五大陆游记范文

导语：如何才能写好一篇五大陆游记，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公文云整理的十篇范文，供你借鉴。

篇1

Wild Parrots of Telegraph Hill

特利格拉夫山的野鹦鹉(2003)

Filmmaker Judy Irving looks in on the life of down-and-out[穷困潦倒的] musician Mark Bittner

who lives on San Francisco’s Telegraph Hill. There, he enters into communication and

communion[交流] with a flock[群] of some 50 wild parrots, who have distinctive personalities and eventually change his outlook[见解] on life. You will love this heartwarming film.

电影制片人

朱迪・欧文带我们走进落魄音乐家马克・比特讷的生活。比特讷住在(美国)旧金山的特利格拉夫山。在那里,他和50只野鹦鹉建立了融洽的关系,互相交流,而这些各具个性的鹦鹉最终改变了他的人生观。你会爱上这部感人的电影。

Arctic Tale北极传说(2007)

Arctic Tale gives you close-up and unforgettable profiles[简介] of Nanu, a polar bear cub[幼兽], and Seelu, a seal pup[幼畜], as they struggle to survive changing environmental conditions that threaten their habitat[栖息地] and their lives. With these lovable animals

leading the way, the film swims directly and deeply into disturbing environmental

issues[问题] global warming, pollution,

and, most especially, the shrinking

arctic ice.

《北极传说》为你近距离地描述了北极熊幼熊娜努和小海豹希努的难忘故事――不断变化的自然环境威胁着它们的栖息地和生命,它们要在这种环境中求生。在这两只可爱的小动物的带领下,电影直接而深入地探讨了令人不安的环境问题――全球变暖、污染,尤其是北极冰层的不断缩减。

Grizzly Man 灰熊人(2005)

In October 2003, grizzly bear activists[积极分子]

Timothy Treadwell and Amie Huguenard were killed by the Alaskan bears they’d been following and studying.

Famed director Werner Herzog uses the pair’s

archival[档案的] footage[电影胶片] plus interviews with their friends, family, colleagues and bear experts to

examine their lifestyle, motivation and experiences.

The film is a fascinating study of human interaction[相互作用]

with wild animals, and the footage of the bears is

absolutely phenomenal[出众的].

2003年10月,灰熊保护积极分子蒂莫西・崔德威尔和阿米・于格纳尔被他们一直追踪研究的阿拉斯加熊杀死。著名导演沃纳・赫尔佐格通过两人的影像档案资料,加上对其朋友、家人、同僚和灰熊专家的访问,回溯了他们的生活方式、动力和经历。这是一部研究人与野生动物互动的佳作,灰熊的影像片段更是意义非凡。

Winged Migration

鸟与梦飞行

(一译《迁徙的鸟》)(2001)

French directors Jacques Perrin and Jacques Cluzaud and their crew of 500 people spent four years and spanned the globe to capture the beautiful images of various species of migrating birds as they fly thousands of miles twice annually[一年一次] in search of food. An amazing cinematic[电影的] achievement.

法国导演雅克・贝汉和雅克・

克鲁奥德连同500名工作人员花了4年时间踏遍整个地球,捕捉到各种候鸟每年两次飞行数千英里寻找食物的美丽画面。这是一个无与伦比的电影成就。

Wolves: A Legend Returns to Yellowstone

狼族:重返黄石公园(2007)

Wolves, so often m aligned[诽谤] in legend, have been hunted and slaughtered[屠杀] almost to the point of[达到……的程度]

extinction. They are still on the endangered species list, but these fascinating creatures are making a comeback in

Yellowstone. This is their story, and it’s a great one!

狼在传说中经常被人中伤。它们一直被捕猎和大量屠杀,濒临绝种边缘。虽然它们仍然被列入濒危物种名单,但这些神奇的生物逐步重返(美国)黄石公园。这是它们的故事,一个伟大的故事!

March of the Penguins

帝企鹅日记(2005)

March of the Penguins takes you into the harsh environment of Antarctica, where Emperor Penguins gather annually to go through their rituals[仪式] of building their nests, finding mates and propagating[繁殖]

their species[物种]. They endure amazing hardships. And, as this film shows, they may be cute, but

penguins are truly tough birds.

《帝企鹅日记》带你走进南极洲严酷的环境。在那里,帝企鹅每年都要进行筑巢、寻找伴侣和繁衍后代等一系列“仪式”,历尽艰辛。另外,正如电影向人们展示的那样,虽然企鹅很可爱,但它们其实很能吃苦。

相关链接

2008年4月21日,迪士尼公司特别选在世界地球日的前一天宣布公司新品牌“迪士尼自然”(Disneynature)成立。迪士尼将在这个品牌下制作高品质的自然电影纪录片。作为迪士尼家族的新成员,“迪士尼自然”把视角对准我们赖以生存的这个星球,同时依托迪士尼的强大商业平台(媒体、出版物、授权产品、主题公园和教育机构等)向人们宣扬环保理念。

打头阵的是全境展现地球胜景的纪录片《地球》(Earth),已于2009年的世界地球日(4月22日)推出。

篇2

关键词：优秀财务；经营团队；研究分析

一、前言

集团企业财务团队担负着筹资、投资、价值分配、资源优化等职能，对资产保质增值提供经营决策依据，对集团的稳定快速发展起着保驾护航的作用。特别在当今市场发展，同行竞争时代，要求财务团队比传统部门结构或其他形式的群体更灵活、更快速，特别是需要积累多种技能、经验、知识来保障，通过成员的优势互补，融汇一体，从而预测企业经营发展更精准，防范风险更严密，内控更有效，组织目标方案更科学实用，因此集团企业健康快速发展离不开优秀财务团队保驾护航。

二、集团企业财务团队现状

我国多数大型企业集团在成长起来后在10―15年内昙花一现就消失成为业界的笑柄，如巨人集团、湛大饲料集团等企业除了与集团经营管理不善，还因资金链断裂导致企业倒闭，与财务团队建设保障出现问题，没有快速提供决策信息依据，导致企业很快结束生命，因此打造一支优秀的财务团队对集团企业快速健康发展至关重要，特别是新型快速发展的大中型集团企业财务团队决定着其生存命运。如我国新希望、通威、海大等集团企业的财务团队都非常优秀，对财务管理更专业、更精湛、风险防范更谨慎，为经营提供信息更可靠，并参与经营决策。因此必须建设一支作风优良、纪律严谨、业务专业、服务到位、保障有力的财务团队支撑集团企业快速发展。

三、打造集团优秀财务经营团的措施

伴随我国农牧业集约化、标准化、规模化发展起来的中大型农牧集团企业“正邦集团”：2012年实现产值260亿元，分子公司300家，员工3万人，主营饲料、养殖、兽药、牛奶、农药、食品、粮油、林业、金融等九大产业。正邦集团从96年一个20多人的畜禽饲料厂在十多年时间发展成巨型民营集团企业，经营产业跨度广、地域分布辽阔，除了有一支优秀的经营管理领导团队外，还与建设了一支800多人的优秀财务团队密不可分。通过分析研究正邦集团快速发展及财务人才资源的作用，重点从以下方面实施集团优秀财务队伍的建设措施。

1.财务人才的引进选聘：财务专业人才是财务团队的基础，为打造优秀团队奠定坚实基础。结合正邦的特点主要从如下渠道引进选聘：

（1）企业内部选拔培养：在现有财务人员中，对认同企业文化，忠诚敬业，对企业、社会有责任感，具有开拓创新、奉献精神，具有大专学历、会计师以上职称或有财务专长的财务人员进行职业规划，由现有分（子）公司从专业知识、后续教育、经营管理等方面进行定向培养，经考核合格后推荐到其他分（子）公司主持财务工作。

（2）学校选拔招聘：每年从财经院校引进财务、会计、审计、金融等优秀本科生（贫困省市农村出身优先），招进后分配到各分（子）公司制定详细的培养计划，从仓管、内勤、收款、销售会计、资产会计、主办会计、财务经理进行培养。

（3）社会公开招聘引进：引进有3-5年工作经验的优秀会计人员，最好是农牧企业，有沟通能力，对社会、企业有责任感的财务人员，招进后派到大公司并交给有培养经验的财务经理培养。

（4）从外部企业挖取：从中大型企业招聘5-10年以上财务主管经验的财务经理或财务总监，有中高级会计师以上职称、沟通协调能力较强，认同集团文化，具有开拓进取精神的财务干部，挖进后派到集团或事业部财务部工作3个月左右，完成一定专项工作后直接调入（分）子公司主持财务工作或担任区域财务总监工作。

2.打造团队持续学习力：财务行业是需要不断学习不断实践的组织，国际经济环境的全球化，会计准则的国际化，国家财经政策与时俱变，高科技信息办公全面应用，可见要建设优秀的财务团队学习是非常关键的，只有团队成员通过学习，技能、知识、智慧提高了，财务团队的战斗力才能不断提升，才能公司创造出更多的服务价值。

集团要创造多种多样的学习机会，如通过参加月度财务会议交流培训获取实践与理论知识，通过与先进集团企业财务人员相互交流获取实战经验， 通过财务总监在工作中的传帮带使团队成员学习业务技能等，不断提升综合经营管理水平，实现知识积累并与时更新。

3.强调团队执行力：知识技能是基础，最终要落实到执行力，需要每个人都要具有强烈的责任心和事业心，对于团队精心制定的工作计划、制度要不折不扣、坚定不移地贯彻执行，对于每一个运作细节和项目流程都要落到实处。

要保证团队的执行力，关键要在执行中“三定一落实”，即订时间、订任务、订措施并落实到责任人，这是按质按量完成任务的关键，也是保证执行力的关键。如团队在执行“ERP项目月结账”的任务，要明确单据审核时间、采购发票、销售发票钩稽时间，其它出入库单据的审核检查、盘点工作完成时间等，并定时检查、考核并与绩效挂钩，使执行效果更贴近目标，执行结果也有保障，不会出现工作不能及时完成的现象。在工作中可以采用“财务工作完成进度报告”的方式将日常工作明确到每位财务人员，在规定期间必须完成，从而保障财务团队的执行力。

4.培养团队创新力：只有不断创新才能保持企业竞争优势，只有创新才能不断提升团队服务价值，创新能力从哪里来？只有非常熟悉流程、工艺、供应、销售等环节才能不断创新，因此教育培训是提高创新能力的重要手段，尤其在不断发展壮大的企业体现得更为明显，在实践中可采用每周、每月不定时进行业务知识培训，包括做人、做事、沟通服务技巧、公关妙计、会计核算技能等培训，不断提高财务团队的整体服务素质。

在工作中对财务流程进行优化，通过核算流程优化，如资产、成本会计合并可提高工作效率减少核对工作量，启用现金系统可减轻出纳记账工作；利用财务软件批量运算功能对报表进行提取数据，提高了编制报表的工作效率和质量；将分子公司的财务会计报表和管理会计报表设计成标准表可以提高集团合并报表和经营分析效率，利用报表的钩稽关系自动核对可减轻财务审核工作量，通过财务团队的不断努力，通过创新提高自身服务效率。

其实创新能力是一个综合概念，也只有综合性的创新才是真正的具有竞争优势的能力。人才培养要重视知识技能方面，还要注重企业文化、队伍的凝聚力和团队精神的培养。只有这样才能持续保持团队整体创新优势。集团制度有创新项目激励机制，对有突出创新项目按创造价值总额的20%对团队人员进行奖励。

5.团队分工与合作：如果没有明确的分工则财务人员就不知道自身的工作任务，要承担的工作责任，也就谈不上合作，且财务团队对一些岗位就有特殊的要求，如职务不相容原则，内部控制等等。因此要建立一个团队首先就得进行科学分工。

传统的分工是流水作业，如财务人员负责验收录入后，传递到另一位财务人员统计汇总，再传递到下一人员进行成本核算，最终进行报表的编制与传送。这样分工明确、能促进整体合作。但职责不明确，容易造成数据准确性差。其实可对分工方式进行重新定位，即采用并联的工作方式，将财务岗位分为：财务经理、主办会计、资产管理会计、销售会计、出纳等。这样进一步明确各岗位会计人员职责和权限，由多个部门单独核算后合并汇总，提高了数据的准确性，保障了财务工作效率。

要在分工的基础上强调团队合作，首先要加强财务人员的合作意识，使他们懂得财务工作是整体性工作，特别是运用ERP系统的公司协同作战更关键，任何一个人员的工作不到位都会影响团队的工作效率，其次要营造良好的工作氛围，形成相互协作的作风，最后财务经理人应不断指导下属如何进行合作，只有既有分工也有合作的团队才具有战斗力。

6.建立团队共同愿景 ：愿景是指经过努力能达到的目标，有意义的目标能激发团队成员的热情、耐心及接受挑战的意愿。这包括共同愿景和个人愿景，所有团队成员对共同愿景有自己感情上的联系，也有个人利益的联系。即一个共同愿景能把团队成员的个人愿景和团队共同愿景结合在一起。在工作中只有个人愿望是不够的，还要有共同的愿望，一起进行深入思考，从而建立团队的共同愿景，并为之不懈努力。从某种意义上讲建立共同愿景的过程，就是成员讨论和交流的过程，因此建立起共同愿景，这是提高团队凝聚力的最佳途径。

7.科学的绩效考核：财务团队要高效、务实完成组织交给的任务，就必须建立责、权、利相统一的考核分配机制，团队成员及企业还不可能达到按需分配和无偿奉献的地步，团队出色完成了企业交给的任务后，企业会给予一定的绩效奖金，如年终绩效奖，项目奖，特殊贡献奖等，团队再根据岗位的职责、工作质量、敬业精神、工作效果，设计成可量化的指标按权重按月或按项目进行考核量分，根据绩效考核按比例进行科学合理的分配。可以提职或加薪，对业绩突出、综合管理能力强、有领导能力的员工创造条件让他们到更高层岗位工作，承担更多的责任，更好地为组织服务，创造更多的价值，同时自己也得到不断成长。

特别对团队作业项目作出突出贡献的人员，如ERP项目建设、特殊税收政策的争取，对有功人员要提高特殊贡献奖励比例，从精神上物质上加大对成员的激励，从而形成积极向上的氛围，不断创造最佳业绩，从而为整个企业的发展提供优质高效的服务价值。

四、对打造集团优秀财务团队的建议

1.财务人才选聘：结合集团企业的特点引进选聘优秀财务人员，从专业院校选择适合产业特点，认同企业文化有责任感的财务本科生从基层培养，成为未来的核心力量；从同行业引进有3-5年工作经验认同企业文化的优秀财务人员进行培训聘用，成为集团财务的中坚力量；从中大型企业引进优秀的、认同企业文化的高层财务管理人员，成为集团优秀财务管理人员。

2.财务团队的持续学习，普通财务人员每月参加片区会议，以会代训，提高其会计核算、监管、服务水平。事业部财务总监到重点大学，读工商管理，学习财务知识以及生产、营销、税务、贸易、金融等综合经营管理知识，不断更新财务知识及管理技能。集团财务总监定期到行业大型集团企业观摩交流先进的实战管理技能。

3.财务团队的创新力，对集团经营管理流程不断深入学习，对先进管理软件及电子技术的应用研发，不断提升会计核算和数据分析应用水平，沿着简化流程，提升效率，节约人力等方面创新财务核算和分析水平。

4.强调团队执行力，对财务工作时间及内容特殊性要求，要“三定一落实”，既定时间、定任务、定措施并落实到责任人，定期检查，如报表编制准确度，完成时间，报送时间，责任人，要非常明确，按时完成，明确集团层级按时执行完成。

5.团队合作及分工，财务部要保证执行力，总部、事业部、子公司各级财务人员必须既分工又合作，在规定时间，各司其职能。按时完成核算、汇总、分析等工作，配合集团财务的合并汇总分析工作。

6.建立团队共同愿景：财务团队要设立共同的愿景目标，通过自身的努力实现各自的目标促进整个财务团队目标实现，如事业部对资金的集中管理，加速资金周转降低资金定额，最终实现全集团年节约财务费用***万元的目标。通过财务软件的开发应用，提高工作效率，节约财务人员，全年可节约财务人员工资***万元。

7.财务团队要有科学绩效的考核，财务团队要根据其职能建立绩效考核指标，不同层级财务组织或人员要根据不同时期、不同职能分解成月度，季度，年度绩效考核指标，并与工资挂钩，从而激发大家的工作热情，提升财务团队的绩效水平。

打造优秀的集团财务团队是一项持续永恒的工作。需要各位财务总监不断加强自身学习与团队的建设，通过大家的不懈努力建设一支财务技术过硬、服务高效、内控有力的财务团队，为中大型企业的持续、稳定、健康、快速发展当家理财保驾护航核心团队。

参考文献：

[1]刘大卫：人力资源管理案例精选，上海交大出版社. 2010年.

篇3

关键词:跨既有铁路线 封闭绝缘挂篮 设计

1工程概况

新建天津至秦皇岛铁路客运专线下坞蓟运河特大桥D段跨津山铁路连续梁，起讫里程DK87+928.54～DK88+150.24，为一座一联三跨(60m＋100m＋60m）连续梁桥,墩位编号559#～562#。主跨100m斜跨既有津山线津山铁路上下行，交汇处既有津山线里程约为JSK226+305，桥梁中心线与津山铁路的夹角20.42°。上部梁体施工时，施工影响区域内封闭式挂篮底与铁路轨顶最小净空不足8m,距接触网承力索最小净空不足1m。如下图所示：

2总体施工方案及总体布置

2.1总体施工方案

箱梁施工，特别是中跨箱梁施工是本段跨既有津山铁路施工的控制点。如何在行车不中断的条件下，保证行车和施工安全，是本段施工的重点和难点。对于中跨箱梁跨线

悬浇施工的安全防护，在对棚架防护普通挂

篮法和封闭式挂篮法进行方案比选，结合以往跨线施工的成功经验，决定采用封闭式挂篮悬浇法施工，以防施工物件掉落，确保行车安全。所谓封闭式挂篮，即在普通挂篮的基础上，采用型钢结合彩钢板(型钢及特制绝缘不透水材料)对普通挂篮底模平台的前端和两侧进行封闭，同时在相应位置挂设安全网（从主桁所在平面开始往下挂设安全密目网），底部为防止接触网高压对挂篮产生感应电势和放电，满布6mm厚环氧树脂绝缘板并可靠接地（通过型钢过渡并满铺3mm钢板，并在其上通过特殊工艺涂刷特制绝缘不透水材料），以使挂篮具备防坠物和防触电功能。封闭式挂篮底至梁底建筑高度按1.10m（含挂篮滑移时降落空间）设计。相比棚架防护普通挂篮法，封闭式挂篮法的最大特点是不破坏原有铁路路基、亦不影响行车，非常适合本段跨既有津山线箱梁施工。

2.2 施工总体步骤

调查了解施工范围内地下管线和接触网、自闭贯通线改移地下管线和接触网、自闭贯通线及防护栏设立施工警戒线插打津山线路基侧钢板桩支护施工钻孔桩插打基坑防护钢板桩开挖承台基坑、施工承台回填基坑拔除钢板桩（靠既有津山线路侧不拔除）墩身施工封闭式挂篮法连续箱梁施工拆除连续箱梁挂篮拆除防护警戒设施恢复原地貌。

3封闭绝缘挂篮细部设计与安装

3.1 跨既有线施工安全要求

连续梁施工跨越铁路既有高压线时，由于施工挂篮距离高压线都比较近，很容易造成人员触电和线路短路的问题。

连续梁施工跨越既有线时，必须满足以下安全要求：

（1）、不允许由于施工安全防护不够的原因引起人员触电；

（2）、不允许由于施工设施绝缘不好的原因引起线路短路；

（3）、不允许在施工时往铁路线路上跌路物品；

（4）、不允许在施工时往铁路线路上漏水。

3.2 挂篮施工时可能出现的安全隐患

（1）、施工挂篮一般距离铁路既有线距离都比较近，很容易产生高压电线对挂篮之间的空气击穿，挂篮钢结构又有许多尖角和钢铁毛刺，即使距离较远，也可能产生电气尖

端放电，这样势必会造成挂篮带电和线路短路；

（2）、施工挂篮距离既有线距离较近时，由于既有线的周围有很强的电磁场，在施工挂篮上就会产生感应电压，当这种电压超过安全电压（50V）时，就会危及施工人员的生命安全；

（3）、施工挂篮底托的横梁和纵梁都是镂空连接，中间空隙很大，在施工时很容易掉落物品，当有列车行驶时安全隐患很大；当浇筑混凝土和天气下雨时都会往下流水，当这种流水形成线时，一旦和既有线通接，就会出现线路短路，挂篮带电造成人员触电。

3.3 封闭绝缘挂篮的设计

中跨梁段施工时，为保证既有铁路行车与人身安全，须在普通平弦式挂篮的基础上安装封闭、绝缘系统。本挂篮封闭系统、绝缘系统的设计，遵循“结构安全、封闭到位、绝缘有效”的原则。

3.3.1.封闭系统设计

封闭系统分底面和立面两大部分（如图1、图2）。具体措施如下：

（1）、底面封闭措施

挂篮底面包括底模平台和前操作平台,封闭方法是在底面空隙区域满铺3mm厚花纹钢板，以保证其刚度满足坠物打击或人员行走等工况要求。

底模平台包括底板部分、翼缘板部分两个区域。其中底板部分因底模是一个完整的平台，其本身无需再安装封闭设施，只需做好与前操作平台的搭接即可。翼缘板部分在封闭前，先将其上的焊接分配梁，再满铺花纹钢板。

前操作平台在封闭前，先对其进行改制，设置悬臂梁并与底模纵梁焊接，以利立面后期封闭栏杆和绝缘系统的设置，满足前操作平台的活动空间和受力要求。改制完成后再在上面满铺花纹钢板。

（2）、立面封闭措施

挂篮立面包括前端面、左右侧面、后端面（翼缘区域）共三部分。挂篮立面封闭方法是：在挂篮底模平台四周设置角钢桁架围栏，在其内侧铆钉彩钢板，并与挂篮前后上横梁绑扣密目安全网。

3.3.2.绝缘系统设计

（1）、在施工使用的挂篮底部用3mm厚的钢板与横梁、纵梁焊接在一起，横梁上面焊接的钢板需要将钢板做成U形，尺寸根据横梁的尺寸确定，与横梁紧贴焊接，这样就形成了一个相对的平板电极，能够均匀的接受来自既有线的电场冲击；当钢板焊接完成后在钢板的背面进行防水处理，这样就可以解决漏水和落物的问题（在钢板的焊接时，不能把钢板焊穿；在钢板焊接成型后，在钢板的表面不能有尖角、毛刺，如果有，应该用砂轮打磨平整，圆滑；因为钢板上要承载很大的重量，焊点要求不能虚焊）。

（2）、在钢板焊接形成的电极对既有线的一面制作绝缘层，采用绝缘树脂，加专用固化剂、活性稀释剂、白碳黑、消泡剂，采用树脂配合无碱玻璃丝布施工的方法，直至达到要求的绝缘厚度，这样就可以避免产生电气空气击穿和拉弧。在制作绝缘树脂层时要求要搭建临时施工棚，在施工棚内加温，要求温度达到20℃，满足绝缘树脂的固化条件；把需要制作绝缘树脂部位的钢板打磨除锈，进行酸洗，磷化，钝化；为了使绝缘树脂和钢板更好的结合，底涂采用固体绝缘树脂，加活性稀释剂，加固化剂，在钢板的表面刷上1mm厚的混合绝缘树脂，需要室温固化12小时）；在挂篮四周护栏上装上绝缘板，防止人员头、手和施工物品外露，进一步保证施工人员的安全。

（3）、制作一个接地电极，深埋于地下，进行降阻处理（要求接地电阻小于4欧姆），用接地钢带将挂篮和钢板电极焊接在一起，保证良好的接地，形成挂篮对地零电位，这

样就解决了感应电压形成的安全隐患问题。

（4）、设计制作一套电压在线监测系统和自动报警系统，适时了解钢板电极上所承载的电压，当电极的电压超过安全电压时，监测系统自动反馈到报警系统，形成声、光同时报警，能够让施工人员及时采取保护措施，进一步保证施工的安全。

这样就形成了一套安全的防护系统，能够极大的提高施工效率，即能满足铁路安全部门的安全要求，又能保证施工人员的生命安全和铁路的正常运行。

3.3.3.封闭、绝缘系统安装

0#块浇筑完成后，先吊装挂篮走行轨道、走行支腿和主梁，安装后锚固，吊装前后上横梁。在1'#块梁底对应位置拼装挂篮底模平台、安装底模，再通过千斤顶、钢绞线、导链等设备将底模平台系统提升至距地面约1.50m，焊接绝缘系统的角钢附着架，改制前操作平台，安装附着架底面绝缘板，铺设封闭花纹钢板，再将底模平台整体提升至设计位置，挂篮侧模滑移到位，最后焊接立面栏杆，安装立面绝缘板、彩钢板，绑扣密目安全网，形成完整的封闭绝缘体系。

4结语

篇4

【摘要】

目的 应用生物信息学分析软件预测细粒棘球蚴中国大陆株铁蛋白（Eg. ferritin）氨基酸序列的结构与功能。方法 利用DNAman、NCBI/BLAST公共数据库对目的基因的同源性进行比较分析。应用DNAstar、Biosun 等生物分析软件对铁蛋白的二级结构、抗原表位进行预测分析，应用SWISSMODEL对蛋白的三维结构进行模拟。结果 检索Eg. ferritin氨基酸序列在其功能区的130AA内同源性为97.7%。不同生物间的同源性平均达40.79%。生物软件预测：Eg. ferritin的分子量约16.7 kD，含非极性氨基酸68个，预测其抗原表位肽段为7N-12E，36H -43V， 55S-62H， 69Q-76R， 82A-89E， 102I-107E， 117A -124S，129L-136T。结论 Eg. ferritin的结构和功能及其抗原表位的预测对选取有价值的抗原肽段提供了依据。

【关键词】 细粒棘球蚴中国大陆株；铁蛋白；生物信息学；预测分析

Abstract: Objective To predict the structure and function of Eg.ferritin using bioinformatics method. Methods Homology of ferritin gene was analyzed Using DNAman and NCBI/BLAST database and second structure and antigen peptide of Eg.ferritin and imitate 3D structure of Eg.ferritin was predicted using DNAstar， Biosun et.al. biological softwares to. Results Deduced ferritin amino acid sequence homology was 97.7% in the 130AA and average homology of different species was 40.79% with the published ferritin gene. And it had 68 nonpolar amino acids and had 9 antigen peptide such as 7N-12E， 36H -43V， 55S-62H， 69Q-76R， 82A-89E， 102I-107E， 117A-124S， 129L-136T. Conclusions Using softwares to predict Eg.ferritin structure and antigen peptide can provide some theoretical bases for selecting some valuable antigen peptides.

Key words： echinococcus granulosus；ferritin；bioinformatics；predicting analysis

铁蛋白（ferritin) 是普遍存在于生物体内的一种保守性较高的多功能多亚基蛋白，它不仅调节体内铁的含量，而且在抵抗氧化损害、调节细胞增殖及机体的免疫反应等方面发挥了重要作用［1-4］。据此推断铁蛋白在寄生虫的生理代谢活动中担负着十分重要的作用，因此，它也成为各种寄生虫疫苗研究中备受关注的候选分子。本文通过生物信息学方法预测细粒棘球蚴中国大陆株铁蛋白（Eg. ferritin）氨基酸序列的结构与功能，为进一步研究其生物学功能提供线索，为其在肝包虫的诊断、药物研发和疫苗筛选方面提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

Eg. ferritin基因由本实验室通过RT-PCR成功扩增，其它寄生虫ferritin氨基酸序列源自GenBank。

1.2 方法

通过DNAman、DNAstar对重组基因序列进行分析并推算出其编码的氨基酸序列。通过NCBI、BLAST在线软件将Eg. ferritin cDNA序列与同源性较高的其它动物ferritin基因序列进行同源性分析。通过蛋白质分析软件Biosun和DNAStar将肽链的二级结构（secondary structure）、亲水性参数（hydrophilicity）、抗原性参数（antigenicity）、可塑性参数（flexibility）、表面可能性（Surface Probability）等5种参数综合进行抗原表位的预测。

2 结果

2.1 Eg. ferritin基因开放阅读框基因序列

DNAman 软件对测序后的铁蛋白基因序列进行分析，测序结果表明该基因开放阅读框为435bp，基因序列，见图1。

2.2 Eg. ferritin氨基酸序列的同源性分析

NCBI/Genbank/BLAST进行氨基酸序列的比较分析结果表明，推导的铁蛋白氨基酸序列是由145个氨基酸残基组成，与已知Genbank中ferritin氨基酸序列比较，并且在其功能区内的130AA同源性达97.7%。有三处氨基酸残基 (阴影加黑标记) 与发表序列存在差异，见图2。

用DNAman 对不同生物的铁蛋白氨基酸序列进行同源性分析，其中与牛带绦虫(Taenia saginata)、日本血吸虫(Schistosoma japonicum)、人铁蛋白H链、曼氏血吸虫(Schistosoma mansion)和肝片虫(Fasciola hepatica)的ferritin平均同源性达40.79%。图3（见封2）中黑色标记区域同源性达100%，粉色为75%，绿色为50%，黄色为33%。

2.3 Eg. ferritin二级结构的预测和蛋白三维结构的模拟

Biosun软件对蛋白二级结构的预测发现二级结构中α螺旋水平较高，而且该Eg. ferritin在真核及原核生物中未发现信号序列酶切位点，也未发现穿膜结构域（图4）。DANstar 对Eg. ferritin的氨基酸序列进行预测，见表1。表1 Eg.ferritin所含氨基酸种类（略）

DNAstar和Biosun软件对Eg. ferritin亲水性参数、可塑性参数以及抗原表位肽段进行预测，两种软件的预测结果基本符合，见表2、3。表2 Eg. ferritin中20种氨基酸可塑性参数（略）表3 Eg.ferriti抗原肽段的预测（略）

3 讨论

随着基因组和功能基因组研究的深入，生物信息学理论和方法也得到了迅猛发展和广泛应用。利用生物信息学方法对蛋白的二级及三级结构进行分析和模拟是一种快捷有效的方法［5-6］。本实验室于2006年成功克隆出细粒棘球蚴中国大陆株Eg. ferritin［7］并注册到GenBank。经DNAman软件对本室扩增的Eg. ferritin基因序列进行分析，发现该序列与互联网上检索序列(肯尼亚株)有所不同：检索的基因序列为522bp，而我们得到的基因序列长度为562bp，并推导出其包含145AA。在NCBI/BLAST公共数据库中氨基酸序列在130AA内同源性达97.7%。Thompson研究认为细粒棘球绦虫在长期的演化过程中会引起遗传基因的改变［8］，据此我们考虑该基因可能是我国细粒棘球蚴虫株特有的，有望作为预防当地包虫病疫苗的候选基因，可能在虫株的鉴别诊断上也有一定的应用价值。

利用DNAman等生物学软件推导铁蛋白的氨基酸序列，预测其蛋白质二级结构和抗原表位，以及模拟其三级结构。经软件分析的结果来看，铁蛋白是生物体中的一个保守性很高的蛋白，并在长期进化过程中被保留下来，其具有的相同氨基酸序列，可能是影响整个铁蛋白功能的核心区即功能域；DNAstar，Biosun对其二级结构进行了预测，结构显示在Eg.ferritin中α螺旋水平较高，说明该蛋白的柔韧性和弹性较好，具有较好的稳定性，在真核及原核生物中未发现信号序列的酶切位点和跨膜结构域，并且两软件对铁蛋白抗原肽段的预测结果基本一致，提高了预测的可靠性。这些区域和结构的确认为铁蛋白功能的进一步探索提供了一定的参考资料，并且为后续选取Eg. ferritin中有抗原价值的肽段，制备多肽段联合疫苗提供了一种可借鉴的手段。

参考文献

［1］Wang QL， Kong B， Huang HQ， et al. Progress in Structural and Functional Study of Nanometer Protein Shell of the ferritin［J］. Progress in Chemistry， 2004， 16(4):516-519.

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［4］Theil EC. ferritin:at the crossroads of iron and oxygen metabolism ［J］. J Nutr， 2003， 5（Suppl1）：49-53.

［5］王键，师志云，赵巍，等.宁夏人细粒棘球蚴重组延伸因之－1重组蛋白特性分析及抗原表位预测［J］.中国药学杂志，2008，43（9）：654-657.

［6］棘怀庆，雄英，赵巍，等.细粒棘球蚴中国大陆株谷胱甘肽S-转移酶结构与功能的生物信息学分析［J］. 宁夏医科大学学报，2009，31（2）：150-153.