激活范文10篇

激活范文篇1

一、坚持在课外下功夫，带领学生种好牵牛花，培养学生的观察能力。

为了给学生的实践活动提供平台，今年春天我带着学生在校园一角种下了牵牛花的花苗。挖坑、植苗、培土、浇水，看似简单，做好不易。坑挖浅了，花苗站不稳;坑挖深了，花苗出不了头;土培紧了，花苗压死了;土培松了，花苗又倒了……先让学生看着自己的花苗有多长，挖的坑的深度和它一样高。然后再给他们做示范:把花苗立在坑中间，左手扶苗，右手把土轻轻拨到坑里，让土填满了坑，再放开左手，然后松松地压一压土。学生仔细观察了我的示范，学着扶苗、拔土、压土。有些学生观察不到位，我就再示范.给他看，他再动手植苗，费了九牛二虎之力，才把苗种好。

牵牛花长叶、抽蔓了，该给花搭架了。我给学生示范，每棵花苗边插一根竹竿，把花蔓轻轻绕到竹竿上.，这样花蔓就能顺着竹竿往上爬。大部分学生是按照我的方法搭架，有几个学生在观察了牵牛花花蔓的长势后，自己琢磨了一种搭法;因为花蔓弯弯曲曲，怎样绕也绕不到一根竹竿上，所以他们用三根竹竿措成三角形，这样不仅架子站得稳，而且牵牛花蔓无论倒向哪一边，都有竹竿可爬。还有几个学生的竹竿较短，他们就把竹竿稍稍歪向旁边的栏杆，这样花蔓能顺着竹竿爬向栏杆。看来，观察确实是学生认识事物的重要途径，是增长知识的重要能力。这几个学生正是在仔细观察了牵牛花及周围的环境后，想出了这些好办法解决了实际问题。为了有意识地培养学生的观察能力，我还要求学生认真观察牵牛花，学生培育出了美丽的牵牛花，对牵牛花的钟爱让他们流连忘返。他们观察蔓、叶、花的形态，就连叶子上细细的绒毛都观察到了，还能通过这些绒毛分辨出哪些是刚刚长出的嫩叶，哪些是长出几天的老叶。对自己喜爱的事物，学生的观察兴趣特浓，观察能力也尤为突出，这就为他们说写牵牛花奠定了基础。

二、坚持在搜集资料上下功夫，指导学生搜集牵牛花的资料，培养学生的合作能力。

搜集、整理资料的过程，是对学习内容深人理解、融汇贯通的过程，是开阔眼界、不断提高的过程。有了丰富的资料，就等于建立了一座知识的宝库。学生没有种花的经验，对牵牛花的生活环境及怎样种植都一无所知。有的学生还好奇地问我:“老师，这种花为什么叫牵牛花呢?”面对这些问题，我启发他们去搜集资料，学生不知道什么叫资料，如何去搜集资料。我指导他们:家里有电脑的让父母帮助上网找找有关牵牛花的资料;还可以到书店去找一找有关花卉栽培之类的书籍，寻找有关牵牛花的资料;也可以问问爱种花的亲友或邻居，向他们请教关于牵牛花种植方面的知识。学生的兴致很高，把家长都发动起来了，上网、跑书店、请教别人……过了一个星期，同学们找到了关于牵牛花的各种资料，有介绍牵牛花生长习性的、种植方法的、名称来历的、药用价值的，还有介绍牵牛花藤为什么能缠绕而生、牵牛花为什么朝开暮合等特征的，可以说，学生几乎把关于牵牛花的所有资料都找齐了。于是我又布置了一个任务:让小组成员把资料集中起来，分门别类地整理好。这个任务难度较大，我就分组指导他们按外形特征、种植方法、药用价值分类，把资料整理一番。

这一整理，学生从中学到了不少关于牵牛花的知识。他们能对照牵牛花找到什么是三裂叶片，什么是全缘叶片，什么尊片，知道牵牛花一天浇几次水，该给它施什么肥，什么时候给它搭架，它什么时候开花等等。于是我又给各小组布置了新任务:各组分工合作制作牵牛花叶子标本。同学们又兴奋又春急，不知该怎么办。我把制作标本的方法告诉他们，并且示范了一个标本的制作过程。各小组忙开了，同学们有的去选择又大又漂亮的叶子，有的负责带回家压平、吸干，有的准备标本签，还有的准备粘贴标本的标本纸，经过三、四天的分工合作，每个小组拿出了一幅幅牵牛花叶子标本，虽说并不那么标准，但挺像那回事，学生着急自己的作品，喜不自禁。牵牛花开花了，同学们欣喜地观看，都舍不得伸手去摸一摸。在他们看来，那是天底下最美的花了。

过了几天，花凋谢了，同学们还有些心疼，我对他们说;“你们把盛开的牵牛花画下来，不就把它们永远留下来了吗?”这下提醒了他们，他们又忙开了。因为是实物临摹，又没有美术老师的指导，有些学生不知如何下手。一些有画画基础的学生充当了小老师，帮他们选定几种花的形态，告诉他们花的基本形状是喇叭形，叶子是桃形或三裂形，还告诉他们叶子是什么绿色，藤是什么绿色，有的颜色由外及内逐渐变淡等。看着学生你帮我，我教他，我觉得我只是一个旁观者了。画画好了，就是一朵朵牵牛花盛开在雪白的画纸上。同学们通过自己的努力完成了搜集资料、整理资料、标本制作、描绘牵牛花这些学习过程。更为难得的是，在这个过程中，老师只是稍作指导，真正的实施者是他们自己。他们互相商量、互相帮助、分工协调合作，解决了学习过程中出现的问题。虽然结果不是那么完美，但对于一年级学生来说，已经很让人欣慰了。

三、坚持在课堂上下功夫，引导学生说写牵牛花，培养学生的表达能力。

表达能力是学生语文素养的综合体现，语文学习的重点应是培养学生的表达能力。学生在种了牵牛花、观察了牵牛花之后，为说写牵牛花作好了充分准备。我先让他们回想写植物的课文是怎么写的，学生都知道一般是抓住茎、叶、花这几方面，而写茎、叶、花又是从形状和颜色这两方面来写的。这时我就让他们想想自己观察到的牵牛花的茎(蔓)、叶、花是什么样的。让他们说自己的牵牛花，那是学生再高兴不过的事了。有的学生说牵牛花的苗苗“两片嫩绿的子叶就像两只小蝴蝶对抵着它们的触角”;有的学生说牵牛花绿绿的叶子“像一个个鸭掌在风中轻轻摆动”;有的学生说牵牛花的藤“像细铁丝一扭一扭的，弯弯曲曲顺着竹竿往上爬”;还有的学生说“我的牵牛花开了六朵，就像一朵朵紫红色的小喇叭在欢快地唱着歌”。这么一棵普普通通的植物，就因为学生细致的观察和丰富的想象力而竟然变得如此可爱。

激活范文篇2

关键词：高中历史；激发兴趣；活力课堂

由于历史真实的反应古今中外重大的历史事件，不像写文章那样可以艺术加工，学生学起来枯燥、乏味，加之历史“教书匠”们对历史“填鸭式”的灌输教学抱残守缺，缺乏情境性、生动性、趣味性、技巧性、艺术性，使教出的一些“书呆子”们，只能对历史知识采取“死记硬背”方法，最后导致因考试成绩不理想而失去学习历史的兴趣，致使历史课堂如同一潭死水，波澜不惊，失去了本该应有的生机活力，导致低效甚至无效课堂。随着高中历史新课程改革春风的沐浴，那么如何激发历史课堂的生机活力，这需要历史老师要转变教学理念，采用先进的教学模式，构建和谐教学氛围，创设新颖、新鲜的情境教学，进行艺术性的提问，展开自主探究和合作研讨，让生随课动，师从生动，这样老师富有激情的教，学生富有兴趣的学，这样的历史课堂想不激活都难。

一、转变教学理念，使学生成为课堂的载体

在传统的师道尊严的理念下，老师是绝对的权威，是知识的化身，不准质疑，哪怕历史老师讲错了学生也不敢挑战，学生完全变成了接收机器，没有自主权、没有话语权，没有师生互动、没有生生研讨交流，整个的历史课堂只有历史老师一人在无拘无束、自娱自乐的表演，此抑制了学生的个性展示，抹杀了灵性和反应问题的敏捷性，使整个历史课堂毫无生机活力可言。随着高中历史新课程改课的深入，历史老师教学理念的更新，也为历史课堂注入了新的活力。老师放下了高高在上的架子，开始融入学生群体，与学生打成一片，用微笑教学、赏识教学、惊讶教学，公平公正地对待每一位学生，让老师温暖的眼光普照到每一位学生。给学生亲和的形象，拉近师生情感，做学生的良师益友。克服教师中心论，把历史课堂让位与学生，发挥学生的主体地位，让学生成为课堂的主宰，真正使学生实现“我自主、我参与、我思考、我快乐”的理念，真正实现历史教学因学生参与而精彩，因学生展示而高效，更好的提高了历史课堂教学效率。

二、采用先进的教学模式，给学生展示的舞台

传统的教学模式老师是课堂的主宰，是唱戏的主角，而学生则是忠实的观众，当然学生学习历史的主动性、积极性很难被调动起来，课堂气氛也就很难活跃起来。随着我校采用新的教学模式——协同模式，实施导学案、检测案双案教学，教师的话语霸权被打破了，实现了讲堂变学堂，教师变导师，灌输变探究转变，针对课堂教学目标，课堂检测、材料解析全部都以提问的方式展现，组织学生积极参与合作研讨，在老师的主导下，让每一个学生对问题畅所欲言，各抒己见，特别对历史教学中的重难点引导学生思、议、展、评。特别学习小组的建立要合理搭配，在历史问题的合作探究中，要把握课堂上的“度，既要提升学生合作的高度、又要挖掘探究的问题深度，更要激活学生自主参与度。例如，在上新文化运动时，资产阶级激进派提出要“打倒孔家店”，我把这个难点设计成问题，把球踢给学生，让学生在我的引导下进行合作探究，问题是：1、孔家店是否真的应该被打倒？假如你换成了当时的资产阶级激进派代表人物，应该怎样对待这个观点？我把死的知识变成活的、开放性提问，极大地激发了学生参与探究这个问题的好奇心和兴趣，一下使历史课堂活跃起来了，受到了意想不到的教学效果。

三、创设多彩的教学情境，把历史课堂当成乐园

营造一个潮气蓬勃的创新氛围，除了老师语言幽默风趣外调节外，可以利用多媒体的光、色、影视，把平淡无奇的死知识营造成动感、生动有趣的情境化艺术品，刺激学生感官，使学生情绪高涨，例如，国共两次重要的谈判——重庆谈判和北平谈判，我没有平铺直叙的口述，而是展现两段历史视频材料：播放第一幅视频是在、王若飞的陪同下乘飞机去重庆谈判；第二幅是播放国民党张治中将军在北平参与谈判的情景，正当学生看的热血沸腾的时候，我抛出两个具有挑战性的问题：1、知道摆的是“项庄舞剑意在沛公”的鸿门宴吗？为什么还要去“赴汤蹈火”呢？2、国民党张治中将军知道国民党已经“气数已尽”吗？为什么还要硬着头皮赴京呢？假如这两次换成是你，你会去吗？此时班级一下子“炸开锅”了，有的说、张治中都是被逼的；有的说或者他也敢去；…。通过激烈“百家争鸣”，终于得出、张治中明知山有虎，再向虎山行的原因了。这种有老师导演，学生唱戏的情境教学，使学生把历史课堂作为一种享受的乐园了，同时优质提、高效的完成了教学任务。

总之，诺贝尔物理奖华人获得者丁肇中说过：“兴趣比天才重要”。如何历史课堂能够充分激发学生学习历史的兴趣，发挥学生的主体地位，让学生积极主动地参与历史教学，让学生在实施素质教学的理念下，在轻松、民主、和谐的环境中，老师的幽默风趣下，在多姿多彩的教学情境中，让学生耳听、眼看、嘴动、脑思、手写有机结合起来，使历史教学笑在学生脸上，快乐在心中，学在脑中，我想这堂历史课就是优质、高效之课。

作者:张旭 单位:江苏省沭阳县建陵高级中学

参考文献：

激活范文篇3

一、消除顾虑，统一思想

在私营企业支部成立之初，一些私营企业主对此项工作不是非常理解，非公有制经济组织党员少，党建工作无关紧要、无碍大局；有的认为，非公有制经济组织党建工作没有现成的模式，情况复杂，无从抓起；还有人认为，非公有制经济组织资产私有，党建工作难以开展，也难以发挥作用，甚至还会影响了企业的发展。为此我们对业主做了耐心细致的思想工作。我们采取了两项措施：一是认真学习和领会党的十六大文件中关于非公有制党建工作的论述。在加强学习的同时，还组织党务干部与部分非公有制经济组织业主进行学习座谈，使业主认识到：非公有制经济是我国社会主义市场经济的重要组成部分，它的发展不排斥党对企业的政治领导，而是对党的工作提出了更高的要求。这不仅是经济结构发生变化的需要，也是实践“三个代表”，加强基层组织建设的需要。二是组织参观学习。利用和企业家到南方参观之际，带领他们到那些私营企业党建工作开展好的大型企业进行学习。

二、加强领导，目标明确

（一）、制订目标。每年镇党委制订的党建目标中，都把非公有制党建工作列为其中一项，参与年底积分考核。

（二）、领导重视。成立了由镇党委书记秦保建为组长，党委副书记为副组长，党委成员和分管工业的副书记为成员的领导小组。河南省中原针织厂党支部成立之际，县组织部张善波部长亲自向支部赠送党旗，并和镇党委书记秦保建同志一起参加了支部挂牌仪式。

（三）、强化调研。镇领导曾多次向两个支部书记了解情况，根据需要为他们带去各种学习光盘，在和企业主的谈话中，建议他们多支持支部的工作，在场地、经费上都要予以帮助，利用党组织阵地，结合企业实际，塑造自己的企业文化，从而更快地促进企业发展。

（四）、建章立制。镇党委先后下发了《关于大力加强非公有制党建工作的意见》、《大召营镇非公有制经济党员发展意见》等文件,从制度上约束、规范支部的发展，使其逐渐步入正规。

三、学习培训，提高素质

对企业职工的学习培训，我们主要抓好三个方面：

（一）、抓党的理论知识学习。我们的对象是全体党员和企业的中层以上干部。利用板报、广播宣传党的路线、方针、政策，利用业余时间，每月组织一次党员进行学理论、学党史活动。今年“七一”前夕，中州纺织有限公司支部还组织新老党员到革命圣地延安进行了新党员入党宣誓仪式。

（二）、抓好业务技能培训。支部和工会相结合，聘请了新乡市纺织厂熟练职工对企业技术工人进行轮训，使职工能很快掌握新机器、新技术的应用，熟练操作，很快的提高了工作效率。

（三）、抓好企业文化建设。建设有理想、有道德、有文化、有纪律的职工队伍和现代企业文化。要求企业每两周一次集中学习。学习内容主要是观看《如何创建学习型组织》、《商务礼仪》等VCD光盘和发放《细节决定成败》、《没有任何借口》等书籍，增强大家的团队精神。

在学习、开展活动的过程中，我们始终坚持党的活动围绕企业的中心工作，力求为党员和广大职工所欢迎，为业主、经营者所理解，以小型、分散、业余为主，见缝插针，灵活安排。这样既保证了党组织活动正常进行，又不影响企业的生产经营。得到了党员和业主的欢迎。

四、发挥作用，注重实效

一是宣传贯彻党和国家的路线方针政策。我们通过黑板报、宣传栏等形式，大力宣传国家的经济、税收政策，引导和监督企业遵守国家的法律法规，依法经营，照章纳税；二是关心企业生产经营的重大问题，提出意见和建议，支持和促进企业发展。今年上半年中州纺织厂党支部向董事会提出了《关于加强公司绩效管理》的建议，公司董事会高度重视、及时采纳了这一建议，并大力组织实施，有效提高了企业管理的水平。职工魏艳蕾同志提出的班组出纱量日公布制度，经企业采纳后，大提高了各个班组之间的竞争，出纱量大增。目前，“事事有人管，人人都管事，工作天天清，目标步步高”在集团内部已蔚然成风。三是加强党员的教育管理，做好发展党员工作。除了党性教育等必要内容外，我们还开展了职业道德教育，“创文明班组”、“岗位立功”等活动，充分发挥党员的先锋模范作用；四是考虑到两个支部都是纺织行业，组织的特点和实际情况，我们通过“接线头大比武”、“单位时间出纱比赛”等丰富多彩的活动，不但激发广大党员职工的工作热情，同时又以卓有成效的工作实绩赢得业主的理解和信任。五、发挥了先锋模范作用。中州纺织有限公司21名党员中，担任副厂长的有1名。车间班组长以上的有13名，一线带班长的有7名，他们在企业的生产经营中有效发挥了先锋模范作用。六是协调企业内部各方面的关系，坚持原则，化解矛盾，维护了企业和社会的稳定。

通过开展寓教于乐、健康向上的文娱体育活动，不断陶冶员工情操，丰富职工业余文化生活，培养员工爱企如家的意识和积极向上的精神，全心全意建设企业两个文明；通过进一步弘扬企业精神，大力培育企业理念，切实转变员工的思想观念，规范言行，提升企业在员工心目中的地位，增强加速企业发展的驱动力、向心力和凝聚力。

激活范文篇4

【关键词】初中物理教学；微课；课堂激活

纵观当前初中教学体系的总体现状，物理是学生较难理解和掌握的一门学科，物理需要学生具备良好的思维逻辑能力。初中生正处于青春期，对于物理这门新接触的学科具有一定的好奇心，然而，如果教师不能应用正确科学的方式保持学生的好奇心，时间一长，学生就会因为物理知识的枯燥性和困难性，失去学习物理的兴趣和信心。因此，这样的教育背景下，也给初中物理教师在教学上带来了困难和挑战。物理不同于其他学科，既需要学生具备扎实的知识基础，又要在此基础上具备举一反三的能力，很多学生对于物理很难产生兴趣和热情。而微课是信息技术的呈现方式，微课在教学中的应用价值也得到了实践的证明，因此，教师必须要正确应用微课来激活物理课堂教学氛围。

一、初中物理教学课堂现状

初中物理是一门理性逻辑较强的学科，教师在教学的过程中不能只注重理论化的教学，而是要让学生在教学活动中有参与感，因为只有让学生从亲身参与的过程中感受到学习物理的价值，才能让学生积极主动的研究物理。另一方面，初中物理中的很多实验都与实际生活紧密相连，需要学生具备一定的生活常识和生活经验，才能够推动教学质量的提升。然而，纵观当今初中物理课堂教学现状，教师总是以理论知识的讲解作为重点，学生总是沉浸在压抑紧张的课堂氛围中，注意力难以集中，学生从内心对学习物理有一种抵触的心理，也就导致了学生的学习效率难以提升。

二、利用微课激活初中物理教学课堂的策略

1.利用微课进行课堂导入。想要激活初中物理教学课堂的活力，重新营造一个高效轻松的物理课堂，改变过去死气沉沉的课堂教学氛围，教师首先要做的就是在课堂导入的过程中充分调动学生的积极性。课堂导入是保证整节物理教学高效率的基础环节，教师必须要重视课堂导入的重要性，才能够给物理教学课堂注入新鲜的活力，走出传统教学模式的影响。因此，教师在初中物理课堂教学导入中，可以先向学生播放一些本节课相关知识点的微课，通过简短有趣的微课内容，将学生学习的兴趣激发出来，之后再针对微课内容进行一些问题预设，在课前先给学生10分钟左右的时间进行交流讨论，让学生根据自己的想法找出问题的答案，这样教师在正式教学时可以根据学生的薄弱之处，针对性地进行教学。2.制作微课视频，帮助学生掌握知识点。物理知识点一般是复杂且繁琐的，初中生的认知能力和学习习惯还没有完全养成，因此在学习物理的过程中总会遇到阻碍，总是会因为种种原因导致学习效率差等问题，因此，在帮助学生学习新知识点，巩固旧知识点方面，微课就可以发挥很大的价值。微课的特点在于短小精悍，一般不超过10分钟，这完全符合初中生注意力集中的最佳时间，而且在物理教学课堂上，教师所讲解的物理知识较多，学生经常发现混淆的现象，而教师将知识点制作成简短的微课视频，就可以对每一个知识点进行具体分析，学生可以根据自身的实际情况去反复观看视频，认真研究一个知识点，直到完全理解，能够将其融会贯通。3.利用微课进行抽象概念的教学。物理是一门理性学科，学生在学习的过程中由于缺乏实际的经验和技巧，对于很多抽象的知识无法理解，总是容易进入死胡同，这对于学生来说是一件很常见的事情，也是大多数学生学习过程中容易遇到的困难。如果教师在教学过程中总是强迫将这些晦涩难懂的知识让学生理解，这确实有些不在初中生的接受能力之内。因此，针对初中物理中一些抽象化的知识，教师就可以用微课的形式向学生展示，例如：初中物理中针对浮力的教学，很多学生都不能理解，教师就可以在网上查阅浮力相关实验的视频，让学生通过切实的实验理解一些相关物理公式，并且通过直观的微课视频了解实验过程，并且能够了解物理知识在生活中实际应用的价值。

三、结语

当今社会的发展对于人才的要求也在不断提升，只会读书的“书呆子”型人才已经不能满足社会各界的要求，因此，在当今初中物理教学中，教学课堂是学生学习知识的重要场合，同时教师的课堂教学也是学生接受知识的主要途径。教师在初中物理课堂教学中，一定要考虑到初中生的心理特点，为学生打造一个全新的教学课堂，让学生在快乐中学习，在学习中成长。教师要正确认识微课的教学价值，并且通过深入的研究，创新微课应用策略，促使其在教学中能够有效激活物理课堂教学的气氛。

【参考文献】

[1]卢国棠.激活兴趣，创高效课堂———初中物理微课的应用[J].新课程（中学），2016（10）.

激活范文篇5

词汇是英语教学的基础，也是学生英语学习的基础。词汇量的多少，直接影响着学生的听说读写能力。为此，教师首先要注重词汇教学，帮助学生掌握一定的词汇量，为日后的英语学习和交流打下坚实的词汇基础。随意联想在词汇教学中的运用，主要有谐音联想、词根词缀联想、以旧带新联想等。1.采用谐音联想记忆。谐音联想，顾名思义就是根据单词的发音以及汉语的相似读音而进行趣味联想的方法。谐音记忆不仅有助于提高词汇学习效果，也能激发学生词汇学习的兴趣，增加单词教学的趣味性。如vacation这个单词的教学，根据单词的发音/v??ke??n/，引导学生联想汉语里哪个词语或者句子与其发音相似，于是，学生会想到“我开心”，在重复“我开心”中感受英语词汇学习的乐趣，也通过谐音联想记住这个单词；也可以引导学生进行意义联想“放假了很开心”，将这个单词的音、形、义进行巧妙随意联想，提高单词的记忆效果。2.根据词根、词缀联想。根据词根、词缀联想，也是随意联想的主要方法。这种方法主要是根据单词添加某种含义的词缀而组成新的单词进行联想，不仅有利于学生记忆单词，而且有助于学生掌握英语构词法，提高词汇教学的效率。如comfortably的教学中，引导学生根据形容词词尾加-ly构成副词的特点，联想出这个单词是副词，去掉-ly就是形容词，根据-ly的增加方法，以l(e)结尾的单词只加-y的知识，可以联想出comfortably的词根是comfortable；教学impatient时，明白im-是否定前缀，从而联想出patient与impatient是反义词。这种运用词根词缀联想的方法，能降低词汇学习的难度，增强学生记忆词汇的信心。3.以旧带新展开联想。以旧带新的联想方法是根据熟悉的单词进行联想，或者将单词拆分、合成等而进行随意联想的方法。它可以有效帮助学生轻松记忆，且不易遗忘。如something的教学中，引导学生将这个单词拆分为some和thing，记忆起来轻松快捷。再如教学good-looking时，引导学生记住good是“好”、looking是“相貌”之意，那么good-looking的含义不言而喻，并且词形的记忆也简单快捷。运用随意联想记忆词汇，还可以通过近义词、反义词、固定搭配等的联想来记忆，让词汇学习趣味横生。

二、运用随意联想开展阅读教学

阅读是英语教学的重头戏，是激发学习兴趣、提高阅读技能、发展阅读能力的主要途径，同时也是学生积累知识、提高综合能力的重要途径。传统的阅读教学中教师多采用讲读、翻译的方法，将阅读演绎为读懂、应试而忽视了兴趣的培养和能力的提升，学生对阅读也停留在会读、能背诵、做练习的层面。为此，改变传统的阅读模式，创新阅读模式，激活阅读课堂是英语课堂改革的必然。在阅读教学中运用随意联想，可以从下面几个方面着手：1.根据文章标题联想。文章的标题一般是文章的点睛之笔和核心，从标题中可以联想出文章的主要内容。为此，根据文章标题引导学生随意联想，能让学生快速把握文章的精髓，推断出文章的主题。如Whatabraveyoungman的阅读教学中，教师引导学生分析文题的构成，抓住关键词youngman和brave，猜想这篇文章讲的是一个年轻男子的故事，这个年轻人的主要特点是brave，接着鼓励学生继续猜想，文章通过讲述勇敢的年轻人的故事，号召人们学习他勇敢的品质。然后，教师可以提出Whoistheyoungman?Whatdidhedo?Whatkindofmanishe?Whatshouldwelearnfromhim?等问题，引发学生的阅读欲望，激发起浓厚的阅读兴趣。教师也可以让学生提出问题，让学生从文题中思考自己想知道哪些内容，从而引发学生有效联想，调动阅读的主动性，提高阅读的有效性。2.根据文章中关键词联想。阅读文本中，除了文题高度概括出文章的主要内容和主旨外，文本中每一自然段也都有主题句和关键词，这对文章也起到提纲挈领的作用。在这些关键词和主题句下进行联想，有利于学生更好地理解文章的主题，掌握文章的结构，深层次地理解文章。如ThestoryofXiWang阅读教学中，当学生阅读了第一部分ThegrowthofXiWang后，引导学生根据sadly进行联想，思考文章从介绍希望的成长历程，下一段该写什么？引导学生抓住sadly而进行联想，从sadly这个单词的词义猜想下面要写的可能是关于“希望”的不好的一面，可以猜想是“danger”的问题；再引导学生从faceseriousproblems而猜想“希望面临的危险的严重性”，进一步促使学生联想WhatdangersisXiWangfacing?他们根据生活常识归纳出：人们砍伐森林，熊猫没有竹子、竹叶吃；人们把熊猫带回家养；狩猎着捕杀大熊猫等。这样以“想”带“读”，有助于学生理解能力的提升，也提高了学生的创新思维和发散思维能力。3.阅读情境中联想。根据阅读文本的情境、语境猜测新单词、推测阅读文本是提高阅读分析能力的主要方法。在阅读情境中随意联想，可以加深学生对词汇的理解和文章的把握，也能激活学生的思维，激活阅读课堂。如阅读TheTaiwanearthquake时，在阅读“地震发生”一段时，教师可以借助PPT为学生呈现地震发生时的视频情境，再让学生阅读时展开联想，理解runinalldirections、falldown、comedown等短语，这些词汇的意思不言自明。阅读中的随意联想，也可以引导学生根据文章的脉络来进行。如Whatabraveyoungman的阅读中，读到张华听到邻居家的呼救声、看到浓烟滚滚时展开联想：如果自己是张华会怎么做，联想张华会不会奋不顾身去救孙太太，想象张华去救孙太太时应做好哪些准备，想象大火中救人，张华又会不会有危险……这些联想，以文章的情境为基础，发展了学生的思维能力和想象力，也促进学生之间的交流和互动，从而激活了阅读课堂。

三、运用随意联想开展写作教学

写作是语言的输出和运用，是学生综合能力的体现。传统的写作课堂的气氛沉闷，学生毫无兴趣，不会写、不想写的现象普遍存在，写作课堂毫无生机和活力。而运用随意联想可以有效改善低效、乏味的写作课堂模式，激活写作课堂，提高学生的语言综合运用能力。写作教学中运用随意联想，可以引导学生从词汇的选择、谋篇和构建、主题的升华等几个方面进行。在随意联想的基础上再动笔成篇，写作不再是问题。如要求学生以Protecttheanimals为题写一篇文章，写作教学前，教师引导学生先从文题和写作要求分析文章应从目前动物稀少的原因以及我们应采取的保护措施入手，这样便搭建起写作的“框架”；然后引导学生思考动物面临的危险和困境有哪些，以及应采取的措施有哪些等，并由此联想出相应的词汇，如wildanimals、beindanger、forest、hunter、huntfor、takeactions、dosomethingfor、astheresult等，为学生遣词造句、语序安排打好基础。写作中的随意联想，也包括如何开头、怎样结尾等。如写保护野生动物的文章，可以引导学生开门见山入题：Animalsareourfriends.然后用but笔锋一转，介绍野生动物面临的困境，以Buttheyareindangernow作为主题句介绍动物面临哪些困境。之后，引导学生联想描写了动物面临的危险后，写出应采取的措施，同样引导学生怎样拟好这段的主题句，打算从哪些方面论述措施和策略，进一步引导学生思考怎样结尾，可以运用名句点亮文章的主题，如以Protectinganimalsisprotectingourselves等结尾。这样，教师步步引导学生联想、想象和思考，从单词的运用、谋篇、主题的升华等全面兼顾，写作起来得心应手。

总之，随意联想在英语教学中的作用不可小觑，既能激发兴趣，激活课堂，又能培养、提高学生的思维力、想象力和综合能力。同时，其运用的方式也多种多样，带给英语课堂无限的生机。

参考文献：

[1]袁媛.初中英语单词联想记忆教学实践探析[J].成才之路,2014，(33).

[2]齐曼曼.联想记忆策略在初中英语词汇学习中的应用研究[D].赣南师范大学,2017.

[3]董艳菲.开展有效的活动激活初中英语课堂[J].读与写(教育教学刊),2017,(10).

激活范文篇6

论文关键词：日记获取信息储存信息训练表达养成教育

日记是观察的“竞技场”，是练笔的“跑马场”，也是学生课余自由自觉的“娱乐场”。叶圣陶也曾提出了在学校写作训练中，用日记代替命题作文的构想，可见其地位的重要。《语文课程标准<试行)》指出：“能不拘形式地写下见闻、感受和想象，注意表现自己觉得新奇有趣的或印象最深、最受感动的内容。”由此不难发现“日记”是体现这一学习主题的最佳方式，在作文写作中发挥着重要作用。当代教育家为书生提倡学生写日记，称写日记为“道德长跑”，就像春夏秋冬，年复一年坚持长跑的学生身体健康，强壮有力一样，倘长年坚持不懈写日记，就使人心灵健康，心底开阔。作为语文教师，在教书方面怎样提高学生的写作能力，又在育人方面冶练人的情操，提高学生思想素质，找到一本两利的教学方法呢?坚持让高职高专的学生们写日记，不乏是条有效途径。在多年的教学实践中，笔者认为：

1日记是学生获取信息的重要途径之一

让学生将自己一天中的所见、所闻、所想、所感等，择其要者，以日记的形式写下来；将个人的各种感触在日记中作以描绘，尤其让第一学年的学生写观察日记，第二学年的学生坚持写生活日记，日积月累，收益颇丰。

2写日记是学生储存信息的最佳方法之一

学生看到的材料，获得的信息，有些直接储存在大脑中，成为内储信息；有些要写在本子中，备后查用，成为外储信息。日记乃外储信息之一法。只有大量地储存信息，占有材料，写起作文来才会滔滔绝，左右逢源。

3日记是训练表达能力的有效方法之一

日记者，每日一记也。古人云：“记者，纪事之文也。”早期日记以记事为主，以后渐有议论。所以明朝人吴讷说：“叙事之后，恰作议论以结之，此为正体。而虽专尚议论，然其言足以垂世而立教，弗害其为体之变也。”到后来，日记的内容更丰富，表达也更灵活。可记事，可议论，可描写，可说明，亦可抒情；可即兴记事，可浮想抒怀；可写国家大事，可写家庭琐事；可写对人生，社会之我见，可写对道德行为之评判；可歌可赋，形式多样，能散能韵，不拘一格。语自经验教训，言出喜怒哀乐，几所见、所闻、所想、所感，只要自己认为有写的必要，有记的价值，都可写进日记。因此，El记对训练表达，锤炼语言，遣词造句，修改辞章法，材料取舍，详略处理等不无裨益，是很好的写作训练方式。

4写日记有利于加强对学生的思想道德修养和社会责任感的养成教育

在日记里，学生可以打开心扉，坦陈自己的思想感情，总结学生生活中的经验教训，评判他人和自己的行为，表白自己对社会对人生的感悟和看法；可抨击时弊，针砭流俗，指点扛山，激扬文字；可判别是非，褒贬人事，从而提高道德素质，加强思想修养，渐次形成参与社会变革，拼搏向上的人生态度。一本本日记，就是青少年们小小的“思想库”；一本本日记，就是青少年们的成长史。他们就是在这吐故纳新中渐次走向成熟的。

5写日记是提炼生活的一种手法

学生们把生活中获得极丰富的生动的形象的感性材料，通过日记，诉诸形象，借助形象表达自己对人生，对生活和社会的理解和感悟，从而也懂得生活，理解了人生，理解了社会，而生活是人生最好的老师，它可以教会你写作，也可以教会你一切。每一位坚持长年写日记的学生都有了多方面的收获，写得越认真，学生进步就越快，从学生的日记里，看到了他们心灵原野上，朝着真善美的目标奔跑的足迹，看到了他们写作水平的渐次提高。此外坚持写好日记是在作文教学中渗透心理教育的有效途径。写好日记是学生心理健康的必经之途。学生写好心理El记，让学生在日记中宣泄心中的喜怒哀乐，迁移情绪和升华感情，有助于克服心理状态，完善自我，从而逐渐形成健康心理。同时，也可通过El记这篇反映学生的心理活动的“窗口”，及时了解学生的心理状态，为做好学生的思想工作提供了非常有力的依据。

激活范文篇7

找准卖点，招商定位上求“高”。商家效益为本，资本逐利而动。在招商引资深入人心，海内外都在争资、抢商的大趋势下，要快人一步、先人一筹，关键是要以特招商，优势互融，以科学的定位和精准的卖点，吸引投资者联手创业、共同发展。##毗邻经济发达、人口密集的俄罗斯滨海边区，背靠俄远东腹地。在国内发达地区产业饱合、规模转移的态势下，俄富集的能源、原材料和广袤市场对过剩资本极具吸引力和诱惑力。尤其作为全省对俄经贸的龙头，我们直接面对着国内外两个市场、两种资源，培育了一批资金雄厚、经贸网络通达、熟知俄市场规则的精品企业和优秀企业家，与俄高层、地方政府、企业间的公共关系和感情联系紧密而融洽，这客观上使##成为外埠企业进军俄罗斯市场的重要桥梁和最佳“跳板”。为此，我们抢抓“东北振兴”战略深入实施、对俄经贸加速升级的难得机遇，高点定位，差异取胜，创新落实“南联北开”战略，着眼促进外埠企业及资金的吸纳和联结，确立了“引外强内、联外促外”的招引方针，使##迅速成为了承接南资北移、港企北上的热点区域。

精选区域，招商方向上求“准”。招商引资务必避免“打乱仗”，需目标明确，一矢中的，进而开辟捷径、事半功倍。我们坚持“突出重点、兼顾一般”的原则，明晰方向，将招商引资的重点聚焦于招外商、跑专项、启民资，三步齐走，配合发力，提升了内外招引的实效。以全省深化龙港、两江协作为契机，主攻港澳、江浙等发达地区的大企业、大财团和战略投资者，实现了香港##等外资项目的协议“落地”，签约额达1.6亿元；着力与浙、鲁、沪等地商家攀亲结缘，促成##公司斥巨资兴建##园，将成为东北沿边开放的新亮点；引导外经贸企业联合南方资金、技术和品牌共同“走出去”，##集团与名企合作，在俄投资##万元兴建##条制鞋生产线，年加工各类鞋1##万双，产品直销莫斯科等俄大中城市，得到上级认可并在全省推广，带动全县30%以上边贸企业实现了由贸易向贸工结合的战略转型。吃透政策，把握导向，利用对上联络广、人员熟、路子通等便利条件，全力跑上公关，2004年争取专项资金近##亿元。发挥老百姓生活殷实、城乡储蓄存款余额高达##亿元的优势，帮助遴选项目、对接客商、提供信息，有效激发了民资潜能，去年启动民间投资##亿元，实现县域经济发展和群众自身受益的“双赢”。

创新招法，招商方式上求“活”。创新是招商的灵魂。只有应时顺势、灵活应变，不断探索、活化招商引资的形式、手段和方法，才能抢占先机、求得突破。我们以“招商引资年”活动为载体，坚持领导带动、部门联动、企业主动、干部促动，广拓渠道，凸显实效。县主要领导带队赴港开展定向、定位、定点、定人招商，同香港##等著名商会组织和社团建立了联系，与##等近百家知名港企进行了对接商洽，达成了联合开展对俄工业园区开发、林木产品加工、大型机械进口等合作意向。以##园为牵引，以商招商、以外引外，在北京、上海、浙江、福建等省（市）设立招商处30余个，动员全县力量帮助外来投资者做大“蛋糕”、形成气候，积极吸引关联产业和配套企业，释放了“引来一个，带来一批，辐射一片”的聚集效应。开展节会招商，成功举办中国（##）首届##节，同韩、日及省内外知名企业签订总值2.7亿元的购销合同，提升了##的影响和名气。

激活范文篇8

1.1促进了幼儿身体素质的发展

幼儿阶段是一个人发展的初始阶段，这个时期无论是身体素质还是知识基础都在不断发展，特别是身体的发育，除了保证充足的营养之外，还需要参加适当的体育锻炼促进生长发育。经过大量的实践证明，体操教学能够明显促进幼儿的体质增强，帮助幼儿的骨骼，肌肉，器官健康发育，促进体型协调发育，进行有效的体操锻炼还能够促进幼儿协调能力和柔韧性的提高。

1.2符合幼儿心理健康发展的需要

幼儿阶段是教育的启蒙阶段，这个时期的教育需要充实幼儿的内心体验，帮助幼儿爱上学习，对体育锻炼也是如此。开展有效的体操教学能够促进幼儿性格的健康发展，从而对体育锻炼产生浓厚的兴趣，不断开阔视野，发展身体的协调能力，总之，在幼儿阶段开展体操教学符合幼儿心理健康发展的需要。

1.3促进幼儿意志力的发展

对于幼儿开展体操教学，是幼儿体育活动的重要组成部分，在进行体操训练的时候能够在很大程度上促进幼儿意志力的增强。首先需要完成一定的动作，这个时候幼儿必须集中注意力，在锻炼过程中控制自己，促进任务的完成，在这样就在很大程度上促进考虑幼儿集体意识和纪律意识的养成。

1.4促进幼儿审美能力的发展

体操运动本身就是一项美感十足的运动，将人的形体美展现的淋漓尽致，再加上体操运动过程中播放的动听的音乐，能够激发幼儿的学习兴趣，通过体操锻炼，幼儿对队形的组合变化，音乐的节奏等进行评价，促进了审美能力的发展。

2.如何利用多媒体促进幼儿体操教学的有效性

2.1充分利用多媒体，促进幼儿对于体操学习的兴趣

兴趣是进行任何学习的动力，缺乏兴趣的学习是不会有效的。所以对于幼儿进行体操教学首先需要从幼儿的学习兴趣入手，充分利用多媒体带来的优势为幼儿展示体操运动。多媒体课件生动的形象，悦耳的音乐，将体操运动的形声色充分的表现出来，幼儿在观看的过程中，不断想象、思索，很容易产生共鸣，非常想要进行体操运动的体验。在丰富多彩富于变幻的信息双向传递中，幼儿愉快、自然、主动地学习。例如小班幼儿在学习体操的一个基本动作，肩肘倒立时，由于幼儿很难体会到动作的要领，所以教师可以在多媒体上向幼儿播放一段火箭发射升空的视频，然后燃让幼儿模仿火箭升空的动作，在模仿中幼儿就能体会到动作的要领。通过采用多媒体演示能够激发幼儿对体操学习的兴趣，还能够将动作的精髓掌握住。

2.2充分利用多媒体，促进幼儿对体操锻炼的认识

在进行体操教学时，离不开教师的正确引导，由于幼儿缺乏经验。所以学习的模式大都是教师在前面做体操的示范动作，幼儿跟着学习。但是这种教学模式有很多弊端，例如教师在前面做动作，但是幼儿的人数非常多，这时候很多幼儿就不能看清楚教师的动作，所以教师需要重复动作，多方位的进行展示，不仅教师累，还浪费了大量的时间，学习效果也不好。但是可以充分借助多媒体进行演示，这样生动，形象的演示，幼儿无论咋任何方位都能够清晰的看到示范动作。例如在学习向前滚翻这个动作时，分步骤将这个复杂的动作演示出来：首先双手撑地蹲，然后将腿蹬直向前翻滚，双脚着地，最后站立，再加上多媒体有趣的设计，让幼儿在愉快的氛围中掌握体操动作的要领，加深对于体操锻炼的认识。

2.3充分利用多媒体，促进体操教学的巩固

采用多媒体教学还有一个优势就是可以实现体操教学过程中有效反馈。教师通过相机将幼儿在体操课上完成的动作记录下来，然后利用多媒体图像播放出来。然后教师和幼儿共同观看视频，观察动作时否做的到位，是否规范，及时的进行评价和纠正，让幼儿欣赏自己动作的同时获得成就感。同样教师用摄像机将幼儿的动作录下来，通过观察，可以发现幼儿在进行体操学习过程中存在的问题，然后结合幼儿学习的特点采取有针对性的教学策略，做到因材施教，能够达到事半功倍的教学效果。

2.4充分利用多媒体，促进幼儿思维水平的发展

充分利用多媒体进行幼儿体操教学，能够将体操运动进行有效的分类，分析，总结，有助于幼儿思维水平的发展。多媒体教学能够促进幼儿对于外部刺激进行主动的选择性加工，从而获得一些感性材料，展开联想，引导幼儿多提问问题，多进行思考，为幼儿的思维水平的发展做出努力。例如在《快乐的青蛙》体操教学中的开始部分，播放一些青蛙生长的动画，启发幼儿用形体动作表现青蛙生长过程中不同的样子，如幼儿用滚皮球动作表示“卵”的样子，趴在地上双手抱肩、双腿并拢、然后扭动屁股表示“蝌蚪”游动等。在巩固练习蛙跳动作中，利用多媒体播放害虫吃庄稼，农民着急的画面。采用有效的情景激发幼儿的学习兴趣，充分发挥多种感官功能，为幼儿而提供自我表现的机会和空间，活跃了学习气氛，刺激了思维水平的发展。

综上所述，幼儿阶段是一个人成长过程中的关键阶段，在这个阶段人的身体快速成长，肢体的协调性及身体素质的好坏都是在这个阶段打下基础的，虽然良好的身体素质和身体的协调性离不开必要的营养物质的支持，但是进行科学的体育锻炼对促进幼儿身体的协调发展及增强体质是不可或缺的关键因素。充分利用多媒体技术开展幼儿体操教学符合幼儿发展的需要。

作者:王芳 单位:江苏省常州市西夏墅中心幼儿园

参考文献：

激活范文篇9

关键词：初中物理；自制教具；实验教学；学习认知

物理实验教学中，教师鼓励学生自制实验教具，不仅能够给实验课堂教学创造全新认知机会，还能够有效培养学生的实践能力。学生自制实验教具是自主探究学习的基本体现。在具体操作中，教师要引导学生对实验内容展开深入分析，对实验操作过程进行全面科学评估，对实验效果展开深入调研，以使学生参与到实验操作中，并利用自制教具展开实验操作，从而形成更科学、更深刻的学习认知。

一、规划自制教具方案，培养学生科学态度

学生自制实验教具设计时，教师需要对教材实验内容展开全面评估，对实验需要的教具情况做出预设，对学生自制实验教具的可行性做出科学评估，对学生自制实验教具实验应用价值做出针对性分析，以便启动学生自制实验教具行动计划。物理实验需要多种教具，而且有些实验还有特殊要求，学生自制教具也会受到一些客观因素的制约。只有全面评估衡量，才能制订可行的计划。自制物理实验用教具，需要做好规划设计。第一，学习实验内容，探究实验目的，明确实验原理。第二，对实验用教具进行分析比对，找出替代品，或者是根据实验原理创设全新实验方案，确定自制教具范围。第三，圈定自制实验教具范围，筛选材料，设计制作方法。第四，在制作过程中不断修改，在实验过程中验证效果，获得需要的实验效果。例如，“光学”实验中，为弄清阳光是由多重色素组成的，可以设计一个自制实验操作方案：找来洗脸盆，并装半盆水，再找来一面镜子，将水盆放置地面上，然后放置镜子，调整阳光进入水盆的角度，让水盆中镜子的面折射出光柱，学生便可以看到天花板上呈现出七彩彩虹。这个实验需要的教具很简单，操作也比较方便，却能给学生带来丰富的视觉冲击，说明自制实验教具设计是比较成功的。

二、整合自制教具资源，培养学生勤俭意识

实验用教具都是由学校统一配备的，数量有限，而且需要一定的耗材，会给学生开展普遍性实验操作带来一定制约。如果能够发动学生自制一些实验教具，势必能够为学生创设更多实验操作体验的机会，这样也能够培养学生的勤俭节约意识。物理实验对实验教具的要求呈现个性化特征，教师让学生从生活中找寻一些实验材料，不仅能够节约实验操作成本，还能够提高学生的自觉学习意识，对塑造学生物理综合学习能力有重要的现实意义。例如，为证明大气压的存在，教师为学生设计一个自制教具操作的实验：将玻璃杯放在桌面上，向杯子中注入清水，需要灌满水，用一个硬纸片放置在杯口上，用手压住杯口快速翻转杯子，玻璃杯翻转并静止之后轻轻松开压住纸片的手，硬纸片会稳稳贴在杯口，玻璃杯中的水也不会流出来。因为实验用教具很好找，学生都能够获得实验操作体验。经过一番操作，学生对大气压强有了更多的认识。学生对实验的认识往往会存在一些偏差，认为实验只能在实验室内操作。教师可发动学生从生活中寻找实验材料和实验教具，为学生实验学习开阔眼界，使学生的实验学习效率大大提升。

三、拓展自制教具视野，培养学生创新思维

学生自制教具本身就是一种创新实践活动，物理实验对实验教具的需要呈现个性化特征，教师需要为学生做出一些针对性引导，让学生学会利用生活中的一些材料进行科学合理的搭配，或者进行相应的改造，甚至是利用生活废旧材料制作成实验教具，都可以为实验教学带来一定的便利条件。学生在自制实验教具操作中，需要对实验目的、实验内容、实验程序、实验效果等多种因素展开细致分析，以提升实验教具制作的适合性。例如，声音在不同媒介中的传播速度是不一样的，为弄清声音传播原理，教师为学生设计一个自制实验教具的操作活动：在生活中，有很多地方都有声音传播的应用，如铁路维修工通过敲击铁轨就能判断哪一个地方出现了问题，中医号脉其实也是对心脏脉冲的诊断。根据这些原理，同学们自制一种装置，演示一下声音在不同媒介中的传播。学生拿到实验设计之后，纷纷展开小组讨论，并给出多种设计方案，有学生利用身边材料开始了实验操作演示活动。成果展示阶段，学生纷纷展示自制教具，并讲述操作原理。有的学生说：我自制了一个“电话”，这是一根线，有5米长，这是“电话线”，在线的一端穿上一个小纸盒，用铅笔头固定，在线的另一端裹住一个铅笔头。操作时，小纸盒一端为接听方，将纸盒放在耳边，另一端为呼叫方，转动铅笔头，拉紧线段，便有声音传递出现。教师亲自参与自制实验教具操控活动，并对学生自制教具进行客观评价，使学生的学习认知得到有效巩固。

总之，教师发动学生自制实验教具参与实验操作，能够有效激活学生的实验兴趣，并在不断探索的过程中，为学生带来全新的学习认知体验。自制实验教具属于学生自主探讨学习活动，教师要给出必要的引导和帮助，为学生提供更多实验感知机会，全面提高学生的物理素养。

参考文献：

[1]钱晓.自制教具在物理教学过程中的应用[J].物理教师,2014(06).

激活范文篇10

【蛋白酶激活受体；肺上皮细胞；RTPCR；流式细胞术；免疫荧光细胞染色

0引言

蛋白酶激活受体（proteaseactivatedreceptors,PARs）属G蛋白耦联受体家族，目前共发现4个成员摘要：PAR1，PAR2，PAR3，PAR4.蛋白酶可以酶切PAR的N末端，暴露含有系锁配体的新的N末端，可自我激活PAR功能［1］.探究显示，PARs分布在多种组织细胞上，包括血小板、白细胞、肥大细胞、内皮细胞、血管平滑肌细胞、成纤维细胞、消化道上皮细胞等.PAR被激活后，可介导跨膜信号转导从而参和凝血、炎症、变态反应等生理和病理过程的发生［2］.许多组织上皮表达的PARs可能在不同的病理过程中起功能，虽然一些组织的PARs的分布已有探究，但4种PARs在肺上皮的表达情况和功能还不是十分清楚.因此，我们利用培养的人肺癌上皮细胞系A549细胞探索四种PARs在肺上皮细胞上的表达特征.

1材料和方法

1.1材料

人肺癌上皮细胞系A549细胞购自中国科学院上海细胞探究所,青、链霉素、非酶性细胞分离液购于Sigma公司，DMEM培养液、胎牛血清（FBS）购自Gibco公司，TRIZOLReagent购自Invitrogen公司,TAKARALARTPCRkit,购自TAKARA公司，SYBRGreenI核酸凝胶染料购自BMA公司,PCRMarkers购自Biolabs公司.PE标记的小鼠抗人PAR1和PAR2mAb,兔抗人PAR3和兔抗人PAR4多克隆抗体及相应的同型对照均购自SantaCruz公司.FITC标记的羊抗兔IgG二抗购自BDPharmingen公司.PCR仪PTC200购自MJResearch公司，激光扫描共聚焦显微镜系统购自日本Nikon公司，FACSCalibur流式细胞仪购自BectonDickinson公司.

1.2方法

1.2.1细胞培养人肺癌上皮细胞系A549细胞接种于50mL培养瓶内，用DMEM完全培养液（含100g/LFBS，1×105u/L青霉素和100mg/L链霉素），于37℃,50mL/LCO2培养箱中培养.

1.2.2RTPCR收集培养的A549细胞，用TRIZOLReagent提取细胞总RNA，具体操作步骤按试剂说明进行.RNA经10g/L琼脂糖电泳后，按TAKARARTPCRkit说明进行cDNA合成.逆转录的条件为摘要：oligod(T),42℃30min，99℃5min,5℃5min.PAR1，PAR2，PAR3，PAR4和βactin的特异性引物均由上海博亚生物技术有限公司合成.βactin（F）5′AGGGGCCGGACTCGTCATACT3′,（R）5′GGCGGCAACACCATGTACCCT3′，PAR1（F）5′CAGCTCCTGGCTGACACTCTTTGTC3′，（R）5′CGAGCAGGGTTTCATTGAGCACAT3′,PAR2（F）5′GCAGCCTCTCTCTCCTGCAGTGG3′，（R）5′CTGAGGCAGGTCATGAAGAGAATGG3′，PAR3（F）5′GGCTGGACAGGAGCCACGAT3′，（R）5′AGCGGTTGATGCTGATGCAGG3′,PAR4（F）5′GGATCGCCTACCACCTGCGTG3′，（R）5′CCCGTAGCACAGCAGCATGG3′.βactin的PCR扩增条件为摘要：94℃2min,94℃30s,55℃30s,72℃30s,35个循环,72℃10min.PAR1,PAR2,PAR3和PAR4的PCR扩增条件为摘要：94℃2min,94℃30s,67℃30s,72℃1min,35个循环,72℃10min.PAR1,PAR2,PAR3和PAR4扩增的目的片段分别为500,461,403和401bp；βactin的扩增片段为202bp.PCR扩增片段经测序验证.

1.2.3流式细胞术分析待培养细胞生长至70%~80%时，用非酶性细胞分离液悬浮细胞，10g/LBSA/PBS洗2次，调整细胞密度为5×109~1×1010/mL，40g/L多聚甲醛室温固定10min,按说明书分别加入1∶20PE标记的抗PAR1、抗PAR2小鼠抗人mAb、1∶20抗PAR3、抗PAR4兔多克隆抗体及相应的同型对照抗体，4℃避光孵育30min,10g/LBSA/PBS洗2次;PAR3,PAR4管再加入FITC标记的羊抗兔Ig二抗，4℃避光孵育30min,10g/LBSA/PBS洗2次,最后各管均加入500μL1×PBS悬浮细胞，使用流式细胞仪CELLQUEST软件检测和分析上皮细胞PAR的表达情况.

1.2.4免疫荧光细胞染色将A549细胞接种于8孔显微镜玻片培养过夜，用10g/LBSA/PBS漂洗后加入甲醇固定20min,然后用10g/LBSA/PBS孵育5min，加入1∶20的PE标记的抗PAR1、抗PAR2小鼠抗人mAb、抗PAR3、抗PAR4兔多克隆抗体及相应的同型对照抗体，室温避光孵育1h,10g/LBSA/PBS洗3次,PAR3，PAR4管再加入FITC标记的羊抗兔Ig二抗，室温避光孵育1h,10g/LBSA/PBS洗3次,最后用甘油封片，共聚焦显微镜下观察.

2结果

2.1肺上皮细胞PARsmRNA的表达肺上皮细胞表达PAR1，PAR2，PAR3和PAR4的mRNA，扩增PAR1，PAR2，PAR3和PAR4mRNA的长度分别为500,461,403和401bp（Fig1）.

2.2肺上皮细胞PARs蛋白质的表达流式细胞仪检测发现肺上皮细胞表达PAR1，PAR2，PAR3和PAR4，其中PAR4的表达为最强，PAR1和PAR3的表达水平较相似，PAR2的表达水平最弱.免疫荧光细胞染色分析进一步证实上述PARs在肺上皮细胞上的表达（Fig2）.

Fig2ImmunofluorescencestainingofPARsonlungepithelialcells

图2免疫荧光细胞染色分析检测肺上皮细胞PAR的表达

3讨论

PARs家族共有PAR1，PAR2，PAR3和PAR44个成员，凝血酶可激活PAR1、PAR3和PAR4，而PAR2可被胰蛋白酶、肥大细胞类胰蛋白酶和活化的凝血因子Ⅹ所激活［3-5］.另外，这些受体还可被相应的PARs激动肽所激活.其中PAR1是凝血酶的高亲和力受体，而PAR4只能被高浓度凝血酶激活.探究显示，凝血酶通过PAR1和PAR4途径协同互补介导血小板的活化，而PAR3作为PAR4的辅助因子，在血小板活化中也起着一定功能［6］，除参和凝血外，多种细胞类型PARs的广泛激活还可参和血管损伤反应［7,8］.PAR2的激活可参和细胞因子及炎症介质的释放,增加微血管的渗出以及中性粒细胞的趋化,血管扩张,血管收缩,细胞增殖等炎症的病理过程.此外，在不同的生理和病理条件下，体内不同的内源性蛋白酶的存在，可能会激活同一细胞上的PAR2.

我们利用RTPCR、流式细胞仪和免疫荧光细胞染色分析技术检测到了4种PARs在肺上皮细胞上的表达.肺上皮细胞作为首先接触吸入性抗原的组织细胞之一，在变态反应性疾病的发病机制中起重要功能，它能够合成和释放许多前炎症细胞因子和趋化性细胞因子，包括IL1，IL6，IL8，GMCSF，MIP，RANTES和eotaxin等［3,9］，还可以合成抗炎因子如PGE2和NO［10］.通过这些因子的功能来募集、激活炎症性细胞从而调节机体的炎症过程，尤其是PAR2的激活可多方面参和肺部炎症的发生和发展.我们也曾经用胰蛋白酶和PAR2激动肽激活肺上皮细胞，诱导其产生了趋化性细胞因子MCP1［11］，但其释放的机制及肺上皮细胞表达PARs的生理和病理生理意义还有待进一步的探索.

【参考文献

［1］De′ryO,CorveraCU,SteinhoffM,etal.Proteinaseactivatedreceptors摘要:Novelmechanismsofsignalingbyserineproteases［J］.AmJPhysiol,1998；274（6Pt1）摘要:C1429-C1452.

［2］OssovskayaVS,BunnettNW.Proteaseactivatedreceptors摘要:Contributiontophysiologyanddisease［J］.PhysiolRev,2004；84(2)摘要:579-621.

［3］AsokananthanN,GrahamPT,FinkJ,etal.Activationofproteaseactivatedreceptor(PAR)1,PAR2,andPAR4stimulatesIL6,IL8,andprostaglandinE2releasefromhumanrespiratoryepithelialcells［J］.JImmunol,2002；168（7）摘要:3577-3585.

［4］HeS,AslamA,GacaMD,etal.Inhibitorsoftryptaseasmastcellstabilizingagentsinthehumanairways摘要:Effectsoftryptaseandotheragonistsofproteinaseactivatedreceptor2onhistaminerelease［J］.JPharmacolExpTher,2004；309(1)摘要:119-126.

［5］OBrienPJ,MolinoM,KahnM,etal.Proteaseactivatedreceptors摘要:Themeandvariations［J］.Oncogene,2001;20（13）摘要:1570-1581.

［6］MacfarlaneSR,SeatterMJ,KANKET,etal.ProteinaseActivatedReceptors［J］.PharmacolRev,2001；53(2)摘要:245-282.

［7］CoughlinSR.Proteaseactivatedreceptorsinvascularbiology［J］.ThrombHaemost,2001；86(1)摘要:298-307.

［8］GriffinCT,SrinivasanY,ZhengYW,etal.Aroleforthrombinreceptorsignalinginendothelialcellsduringembryonicdevelopment［J］.Science,2001；293(5535)摘要:1666-1670.

［9］StellatoC,BeckLA,GorgoneGA,etal.ExpressionofthechemokineRANTESbyahumanbronchialepithelialcellline摘要:Modulationbycytokinesandglucocorticoids［J］.JImmunol,1995；155(1)摘要:410-418.