浅谈农药残留检验前处置技巧

近年来，由于农业消费过程中无视农药的正确、合理运用，农药污染问题经常发作，农药残留量超标现象相当严重，并呈现逐年加剧的趋向。为保证人民的身体安康、有效控制农药在农产品消费中的运用和对其残留量停止监控，鼎力展开农药残留检测技术特别是相关的前处置技术的研讨是十分必要的。农药残留测定之前要有合适于各种样品的理化性质的萃取、净化、浓缩等前处置步骤，这些前处置过程常常对农药残留剖析的精确性、准确水平有重要影响。由于农药残留检测技术触及的样种类类繁多、样品组成及其浓度复杂多变、样品物理形态范围普遍，对农药残留测定构成的干扰要素特别多，所以需求选择科学有效的处置办法。据统计标明，大局部农药残留检测实验室中用于农药残留检测样品前处置过程的时间约占整个剖析时间的2/3。为了进步剖析测定效率，改善和优化农药残留检测样品制备的办法和技术是一个重要问题。在现代农药残留剖析中，有些提取办法曾经可以到达局部净化或完整净化的效果。因而，提取和净化办法的界线已非常含糊。这些新技术的共同特性是俭省时间，减轻劳动强度，俭省溶剂，减少样品用量，进步提取或净化效率以及自动化程度。目前，得到普遍应用的新技术主要有超临界流体提取、固相微萃取、微波辅助萃取技术、胶浸透色谱、基质固相分散萃取、固相萃取等。

1超临界流体萃取（SupercriticalFluidExtraction，SFE）

超临界流体（supercriticalfluid，SCF）是指处于临界温度和临界压力的非凝缩性的高密度流体。这种流体介于气体和液体之间，兼具二者的优点。超临界流体萃取（SFE）是指应用处于超临界状态的流体为溶剂对样品中待测组分的萃取办法。Lehotay等[2]初次报道了应用SFE技术检测蔬菜中五氯硝基苯残留，样品无需进一步净化即可经过气质联机（GC-MS）检测。随后Lehotay等再次运用SFE，GC-MS检测了蔬菜、水果中46种农药残留，除甲胺磷和乙酰甲胺磷外，其他农药的回收率都在80%以上。为进步SFE的萃取效果，常在超临界流体CO2中参加少量的极性溶剂。Rhan经过在洋葱、胡萝卜前处置过程中参加甲醇，有效地进步了被检农药的回收率。刘瑜等[3]应用此技术对苹果中5种氨基甲酸酯农药停止检测，其结果支持了这一观念。SFE技术的优点是可停止选择性萃取，萃取物不会改动其原来的性质，萃取过程简单易于调理；缺陷是萃取安装较昂贵，不适于剖析水样和极性较强的物。

2固相微萃取（Solid-phasemicroextraction，SPME）

固相微萃取是20世纪80年代末由加拿大Waterloo大学Pawliszyn和Arhturhe教授提出的，它是在固相萃取技术根底上开展起来的一种兼样品制备的前处置技术。SPME的原理是应用待测物在基体和萃取相之间的非均相均衡，使待测组分扩散吸附到石英纤维外表的固定相涂层，待吸附均衡后，再以气相色谱或高效液相色谱别离和测定待测组分。SPME技术具有烦琐、快捷、无需萃取溶剂的特性，十分适用于挥发或半挥发农药残留剖析。影响固相微萃取结果的要素包括萃取头类型、萃取时间、离子强度、解吸附温度和解吸附时间等。陈伟琪等应用100μm聚二甲基硅氧烷萃取头浸入匀浆液的萃取方式，由GC-FPD测定了茼蒿中的甲拌磷等4种有机磷农药残留量，讨论了搅拌速度、离子强度、均衡时间等影响要素对测定结果的影响；Lambropoulou等采用100μm聚二甲基硅氧烷萃取头、顶空-固相微萃取（HS-SPME）方式，用GC-MS办法测定了草莓和樱桃中的乙硫磷、对硫磷、倍硫磷等7种有机磷农药残留量；Sakamoto等开展了一种采用85μm聚丙烯酸酯萃取头、顶空-固相微萃取测定水中的158种农药残留量的GC-MS办法，讨论了不同品种萃取头、盐浓度、pH值和萃取温度等参数的影响。固相微萃取的优点是操作简单快速，价廉适用，适用于现场检测；缺陷是因固定相吸附容量有限，定量结果误差相对较大，主要用于定量测定。

3微波辅助萃取技术（MicrowaveAidedExtraction，MAE）

微波辅助萃取是1986年匈牙利学者Ganzler等人经过应用微波能萃取土壤、食品、饲料等固体物中的有机物，提出一种新的少溶剂样品前处置办法。微波辅助萃取技术是对样品停止微波加热，应用极性分子可疾速吸收微波能量的特性来加热一些具有极性的溶剂，到达萃取样品中含目的化合物，别离杂质的目的。Akhtar等[6]先用MAE法从精饲料中萃取出盐霉素，然后用HPLC法测定其浓度。Hummert等用MAE法萃取后用GC-ECD测定了海洋哺乳动物脂肪组织中的有机氯化合物，经该办法与索氏提取办法萃取的样品中类酯的含量类似。微波辅助萃取技术的优点是快速节能、俭省溶剂、污染小；缺陷是不易自动化，且普通仅用于有机氯类农药的提取。

4凝胶浸透色谱（gelpermeationchromatography，GPC）

凝胶浸透色谱技术是依据溶质（被别离物质）分子量的不同，经过具有分子筛性质的固定相（凝胶），使物质到达别离。凝胶浸透色谱法最初主要用来别离蛋白质，但随着适用于非水溶剂别离的凝胶类型的增加，凝胶浸透技术应用于农药残留量净化得以开展。Balinova采用GPC提纯步骤，用HPLC检测了5种GC无法检测的农药（杀虫隆、氟虫脲、四螨嗪、噻螨酮、除虫脲），办法灵活度高，精确度及精细度好，数据线性范围宽（2~40ng），可以很好地别离共萃取基质。该办法的操作难度相对较高，初学者不易控制。

5基质固相分散萃取（Matrixsolid-phasedispersionextr-action，MSPD）

基质固相分散萃取由Barker于1989年初次提出。这项技术的优点是不需求停止组织匀浆、沉淀、离心、pH调理和样品转移等操作。MSPD的原理是将C18等固相萃取吸附剂与固体、半固体或黏性的样品一同研磨，得到半干状态的混合物并将其作为填料装柱，然后用不同的溶液淋洗柱子，将各种待测物洗脱下来。MSPD多应用于从动物组织、蔬菜、水果中别离药品、除草剂、杀虫剂和其他污染物，BARBERSA和王运浩等以为影响MSPD效果的要素包括吸附剂的粒径、键合相的性质、样品基质的性质以及基质的修饰、淋洗剂的性质以及参加的次第等。Kristenson等开展了一种烦琐快速的MSPD/GC-MS办法测定水果中的氯菊酯和倍硫磷、马拉硫磷等10种有机磷农药残留量。选择C8作为吸附剂，每次剖析仅需25mg样品和100μL溶剂；Pico等应用C18做分散吸附剂、硅胶柱净化、GC-NPD和GC-ECD测定的办法检测了水果和蔬菜中的克菌丹、灭菌丹等8种杀菌剂；Morzycka树立了一种烦琐的多残留剖析的MSPD/GC-NPD办法测定蜂蜜中的乙硫磷、毒死蜱等12种农药的残留量，采用Florisil和硅胶作分散吸附剂，氧化铝和硅胶作为净化吸附剂，到达了较好的净化效果和良好的回收率。该办法仅适用于一类化合物的别离。

6固相萃取（SolidPhaseExtraction，SPE）

固相萃取（SPE）是应用固体吸附剂将液体样品中的目的化合物吸附，与样品的基体和干扰化合物别离，然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附，到达别离和富集目的化合物的目的。与液/液萃取相比，固相萃取有很多优点：固相萃取不需求大量互不相溶的溶剂，处置过程中不会产生乳化现象；采用高效、高选择性的吸附剂（固定相），能显著减少溶剂的用量，简化样品的预处置过程，同时所需费用也有所减少。普通来说，固相萃取所需时间为液/液萃取的1/2，而费用为液/液萃取的1/5。固相萃取本质上是一种液相色谱别离，其主要别离形式也与液相色谱相同，可分为正相（吸附剂极性大于洗脱液极性）、反相（吸附剂极性小于洗脱液极性），离子交流和吸附。目前，用于HPLC的填料简直均可用于SPE。但SPE柱的填料粒径大于HPLC填料，SPE柱效会远低于HPLC色谱柱。因而，该办法适于别离保存性质差异很大的化合物，主要用于处置样品。

固相萃取主要用于复杂样品中微量或痕量目的化合物的别离和富集。例如生物体（如血液、尿等）中药物及其代谢产物的剖析、食品中有效成分或有害成分的剖析、环保水样中各种污染物（可挥发性有机物和半挥发性有机物）的剖析等，都能够运用固相萃取将目的化合物别离出来，并加以富集。

该文将近年来开展疾速的固相萃取前处置技术与先进的气质联用检测技术分离起来，希冀能探究出一种快速便当、精确牢靠、用于实验室内的农药残留（包括有机磷、有机氯、拟除虫菊酯、氨基甲酸酯、除草剂、杀菌剂）检测前处置办法，进一步完善农药残留检测计划，为制定掩盖面广、快速、有效的新规范办法提供技术支持。