薄层色谱十篇

薄层色谱篇1

【关键词】 宁心胶囊;薄层色谱法;丹参酮ⅡA;黄芪甲苷;苦参碱

Abstract：Objective To establish the qualitative identification methods of Ninxin Capsules. Methods TLC method was used to identify salvia miltiorrhiza， membranous milk vetch root， radix sophorae flavescentis， with chemical substance and medicinal materials as reference. Results The spots for TLC identification of sample， preparation of chemical reference (Tanshinone IIA， astragaloside， matrine) and medicinal materials (salvia miltiorrhiza， membranous milk vetch root， radix sophorae flavescentis) were in the same position with the same color. Conclusion The method is reproducible and feasible， and provides basis for the qualitative quality standard of Ninxin Capsules.

Key words：Ninxin Capsules;TLC;Tanshinone IIA;astragaloside;matrine

宁心胶囊为本院制剂，由丹参、黄芪、苦参等药物组成，具有宁心安神、益气养心、活血通脉功效和抗心律失常作用，对胸痛、心悸也有良好的治疗效果。本试验采用薄层色谱法，对宁心胶囊样品中的主要组成药物丹参、黄芪、苦参等进行定性鉴别，为本品的质量控制提供依据。现将试验结果报道如下。

1 仪器与试药

PBQ-1型自动铺板器(重庆南岸动力仪器厂)，恒温水浴锅(常州国华电器有限公司)，紫外透射反射仪(北京六一仪器厂)，KQ-500超声波清洗器(上海超声波仪器厂)等。

宁心胶囊(本院制剂室自制，批号080613、081025、090301);对照药材丹参、黄芪、苦参(购自江苏南通鑫鑫医药药材有限公司，经本院陈峰生主任中药师鉴定);对照品丹参酮ⅡA(批号110766-200416)、黄芪甲苷(批号781-9002)、苦参碱(批号100078-200414)，供含量测定用，购自中国药品生物制品检定所。硅胶G(青岛海洋化工有限公司产品)。所用化学试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 丹参的鉴别

取丹参酮ⅡA对照品，加乙酸乙酯制成每1 mL含2 mg的溶液，作为对照品溶液。取本品内容物粉末2 g，加乙醚10 mL，置具塞试管中，超声提取30 min，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯1 mL使溶解，作为供试品溶液。取丹参药材1 g，按上述供试品溶液的制备方法制成对照药材溶液。按处方量，取除丹参外的其余药味按工艺要求制成缺丹参的样品，按供试品溶液制备方法制备阴性供试品溶液。吸取上述溶液各5 ?L，分别点于以同一羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，照薄层色谱法[2005年版《中华人民共和国药典》(一部)附录ⅥB]试验[1]，以苯-乙酸乙酯(19∶1)为展开剂，展开，取出，晾干， 10%硫酸乙醇液喷雾显色，热风吹干(80 ℃)，日光下检视。供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应位置上显相同的暗红色斑点，见图1。

2.2 黄芪的鉴别

取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。取本品内容物粉末2 g，置索氏提取器中，加甲醇50 mL冷浸1 h，水浴回流2 h;提取液回收甲醇并浓缩至干，残楂加水10 mL微热使溶解;用水饱和的正丁醇萃取3次，合并正丁醇萃取液，用氨试液处理2次，弃除氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水3～5 mL使溶解，放冷;通过D101型大孔吸附树脂柱，先以水50 mL洗脱，弃除水液，再用40%乙醇30 mL洗脱，弃除40%乙醇液，继用70%乙醇50 mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2 mL量瓶内，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取黄芪药材粉末1.5 g，依上述供试品溶液的制备方法制备对照药材溶液。按处方量，取除黄芪外的其余药味，按工艺要求制成缺黄芪的样品，按供试品溶液的制备方法，制备阴性供试品溶液。吸取上述溶液各5 ?L，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，照薄层色谱法[2005年版《中华人民共和国药典》(一部)附录ⅥB]试验[1]，以氯仿-甲醇-水(13∶6∶2)(10 ℃以下放置过夜)为展开剂，展开，取出，晾开。喷雾10%硫酸乙醇液显色，热风吹至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应位置上显相同的暗蓝色斑点，见图2。

2.3 苦参的鉴别

取苦参碱对照品适量，加氯仿制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。取本品内容物粉末1 g，置具塞锥形瓶中，加氯仿-氨水(25∶0.3)20 mL，超声提取20 min，滤过，水浴蒸干，加氯仿适量溶解，滤过，定容至10 mL，作为供试品溶液。取苦参药材粉末0.5 g，加氯仿25 mL，浓氨试液0.3 mL，放置过夜，滤过，滤夜蒸干，残渣加氯仿0.5 mL使溶解，作为对照药材溶液。按处方量，取除苦参外的其余药味，按工艺要求制成缺苦参的样品，按供试品溶液的制备方法制备阴性供试品溶液。取上述4种溶液各5 ?L，分别点于同一以2%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，照薄层色谱法[2005年版《中华人民共和国药典》(一部)附录ⅥB]试验[1]，以苯-丙酮-甲醇(8∶3∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾开，喷以碘化铋钾试液，热风吹干。供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应位置上显相同的鲜红色斑点，而阴性供试品色谱在此位置上无斑点，见图3。

注：1，2.对照品;3，4.对照药材;5，6.供试品;7，8.阴性供试品

图3 苦参薄层鉴别图谱

3 讨论

苦参是本制剂的主要成分之一，笔者参考文献[2]对苦参进行定性鉴别，同时对方中丹参、黄芪进行了定性鉴别。试验结果显示，制剂中丹参、黄芪、苦参药材的薄层定性鉴别斑点清晰明显，结果重复性好，可作为宁心胶囊制订定性质量标准依据。本品君、臣药指标性成分的含量测定方法与标准有待进一步研究制定。

参考文献

薄层色谱篇2

【摘要】 目的采用薄层定性的方法对哈蟆油进行薄层色谱研究。方法对哈蟆油在不同极性的溶剂、不同提取方法、不同显色剂，展开条件下薄层色谱行为进行研究。结果对哈蟆油的薄层色谱行为有了初步的了解。结论建立了不同极性范围内的哈蟆油薄层色谱图。

【关键词】 哈蟆油； 薄层色谱

Abstract：ObjectiveTo study Oviductus Ranae by thin-layer chromatography. MethodsThin-layer chromatography complexion of Oviductus Ranae with different pole solvents， different extraction methods， different visualizing reagents and different developing solvents. ResultsThe thin-layer chromatography complexion of Oviductus Ranae had preliminary acquaintance.ConclusionThe different pole range of thin-layer chromatograms of Oviductus Ranae is set up.

Key words：Oviductus Ranae; TLC

哈蟆油（Oviductus Ranae）为蛙科动物中国林蛙Rana temporaria chensinensis David雌蛙的输卵管，经采制干燥而得，具有补肾益精、养阴润肺的功效。临床用于治疗阴虚体弱，神疲乏力，心悸失眠，盗汗不止，痨嗽咳血［1］。薄层层析法也称薄层色谱法(thin-layer chromatography，TLC)，是快速分离和定性分析少量物料的一种非常重要的技术，与经典的分离提纯手段（重结晶、升华、萃取和蒸馏等）相比，薄层色谱法具有微量、快速、分离效率高和灵敏度高等优点［2］，自20世纪50年代建立该方法以来，在很多方面得到了广泛的应用，如判断有机合成反应进行的程度，合成药物的质量控制及杂质检查，中草药的分离提纯和鉴别，药物分析及含量测定等。近年来，尽管其他色谱技术发展迅速，但薄层色谱的应用并没有明显减少，反而随着新的固定相和高速发展的仪器技术的引入，呈现出愈加重视的势头，并成为一种现代的、灵敏的、高效的分离分析方法，是控制中药质量的良好方法。本文报道哈蟆油的TLC定性鉴别。

1 器材

1.1 药材正品哈蟆油药材，经本院生药教研室姜大成教授鉴定为蛙科动物中国林蛙Rana temporaria chensinensis David雌蛙的输卵管，经采制干燥而得，符合《中国药典》2005年版Ⅰ部哈蟆油项下规定。见表1。

表1 正品哈蟆油药材TLC指纹图谱研究供试样品（略）

1.2 试剂 胆固醇对照品，（10-1491-79，北京化工厂）；硅胶G（青岛海洋化工厂）；氯仿、甲醇、乙醇、醋酸乙酯、正己烷、丙酮、正丁醇、乙醚、石油醚、冰醋酸（均为分析纯）。

1.3 仪器超声波提取器 （KQ-100B，昆山市超声仪器有限公司）；电子分析天平（T-500，常熟双杰测试仪器厂）；双相展开槽（P- 上海信谊仪器厂）；电动显色设备（YOKO-PN，武汉药科新技术开发公司）；电水浴锅（HH-2 江苏金坛市荣华仪器制造有限公司）；紫外分析仪（EF-I，上海顾村电光仪器厂）；数码相机（Nikon E5600，510万有效像素）。

2 方法与结果

2.1 供试品溶液的制备

2.1.1 提取溶剂的选择和确定据报道，哈蟆油的化学成分有水溶性的和脂溶性的，根据其成分选择用不同极性的溶剂进行梯度提取，分别研究不同极性范围的哈蟆油薄层效果。主要有石油醚、氯仿（乙醚）、醋酸乙酯（正丁醇）、乙醇（丙酮）4个梯度。结果4个梯度的溶剂提取物的薄层效果没有显著的区别，区别仅在于极性稍大的溶剂的色谱斑点较少，其所有的斑点均能体现在极性较小的提取物的薄层板上。经过多种色谱条件的优选，以氯仿提取物的斑点较多，颜色较深。

2.1.2 提取方法的选择和确定分别采用超声提取法、回流提取法、连续回流提取法、浸渍法、硅胶柱色谱、萃取法。薄层跟踪的结果显示采用超声提取法和回流提取法的效果较好，两者没有明显的区别，考虑到超声提取法省时省力，设备先进，故选用了超声提取法。同时对超声提取时间进行了考察，结果超声提取10，20，30，40 min没有明显的区别，考虑节省时间、对仪器的损耗、提取更充分，选用了超声提取20 min。

2.2 对照品溶液的选择和确定先后选用了胆固醇、十六烷酸胆甾醇酯、1-甲基海因以及各类氨基酸作为对照品。结果以胆固醇和十六烷酸胆甾醇酯作为对照品在各个提取物中效果都很好，且Rf值适中。

2.3 吸附剂的选择和确定吸附剂是影响薄层效果的重要因素之一，常用的吸附剂主要有硅胶G、硅胶H、硅胶GF254、中性氧化铝、聚酰胺薄膜，在相同的实验条件下分别比较了上述几种吸附剂的薄层效果，结果以硅胶G为吸附剂色谱斑点无拖尾现象且色谱斑点较多。

2.4 展开剂的选择和确定采用了数值分析法、棱柱形法、均匀设计法等，结合哈蟆油所含成分的性质和结构。从上百种展开剂中优选，结果以石油醚∶醋酸乙酯∶丙酮∶冰醋酸（10∶1∶1∶1）、石油醚∶醋酸乙酯∶丙酮∶甲醇（10∶1∶2∶1）、石油醚∶丙酮∶正己烷∶冰醋酸（8∶1∶1∶1）、石油醚∶正己烷∶冰醋酸（6∶1∶2）、石油醚∶正己烷∶乙酸乙酯∶氯仿∶冰醋酸（9∶2∶1∶1）、石油醚∶冰乙酸（4∶1)、石油醚∶丙酮∶冰醋酸（6∶1∶1）、正己烷∶丙酮∶冰醋酸（8∶2∶1）、石油醚∶乙醚∶甲酸（10∶6∶1）、石油醚∶醋酸乙酯（8∶1）、石油醚∶醋酸乙酯∶正己烷（8∶1∶1）、石油醚∶氯仿∶正己烷（1∶6∶6）展开效果较好，分离度高，斑点较多，且没有拖尾现象，部分色谱图如图1。

图1 哈蟆油薄层色谱图（略）

2.5 显色剂的选择和确定显色剂考察了荧光灯（365 nm，254 nm）、改良碘化铋钾、硫酸乙醇、磷钼酸乙醇、香草醛试液、茴香醛试液、3，5－二硝基苯肼乙醇试液、对二甲氨基苯甲醛试液。结果以磷钼酸乙醇和硫酸乙醇为显色剂，显色的斑点较多，颜色分明。

2.6 展开方式的选择和确定展开方式选用了上行法、下行法、双向展开法、二次展开法，分别考察了10 cm×10 cm和10 cm×20 cm的薄层板，结果采用10 cm×10 cm的硅胶G板，二次展开后的分离效果更好，斑点也更清晰。

3 讨论

本研究曾对文献报道的有关哈蟆油的薄层色谱鉴别进行了考察，结果在薄层板上显现的斑点较少。基于本原因，作者对哈蟆油的薄层色谱进行了系统的研究，从提取溶剂的选择到提取方法，展开剂，显色剂，吸附剂以及展开方式的优选都做了比较研究。

由于极性较小的溶剂提取效率较好，本实验还对正己烷，环己烷，苯和甲苯提取物进行了研究，苯和甲苯提取物与环己烷和正己烷提取物的薄层效果没有明显的区别，同时由于苯和甲苯是一类试剂，环己烷和正己烷的极性与石油醚、乙醚的极性相当，提取物的效果也没有明显的区别，因此没有列出环己烷和正己烷提取物及其相应的展开剂系统。

在哈蟆油的近百种展开剂的优选中，对哈蟆油药材的薄层色谱行为有了一定的掌握，同时对哈蟆油所含成分的极性和溶解性有了更进一步的了解，为以后的研究工作提供了依据。

本研究首次全面考察了哈蟆油薄层色谱条件，确立了快速、直观、操作简便的鉴别哈蟆油药材自身的薄层色谱条件，为更好地控制哈蟆油的质量提供了依据。同时为进一步研究哈蟆油的薄层色谱指纹图谱以及同其它的色谱光谱联用技术提供了前提条件。

【参考文献】

薄层色谱篇3

【关键词】 丹芍活血胶囊；丹参；赤芍；牡丹皮；人参；薄层色谱法

丹芍活血胶囊由丹参、赤芍、牡丹皮、红花、人参、黄芪、山药、白术（炒）、天花粉、葛根等中药制成，具有健脾补肾，活血化瘀的功效。临床用于治疗糖尿病久气虚血瘀等症。笔者对处方中丹参等药材的薄层色谱鉴别进行了研究，报道如下。

1 仪器与试药

丹参酮ⅡA对照品（批号：744－8701）、丹皮酚对照品（批号：0708－9003）、芍药苷对照品（批号：0736－200118）、人参皂苷Rg1对照品（批号：0703－200118）均由中国药品生物制品检定所检所提供；薄层板：以0.5%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G（青岛海洋化工厂）薄层板自制 规格 10×10cm；紫外分析仪（）；样品及阴性对照样品均由本市红旗医院提供；所用试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 丹参 取本品内容物15g，加乙醚25ml，置具塞瓶中，超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。取丹参酮ⅡA加醋酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液作为对照品溶液。缺丹参阴性对照样品溶液同供试品溶液制备方法。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VI B）试验，吸取上述3种溶液各10 ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）－醋酸乙酯（41）为展开剂，展开，取出，凉干。供试品色谱中，在与丹参酮ⅡA对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点，阴性对照样品溶液无干扰。见图一

2.2 牡丹皮 供试品溶液同2．1 丹参项下。取丹皮酚对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含5mg的溶液作为对照品溶液。缺牡丹皮阴性对照样品溶液同供试品溶液制备方法。照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各10 ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）－醋酸乙酯（41）为展开剂，展开，取出，凉干，喷以盐酸酸性5%三氯化铁乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与丹皮酚对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点，阴性对照样品溶液无干扰。见图二

2.3 赤芍 取本品内容物5g，加乙醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml溶解，作为供试液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。缺赤芍阴性对照样品溶液同供试品溶液制备方法。照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各4ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿－醋酸乙酯－甲醇－甲酸(40:5:10:0.2) 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝紫色斑点。阴性对照样品溶液无干扰。见图三

2.4 人参 取本品内容物5g，加水饱和的正丁醇40ml,超声处理20分钟，滤过，滤液加氨试液40ml,摇匀，放置分层后，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。取人参皂甙Rg1对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。缺人参阴性对照样品溶液同供试品溶液制备方法。照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各3ul,分别点于一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(65:35:10)10℃以下放置12小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色荧光斑点。见图四

3 讨论

薄层色谱篇4

【摘要】 目的建立牡荆叶和牡荆油薄层色谱鉴别方法。方法以牡荆油为对照，采用硅胶G薄层板，以石油醚－醋酸乙酯（10∶0.3）为展开剂，以含5%香草醛的10%硫酸乙醇溶液为显色剂，105℃加热显色。结果斑点清晰，分离良好。结论该法操作简便，重现性好，可以作为牡荆叶和牡荆油的鉴别方法。

【关键词】 牡荆叶； 牡荆油； 薄层色谱

Abstract：ObjectiveTo establish the TLC method for the identification of Folium Viticis negundo and Oleum Viticis negundo.MethodsUsed the Oleum Viticis negundo as reference. Applied gel silica G thin layer plate by using the mobile phase 10:0.3 petroleum ether-acetoacetate solution， and the coloring agent alcohol solution of 5%vanillin and 10%sulfuric acid. The coloring temperature was 105°C. Results The spots were clear and the segregation was good. Conclusion The operation is brief and the reproducibility is good. The method can be used to identify Folium Viticis Negundo and Oleum Viticis Negundo.

Key words：Folium Viticis Negundo； Negundo Chastetree Oil； TLC

牡荆叶系马鞭草科植物牡荆Vitex negundo L.var.cannabifolia (Sieb.et Zucc.)Hand.-Mazz.夏秋两季叶茂盛时采摘的叶子；牡荆油系牡荆叶经水蒸气蒸馏所得的挥发油。牡荆油为牡荆叶的主要成分，具有一定的祛痰、止咳、平喘作用，临床上主要用于慢性支气管炎的治疗［1］。牡荆油成分复杂，根据不同成分的功能基团表现不同的化学特征可以对牡荆油进行初步定性鉴别，《中国药典》（2005版）［1］中收载的牡荆油鉴别方法即采用显色反应对其进行鉴别，然而此显色反应专属性不强，不能有效鉴别牡荆油的真伪。吴启端等［2］采用薄层色谱法，以5%香草醛硫酸溶液为显色剂，对牡荆油进行定性鉴别。文中仅选择牡荆油对照提取物中的一个未知物斑点进行鉴别，且得到的薄层色谱图清晰度不够。为了建立和完善牡荆叶、牡荆油的定性鉴别方法并对国家标准进行修订，本文采用TLC法以牡荆油对照提取物为参照，对牡荆叶和牡荆油进行了薄层鉴别方法研究，获得了满意的效果。现报道如下。

1 材料与试剂

牡荆叶：批号080529、080530分别采自湖北和江西吉水，经苏州大学药学院刘春宇教授鉴定为马鞭草科牡荆Viticis negundo L.var.cannabifolia (Sieb.et Zucc.)Hand.-Mazz.的干燥叶。牡荆油： 批号080101、080520分别购于广东佛山和江西上饶。牡荆油对照品，购于中国药品生物制品检定所（批号：200602，供薄层鉴别用）。硅胶G薄层板：青岛海洋化工厂（批号060930）；石油醚：上海凌峰化学试剂有限公司（批号061226，AR）；醋酸乙酯：国药集团化学试剂有限公司（批号T20070629，AR）；环己烷：国药集团化学试剂有限公司（批号T20070612，AR）。

2　方法与结果

2.1 供试溶液的制备

吸取牡荆油对照品和样品各0.1 ml，加入醋酸乙酯4.0 ml，溶解稀释，分别作为对照品溶液和供试品溶液；另取牡荆叶按《中国药典》［3］方法制成牡荆油，同法配制成供试品溶液。

2.2 供试品的薄层色谱鉴别

按照《中国药典》（2005年版）Ⅰ部薄层色谱法［1］，吸取对照品溶液与供试溶液各2 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（沸程30～60℃）－醋酸乙酯（10∶0.3）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以含5%香草醛的10%硫酸乙醇溶液，于105℃加热约5 min至斑点清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相同的位置显相同颜色的6个斑点。结果见图1～2。

2.3 精密度考察

分别吸取牡荆油对照溶液各2 μl，点于同一硅胶G薄层板上，按“2.2”项下展开，显色，结果表明精密度良好，见图3。

2.4 不同展开剂考察

分别吸取牡荆油对照溶液与供试溶液各2 μl，照“2.2”项下进行试验，并调整展开剂为石油醚（ 30～60℃ ）－醋酸乙酯(10∶0.3)、环己烷－醋酸乙酯(10∶0.5)、石油醚（60～90℃）－醋酸乙酯(10:0.3）。结果分别见图4～6。

2.5 不同显色剂考察

分别吸取牡荆油对照溶液与供试溶液各2μl，照“2.2 ”项下进行试验，并调整显色剂为10%硫酸乙醇溶液进行显色。显色效果见图7。

2.6 高湿度展开

在双槽展开箱的一侧槽中加入硫酸－水（10.8∶100）溶液（相对湿度为88%），将薄层板放入另一侧槽中，密闭放置15～30 min，加展开剂于不含硫酸的槽中，照“2.2 ”项下进行实验。结果见图8。

2.7 展开温度考察

照“2.2”项下进行实验，分别置于4℃，30℃条件下进行展开结果见图9～10。

3 讨论

3.1 展开剂的选择

实验中分别考察a：石油醚（ 30～60℃ ）－醋酸乙酯（10∶0.3）；b：环己烷－醋酸乙酯（10∶0.5）；c：石油醚（60～90℃）－醋酸乙酯（10∶0.3）3种展开剂，结果表明a的展开效果明显优于b，而a与c的展开效果差异不大，但a的单次展开时间较c明显缩短，由45 min降至25 min左右，因此本着快速分析的目的，采用a作为展开剂。

3.2 显色剂的选择

从图4和图7比较发现，以含5%香草醛的10%硫酸乙醇溶液进行显色所得斑点数及清晰度明显好于其它，且优于文献［2］中的5%香草醛硫酸溶液显色效果。

3.3 影响因素考察

温湿度是薄层色谱实验常见的影响因素，本文通过考察，结果发现高湿度和实验室高、低温度对薄层色谱试验未见明显影响，表明本实验方法的稳定性较好。

本文建立了以牡荆油对照品为对照的牡荆叶及牡荆油的薄层色谱鉴别方法，对相关薄层条件进行优化，并对日常薄层色谱操作中容易影响实验结果的相关因素进行了考察，最终表明此薄层鉴别方法的专属性强，稳定性及重复性均较好，操作简单，可作为牡荆叶和牡荆油鉴别方法。

参考文献

薄层色谱篇5

    【摘要】目的 采用新的展开系统测定两面针中氯化两面针碱及乙氧基白屈菜红碱的含量,同时对不同部位的两面针药材图谱作比较。方法 应用甲苯-乙酸乙酯-甲醇(25:20:0.1)和浓氨试液展开系统,对不同部位两面针药材供试品进行薄层色谱,比较其氯化两面针碱及乙氧基白屈菜红碱含量。结果 本文的展开系统不仅可以使其基线达到完全分离,而且同时鉴别氯化两面针碱和白屈菜红碱。两面针的根中氯化两面针碱和白屈菜红碱的含量显着高于地上部分,细茎的成分很少。结论 新的展开系统可同时鉴别氯化两面针碱和白屈菜红碱两种成分,操作简单,重现性较好。

    【关键词】氯化两面针 白屈菜红碱 薄层色谱

    两面针为芸香科植物两面针Zanthoxylum nitidum (Roxb.)DC.的干燥根,为我国南方省区的常用中药。对于两面针药材的质量控制,主要是利用薄层-分光光度法[1]和薄层扫描法[2]测定两面针中氯化两面针碱的含量,药典以甲苯-乙酸乙酯-甲醇(25:2:0.1)展开系统作为乙氧基白屈菜红碱成分的鉴别,氯化两面针碱的色谱条件为苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试液(20:5:3:1:0.12)[3],本文采用的条件可将以上两种成分较好地分离,同时对不同部位的两面针药材图谱作了比较。

    1 仪器与材料

    双槽展开缸(Camag),薄层色谱摄像仪(Camag Digistore 2);全自动点样仪(Camag ATS4);薄层色谱扫描仪(Camag TLC scanner 3);硅胶60预制板(10×20cm,Merck)。所用试剂均为分析纯。对照药材两面针(Zanthoxylum nitidum(Roxb.)DC.)由中国药品生物制品检定所购得,批号:21014-200302,10批药材均为广东罗浮山药业提供。

    2 试验方法与结果

    2.1 供试品溶液的制备 取本品粉末0.5g,加入甲醇30mL,超声处理30分钟,取出,滤过,滤液浓缩至5mL,即得。另取两面针对照药材0.5g,同法制得对照药材溶液。

    2.2 对照品溶液的制备 称取氯化两面针碱约0.5mg,白屈菜红碱适量(制备薄层所得),加甲醇制成0.5mg,mL-1的溶液。

薄层色谱篇6

【关键词】贯叶连翘；金丝桃素；薄层色谱扫描

【Abstract】Aim To determination of the content of hypercin in Hypericum Perforatum L by TLC-scanning. Metheds Silica GF254 thin layer plate was adopted in the determination with Petroleum ether-Ethyl acetate-methanol（2：4：1）as developer by TLC-scanning， the detection wavelength was 588nm. Results Good linear correlation was within 0.15-7.5μg（R=0.99987）， the average recovery was 97.92%，RSD=1.82%（n=5）. Conclusion This method is convenient in operation ，easy in separation and economical at cost .And TLC scanning can be used for the content determination and the quality control of Hypericum Perforatum L.

【Key words】Hypericum Perforatum L； Hypercin； TLC-scanning

金丝桃素是贯叶连翘中最具有生物活性的物质，研究表明金丝桃素在抗抑郁、镇静、抗菌消炎及抗肿瘤中具有显著的效果，尤其是在抗病毒活性方面作用突出。由中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所从贯叶连翘中分离提取的金丝桃素在抗禽流感病毒[1]、口蹄疫病毒[2]等病毒中显示出了良好效果。我国有着丰富的贯叶连翘植物资源，利用这些资源优势对其有效成分及活性进行系统的研究，为新药的开发、应用以及一些疑难症的治疗提供坚实的科学依据，为进一步开发具有我国特有优势的中药新药产生极大的推动作用。因此，本实验以金丝桃素为指标，首次采用薄层色谱扫描法对甘肃产药材贯叶连翘中金丝桃素的含量进行了研究，为贯叶连翘的资源开发提供依据。

薄层色谱法是在20世纪50年代从经典柱色谱法及纸色谱法的基础上发展起来的一种色谱技术。近年来，薄层色谱采用更细、更均匀的吸附剂作为固定相，发展成现代薄层色谱法，其灵敏度已可与高效液相色谱法媲美，而且已经在天然药化含量测定中广泛应用，其特点是快速、方便、操作简单、试验成本低、分离条件易掌握且结果直观。本实验尝试采用薄层扫描色谱法对贯叶连翘中所提取的金丝桃素进行分离和定量测定，得到了较为满意的结果。现报道如下：

1 仪器与试药

KH-2100薄层扫描色谱仪，（上海科哲生化科技有限公司）；薄层硅胶板GF254（10cm×20cm），（青岛海洋化工）；25μL平头微量进样器，（宁波市镇海玻璃仪器厂）。金丝桃素标准品，（Sigma公司）；贯叶连翘产于甘肃陇南，经鉴定为Hypericum Perforatum L的全草；所用其他试剂均为分析纯。

2 实验方法与结果

2.1 对照品溶液的制备

精密称取金丝桃素对照品适量，加甲醇制成0.1mg/ml的溶液，作为对照品溶液，冷藏，备用。

2.2 供试品溶液的制备

取适量贯叶连翘粗粉，无水乙醚反复浸渍，除去其中叶绿素，再用无水乙醇于60℃下多次浸提，直至TLC检测无金丝桃素提出，合并无水乙醇浸提物，50℃内旋转蒸发仪浓缩，得到金丝桃素浸膏。称取适量浸膏用甲醇溶液溶解，置10ml容量瓶内，用甲醇稀释至刻度，摇匀。取少量该溶液以0.45μm的微孔滤膜滤过，作为供试品溶液，冷藏，备用。

2.3 薄层色谱鉴别

金丝桃素的鉴别：按照薄层色谱法（《中国药典》2000年版―部附录ⅥB），取以上供试品和对照品各4ul，分别点于同一硅胶板上，以石油醚-乙酸乙酯-甲醇（2：4：1）为展开剂；避光条件下薄层板放入展开缸内上行展开，取出，晾干，置紫外灯（365nm）下检视，供试品色谱中，在与金丝桃素对照品相应的位置上，显相同的橙色荧光斑点。

扫描条件：薄层硅胶板：GF254（10cm×20cm）；展开剂：石油醚-乙酸乙酯-甲醇（2：4：1）；展开方式：避光条件下薄层板放入展开缸内上行展开8cm；采用单波长扫描，扫描波长588nm。

2.4 干扰试验

精密吸取金丝桃素对照品溶液5μL、甲醇溶液5μL，甲醇作为对照点，将样品点于同一薄层板上，按照上述条件展开。分别对对照品斑点位置进行扫描。结果表明，在金丝桃素斑点处有吸收峰，而在甲醇相应的位置无吸收峰。说明此薄层板对于测定金丝桃素含量无干扰。

2.5 线性关系考察

2.6 稳定性试验

取同一薄层板上点样量相同（2μL）的6个对照品斑点，每隔5min扫描一次，取每次的平均值。结果表明，金丝桃素在25min内扫描基本稳定，RSD=1.92%（n=6），以后随时间延长，吸收峰面积略有减小。

2.7 精密度试验

分别精密吸取金丝桃素对照品溶液2μL，在同一薄层板上点6个点，依法展开，对斑点扫描，结果6个点的平均峰面积积分值为20525，RSD=1.75%（n=6），说明其精密度良好。

2.8 重复性试验

按照样品溶液的处理方法，对同一批样品分别制备6份供试品溶液，精密吸取2μL，点样，测定峰面积，平均峰面积积分值为19894，RSD=2.13%（n=6）。

2.9 加样回收试验

精密称取已知含量的同一批样品5份，分别精密加入金丝桃素标准品0.001mg/ml溶液2ml，按照供试品溶液制备方法制成加样回收溶液，在上述条件下展开，测定其平均回收率为97.92%，RSD=1.82（n=5）。

3 讨论

对贯叶连翘中金丝桃素含量的测定已有文献报道[3-5]，但对贯叶连翘采用薄层色谱扫描进行金丝桃素含量的测定尚未见报道。高效液相色谱虽具有快速、自动化高，但是其试剂和色谱柱昂贵，实验成本相对较高，不利于大量样本的分析。而该法具有操作简便、快速、分离度和重复性较好，大量样品一次性处理的优势，可为建立该药材的质量标准提供依据。

金丝桃素具有光敏性，遇光会分解，在点样和展开剂展开的过程中均需要在避光的条件下进行，展开完后，要在避光的条件下尽快将展开剂挥干，于365nm的紫外灯下观察斑点，测量出大概的扫描位置，然后再进行扫描。

【参考文献】

[1]赵晓虹，梁剑平，祝艳华，等.金丝桃素蛋白络合物体外抗H5N1亚型禽流感病毒的活性研究[J].中兽医医药杂志，2006，3：13-15.

[2]王曙阳，杨林西，梁剑平，等.金丝桃素的体外抗口蹄疫病毒活性[J].中国兽医科技，2005，35（4）：310-314.

[3]曾建国，张胜，陈玉秀.HPLC法分析贯叶连翘不同部位中金丝桃素的含量[J]. 西北药学杂志，2000，15（8）：1581.

薄层色谱篇7

【关键词】颗粒；薄层色谱；鉴别；黄芪；红花

TLC identification of granular preparation of tongyanghuoxue

HUO Zuan-yun，CHEN Shu-ying.ChineseTraditionalMedicalHospitalofFoshan，Guangdong 528000,China

【Abstract】 Objective Providing scientific basis for quality standards established by establishing the qualitative analysis of the most effective composition in the granular preparation of Tongyanghuoxue.Methods Effective compositions of Flos Carthami and Radix Astragali were identified by TLC.Results In the TLC of the testing samples，same color spots were noted at the corresponding sites of the reference substances and effective compositions of Flos Carthami and Radix Astragali can be identified by TLC.Conclusion The reproducibility and the specialization of the TLC were good.The method was simple and convenient，which can be used for quality control of the granular preparation of Tongyanghuoxue.

【Key words】Granular preparation; TLC; Identification；Radix astragali；Flos carthami

通阳活血颗粒是本院的一种中药制剂，由黄芪、红花、地龙等中药材制成，具有益气活血，除痰通络的功效。主要用于气虚痰瘀证，如强直脊椎炎，风湿性关节炎，类风湿关节炎，增生性骨关节炎及坐骨神经痛。症见疼痛日久，肢体麻木，骨节僵硬等，亦用于中风之半身不遂，口眼歪斜等。经过长时间的临床应用，通阳活血颗粒对上述症状有明显的疗效，为了更好地保证该制剂的质量，对颗粒中的君药黄芪、红花进行薄层色谱鉴别，为制定其质量标准提供理论依据。

1 实验仪器、原料与试剂

ZF-90型电暗箱式紫外线灯投射仪(上海顾村电光仪器厂)；超声波清洗器；萃取装置；回流提取装置；硅胶G(青岛海洋化工有限公司)；玻璃点样毛细管(华西医科大学仪器厂)；黄芪对照药材(批号：20080110)；红花对照药材(批号： 20080221)；黄芪甲苷标准品、对照品均

购自中国药品生物制品检定所；所用中药材由广州致信药业有限公司提供；试剂均为分析纯。

2 实验方法与实验结果

2.1 黄芪薄层色谱鉴别［1-2］

2.1.1 供试品制备 取本品3 g，研细，加甲醇40 ml，超声处理20 min，放冷,滤过,滤液蒸干,残渣加水15 ml,分次溶解,加乙醚提取2次,每次15 ml,弃去乙醚液,水液用水饱和的正丁醇振摇提取2次,每次15 ml,合并正丁醇提取液,加氨试液提取2次,每次20 ml,弃去氨液,将正丁醇水浴蒸干,残渣加甲醇1 ml溶解,作为供试品溶液。

2.1.2 标准品制备方法 取黄芪甲苷对照品,加甲醇制成每1 ml含0.5 mg的溶液,作为对照品溶液。

2.1.3 对照药材溶液制备 取黄芪对照药材适量，加甲醇20 ml,加热回流1 h，滤过，滤液加于中性氧化铝柱(100~120目，5 g，内径10~15 mm)上，用40%甲醇100 ml洗脱，收集洗脱夜，蒸干，残渣加水30 ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20 ml，合并正丁醇液，用水洗涤2次，每次20 ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇0.5 ml使溶解，作为对照药材溶液用。

2.1.4 阴性液制备 按通阳活血颗粒处方去除黄芪,其他按供试品制备方法制成阴性液。

2.1.5 薄层层析 照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录V IB)试验,吸取上述四种溶液各10、 20 μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以正丁醇-醋酸乙酯-甲醇-水(4∶1∶1∶1)为展开剂,展开,取出,晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃烘约5 min,至斑点显色清晰,取出。

2.1.6 测定结果 供试品色谱中,在与标准品、对照药材色谱相应的位置上，日光下显相同的棕褐色斑点，阴性液无干扰(见图1)。

2.2 红花薄层色谱鉴别［3-4］

2.2.1 供试品制备 取本品适量，加80%丙酮溶液20 ml，密塞，超声处理10 min，过滤，滤液作为供试品溶液。

2.2.2 对照药材溶液的制备 取红花适量，加水煎煮2次(1 h，0.5 h)，每次20 ml,过滤，合并滤液，加乙醇使之含醇70%，放置6 h，过滤，滤液回收乙醇至干，残留物加20 ml水溶解后按供试品溶液制备项下方法制成红花对照药材溶液1 ml。

2.2.3 阴性对照品的制备 取不含红花的通阳活血颗粒适量，溶解，再按供试品溶液制备项下方法制成空白对照液1 ml。

2.2.4 薄层层析 照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录V IB)实验，吸取上述三种溶液各5 μl，分别点于同一以羧甲基纤维素为粘合剂的硅胶H薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇(7∶2∶3∶0.4)为展开剂，展开，取出，晾干。

2.2.5 测定结果 供试品色谱中与对照药材色谱相应位置上，日光下显相同红褐色的斑点，阴性液无干扰 (见图2)。

3 讨论

3.1 用TLC法鉴别通阳活血颗粒，均能检测到主药黄芪和红花的成分，色谱斑点清晰，附近无杂质斑点干扰，方法简便、快速、可行性及重现性好，结果准确、可靠，可用于该制剂质量控制中的定性分析。

3.2 本实验的关键是选择适宜的试验条件、合适的分离提纯方法及展开条件。在对黄芪中有效成份黄芪甲苷的提取中选取合适的提取溶剂，以获得纯的黄芪甲苷成份。在测定黄芪甲苷含量过程中发现展开剂的选择及配比对测定结果影响较大,传统的氯仿∶甲醇∶水(13∶7∶2)和正丁醇∶冰醋酸∶水(4∶1∶1)对于本制剂的分离效果都不理想,在多次比较筛选后本实验确定选用正丁醇∶醋酸乙酯∶甲醇∶水(4∶1∶1∶1)为展开剂。

3.3 通阳活血颗粒作为复方中药制剂，原质量标准只是对某一类物质进行理化鉴别，专属性不强，为了更准确地控制其质量标准，故在原质量标准基础上增加了对制剂中黄芪、红花的薄层色谱鉴别，为制定其质量标准提供理论依据，确保临床用药的安全和有效。

参考文献

［1］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典.化学出版社，2005：212-213.

［2］ 聂明华，黄淑君.中风康复胶囊中黄芪、红花、丹参的薄层色谱鉴别.中国药业出版社，2006,15(8):29.

薄层色谱篇8

作者：邓英璞 杨天明 许杏梅

【摘要】目的 建立参蓉壮骨胶囊的质量控制方法。方法 采用薄层色谱法对方中的当归、三七进行定性鉴别。结果 薄层色谱斑点清晰，阴性对照无干扰，耐用性良好。结论 薄层色谱法简单、易行，专属性强，重现性好，可对参蓉壮骨胶囊进行定性鉴别。

【关键词】参蓉壮骨胶囊　薄层色谱鉴别

参蓉壮骨胶囊(批件号：YZL-2009-004)为广东省英德市中医院自拟处方制剂，由当归、三七、党参、白芍、独活、枸杞子、巴戟等多味中药组成，具有补益肝肾、强壮筋骨、祛风除湿等功效，用于骨伤恢复期，经英德市中医院使用多年，疗效确切。2009年经广东省食品药品监督管理局批准，同意进行临床试验。为制订制剂质量标准，本试验在参考2005年版《中国药典》（一部）的文献基础上，对制剂中的当归、三七进行薄层色谱定性鉴别研究。

1 材料

当归对照药材（批号120927-200310）、三七皂苷R1对照品（批号110745-200313）、人参皂苷Rb1对照品（批号110704-200319）、人参皂苷Rg1对照品（批号0703-200118）均购于中国药品生物制品检定所；硅胶G（批号060412）为青岛海洋化工有限公司生产；其他所用试剂均为分析纯；参蓉壮骨胶囊由广东省英德市中医院制剂室生产，批号为2007010801、2007010802、2007010803；阴性对照品制剂按制剂处方工艺缺味配制，所用药材均符合《中国药典》（一部）2005年版规定。

2 方法及结果

2.1 当归薄层色谱鉴别

取参蓉壮骨胶囊内容物6g，加甲醇15ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。同法取缺当归的阴性对照品制成缺当归阴性对照品溶液。另取当归对照药材，加甲醇10ml，同法制成对照药材溶液[1]。

2.1.1 专属性

吸取供试品溶液、对照品溶液和阴性对照溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(4：1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，结果未见阴性对照溶液对鉴别有干扰，（见图1）。

图1 当归薄层鉴别

1.供试品 (2007010801) 2.供试品 (2007010802) 3.供试品 (2007010803) 4.当归对照药材 5.缺当归阴性对照

2.1.2 耐用性

不同温度的比较：取点样后的薄层板，分别在6℃和14℃的层析缸中展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。结果表明在6℃～14℃范围内试验，对鉴别无明显的影响。（图2）。

图2 不同温度下试验结果

1.供试品 (2007010801)

2.当归对照药材

不同湿度的比较：取点样后的薄层板，分别在用硫酸调节相对湿度32%和72%的层析缸中展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。结果表明在相对湿度32%～72%范围内试验，对鉴别无明显的影响。（见图3）。

图3 不同湿度下试验结果

1.供试品 (2007010801) 2. 当归对照药材

经上述方法学验证，结果表明温湿度变化对展开效果影响不大，因此，认为本方法的耐用性良好。

2.2 三七薄层色谱鉴别

取参蓉壮骨胶囊内容物6g，加乙醚20ml，超声处理10分钟，滤过，药渣挥干乙醚，加甲醇20ml，加热回流20分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水25ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次15ml，取正丁醇提取液，用氨试液20ml洗涤，再用正丁醇饱和的水溶液洗涤2次，每次20ml，正丁醇浓缩至干，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液；按处方及制法制成缺三七的阴性对照样品，取相当于供试品的量，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液；另取三七皂苷R1对照品、人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液[2]。

2.2.1 专属性

吸取供试品溶液、对照品溶液和阴性对照溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，结果未见阴性对照溶液对鉴别有干扰。（见图4）。

图4 三七皂苷R1对照品、人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Rg1对照品薄层鉴别

1.供试品 (2007010801) 2.供试品 (2007010802) 3.供试品 (2007010803) 4.三七皂苷R1对照品、人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Rg1对照品的混合液 5.缺三七阴性对照

2.2.2 耐用性

不同温度的比较：取点样后的薄层板，分别在6℃和16℃的层析缸中展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，结果表明在6℃～16℃范围内试验，对鉴别无明显的影响。（图5）。

1.供试品 (2007010801)

2.三七皂苷R1对照品、人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Rg1对照品的混合液

不同湿度的比较：取点样后的薄层板，分别在用硫酸调节相对湿度为32%和72%的层析缸中展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。结果表明在相对湿度32%～72%范围内试验，对鉴别无明显的影响。（见图6）。

1.供试品 (2007010801)

2.三七皂苷R1对照品、人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Rg1对照品的混合液

经上述方法学验证，结果表明温湿度变化对展开效果影响不大，因此，认为本方法的耐用性良好。

3 讨论

3.1 上述2种药材成分的提取、薄层色谱所用的展开剂，均是在参考了有关资料的基础上经过多次试验筛选后得出的。

3.2 从上述试验的结果可以看出：2种药材采用薄层色谱鉴别方法，展开及分离效果良好，阴性对照无干扰，温湿度变化对展开效果影响不大，方法简便、快捷，重现性好，可对成品制剂中所含的当归以及三七所含主要有效成分进行有效检识。

参 考 文 献

薄层色谱篇9

[关键词] 救心丸；薄层色谱；人参；鉴别

[中图分类号]R927 [文献标识码]B [文章编号]1673-7210（2009）02（a）-038-02

Studies on the Ginseng TLC identification for Kyushin Pills

MO Jie-li, LONG Ying

(Guangdong Institute for Drug Control, Guangzhou 510180,China)

[Abstract] Objective: To improve the method of Ginseng TLC Identification in Kyushin Pills, and establish a better way to control the quailty of Kyushin Pills. Methods: The methods of extraction and the condition of chromatography and coloration under the differential item of TLC in the original quality test were improved. Results: The operation was easy and the chromatographic spots was clear and had no interference.Conclusion: It could be used to control the quailty of Kyushin Pills.

[Key words] Kyushin Pills; TLC; Ginseng; Identification

救心丸是由蟾酥、牛黄、人参、鹿茸粉末、羚羊角、动物胆（豚胆）、珍珠、龙脑等多味中药材组成的中成药，具有益气强心的功效，用于气虚血瘀所致的心痛、胸闷、气促、眩晕、心悸、神疲乏力、自汗、手足发冷、食欲不振、水肿等症状以及冠心病、心绞痛、陈旧性心肌梗死、心功能不全的治疗。该药由救心制药株式会社生产，其现行进口注册标准中人参的薄层色谱鉴别方法经过多批检验，其中人参皂苷Rb1等均难以被检出，且杂质干扰大、色谱重现性较差，对结果判断造成一定的影响。根据有关文献报道，现对救心丸中人参的鉴别方法进行改进，改进后的方法重现性好、色谱斑点清晰、阴性对照无干扰，可用于救心丸的质量控制。

1 仪器与试药

对照品： 人参皂苷Rg1、Re、Rb1购于中国生物制品检定所，批号分别为0703-200322、0754－200320、0704－2004020；供试品：救心丸由救心制药株式会社生产，批号分别为L013、M112、N011；其他试剂均为分析纯；薄层板：自制硅胶G板，规格为20 cm×10 cm，涂层厚度0.5 mm（硅胶粉由青岛海洋化工有限公司生产，批号060310）；预制硅胶G板，规格为20 cm×10 cm，厚（0.2±0.03）mm（烟台市化学工业研究所，批号10060411）；预制硅胶G板，规格为20 cm×10 cm，厚度0.5 mm（德国Merck公司，批号OB528945）。

2 方法与结果

2.1 溶液的制备

2.1.1 供试品溶液的制备取本品粉末1.0 g，加三氯甲烷50 ml，加热回流1 h，滤过，弃去三氯甲烷液，药渣挥干溶剂，加甲醇20 ml，加热回流1 h，滤过，滤液蒸干，残渣加水30 ml使溶解，加水饱和正丁醇提取2次，每次20 ml，合并正丁醇提取液，再加正丁醇饱和水30 ml洗涤，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。

2.1.2 对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1、Re、Rb1对照品，加甲醇制成每1 ml各含2 mg的混合溶液，作为对照品溶液。

2.1.3 阴性对照品溶液的制备按照原标准中制剂工艺制备缺人参成分阴性对照品溶液。

2.1.4 原标准供试品溶液的制备取本品粉末1.0 g,，加三氯甲烷50 ml，加热回流1 h，滤过，滤液蒸干，滤渣加甲醇20 ml，置水浴上加热回流1 h，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，加于已处理好的氧化铝柱（120目，中性氧化铝2 g，内径约10 mm，先用甲醇10 ml预洗）上，用50 %甲醇洗脱，收集洗脱液5 ml，浓缩至约1 ml，作为原标准供试品溶液。

2.2 色谱条件

2.2.1 层析板比较了自制硅胶G板，预制硅胶G板，结果预制硅胶G板效果较好。

2.2.2 点样量3 μl。

2.2.3 展开剂a：三氯甲烷－乙酸乙酯－甲醇－水（15∶40∶22∶10）10℃以下放置的下层溶液；b：三氯甲烷-甲醇-水(65∶35∶10)10 ℃以下放置的下层溶液。

2.2.4 显色方式及检视喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，日光下检视。

2.3 实验结果

2.3.1使用展开剂a的色谱结果，见图1、2。

2.3.2 使用展开剂b色谱结果，见图3、4。

由上述实验结果可见，采用展开剂a的色谱分离度欠佳，预制板比自制板的效果较好。

2.3.3 按原标准检验结果详见图5。

3 讨论

原标准人参鉴别受其他成分的干扰，色谱背景颜色较深，目标成分难以察见，而且供试品溶液的前处理采用中性氧化铝柱去除杂质，中性氧化铝柱对皂苷成分有吸附，会造成皂苷成分的损失，造成其难以被检出。本研究针对上述原因进行了分析，对该鉴别的前处理方法进行修订。

展开条件应注意控制温、湿度，宜在低温低湿的条件下，色谱斑点分离度较好。

采用修订的薄层色谱方法，能有效去除杂质干扰，色谱斑点清晰，重现性好，提取方法较为简便，此方法优于原标准。

[参考文献]

薄层色谱篇10

平面色譜法又包括纸色谱法和薄层色谱法。薄层色谱法是用载板上涂布或烧结一薄层物质作为固定相的液相色谱法。应用最多的是以硅胶为固定相的吸附薄层色谱法。薄层色谱与纸色谱相比，具有分析时间较短、分离能力较强，检出灵敏度较高的特点。20世纪60年代以来已取代了部分纸色谱的工作。又由于薄层色谱实现了仪器化，自动化程度提高，测定精度及灵敏度都有很大提高，至今仍充满活力。 

1 色谱原理 

色谱这一概念首先由俄国著名植物学家Tswett提出，在研究植物色素组成时发现了色谱分离的潜力，首次提出了色谱法这一概念。色谱法（chromatography）是一种分离并分析复杂样品的方法，在化学和生物等领域有着广泛的应用[1]。它主要利用复杂样品本身性质的不同，在不同相态的进行选择性分配，以流动相和固定相的相互位移对复杂样品中的单一样品进行分类洗脱，复杂样品中不同的物质会以不同的洗脱速度在不同的时间上脱离固定相，最终达到分离复杂样品的效果。 

薄层色谱法具有众多的优点：速度快，可同时展开多个试样；试样预处理简单，对试样限制少；仪器简单，操作方便；分离能力较强且灵敏度较高。因此，其使用范围广，使用频率高，已广泛地应用于中药指纹图谱分析、食品添加剂分析、环境科学和化学化工等领域。

2 色谱技术在生产中的应用 

2.1 精细化工领域 

随着色谱分离技术研究的不断深入，尤其集成化和规模化色谱分离技术的应用，使得色谱分离技术在精细化工领域应用越来越广泛，尤其在发掘工业生产过程中，色谱分离技术尤为重要。在发掘工业领域，发酵液成分复杂，杂质多样，而目标样品往往含量较低，如何实现目标成分的高效分离分析，对于该行业的发展起着关键作用。 

2.2 医药领域 

随着医药现代化生产的不断发展，对于医药组分的分离与单一成分研究要求越来越高。但由于药学成分提取复杂，有效成分含量较低等原因，因此需要更为严格的分离分析手段进行药效成分的分离和含量测定。目前在医药成分分离分析领域主要应用到的色谱技术主要包括薄层色谱，气相色谱和毛细管电泳技术。而随着现代分析仪器的不断发展，尤其中药及天然药物药效成分组成极其复杂，对其分离要求也愈发严格，需要发展更为精密的色谱技术，如超临界色谱，高效逆流色谱，高效毛细管电泳和色谱-质谱联用技术。 

2.3 蛋白质组学研究 

色谱技术除了在工业生产中有着广泛的应用之外，在微观大分子分离领域也有着重要的应用。例如蛋白质组学研究中，色谱分离技术也有着重要应用。目前对于蛋白质组的分离研究，主要有双向电泳技术和高效液相色谱技术。其中双向电泳技术根据蛋白质的分子量及等电点在二维领域将蛋白质进行分离，可以直观显示生物体内的蛋白质组成，双向电泳结合质谱技术已成为蛋白质组学研究的一个成熟的研究平台。 

3 化工检验薄层色谱分离技术 

将样品溶液点于预先涂布有固定相（如硅胶）薄层板一端适当的位置，将板置于层析缸中，使点有试样的一端浸入流动相（展开剂）中，由于薄层的毛细管作用，展开剂沿薄层渐渐上升，试样的各组分沿着薄层在固定相和流动相之间不断发生溶解、吸附、再溶解、再吸附。由于各组分的分配系数不同使它们在薄层上移动的距离也不同，从而达到分离。展开剂上升到一定距离时，从层析缸中取出薄层板。如果组分是有色的，就可以看到各个色斑，如果组分无色，要用物理的或化学的方法显色，得到一个薄层色谱图。 

3.1 薄层色谱操作方法[2] 

薄层色谱的实验步骤有：制板、点样、展开、显色、定性和定量。 

3.2 薄层板的制备 

将平板玻璃裁成正方形或长方形，一般分析用20cm×20cm和20cm×10cm两种。将玻璃片洗净烘干。通常采用湿法制板，它具有薄层牢固、可批量制备、展开后便于保存、分离效果好等优点。 

3.3 点样 

样品用适当的有机溶剂制成溶液，浓度约为0.5～2mg/ml。点样量为0.5～5ul，在距薄层板底边1cm处点样，原点直径在3～4mm。手工点样用微量注射器。如用点样仪点样，样量精确、形状整齐一致，能提高定量分析的准确度。 

3.4 展开 

展开的实验操作是，将点样后的薄层板置于密闭的层析槽中，下端浸入展开剂高度不应超过0.5cm。展开距离一般为10～15cm，根据溶剂移动的方向分为上行展开和下行展开。另外，还可利用多次展开、双向展开等方法得到不同的层析结果。 

3.5 定位与显色 

确定被分离组分的位置称为定位。展开后的薄层板自槽中取出，室温下挥发去溶剂。若被分离组分本身有颜色，它们的位置根据有色的斑点即可确定。无色的化合物可采用物理检出法、化学检出法、酶与生物检出法和放射检出法来定位。 

3.6 定性 

试样与标准品同板作对照试验，二者只f值相同且显色特性相同，可初步认为是同一化合物。必要时采用其他方法加以验证。 

3.7 定量 

（1）洗脱法。把组分斑点的吸附剂取出，用溶剂洗脱后，用其他方法测定。如分光光度法、荧光等方法测定。此法操作复杂，效率较低。 

（2）原位法。即在薄层上组分斑点位置进行测定。又分为目测法、测面积法和薄层扫描仪扫描定量法。 

4 结束语 

综上所述，本文介绍了薄层色谱的操作流程、薄层色谱扫描仪的工作原理和原油组分的薄层色谱分离方法。薄层色谱用于定量分析时，最好采用高效薄层色谱法，即采用分离效率高、展开距离短，灵敏度高的高效薄层板。且点样、展开、显色、定量均使用仪器。高效薄层色谱法的应用大大提高了薄层分析的重现性和准确度。 

参考文献