咏柳的意思范文

时间:2023-03-31 12:13:25

导语:如何才能写好一篇咏柳的意思,这就需要搜集整理更多的资料和文献,欢迎阅读由公文云整理的十篇范文,供你借鉴。

篇1

1、《咏柳》是盛唐诗人贺知章写的一首七言绝句。诗句译文:高高的柳树长满了翠绿的新叶,轻柔的柳枝垂下来,就像万条轻轻飘动的绿色丝带。这细细的嫩叶是谁的巧手裁剪出来的呢?原来是那二月里温暖的春风,它就像一把灵巧的剪刀。

2、原文为:碧玉妆成一树高,万条垂下绿丝绦。 不知细叶谁裁出,二月春风似剪刀。

3、这首诗是一首咏物诗。诗的前两句连用两个新美的喻象,描绘春柳的勃勃生气,葱翠袅娜;后两句更别出心裁地把春风比喻为“剪刀”,将视之无形不可捉摸的“春风”形象地表现出来,不仅立意新奇,而且饱含韵味。

(来源:文章屋网 )

篇2

[关键词] 急性胰腺炎;TNF-α

[中图分类号] R657.5 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2014)07-0159-02

急性胰腺炎(acute pancreatitis)是临床上的急腹症,其发病机制目前尚不明确。自从1988年Rinderknecht提出了白细胞过度激活学说[1]后,细胞因子在急性胰腺炎发病机制中的作用逐渐被重视,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)作为急性胰腺炎始动因子的作用已经得到证实[2]。现就促炎性细胞因子TNF-α在急性胰腺炎中的作用综述如下。

1 肿瘤坏死因子

1.1 TNF-α的产生

1975 年Carswell等发现了能使荷瘤鼠肿瘤发生出血、 坏死而对正常组织细胞无明显作用的肿瘤细胞毒因子,Old将其命名为肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor TNF)。TNF主要分为由活化T细胞产生的 TNF-β和活化的单核细胞产生的 TNF-α。在人体内,产生TNF-α的主要细胞是单核巨噬细胞。Ramudo等的研究表明,胰腺相关性腹水时胰腺腺泡细胞中的TNF-α量增加,而非单核细胞或淋巴细胞,可见腺泡细胞是真正产生TNF-a的炎症细胞[3]。

1.2 TNF-α的调节

正常人循环中的TNF-α水平为(10~80)pg/mL。在人和动物,能诱导产生TNF-α物质为LPS,静脉输入LPS后2h,血清TNF-α达到高峰,4h内恢复到基线水平。部分细胞因子也能诱导TNF-α,例如:IFN、IL-1、IL-2等。糖皮质激素、IL-4、IL-6、IL-10、PAF受体拮抗剂和抗MHC-Ⅱ类分子抗体等均能在转录水平或转录后水平抑制TNF-α产生。能抑制NF-κB活性的物质(N-乙酰半胱氨酸、谷胱甘肽等)和能抑制氧化酶的物质均能抑制TNF-α产生。

1.3 TNF-α的生物学活性

1.3.1 TNF-α对血管的影响 TNF-α能引起血管内皮细胞结构变化(如肌动蛋白微丝等重排,失去精密连接)、损伤内皮细胞,导致血浆蛋白和水大量渗漏,于是机体发生毛细血管渗漏综合征。大量的TNF-α会引起广泛的凝血使器官坏死,出现毛细血管渗漏综合征,使全身脱水和肺衰竭,导致全身性炎症反应综合征。

1.3.2 TNF-α对肝脏的作用 TNF-α能诱导肝脏产生急性期蛋白,抑制白蛋白的合成,并通过诱导IL-1和IL-6的生成放大这种效应,导致肝脏发生病理改变。

1.3.3 TNF-α与其他细胞因子 TNF-α在体内能诱导IL-1、IL-6、IL-8、IFN-γ等细胞因子的产生,IL-10、CNTF等抑制TNF-α的作用,而IL-1、LIF、LPS则增强TNF-α的活性。

2 肿瘤坏死因子与急性胰腺炎

2.1 TNF-α在急性胰腺炎中的地位

目前对于急性胰腺炎的发病机制,“细胞因子所形成的三次打击学说”是研究的热点。大量的促炎因子和抗炎因子的相互作用导致胰腺局部损害(第一次打击)、胰腺外脏器功能损害(第二次打击)以及系统性炎症反应综合征(第三次打击)[4]。TNF-α是急性胰腺炎的起动因子,在发病过程中起到“板机”样作用[5]。在急性胰腺炎中,TNF-α升高的程度与胰腺损伤及炎症程度呈正相关,并在急性胰腺炎发病及其全身并发症发生过程中起着重要作用[6]。TNF-α在急性胰腺炎发病的早期即可检测到,高浓度的TNF-α能够诱发和调控多种炎性细胞因子如IL-1、IL-6、IL-8等的释放, 直接和间接参与引起机体内两次高水平细胞因子血症, 引起炎症瀑布样级联反应,引起胰腺的病理变化[7]。

2.2 TNF-α在胰腺损伤中的作用

急性胰腺炎时,胰腺滤泡细胞产生大量TNF-α,这些TNF-α与胰腺细胞相关受体结合,使细胞产生氧自由基,激活核酸内切酶将DNA 裂解成片段,造成细胞死亡[8]。并刺激炎症细胞产生多种炎症介质及细胞因子来加剧胰腺组织损伤[9]。TNF-α还可直接损伤血管内皮细胞,并可通过使细胞表面黏附因子与内皮配位子的接触时间延长和更加紧密而加剧内皮细胞损害[10]。

2.3 TNF-α在肝脏损伤中的作用

TNF-α介导肝脏损伤途径为:TNF-α的毒性作用直接导致肝窦内皮细胞损伤,引起肝血窦微循环障碍,激活补体系统,诱发IL-1、IL-6、PGE2等细胞因子释放,并与IL-1、IL-6等细胞因子协同介导肝损伤[11]。Sindram等研究发现,在肝细胞中,库普弗细胞和血小板通过释放TNF-α来激活凋亡通路[12]。

2.4 TNF-α在肠黏膜损伤中的作用

急性胰腺炎中,肠黏膜缺血、缺氧,黏膜屏障破坏,肠黏膜通透性异常增加,细菌移位引起继发感染,再度激活巨噬细胞,导致TNF-α大量释放,可诱发自身破坏性进程的“级联瀑布反应”,这是机体遭受的第二次打击,最后导致生命器官的功能衰竭。

急性胰腺炎引起肠道出现缺血再灌注损伤是导致肠管黏膜出现功能障碍的主要原因之一[13]。此时,肠道黏膜细胞内可产生大量活性氧、各种细胞因子、炎症介质,导致细菌及内毒素得以穿越损伤的肠黏膜上皮而发生移位[14]。由于内毒素刺激单核巨噬细胞释放 TNF-α使肠黏膜上皮细胞凋亡,导致肠屏障功能障碍,引起氧自由基和蛋白水解酶等有害物质释放,并激活补体系统通过细胞毒性作用加重组织损伤。

2.5 抑制TNF-α的产生可有效缓解急性胰腺炎症状

细胞内信号传导通路介导的胰腺炎症反应机制目前主要包括丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK) 核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB) 等[15]。其中p38MAPK 存在于胰腺细胞激活的早期,在炎症细胞浸润到组织内时就活化,各种不同刺激均可以激活 p38MAPK[16]。因此,对关键的信号转导通路进行有效地阻断和调节,可以有效地调控促炎细胞因子的产生,从而阻断 SIRS 和 MOF 的发生或减轻其严重程度,从而明显减轻临床症状。有研究表明[17],MAPK抑制剂预处理后能显著减少急性胰腺炎大鼠血浆中促炎细胞因子TNF-α的产生,抑制胰腺组织中TNF-α mRNA 的表达。通过抑制TNF-α的表达,明显改善胰腺病理改变,从而减轻胰腺炎症状。

3 总结

综上所述, 促炎性细胞因子TNF-α在急性胰腺炎中起重要作用,不仅对机体本身造成损伤,同时促进其他细胞因子、炎症介质和氧自由基等的大量释放,对胰腺及全身多个器官造成损伤,阻断其表达通路可明显缓解临床症状。

[参考文献]

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[4] Makhija R,Kingsnorth AN. Cytokines torminaeute pancreatitis[J]. Hepatobiliary Panereat Surg,2002,9(4):401-402.

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[10] 徐延钧. 肿瘤坏死因子-α及白介素在急性胰腺炎中的作用[J].中国普外基础与临床杂志,2010,17(9):993-995.

[11] 张喜平,张杰,杨萍. 急性胰腺炎并发肝损伤机制及治疗研究现状[J]. 医学研究杂志,2007,36(12):88-91.

[12] Sindram D, RJ,Hoffman MR, et al. Synergism between platelets and leukocytes in inducing endothelial cellapoptosis in the cold ische-mic rat liver: a Kupffer cell-mediated injury[J]. FASEB J, 2001, 15(7):1230-1232.

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[14] 贾鹏辉,刘续宝. 肿瘤坏死因子在急性胰腺炎并发肠黏膜屏障损害中的作用[J]. 中国普外基础与临床杂志, 2000,7(6):415-417.

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[16] 龙友明,刘学进,陈垦,等. Tat-NBD 多肽抑制胰腺腺泡细胞AR42J 细胞的核因子-κB 相关性炎症反应[J]. 中华急诊医学杂志,2009,18(4):401-405.

篇3

精益物流中的“精”表示少而精,不投入多余的生产要素,只是在适当的时间生产必要数量的市场急需产品(或下道工序急需的产品);“益”表示所有经营活动都要有效益,具有经济性。精益生产就是及时制造,消灭故障,消除一切浪费,向零缺陷、零库存进军[2]。

目前,我国大多数军工企业仍然采取批量生产方式,这一生产方式的形成与中国军工企业发展的历史有一定的关系。现今,军工企业的市场发生了较大的变化,军工企业面临着市场转变的机遇与挑战,本文试图将精益物流理论应用于军工企业,调整以往的少品种大批量的生产方式向多品种小批量生产方式改进。

1.X军工生产企业简介

X军工生产企业是国内专业的军用电机生产厂家,其现有的生产模式为面向用户的单件、批量生产模式。目前X企业电机产品的生产,仍还采用传统的职能分工模式进行计划、调度管理,这已明显不能适应当前市场多品种,小批量的需求,此种生产模式已成为军品生产的瓶颈,对其进行精益物流改造已成当务之急。

2.X军工生产企业生产现状及存在问题

X军工企业目前的生产方式为大规模批量生产模式,生产效率有进一步提高的空间,管理方式有待进一步改进。

工厂整体生产过程首先是由科研计划生产部根据投产任务和产品合同要求,编制研制生产主计划,根据产品生产的必要条件,完成产品生产文件、物料、设备、等准备工作;采购部门根据企业年度经营计划,编制企业物料作业计划、采购作业计划,根据计划采购物资,包括:产品用主料、辅料;设备维修、保养用零组件、材料;产品制造部根据科研生产主计划要求,编制本部门产品生产加工作业计划,按照作业计划设计图纸的要求,进行工艺研究,对机械加工车间,热处理车间,装配车间进行管理指挥调度,及时完成生产加工作业及零部件、产品的周转;生产过程中,运行保障部负责设备的安装、调试、验收、移交和保养,技安部负责安全生产监督管理、环境保护监督管理,职业卫生监督管理,运输部负责公司部门用车申请进行出车安排和车辆调度,质量部负责公司质量管理。

X军工生产企业的生产在应对多品种小批量的市场需求显现了它的不足之处:

第一、企业生产线的布置灵活性不强,面对突如其来的订单,没有足够快的反应速度进行生产调整。第二、公司的设备不够集中,增加了半成品、成品的搬运距离,造成了搬运浪费。第三、企业的组织结构是适应于批量生产的直线职能制模式,生产计划至上而下层层下达,生产的方式主要是大批量的“推式”生产,这样增加的是生产组织时间,不能快速的对市场作出反应。第四、公司的信息系统不够完善,生产信息不能在各部门之间快速的传递。

3. X军工生产企业的精益物流改造

(1)“一个流”的生产方式

为了消除机群式布置下批量生产所造成的浪费,可以采用精益物流中“一个流”的生产理念,最大限度的消除搬运,等待所造成的浪费。所谓“一个流”生产,是指将作业场地、人员、设备合理配置,使产品在生产时,每个工序最多只有一个在制品或成品,从生产开始到完成之前,没有在制品放置在生产场地。

为了缩短工人走动的距离,增加员工之间的交流,可把生产线布置成U型,这样还可以节省空间。

电机生产品主要由四个部分组成:一、前端盖;二、后端盖;三、转子;四、定子。

可将生产工艺相近的前端盖与后端盖组成一道U型生产线,将转子与定子分别组成两道U型生产线,生产出来的配件输送到装配区域进行统一装配,实现生产一个流。

(2)组织结构重组

在新的市场环境下,企业直线组织模式在X军工企业显现出了部门间信息交流的不足;直线部门与职能部门(参谋部门)之间目标不统一,职能部门之间横向联系较差,信息传递路线较长,矛盾较多;系统刚性大,适应性差,容易因循守旧,对新情况不易及时做出反应等弊端。为了更能适应多变的市场,为适应改造后的生产线生产,需要将X军工生产企业现有的组织结构进行调整,打破原有的部门界限,绕过中间管理层次,直接面对顾客和公司总体目标,建立扁平化的组织结构

(3)建立生产制造执行系统

篇4

关键词:高值耗材 招标采购 供配流程管理

中图分类号:F243 文献标识码:A

文章编号:1004-4914(2012)10-232-02

精益管理源于精益生产,是一种先进的管理理念,它起源于20世纪60年代日本丰田公司著名的“丰田生产方式”,是一种消除浪费,要求企业的各项活动都必须运用“精益思维”,来提升流程速度与效率的管理工具。精益管理理论在大型医院医用耗材招标采购供配流程管理与降低运营成本方面非常实用,通过消除所有无增值的程序,以有限的资金及人力物力资源,为患者提供安全、及时、有效的服务保障。

医用高值耗材一般指分属于专科使用,直接作用于人体,对安全性有严格要求。现如今,由于医院的快速发展,医疗技术的不断创新,医用高值耗材需求量大幅增加,采购数量逐年攀升,品种繁多,材质多样,规格型号复杂,专业性强。以笔者所在的湖北医药学院附属太和医院为例,我院是一所集医疗、教学、科研、防保、急救、康复为一体的综合性国家三级甲等医院。多年来,医院始终致力于医疗质量和医疗安全的持续改进,重视医用高值耗材招标采购、供配流程管理,医院取得了经济效益和社会效益双丰收。主要有以下几个特点。

一、重视医用高值耗材招标采购流程环节管理

随着我国医改工作的不断深入,国家基本药物制度的逐步推行,针对医药卫生领域医用高值耗材价格虚高、质量参差不齐以及购销环节的种种问题,加强对医疗供应商的管理和规范采购环节与流程,是医院医疗工作的中心任务。以我院为例,医用高值耗材使用量较大,是医院诊疗收入、药品收入、医技检查收入以外的重要经济要素。因此,对医用高值耗材招标流程环节的管理是医院医疗管理的重点环节。

(一)健全招标采购民主管理机构

医院成立了招标采购民主管理机构及物资招标采购选标工作组,成员由院长、主管后勤工作的副院长,后勤、财经、监审处等有关人员组成。为提高医用高值耗材采购决策的透明度,确保比价招标采购的公开、公平与公正,不同的采购方式选择不同的监管方式。通过有力的行政管理和有效的民主监督,确保物资采购管理逐步、稳定地向规范化、制度化方向推进,做好医用耗材管理的宏观调控,把握投资方向。主管院长负责指导医用耗材项目的评审工作;财经处对相应耗材品种的定价对成交价格进行严格核定;纪委监察、财务、审计等有关部门履行对招投标及审核结果进行监督检查,发现问题及时向医院招标采购民主管理机构建议,提出切实可行的纠错办法。

(二)采取有效措施确保耗材质量

1.组织实施招标采购。根据公平、公开、公正、科学、择优的原则,严格审核招标文件、进行集体评议、确定中标结果。严格按照招标文件规定的标准和方法进行评标,突出各类耗材的关键技术指标。在非公开化状态下,按照成立谈判小组、确定耗材的技术要求和配置,严格审核厂商资格资质及产品注册,组织商务澄清、集体评议,开展成本分析、市场调查,分别谈判的程序进行,选择性价比高、质量可靠、售后服务有保障的产品。

2.供应商的循证管理。主要包括:(1)资质证据。包括注册证、生产许可证、经营许可证等证明产品和企业的合法性。(2)质量证据。卫生许可证和国家药品监督管理局质量检测报告。(3)供应商行为证据。供货的及时性、准确性等。(4)供应链管理证。包括合同、标书、发票、送货单、出库单等,主要保证信息流、资金流和物流的高效流动。(5)外部沟通证据。谈判的现场记录、商变更登记、法定代表人授权书等。(6)内部沟通证据。医用耗材的准入审核、采购、供应、使用及收费涉及到医院医政管理部门、财务部门、供应部门及临床科室,完善的信息化办公系统可以自动留下证据,纸质文件证据是必需的。应严格审查各种证件复印件的真实性和有效性,查验是否加盖经营单位公章。把所有能反映供应商资质、信誉及产品质量的文件、产品图书、证书归档,建立供应商档案,方便查阅和全程管控。

3.主渠道供应控制。一是加强对高值医用耗材的准入控制。履行严格的审批程序,包括使用申请、技术审查等。二是加强对高值医用耗材的采购控制。在规定的渠道以核定的价格进行采购,严格按招标管理规定组织实施招标采购。三是加强对高值医用耗材的使用控制。从严控制高质耗材的采购预算,合理搭配不同档次的品种供病人选择。严格履行告知义务,当患者必须使用高质医用耗材时,主管医生须先告知并征得其同意,并由病人签署高质医用耗材使用同意书(使用同意书的要件必须包括:病人拟使用的高质医用耗材的名称、数量、进口或国产、价格)。医生不得通过故意夸大进口与国产品种间的质量差异来诱导消费。我院对科室使用的重要输血材料、透析材料、手术材料、心脏监测材料、超声材料、介入材料、麻醉材料、内窥镜材料等,禁止临床科室直接向公司购买耗材的现象,杜绝了产生耗材质量问题的隐患。

(三)确保招标采购价格公正合理

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【摘要】 目的 构建生存素(survivin)短发夹状RNA表达载体,检测其对骨肉瘤细胞survivin mRNA及蛋白表达的影响。方法 体外构建survivin shRNA 表达载体pSilence2.1neosurvivin,转染骨肉瘤细胞系MG63,RTPCR、免疫组化方法检测转染前后survivin mRNA及蛋白的表达,MTT比色法检测细胞增殖活性。结果 pSilence2.1neo survivin载体转染能显著抑制survivin mRNA、蛋白表达,转染后48h细胞增殖的抑制率为61.83%。结论 pSilence2.1neosurvivin可显著抑制MG63细胞survivin mRNA、蛋白的表达及细胞的增殖活性。

【关键词】 survivin;RNA干扰;短发夹RNA;骨肉瘤

Inhibition of the Expression of survivin in Osteosarcoma Cell by A Short Hairpin RNA

Key words:survivin;RNA interference;Short hairpin RNA;Osteosarcoma

RNA 干扰(RNA interference,RNAi)是一种新兴的转录后基因阻断技术, 可以简单、有效、特异地下调细胞中目的基因的表达。我们以survivin为靶点,体外构建短发夹状RNA的表达载体, 观察其对MG63细胞survivin基因表达的影响,为骨肉瘤基因治疗的进一步研究提供实验基础。

1 材料与方法

1.1 材料

人骨肉瘤细胞系MG63为本教研室保存,Lipofectamine 2000为Invitrogen公司产品,pSilence2.1neo为Ambin公司产品, RTPCR试剂盒为MBI公司产品,鼠抗人survivin单克隆抗体及SP试剂盒为Santa Cruz公司产品。

1.2 实验方法

1.2.1 pSilence2.1neosurvivin表达载体构建及细胞转染 参照Harborth等[1]的干涉RNA 设计原则,以人survivin的mRNA序列5′TTCGTCCGGTTGCGCTTTC 3′为靶点,体外合成两端带有BamHⅠ和HindⅢ粘端酶切位点、内含5TTCGTCCGGTTGCGCTTTCTTCAAGAGAGAAAGCGCAACCGGACGAA3发夹状序列的双链DNA,将合成的片段接入pSilence2.1neo载体,筛选、扩增后经测序证实构建成功。分4组进行细胞转染处理:空白组、脂质体组、空载体组、shRNA组。

1.2.2 RTPCR检测细胞survivin mRNA的表达 分别收集转染24、48、72h细胞, 提取细胞总RNA,并进行逆转反应。引物的序列为: survivin:上游:5′ATGGGTGCCCCGACGTTG3′下游:5′AGAGGCCTCAATCCATGG3′,扩增产物436bp。βactin:上游:5′TGGCATTGCCGACAGGATGCAGAA3′下游:5′CTCGTCATACTCCTGCTTGCTGAT3′,扩增产物172bp。以survivin与βactin条带的积分吸光度(IA)比值表示survivin mRNA的相对含量。

1.2.3 免疫组化法检测survivin蛋白的表达 按上法处理细胞24、48、72h后,SP法进行免疫组化染色。以细胞浆和/或核呈现棕黄或棕褐色颗粒为阳性细胞,并计算阳性表达率:阳性表达率=(每500个细胞中阳性细胞数/500)×100%。

1.2.4 MTT法检测细胞增殖活性 按上法处理细胞24、48、72、96h后,行MTT染色,测OD值,计算细胞增殖抑制率:细胞增殖抑制率=(空白组OD值处理组OD值)/空白组OD值×100%。

1.3 统计学处理

采用SPSS10.0统计软件,对数据进行t检验。

2 结果

2.1 RTPCR结果

shRNA组436 bp处的条带亮度显著低于其余各组,见图1,与空白组相比shRNA组24、48、72h mRNA 表达抑制率分别为68.52%、74.87%和71.93%, 其抑制作用在24~48h逐步增加,48~72h有所减低,余各组之间无明显差别,见表1。表1 survivin shRNA对MG63细胞survivin mRNA表达的影响

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2.2 免疫组化结果

空白组、脂质体组、空载体组多数细胞中均出现明显的棕黄色的颗粒状细胞浆和/或核着色,见图2,而shRNA组细胞着色较淡,阳性细胞数目较少,见图3。 统计结果显示,shRNA组survivin蛋白表达明显低于其他组,见表2。表2 survivin shRNA对MG63细胞 survivin蛋白表达的影响

2.3 MTT比色法比较细胞增殖活性

与空白组相比,载体转染后24、48、72、96h细胞的增殖活性均受到了显著抑制,48h抑制率最高,为61.83%。其他组间细胞的增殖情况的差异无统计学意义,见表3。

3 讨论

RNAi是指在生物体细胞内,外源性或内源性的双链RNA(double-stranded RNA, dsRNA)引起同源mRNA 特异性的降解,从而高度特异性、高效性地抑制目的基因表达的技术。利用siRNA 干涉技术特异地抑制癌基因、癌相关基因或突变基因的过度表达,使这些基因保持在静寂或休眠状态,可表3 MTT法检测shRNA对MG63人骨肉瘤细胞增殖的抑制作用达到抗肿瘤作用。Lin等[2]利用RNAi 技术使bcl2 基因静寂,从而抑制了前列腺癌LNCaP 细胞的生长,并可见到染色体浓缩、基因组DNA 断裂等细胞凋亡的特征性变化;Elbashir等[3]将体外合成的特异性siRNA转染入人宫颈癌Hela细胞, 结果发现其靶向mRNA 所表达的蛋白质的量比转染前降低了90%。

survivin是迄今发现最强的凋亡抑制因子,属于凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis proteins,IAP)家族的新成员。survivin表达于胚胎和发育的胎儿组织,在终末分化的成人组织中不表达(胸腺除外),但在人类大多数的恶性肿瘤组织中高表达且与肿瘤的恶性程度及预后密切相关[4,5]。其通过抑制凋亡通路末端的效应子caspase3和caspase7而阻断各种刺激(如Fas、caspase、bax、化疗药物)诱导的肿瘤细胞凋亡过程[6]。 采用反义技术阻断肿瘤细胞survivin基因的表达可抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡、增强化疗或放疗的敏感性,故此survivin基因已成为当前肿瘤基因治疗研究的热点。

本研究设计并构建了针对 survivin 的shRNA表达载体pSilence2.1neosurvivin,并证实该载体转染可以显著抑制 MG63细胞中survivin mRNA及蛋白的表达并显著抑制MG63细胞的增殖活性,为靶向survivin基因进行骨肉瘤基因治疗的进一步研究提供了实验基础。

【参考文献】

[1] Harborth J,Elbashir SM, Bechert K,et al. Identification of essential genes in cultured mammalian cells using small interfering RNAs[J]. J Cell Sci,2001, 114(Pt 24): 45574565.

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篇6

关键词:钢丝绳芯胶带,胶接,硫化工艺。

一.前言

我矿现有正处于“保安全,降成本,求生存,促发展”阶段,降低成本是必然趋势,而且众所周知采煤行业是一个高危行业,生产安全管理对于一个煤矿企业尤为重要,机电运输系统又是管理难度最大,最易发生事故的一个环节,然而主运皮带运输又是决定煤炭生产量大小的必要因素。在此前提之下,珙泉煤矿机电运输部在集团公司领导及矿领导的关心和指导下,遵照上级领导对矿井安全生产的要求,对煤炭运输工作当中的不足进行了一系列的改革,其中一项就是:将煤炭用矿车运输和普通胶带运输改为钢丝绳芯胶带运输。现本文就对钢丝绳芯胶带硫化接头和修补在安全生产管理当中的实用性、经济性和大家进行分析。

二.珙泉形势概况

1.矿上正处在“保安全,降成本,求生存,促发展。”的快速发展阶段, 要求在矿井生产建设中要以科技创新为主,大力推广应用新技术、新工艺、小设计、小改革和技术创新。

2.大幅度的降低成本投入节能降耗和提高珙泉煤矿的生产效益。在珙泉矿技改项目中,对各采煤工作面煤炭的顺利开采和运输提供高效、安全、可靠的保障。

三.钢丝绳芯胶带硫化工艺流程

1.硫化机技术特征

1.1.安装,拆卸方便易行、部件轻、主要部件材质为铸铝合金。

1.2.部件有足够的强度和钢度、在满负荷工作时不断裂、变形量小。

1.3.热板工作面平整光洁,技术要求7以上。

1.4.施加工作压力后缝隙小于0.5mm。

1.5.升温快,从室温升至标准硫化温度的时间为30-50min。

1.6.上、下热板表面温度均匀一致,工作面各点温度差在2.5C以内,硫化过程中,温度波动2.5C。

1.7.加压后,热板单位压力为1.8-2.8Mpa。

1.8.热板长度和宽度与胶带尺寸关系?a)长度比接头长300mm以上,?b)宽度比接头宽150mm以上。

2.接头用材料

2.1.钢丝绳芯胶带接头,必须使用规定的材料,其种类和用途如见下表

表1

2.2.安徽天地人生产的各种钢丝绳芯胶带须使用该公司提供的胶片。因这些胶料的配比是在反复试验的基础上经过严格选择指定的,能确保接头部位性能达到要求,不同品种的带型需要不同性能的胶料匹配。接头用胶片最好使用新压制的胶片,压延后在存放温度不超过35的情况下存放时间不超过3个月。存放温度高或时间超过3个月,使用前应进行鉴定,只有确认其未变质时才能使用。

2.3.接头用胶浆可在使用前于现场配制,汽油和芯胶的重量比为5:1。配置前可先在容器中加所需汽油的1/3,将胶片切碎的汽油中,浸泡2小时以上即可开始搅拌,搅拌时太粘稠可酌情再加少许汽油,当胶浆搅或均匀的无块状时再将剩余的汽油倒进,并搅拌均匀即可使用。胶浆存放时间不宜太长,使用中如因溶剂挥发胶浆太绸时,可加入少量汽油搅匀使用。

3.胶带接头尺寸和技术要求

3.1.接头长度和几何结构的设计取决于钢丝绳直径d、钢丝绳间距t、钢丝绳的拉伸强度Fbs、钢丝绳粘合强度Fa。

3.2.本矿使用的钢丝绳芯胶带分别为:ST1000、 ST2000、 ST3150,接头方式各分为:一级接头、二级接头、三级接头,各级接头的最小阶梯长度和接头长度在表2中给出(单位mm)。

表2

4.胶带搭头操作方法

4.1.交接前准备

(1)选择搬运与操作方便的地方做胶接施工。场地要清楚干净,无杂放物品。

(2)在运输机架上搭一矩形操作平台,其长度较硫化机长度略长,宽应较胶带宽度略宽。

(3)将硫化机底座、下热板放在工作台上。将待接的带头放在下热板上。以上准备完毕即可作业。

4.2.胶带准备

(1)标记中心线:找出三个相互距离大于1000mm的中心点,用鲜明、牢固的颜色画出胶带的纵向中心线

(2)画出接头线:按照已确定的接头型式和尺寸,在两个带头上画出接头线。

4.3.剥胶及截钢丝绳

(1)沿上图所示虚线用刀横向割开胶带上下两面覆盖胶,深度近达钢丝绳,但不可触及或损伤钢丝绳。将钢丝绳端头胶割开,用电工钳夹紧钢丝绳绳头,沿水平方向朝侧旁施力平按(不允许向上、下撕拉、不允许将钢丝绳拉弯),最后将钢丝绳从胶中抽出。从胶带边部第一根钢丝绳做起,用同样方法依次抽出全部钢丝绳。

(2)将钢丝绳按需要长度截好。

(3)刮掉钢丝绳表面的附胶。

(4)接合处切成约60°斜坡。

4.4.打毛

(1)用钢丝刷将接触部位的硫化胶打毛。

(2)将钢丝绳上附着的硫化胶尽量打掉。打磨完毕后,将带头和钢丝绳上的胶沫清除干净。

4.5.胶接成型

(1)将两带头钢丝绳平铺在硫化机下热板上,并且要对放、对放位置须使最长的钢丝绳端头与另一带头钢丝绳根部接开间距100mm。

(2)重新校验两带头中心线,调整成一条直线为止。

(3)将两带头用卡子固定定位。

(4)将两带头的钢丝绳翻向两边,放在预先铺有干净的布上画。

(5)用干净毛刷蘸120#汽油,将钢丝绳逐根擦拭干净,汽油挥发后也均匀涂上2-3遍胶浆、使钢丝绳表面均被胶浆覆盖。每次在涂下遍胶浆时,当遍胶浆必须已晾干。

(6)将覆盖胶的一头裁成与带体斜坡面相一致的斜接头(另一头暂不裁)并对正带体的覆盖胶斜坡面上缘,铺平且放置在硫化机的下热板上。在这之前,下热板预先铺平面积足够的干净白布或玻璃纸。

用毛刷蘸120#汽油,将已放妥的覆盖胶擦干净,晒干后,压牢。贴合时芯胶端头也须照斜坡裁齐、芯胶端头与覆盖胶端头应平行错开一定距离。

用毛刷蘸汽油清擦干净芯胶表面,晾干。

(7)将带头及钢丝绳放在芯胶上。

(8)借助另一带头将芯胶、覆盖胶定长截断、随后也将这一带头及钢丝绳铺在芯胶表面上。

(9)再找校一次中心线、调整或无错时将两带头的中间一根或两根钢丝绳定位。

(10)从带头中间向两侧逐根拉紧、拉直、摆放、排列均匀所有钢丝绳,并保持各绳不得变形、弯曲、拱起等。

(11)再在已铺放达到要求的全部钢丝绳上涂胶浆一至两遍、晾干。

(12)各胶接型式的接头结构图共分四种,在“胶接型式,胶接原理及其选择”一节已画出,可供选择。

(13)用芯胶片作边胶条、贴在外侧钢丝绳外边、将两边补至与原带体带边对齐。

(14)仿照以上要求和作法,将上芯胶片铺贴在钢丝绳上。再将上覆盖胶片贴合再芯胶片上。

(15)在胶带两侧放出边线,将带接头部宽出原带体的胶料割去。

(16)在上覆盖胶与硫化机热板间铺放平整足够面积的白布或玻璃纸。

4.6.硫化工艺

(1)先把硫化机4个角上的螺栓拧紧,且松紧一致。

(2)在成型完毕的带头两旁(指带头纵向)的原带体表面上,各铺垫三组四层纱布,其宽度要适当。放在顶紧垫铁的位置上。???平板硫化机对带头的定长,是在纵向两端皆应长出接头长度Ls值100mm为宜。

(3)盖上上热板,安放千斤顶。安放上横梁,开始加压。由两人同时操作,并由一侧开始按顺序逐渐加压,然后,反向顺序加压,使达额定压力。(硫化机没有水压板时,则用泵加压)。

(4)接通电路:

A、当热板温度升至135时排气一次,继续加温。

B、当热板温度至140时,再排气一次,此时必须把硫化机中的冷凝水排完。

C、当热板温度至145时,开始计算硫化时间。

4.7.胶接成环形带

(1)将最后一个接头胶接完毕时,线形胶带便成为配套在输送机上的环形带了,在胶接这个接头时,应将两个带头分别用夹板夹紧,用张紧装置对胶带加张力,直至胶带符合张紧装置的要求,方能进行最后一个头的胶接作业。

(2)重叠两个带头准备胶接时,张紧滚筒应处于行程的上部极限位置。

(3)胶接的环形带长度,要留有补贴余量,这个补贴量以环形胶带受张力后,张紧滚筒基本上位于最上限位置为最佳。

四.结束语:

综合上述,此项技术的实施应用不仅节约了经济成本,还大大提高了工作质量,它凝聚了珙泉矿技术管理人员们的心血与智慧,是无数次实践中得出的经验总和,展现了大家以科技创新为目标,以保安全,降成本为核心的新型煤矿价值观。

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篇7

【关键词】中期妊娠流产 米非司酮 依沙吖啶

以往对于妊娠12周-16周流产一般都采取经阴插管注药加钳刮术,因操作繁琐,难度大,易逆行感染,患者痛苦大,副作用多,现在我们已经放弃此法;对于16周-28周者多采用直接经腹依沙吖啶羊膜腔内注入术,因其容易发生蜕膜残留,我们对此做了改进。自2000年12月到2009年9月我们应用米非司酮配伍依沙吖啶联合应用于12周-28周妊娠流产,并与同期单用依沙吖啶流产及米非司酮配伍米索前列醇经阴道给药和口服法进行了对比研究。现报告如下:

1 资料与方法

1.1 研究对象 从2000年12月到2009年9月12-16周妊娠住院接受流产的健康妇女260例 其中初产妇148例、经产妇112例.肝肾功能均正常,排除严重内科疾患,均经彩超检查核实孕周及胎盘定位与宫颈从解剖学内口到外口的长度。

1.2 研究方法 260例孕妇随机分成两组.研究组100例.对照组160例。对照组又随机分成两组,即A组(60例)与B组(100例)。因B组系用同一药物两种不同给药途径.故又将B组分成B1组(60例)、 B2组(40例)。

1.2.1 药物应用方法 研究组米非司酮150mg,共1次,口服药物的同时即给予经腹羊膜腔内注入依沙吖啶100mg;对照组:A组为经腹羊膜腔内注入依沙吖啶l00mg。B1组为米非司酮25mg tid,共6次,总量是150mg。服完于次晨经阴道后穹窿放置米索前列醇600ug。对无效或宫缩弱者间隔6h再放200—400ug。总量不超过1500ug。B2组:米非司酮用法同B1组。服完次晨空腹口服米索前列醇600ug。对无宫缩或宫缩逐渐减弱者。间隔6h加服600ug,总量亦不超过1500ug,再观察48h无宫缩者为失败。研究组与对照A组从经腹注入依沙吖啶开始观察并记录宫缩开始时间及胎儿、胎盘排出时间。B组从口服米索前列醇或于阴道首次放米索前列醇开始观察并记录宫缩开始时间及胎儿、胎盘排出时间。

1.2.2 疼痛分级 根据孕妇临床表现和主诉分四级 。I级:无痛或稍感不适,活动自如,无出汗;Ⅱ级:轻度疼痛,可忍受,合作,微出汗;Ⅲ级:中度疼痛,难以忍受,辗转不安,合作欠佳,出汗伴肢冷;Ⅳ级:重度疼痛,不能忍受,出汗伴肢冷。

1.2.3 观察指标 宫缩开始时间.胎儿流产时间,胎盘排出时间,流产程,出血量,疼痛分级,副作用,流产效果及宫颈长度对产程、流产痛的影响。

l.2.4 流产效果评定标准 胎儿及胎盘完整娩出者为完全流产;胎儿娩出后胎盘滞留者为不全流产。两者合计为成功率,末次用药48h后妊娠仍继续者为失败。

1.2.5 数据处理采用SPSS10.0统计软件包,组间比较采用t检验和X2检验,P

2 结果

2.1 用药次数及剂量研究组米非司酮150mg,共1次,总量为150mg。口服药物的同时即给予经腹羊膜腔内注入依沙吖啶100mg,均1次成功。对照A组依沙吖啶100mg羊膜腔内注入成功58例,用药48h后无效2例,改用米非司酮50mg口服,12h后配伍米索前列醇经阴道放药1次成功。对照Bl组阴道放药600ug,1次成功40例(66.67%)、2次成功16例(26.67%)、3次成功2例(3.33%),失败2例改用依沙吖啶羊膜腔内注入。对照B2组口服米索前列醇600ug,1次成功32例(80%),2次成功2例(5%),服药48h无效应6例(15%),改用依沙吖啶100mg羊膜腔内注入,均在36h之内流产。

2.2 研究组与对照A组流产成功时间比较见表1。

两组平均宫缩开始时间差异无显著性(P>0.05)。研究组平均胎儿流产时间明显短于对照A组,差异有高度显著性(P

2.3 各组流产效果的比较见表2。

研究组100例均获成功,胎盘、胎膜完整排出84例,完全流产率为84% ,不全流产16例,其中胎盘粘连或小叶残留8例行钳刮术;胎膜不全8例,其中4例因胎膜残留1/3—1/2行钳刮术,4例残留1/4-1/3未作处理,24h后自行排出。对照A组成功58例,胎盘胎膜完整排出36例,完全流产率为62%;不全流产22例,其中胎盘残留或粘连6例、胎膜不全16例,均行清宫术。对照B1组60例放药1次成功40例、2次成功16例、3次成功2例,其中胎盘胎膜完整排出50例,完全流产率为80%;不全流产10例,其中胎盘粘连不下5例,胎盘部分粘连或胎膜残留3例、胎盘早剥2例,均行清宫术。对照组B2组成功34例、失败6例;胎盘胎膜完整排出32例,完全流产率为80% ,其中有2例胎盘胎膜残留,行清宫术。

2.4 宫颈长度与流产程、流产痛比较 对照A组产痛程度明显高于研究组与对照B组。4组孕妇的宫颈长度2.5 -3.5cm 90例,平均总流产程7h;3.6-4.5cm 108例,平均总流产程10h;4.6—5.5cm 52例,平均总流产程12h。见表3、表4

转贴于

由表3可见。研究组及对照B组产痛明显低于对照A组,研究组与对照A组,产痛差异有高度显著性(P0.05)。通过宫颈长度与流产程比较,发现宫颈长度与流产程时间关系极为密切,宫颈越长,流产程时间越长,差异有高度显著性(P

2.5 副作用及处理 对照B组副作用的发生率为32%,主要表现为恶心、呕吐、乏力、腹泻。皮疹伴瘙痒4例、肢体麻木2例、寒战6例,除寒战患者给予地塞米松5mg肌注外,余未作特殊处理,观察2h后逐渐好转。用依沙吖啶经腹羊膜腔内注入及联合流产法者未发生不良反应。单用依沙吖啶者(对照A组)副作用的发生率为16%,关节肿痛2例、发热4例、强直性宫缩伴呕吐4例,给予杜冷丁100mg肌肉注射,症状缓解。

3 讨论

3.1 应用米非司酮配伍米索前列醇行中期妊娠流产的缺点 主要是副作用的发生率超过了其他流产法。口服米索前列醇流产成功率低,只占85%,经阴道放米索前列醇有21%的孕妇需放第2次或第3次,反复阴道操作可增加逆行感染的机会。

3.2 单用依沙吖啶流产的优、缺点 此法成功率较高,是临床上中期妊娠流产的主要方法,缺点是流产痛时间长.重度腹痛发生率高达60%。本组有4例出现强直性宫缩.需使用强镇痛剂缓解。胎盘、胎膜的残留率为36.67%。

3.3 米非司酮与依沙吖啶联合流产法的优点 本法流产痛时间短,重度流产痛的发生率仅为10%,明显低于单用依沙吖啶的60%,完全流产率为84%,高于单用依沙吖啶者的60%。清宫率为16%,低于单用依沙吖啶者的36.67%,流产的成功率为100%,高于对照各组。联合用米非司酮与米索前列醇的副作用发生率为32%。单用依沙吖啶的副作用发生率为16%,联用米非司酮与依沙吖啶则未发生明显的副作用。联合流产法能够发挥优势流产作用主要取决两种药物的协同作用,米非司酮在分子水平结合孕酮受体,阻断孕酮发挥作用,使子宫肌对催产素的敏感性增加。而宫颈情况是流产成功的主要决定因素。米非司酮使宫颈胶原纤维降解,宫颈变软,易于扩张,成为加速分娩的因素之一[1]。依沙吖啶主要作用于胎盘,蓄积在蜕膜细胞的药物通过酶作用使细胞分解、坏死,胎膜剥离致胎儿死亡,依沙吖啶还能使蜕膜细胞中前列腺素合成及释放增加,增强子宫肌的收缩,促使胎儿排出。两种药物的联合作用避免了单用依沙吖啶流产发动宫缩与宫颈成熟的不同步致宫缩过强,流产程长.清宫率高等缺点,还能克服联合用米非司酮与米索前列醇流产的各种副作用。我们在研究中还发现宫颈的长度与流产痛分级、流产程时间有关,用依沙吖啶流产时宫颈长度与流产痛、流产程的正相关关系更为突出。

3.4 由于中期妊娠宫颈不成熟,扩张条件差且宫缩并非自发,极易出现不协调性宫缩和强直宫缩,子宫下段扩张能力弱,向宫颈方向传导宫压能力亦下降,更易出现产程延长、宫缩痛剧烈、胎盘残留及软产道损伤, 所以在产程发动前对宫颈做一定的预处理显得尤为重要。米非司酮不仅可对抗孕酮, 刺激子宫平滑肌兴奋,使产程发动早且能加强宫颈胶原纤维分解,松弛和软化宫颈[2]。

综上所述,我们认为米非司酮与依沙吖啶联合用于12周-28周妊娠流产操作简便,效果确切,副作用小,值得临床推广。

参 考 文 献

篇8

【摘要】 目的: 研究可溶性IL15Rα与脾细胞共同孵育后对小鼠黑色素瘤细胞生长的免疫调节作用。方法: 制备小鼠脾细胞, 分成两组, 一组加入可溶性重组IL15Rα (sIL15Rα), 另外一组不加, 培养48 h后, 分离两组的贴壁细胞和非贴壁细胞, 流式细胞术(FCM)分析CD4、 CD8、 B220、 CD11c、 CD1a的表达; 并把上述4组细胞(即脾细胞非贴壁细胞组, 脾细胞贴壁细胞组, 脾细胞+sIL15Rα非贴壁细胞组, 脾细胞+sIL15Rα贴壁细胞组)和黑色素瘤细胞一起分别注射到小鼠腹部皮下, 观察小鼠腹部皮下肿瘤生长抑制情况, 对照组只注射小鼠黑色素瘤细胞。结果: 脾细胞+sIL15Rα贴壁细胞组小鼠黑色素瘤的生长速度显著小于其他各组; FCM分析, 此组细胞主要成分可能为树突状细胞(DC)。 结论: sIL15Rα与脾细胞共同孵育后, 可能通过DC的作用, 对黑色素瘤的生长进行免疫调节, 从而抑制瘤细胞的生长。

【关键词】 sIL15Rα; IL15; 树突细胞; 黑色素瘤

IL15 属于IL2家族, 它与IL2共用β和γ受体进行信号传导, 但同时又拥有自己独特的α受体, 是与IL2功能有所不同的一种T 细胞生长因子[1]。在生理条件下, IL15与膜上的IL15Rα结合, 但一般认为, 只有在出现IL2/15Rβ和γc时, 才能进行信号传导[2]。IL15Rα分布广泛, 在很多组织和细胞都能被检测出来, 例如脑、 肠、 肝、 外周血单核细胞(PBMC)等。它在体内以两种形式存在, 一种是膜型, 一种是可溶型, 可通过自分泌、 内分泌、 旁分泌或近分泌形式作用于靶器官和组织。其中, 可溶型的IL15Rα(sIL15Rα)相对分子质量(Mr)为42 000, 在生理条件下, 很低的浓度(pmol/L)就能与IL15有很高的亲和力。现在认为, 这种sIL15Rα是锚在膜上的IL15Rα通过金属蛋白酶水解后脱落的, 它可以阻断IL15与细胞膜表面受体的连接, 抑制IL15的作用。因为sIL15Rα对IL15有高亲和力, 有假说认为, sIL15Rα可能扮演一种类似分子清洗物的作用来去除多余的IL15; 当然, 它们之间的这种高亲和力的结合也许还起到其他作用, 目前仍不清楚[3, 4]。本实验中, 我们把sIL15Rα与脾脏细胞共同孵育后, 进一步研究其对小鼠黑色素瘤生长的影响。1 材料和方法

1.1 材料 6~8周龄的雄性C57BL/6小鼠, 质量22~25 g购自扬州大学实验动物中心。饲养温度为25℃左右, 光照周期为光照12 h, 黑暗12 h(12L: 12D), 自由采食、 饮水。小鼠黑色素瘤细胞(B16)为本实验室长期拥有, 培养于RPMI1640培养液中, 含100 mL/L新生小牛血清, 10万U/L的青霉素/链霉素(INVITROGEN)。CD4、 CD8、 B220、 CD1a、 CD11c单克隆抗体(mAb)均购自美国BD公司。小鼠IL15、 IL2、 IFNγ ELISA试剂盒购自R&D 公司。可溶性重组IL15Rα/Fc嵌和体(sIL15Rα) 购自R&D 公司。

1.2 方法

1.2.1 小鼠脾细胞的制备 拉颈椎处死小鼠, 无菌条件下取出脾脏, 放入盛有 RPMI1640完全培养液的平皿中, 研磨, 过滤, 获得粗制的脾细胞悬液; 4℃低速离心1 000 r/min, 5~10 min, 弃上清, 重悬细胞, 加入预冷TrisNH4Cl红细胞裂解液1 mL, 轻轻吹打混匀, 室温静置1~2 min, 溶解红细胞; 加5 mL RPMI1640完全培养液终止反应, Hank’s液洗2次, 最后将沉淀细胞重悬于2 mL RPMI1640完全培养液中; 细胞计数及测定存活率。

1.2.2 FCM检测 把上述制备的小鼠脾细胞, 分成两组, 一组加入可溶性重组IL15Rα(sIL15Rα), 另外一组不加, 培养48 h后, 分离两组的贴壁细胞和非贴壁细胞, 用FCM分析其组分。即把上述4组细胞: 脾细胞非贴壁细胞组(SC NA), 脾细胞贴壁细胞组(SC AD), 脾细胞加入IL15Rα非贴壁细胞组(SC+sIL15Rα NA), 脾细胞加入IL15Rα贴壁细胞组(SC+sIL15Rα AD), 分别用PBS洗涤2次, 将细胞重悬于PBS中, 加入抗CD4PE、 CD8PE、 CD11cPE、 CD1a、 B220PE。充分混匀, 置4℃黑暗中孵育30 min, PBS洗涤2次后, 用FCM检测。

1.2.3 动物实验 共60只小鼠, 分5组。第1组为对照组, 注射小鼠黑色素瘤细胞, 其余4组分别注射上述培养48 h后分离的细胞(即SC NA、 SC AD、 SC+sIL15Rα NA、 SC+sIL15Rα AD)和小鼠黑色素瘤细胞的混悬液。具体如下: 用750 mL/L乙醇消毒小鼠腹部皮肤, 用注射器吸取上述细胞悬液0.2 mL(5×105), 接种于小鼠腹部皮下。接种1周后, 用游标卡尺测量肿瘤结节的最长径a和最短径b, 根据公式计算肿瘤体积 (V)[5], V=a×b2/2, 求其平均值绘制肿瘤生长曲线。并根据不同时间段绘制无瘤小鼠的百分比曲线, 以评价各组小鼠肿瘤生长情况。

1.2.5 统计学分析 采用SPSS10.0软件分析数据, 两两比较采用Student’s t检验, 以P<0.05为差异有统计学意义。流式细胞仪采用CellQuest软件获取, WinMDI2.8分析。

2 结果

2.1 细胞表型分析 SC NA与SC+sIL15RαNA组细胞表型分析: CD11c、 CD1a表达阴性, CD4、 CD8、 B220表达阳性, 提示其主要成分为T、 B细胞。SC AD组与SC+sIL15RαAD组, CD11c、 CD1a表达阳性, CD4、 CD8、 B220表达阴性, 提示其主要组分可能为树突状细胞(图1)。

2.2 小鼠黑色素瘤的生长抑制情况 对照组肿瘤生长速度最快, 其次为SC NA组 和SC+sIL15RαNA组, 再其次为SC AD组, SC+sIL15RαAD组肿瘤生长速度最慢。SC+ sIL15RαAD组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05, 图2)。

2.3 不同时间段无瘤小鼠的百分比 对照组从第20天开始小鼠均出现肿瘤, 无瘤百分比为0; SC NA(图3A)组在第27天有6只小鼠出现肿瘤, 第39天时共有9只小鼠出现肿瘤; SC+sIL15Rα NA组(图3B)在第20天3只小鼠出现肿瘤, 第27天时共有6只小鼠出现肿瘤; SC AD组(图3C)在第27天有3只小鼠开始出现肿瘤; SC+sIL15RαAD组(图3D)直到第35天才开始有3只小鼠出现肿瘤。各组无瘤小鼠的百分比情况基本跟肿瘤的生长抑制情况一致。其中SC+sIL15RαAD组无瘤小鼠的百分比最高。

3 讨论

IL15是一个对原发性和过继性免疫都非常重要的多效性细胞因子。IL15Rα作为IL15的独特型受体, 对IL15而言是非常重要的。在本实验中使用的sIL15Rα是与IL15具有高亲和力的的重组IL15Rα/Fc的嵌合体, 其Mr为42 600, 与IL15结合后, 能竞争性抑制IL15与膜上IL15Rα受体的连接[6], 已经成为研究可溶型IL15Rα的工具。

实验中显示, 当把对IL15有高亲和性的可溶型的IL15Rα和脾脏细胞共同培养后与小鼠黑色素瘤细胞一起种植到小鼠皮下, 其中SC+sIL15RαAD组出现肿瘤的时间最晚, 肿瘤的生长速度最慢, 分析其组分发现, 其主要成分可能为DC, 同样SC AD组细胞表型与其相同。DC是体内非常重要的一种高度特异性抗原递呈细胞, 在免疫系统中起着非常重要的作用。为什么两者的细胞表型相同, 但对小鼠黑色素瘤的抑制情况却不同呢?我们考虑主要是sIL15Rα的作用, 在培养48 h后, sIL15Rα可以与脾细胞中各种细胞分泌的IL15相结合, 从而能竞争性抑制IL15与膜上IL15Rα受体的连接[6], 使得DC膜上的IL15Rα可能得以保存。当把这种细胞和黑色素瘤细胞一起注射到小鼠体内时, DC细胞表面的IL15Rα能够递呈IL15给邻近的细胞, 例如NK细胞, CD8+细胞, 启动它们分泌细胞因子和细胞毒效应, 来杀伤肿瘤细胞[7]。而SCAD组, DC膜上的IL15Rα被IL15结合, 不能起到递呈作用, 所以效果不显著。而在其他两组, sIL15Rα NA和SC NA组, 由于缺乏DC的作用, 不能启动小鼠体内的免疫监视, 导致肿瘤生长速度较快。各组无瘤小鼠的百分比跟上述结果一致, 生长速度最快的对照组, 无瘤小鼠的百分比最低, 生长速度最慢的SC+sIL15RαAD组, 无瘤小鼠的百分比最高。

本实验中我们进一步揭示了可溶型IL15Rα在IL15作用机制中的重要性, 它与脾细胞共同孵育后, 可能通过DC的作用发挥免疫调节作用, 从而抑制小鼠黑色素瘤的生长。可溶型的IL15Rα将来也许能成为一个有前景的药物, 特别是对肿瘤的免疫治疗方面, 可能起到更重要的作用。

参考文献

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篇9

在教学古诗的时候,首先给学生看一些图片,引导学生观察书上面的插图,然后启发学生回忆在户外看见的柳树样子,并且让学生说出自己的对所想到的柳树形象的感受。之后,老师在慢慢的将学生带入书中,引导学生结合书中诗人所写的《咏柳》进行思考:诗人是如何在诗中描述自己当时所见的情景,他在诗中向我们展示了一幅怎么样的画面呢?学生们经过几遍之后的朗读,对其中的意境也有所体会,当然在自己的脑海中也形成了一幅完美的画面。然后老师进行讲解:“碧玉妆成一树高,万条垂下绿丝绦”从这一句诗看得出诗人是在远处看到柳树之后因为感叹而发出的。这是让学生抬起头望着窗外的柳树,闭上自己的眼睛进行想象:窗外屹立的那一棵棵婀娜多姿的垂柳是多么的像一位位亭亭玉立的少女,那细长的枝条就像是少女的头发随着清风舞动起来。然后再重点品位诗句中的“碧玉”、“绿”、“一树高”、“思绦”等这些词语,体会出诗人心目中的柳树的形态和颜色的美,使柳树充满活力生机,变得灵动起来。“不知细叶谁裁出,二月春风似剪刀”,这一句的前半句体现出诗人在面对画面中“细叶”的时候心中油然而生的一句赞叹,而后半句形象的比喻,将无形之中的“春风”刻画的栩栩如生。把“二月春风”拟成“剪刀”,使学生将柳树的美与春天的紧密相连,从中领悟出:诗句看似写柳树,其实隐藏在赞美春天。对与这篇古诗的讲解,最好是先当学生走进柳树、了解柳树,并且仔细的观察柳树、柳叶,记住它们的样子,然后再学习这首诗,通过现实与诗中的画面进行对比,学生更能体会作者在用“春风”和“剪刀”的妙处。最后,再让学生熟读并背诵这首《咏柳》,在熟读的过程中联系自己看见的柳树在大脑中形成自己的画面,与每句诗进行对比,抓住事物的特点,注意柳树的形态、颜色、姿态等进行描画。

2拓展学生的思维,了解诗人的表达方式

自古以来,诗人对春天的描写都是以“杨柳”、“春风”为题材进行描写。《咏柳》中抒写的是柳树,运用比喻、拟人等的修饰手法,无形之中赞美了春天。例如诗中将高高的柳树用碧玉女进行修饰,“碧玉”一词形象的形容了柳树的晶莹、翠绿,深刻的突出了柳树的颜色的美。还有第三句中的“不知”一词使用了发问的口气,诗人明明知道是春风裁剪的细叶,但是运用的发问语气将春风描写的更加形象化,从而增加了《咏柳》的情趣。若想拓展学生的思维可在上课之前为学生举例一些有关春天其他诗人的古诗作品,例如:王维的“渭城朝雨浥轻尘,客舍青青柳色新”这一句中体现出了沐雨之后的柳树显得格外的清新、青翠、淡绿;戴叔伦,唐代的诗人写的“垂柳万条丝,春来织别离”一句中将纤细的柳条比如“丝”;清代时期的高鼎写的“草长莺飞二月天,拂堤杨柳醉春烟”,从中描绘了一幅莺飞草长的季节中醉柳拂堤的画面。这些诗人所描绘的画中都主要是抓住了柳条的纤细长的特点,使读者诵读之后难以忘记。学生在学习完这些古诗之后将其的共同点进行总结:古诗中所蕴含的特点是诗人对生活、大自然的热爱,将自己的真实感情融合于实物中,加之深厚的生活体验,丰富了其想象,加强了观察的细致。这样还能引导学生写好作文。

3结合实物,加强练习

《咏柳》诗句上描写的是柳树,实质是赞美春天,赞美大自然。古诗中既然能用文字将柳叶精致的裁剪出来,那么鲜艳嫩绿的花草也能修饰出来,自然繁花似锦的春天也能裁剪出。请问同学们,在春天你们还与欧留意什么事物吗?请根据自己的喜爱选择一种景物进行描写,结合诗中的写法,使学生在运用中去感受理解,从而锻炼学生的想象力、观察力,并鼓励学生将真情融入到表达中,在写作中培养自己的审美情趣。

篇10

走进碧津湖,眼前变是一棵棵绿油油的柳树。一阵秋风吹过那柳树像一个爱美的小姑娘在梳理他那长长的辫子!又像一个和蔼可亲的阿姨在亲吻水里的条条小鱼!这不禁让我想起了咏柳这一首诗:

碧玉妆成一树高,

万条垂下绿丝绦。

不知细叶谁裁出,

二月春风似剪刀。