DRL可抑制ER-阳性MCF-7人乳癌细胞的蛋白质合成(具有剂量依赖性)，而同浓度的TAM与toremifene无此作用。

2.3对动物肿瘤生长的影响实验证明DRL可比TAM更有效地抑制Fisher334大鼠R3230AC和13762乳腺癌(雌激素依赖生长)以及DMBA(二甲苯蒽)诱导的SD大鼠乳腺肿瘤(严格的卵巢依赖性生长)的生长。DRL还可抑制裸鼠的移植人乳癌T61(高ER含量)的生长。

2.4屈洛昔芬对卵巢切除后大鼠骨转化和骨丢失的保护作用大鼠卵巢切除引起的雌激素缺乏和骨转化增加而导致类似于绝经后妇女观察到的小梁骨丢失。用年幼和年长2种卵巢切除(ovariectomized''''''''OVX)的大鼠，已评价了DRL抑制雌激素缺乏诱导的骨丢失的效果。实验表明，不同剂量(1～20mg/(kg*d))的DRL与雌二醇(E2)30μg/(kg*d)均可阻止生长期OVX大鼠(术后8周)的股骨远端干骺端密度降低以及近侧胫骨干骺端、股骨颈和腰椎小梁骨质含量下降和骨转化率的增加。

此外，实验中观察到DRL≥1mg/(kg*d)与E230μg/(kg*d)均可降低生长期OVX大鼠的血清总胆固醇；DRL还可降低年长OVX大鼠的血清总胆固醇。与E2不同，DRL不刺激生长期和年长的OVX大鼠的子宫肥大。DRL与E2可使OVX大鼠体脂下降而致体重减少。DRL与E2可有效且剂量依赖性地减少TRAP(+)MNC(抗酒石酸酸性磷酸酶阳性多核细胞，即破骨细胞)的数量。

3药代动力学

DRL口服给药溶解迅速(Tmax=1h)''''''''几乎完全(＞80%)吸收。剂量为10mg/kg时原形DRL平均血药浓度为0.13μmol/L(对乳癌细胞有作用)。药物分布于以下主要器官：肺＞肝＞肾上腺＞脾＞肾＞脂肪＞心脏＞卵巢＞乳房组织，血细胞及血浆浓度相对较低。总DRL相关物质大部分以原形对组织和靶部位起作用。

在动物体内，DRL经过广泛的Ⅰ相和Ⅱ相代谢，Ⅰ相代谢过程通过N-去甲基和芳香烃羟化而发生生物转化。通过酚羟化连接葡萄糖醛酸的代谢结合(Ⅱ相)而失活是所有试验动物的主要代谢途径。而葡萄糖醛酸化代谢物的胆汁排泄显然是动物(大便＞85%，尿＜2%)和妇女的主要代谢途径。DRL及其代谢产物的血浆t1/2为5～23h，故清除迅速。氧化代谢在小鼠和狨身上占优势。

4毒理学

4.1急性毒性研究除狗(＞1800mg/kg)之外的所有物种，口服LD50均超过3200或5000mg/kg。

4.2亚急性、慢性毒性研究及其他作用研究用大鼠4周和13周、猕猴的13周研究评价了DRL的亚急性毒性作用；用大鼠的6个月研究、狨的6个月研究及猴的1年研究评价了DRL的慢性毒性作用。此外进行了大鼠的雄性和雌性生育力、致畸作用，小鼠和大鼠的致癌作用的研究。

在大鼠的亚急性研究中观察到DRL和TAM均导致显著剂量相关的体重减少、雄性和雌性性器官萎缩和重量减轻及生殖细胞成熟受到干扰。猕猴的研究中，用DRL后一些雌猴出现卵泡囊肿。

在大鼠和猴的慢性毒性研究中，剂量直到200mg/kg，动物对DRL仍耐受良好，同时，垂体腺、卵巢或睾丸的变化与抗雌激素作用一致。在小鼠的18个月致癌作用研究中，剂量在4，12，36和90mg/kg时，观察到了某些肝细胞肿瘤和良性性腺肿瘤。对于小鼠，和大多数抗雌激素药物一样，DRL的雌激素样活性占优势，这被认为是这些肿瘤发生的原因。类似的剂量，在雌性大鼠观察到包括肝细胞癌在内的肿瘤的发生率没有增加。在毒理学研究中，DRL的作用与相似或更低剂量的TAM的作用一起比较，DRL的毒性及致癌作用明显低于TAM。

在试管内和活体内的基因突变研究中，屈洛昔芬是阴性结果。在生殖研究中，2mg/kg或以上的剂量减少动情。在致畸作用研究中，大鼠胚胎发育全期中观察到骨的异常(波状肋骨)，此发现归因于胎盘肥大的机械压力。生殖研究的NOAEL(不引起异常的最大剂量)为0.08和0.4mg/kg。因为它的抗雌激素作用，妊娠和哺乳期间妇女禁用DRL。

5临床研究

在德国、日本、瑞士、法国、加拿大和美国共完成了9项Ⅰ期临床研究。在几个欧洲国家、巴西、加拿大、日本、中国等国家正在进行一系列Ⅱ期临床研究。对包括1100多例雌激素受体阳性或不明的晚期乳腺癌绝经期后妇女，DRL作为一线、二线或三线治疗药物。

5.1人体中药代动力学及药物代谢过程DRL在化学结构上与TAM类似，DRL分子中有一酚基。TAM的4-羟基代谢产物是产生药效的成分。而此中间产物是通过肝脏代谢产生的，因而，DRL与TAM在人体中的药代动力学有很大差异。

DRL在口服后很快吸收(半数吸收时间约为1h)，单次剂量20～100mg(片剂)/次，Tmax为2h。

DRL可迅速分布于外周组织，平均分布半衰期为0.3～1.2h，血液内99%的DRL与血浆蛋白结合，DRL可迅速分布及代谢。DRL主要代谢过程为酚基葡萄糖醛酸化，主要代谢产物为屈洛昔芬葡萄糖醛酸盐，它的均值为DRL浓度的1/3～1/2。

DRL几乎全部通过胆汁排泄。肾脏排泄代谢很少(尿中出现约1.6%)，其中90%为DRL葡萄糖醛酸盐。

单次给药的平均清除时间为15～39h。治疗28d，DRL葡萄糖醛酸盐的血清t1/2为1～2d，而TAM及其更有效的主要代谢产物N-去甲基TAM的t1/2为14～21d。

对12位健康绝经期后妇女的生物利用度研究表明：相对于标准液体制剂，薄膜封装片剂的相对生物利用度为99%，非薄膜封装片剂的相对生物利用度为96%。AUC的90%可信限在80%～120%，Cmax和Tmax90%可信限在70%～130%。因此临床中应用的2种片剂与标准参考制剂具有生物等效性。

另外，肝脏损害可使DRL的t1/2延长，药物原形化合物的Cmax增加。

5.2副作用和注意事项临床研究中最常见的不良反应为潮热(占病例的33%)，此外还有高钙血症、阴道出血、头痛、WBC减少、肌肉痉挛、鼻炎、腹痛、γ-GT升高、高胆固醇血症、高脂血症、低钠血症、高钾血症、低钾血症、BUN升高及总胆红质升高。总的来说副作用轻微，多数副作用发生率低。

在DRL治疗过程中，由于存在潜在的降效作用，不应同时应用其他激素，尤其是生育控制药。在怀孕及哺乳期严禁使用DRL。绝经前妇女，应采用非激素避孕措施。另据报道TAM可能影响抗凝剂(华法林)的清除，因而在使用TAM或DRL时应仔细检查血凝参数。

5.3疗效在以前没有接受过全身抗癌治疗的268例绝经后晚期乳腺癌患者的研究中，DRL的缓解率较高：20，40，100mg剂量组的缓解率分别为29.8%，46.6%，43.8%。目前正在进行多中心双盲临床研究以确定本品和三苯氧胺的对比结果和临床应用价值。

在一项骨质疏松的研究中，雌激素治疗组或DRL治疗组，在给药12周后，骨质吸收的生化指标，通过双重X线吸收测得的骨质丢失预测值，均降至相似的水平。

DRL可能成为防治骨质疏松的理想制剂，因其对骨骼有雌激素样作用而对子宫内膜和乳腺组织无刺激作用。DRL对晚期乳腺癌(特别是ER、PR阳性的患者)的初步研究中取得了一定疗效，但广泛的Ⅱ期临床试验的结果正在评价中。