氨基酸的功效与作用十篇

时间:2023-04-04 06:44:54

氨基酸的功效与作用

氨基酸的功效与作用篇1

关键词:马蹄香;高效液相;胃肠病;药物;氨基酸

中图分类号:R284文献标识码:A

文章编号:1007-2349(2011)11-0067-03

研究已证明营养物质尤其是氨基酸如谷氨酰胺(Gln)、谷氨酸和精氨酸,在维持肠道健康和功能方面起着重要的作用。马蹄香用于治疗树人工感染轮状病毒肠炎,取得良好的止泻效果,肠黏膜绒毛呈修复过程[1]。马蹄香用于治疗轮状病毒肠炎患儿,是安全有效的,无任何不良反应[2]。动物急性和亚急性毒性实验证明,马蹄香无任何毒副反应,对人和动物血象、肝肾功能及心脏无明显影响[3]。为深入认识马蹄香治疗病毒性肠炎的有效成分和作用机制,本研究测定了马蹄香散剂和5种治疗胃肠病药物中氨基酸的含量,以便利于马蹄香制剂的推广和应用。

1药物样品和来源

(1)马蹄香散剂由中国军事医学科学院军事兽医研究所(长春)提供;(2)蒙脱石散由博福-益普生(天津)制药有限公司生产(批号:U0115);(3)盐酸小檗碱片由杭州民生药业集团有限公司生产(批号:T09K518);(4)复方谷氨酰胺肠溶胶囊由地奥集团成都药业股份有限公司生产(批号:090719);(5)参苓健脾胃颗粒由昆明中药厂有限公司(批号:091221);(6)L-谷氨酰胺呱仑酸钠颗粒由寿制药株式会社生产(批号:Z39M)。

2测定方法

21仪器和试剂美国Waters600系统,2487紫外检测器,M32色谱数据工作站,Waters氨基酸水解标准液,AccQTagUltraaEluentA(美国Waters公司提供)AccQTagUltraaEluentB(美国Waters公司提供),WatersAccQ-Fluor试剂盒(美国Waters公司提供),乙腈(美国Fisher公司,色谱纯),水为超纯水,核桃(购自昆明金马正昌果品批发市场)。

22试验方法

221色谱条件色谱柱:WatersAccQ-Tag氨基酸分析柱46mm×150mm;紫外检测波长:248nm;柱温:55℃;按标准行梯度洗脱;理论塔板数以谷氨酸不低于5000。

222氨基酸标准使用液的制备设定氨基酸使用液浓度:取1支Waters氨基酸水解液标准,打开后吸取1mL,放至一支干净的25mL试管中,加85mL超纯水,旋涡混匀备用。

223衍生试剂制备将烘箱预热至(55±1)℃,取一瓶衍生剂粉2A,轻轻敲动以确保打开前所有粉在瓶底;吸取1mL稀释液2B并弃去以冲洗一个干净的微量移液吸头,移1mL稀释液2B至2A瓶中,盖紧瓶盖,旋涡混匀10min,55℃加热5~10min使衍生剂粉溶解(加热不得超过10min)。将溶解后的衍生试剂放入干燥器中,可在室温保存1星期。

224氨基酸标准品的衍生将烘箱预热至(55±1)℃;用微量进样器吸取10μL标定标准至一支干净的样品管底部;移70μL硼酸缓冲液至样品管中,短暂旋涡混匀;移20μL衍生试剂至样品管中,立即旋涡混匀数秒种;室温放置1min;用封口膜封口,55℃加热5min既得。

225样品溶液的制备精密称取粉碎均匀的样品50mg,置干燥洁净的安瓿瓶中,加02%苯酚溶液1mL,加6mol/L盐酸溶液2mL,充氮,迅速将充好氮气的安瓿瓶瓶口置于酒精喷灯上封口,置110℃烘箱中水解24h,打开安瓿瓶,取1mL水解液移入蒸发皿中,蒸干,残渣用水分次洗涤,合并洗涤液,滤液移至10mL容量瓶中,稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。

226样品溶液的衍生吸取供试品溶液约1mL,通过022μm微孔滤膜过滤,吸取10μL滤液按224以下同法操作。进样量1μL。

测定完成单位:本研究的氨基酸测定由云南省分析测试研究所(中心)完成。测定方法:用高效液相色谱仪(HPLC)方法测定氨基酸。检查和判定标准为GB/T5009124-2003。GB/T5009124-2003由中华人民共和国卫生部和中国国家标准化管理委员会,是国家标准。

3测定结果

谷氨酸和精氨酸在以上6种治疗胃肠病药物中的含量均较高,谷氨酸的含量在L-谷氨酰胺呱仑酸钠>复方谷氨酰胺>蒙脱石散>马蹄香>盐酸小檗碱片>参苓健脾胃颗粒。精氨酸的含量在复方谷氨酰胺中>马蹄香>蒙脱石散>盐酸小檗碱片>参苓健脾胃颗粒。缬氨酸的含量在蒙脱石散>马蹄香>复方谷氨酰胺>盐酸小檗碱片>参苓健脾胃颗粒。在蒙脱石散和复方谷氨酰胺中丙氨酸的含量高于马蹄香。在蒙脱石散中天冬氨酸的含量高于马蹄香。盐酸小檗碱片中的组氨酸、甲硫氨酸高于马蹄香。在L-谷氨酰胺呱仑酸钠中胱氨酸、赖氨酸和甲硫氨酸的含量高于马蹄香。其余氨基酸在马蹄香中的含量均高于其他药物中的,马蹄香散剂中的氨基酸含量是比较丰富的。

4讨论

蜘蛛香(ValerianajatamansiiJones)为败酱草科属植物,药用其根茎及根,别名:马蹄香(云南、广西)。马蹄香已载入中国药典,在《本草纲目》和《滇南本草》中均有记载,具有理气和中、散寒除湿、活血消肿的功效,用于治疗腹脘胀痛、呕吐泄泻、小儿疳积、咳嗽、流感等症,是云南多民族使用的中草药,其资源丰富,分布较广。加强其有效成分的研究,对马蹄香的开发和推广应用极为重要,也是发掘和研究天然药物及民族民间医药的需要。

本研究测定了单方中药马蹄香散剂中氨基酸含量,并与治疗胃肠病有效的药物蒙脱石散、复方谷氨酰胺、盐酸小檗碱片、参苓健脾胃颗粒和L-谷氨酰胺呱仑酸钠中的氨基酸含量进行比较,发现谷氨酸和精氨酸在以上6种治疗胃肠病药物中的含量均较高,谷氨酸的含量在L-谷氨酰胺呱仑酸钠>复方谷氨酰胺>蒙脱石散>马蹄香>盐酸小檗碱片>参苓健脾胃颗粒。精氨酸的含量在复方谷氨酰胺中>马蹄香>蒙脱石散>盐酸小檗碱片>参苓健脾胃颗粒。缬氨酸的含量在蒙脱石散>马蹄香>复方谷氨酰胺>盐酸小檗碱片>参苓健脾胃颗粒。在蒙脱石散和复方谷氨酰胺中丙氨酸的含量高于马蹄香。在蒙脱石散中天冬氨酸的含量高于马蹄香。盐酸小檗碱片中的组氨酸、甲硫氨酸高于马蹄香。在L-谷氨酰胺呱仑酸钠中胱氨酸、赖氨酸和甲硫氨酸的含量高于马蹄香。其余氨基酸在马蹄香中的含量均高于其他药物中的,马蹄香散剂中的氨基酸含量是比较丰富的,有其特点。

氨基酸进入肠道组织后,通过3种途径代谢:①合成蛋白质;②通过转氨基作用生成其他氨基酸、代谢底物或中间产物;③完全氧化成CO2,和H2O。在前两种代谢途径中,氨基酸可被机体用于生长或其他生物学功能。一旦完全氧化成CO2,则是对氨基酸的浪费,尤其是必需氨基酸。随着人们对Gln、谷氨酸和精氨酸认识的逐步深入,临床上在严重创伤、大手术、烧伤等应激状态下或长期行TPN时补充Gln、谷氨酸和精氨酸,可降低肠黏膜的通透性,维护肠黏膜结构的完整性,增强黏膜免疫功能,减少肠道细菌移位,可避免肠源性感染的发生。

在Gln合成酶的作用下,谷氨酸与氨反应生成Gln。L-精氨酸在肝或肾内合成,合成的前体物质是谷氨酸或Gln。肠道黏膜条件必需氨基酸如谷氨酰胺(Gln)、谷氨酸和精氨酸,在调节肠形态和功能完整性起着重要作用。每天食入的谷氨酸、Gln、天冬氨酸和血液Gln进入肠黏膜后,成为小肠能量的主要来源,为小肠养分的主动转运和蛋白质周转提供足量的ATP;谷氨酸是合成谷胱甘肽的前体物,谷胱甘肽是保护肠黏膜免受毒素入侵和氧化损伤的关键组分;精氨酸是NO的生理来源之一,NO在调节肠道血流量、酶的分泌和上皮细胞生长等起主要作用;精氨酸和Gln的代谢产物鸟氨酸是合成多胺的前体物,多胺是肠道上皮细胞修复所必需的物质[4]。

小肠黏膜中的精氨酸在上皮细胞精氨酸酶Ⅱ的作用下合成NO、多胺、脯氨酸、谷氨酸、尿素和鸟氨酸。精氨酸及其肠内衍生物如NO、多胺和鸟氨酸等,对于维持正常的肠道健康生长起着重要的作用[5]。还有研究表明,精氨酸的肠保护作用主要由其产生的NO完成。NO是一种自由基性质的脂溶性气体物质,由一氧化氮合酶(NOS)催化精氨酸产生。动物消化道均有NOS分布,各段密度不同,其中以小肠最多[6]。NO可影响肠上皮细胞的紧密连接、促进肠道黏液和电解质分泌、调节肠黏膜的血流量和维持肠黏膜微循环[7]。Blachier等的研究表明,精氨酸生成多胺后,可促进肠道上皮细胞的分化增生。因此,必须给予一定量的精氨酸才能满足肠道快速发育的需要[8]。最近的研究表明,精氨酸还可激活肠上皮细胞mTOR和一些激酶信号通路,从而提高蛋白质合成、增强细胞分化能力和有助于修复受损的肠道上皮细胞[9]。

肠内谷氨酰胺补给支持能快速有效地促进Peyer’s结淋巴细胞增殖,尤其是B细胞,增加Peyer’s结内淋巴细胞总数:有利于肠道免疫屏障的恢复和强化[10]。Peyer’S结是肠系膜相关淋巴组织(gut associatedlymphoidtissueGALT)的主要成员之一,其中心区域是B细胞的富含区,并具有生发中心,主要含IgA淋巴母细胞即slgA阳性细胞,是黏膜分泌IgA细胞的主要来源,也是小肠内诱导免疫应答的最重要部位[11]。在肠道黏膜免疫系统中,Peyer’s结淋巴细胞直接参与了肠道抗原的识别、呈递和免疫效应,他们的功能和状态直接反映了肠道黏膜免疫系统的功能和状态:因此可以说Peyer’s结构成了肠道免疫屏障的基础,维护和优化Peyer’s结内细胞结构、功能状态对于宿主的防御和维持内环境的稳定极为重要[12]。

研究和临床资料均表明补充Gln、谷氨酸和精氨酸,可降低肠黏膜的通透性,维护肠黏膜结构的完整性,增强黏膜免疫功能,减少肠道细菌移位,马蹄香用于治疗腹泻病并有其特殊的效果,可能与其所含的谷氨酸、精氨酸对受损胃肠组织的生长、粘膜修复及免疫功能调节的特殊作用有关系。本研究从马蹄香散剂中氨基酸含量分析对马蹄香的治疗机制提供了一定的实验依据。

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氨基酸的功效与作用篇2

(滨州学院,山东 滨州 256600)

摘 要:本文主要介绍了我国玉米蛋白质的利用状况,玉米蛋白粉的组成,高F值寡肽的概念和功能,从玉米蛋白粉中提取高F值玉米寡肽的酶解提取工艺.从玉米黄粉的粉碎、预处理、配制水解液、酶解、灭酶、分离纯化、浓缩、干燥、成品.最后对玉米寡肽开发的前景进行了阐述了.

关键词 :高F值;玉米黄粉;酶解;活性多肽

中图分类号:TS213.4文献标识码:A文章编号:1673-260X(2015)04-0072-02

玉米是我国传统的农作物,其产量约占谷物产量的五分之一,利用玉米蛋白质提取高F值寡肽,是一种增加玉米加工经济价值,促进玉米的种植业及加工业健康发展的一种有力措施.

1 玉米蛋白提取的状况

玉米是世界上三大粮食作物之一,在我国的产量更是达到1.1亿吨左右,排在世界第三位.在工业上主要用于生产淀粉,我国玉米加工初具规模,年产淀粉380吨,但是加工深度同发达国家美国相比较,差距很大,表现在:加工产品单一、工艺落后;生产总产低,经济效益不高等.如今,种植业产业结构在我国又进行调整,因此加速玉米的深加工势在必行.玉米蛋白粉又称玉米黄粉是湿法生产玉米淀粉过程中的主要副产物,年产量达20万吨以上.,其含有近60%的蛋白质,具有特殊的气味和色泽,口感粗糙,严重缺乏Lys和Trp等必须氨基酸,在玉米中蛋白体往往与淀粉粒紧紧相连,所以很难直接利用.其中较差的水溶性是制约玉米蛋白质利用的一个重要因素.目前,大部分国家对玉米蛋白质的利用有两条基本利用路线;第一条是作为工业副产物产出的玉米蛋白粉应用于生产饲料;第二条是开发其中的玉米胚蛋白再应用于饲料添加剂或食品.玉米蛋白的提取主要分为以下几个方面:(1)提取玉米醇溶性蛋白,(2)制取玉米食品添加剂蛋白发泡粉,(3)制取玉米中脂溶性色素,(4)制备氨基酸,(5)提取玉米黄色素.作为天然色素的玉米黄色素被欧美国家批准为可食用色素,而且玉米蛋白作为一种植物蛋白也具有重要的营养保健功能,例如可降低患老年性白内障,眼部黄斑退化的风险,能有效抑制肿瘤的生长等.2000年8月,酶解玉米蛋白粉制备高F值寡肽通过了国家轻工业局组织的专家验收.

2 玉米蛋白粉的组成

玉米黄粉中蛋白质主要含蛋白质(50%~65%)、淀粉(15%~25%)、脂肪(7%),水分(<10%)、纤维(2%)、灰分(1%)、类胡萝卜素(100~300mg/kg)玉米醇溶蛋白(60%)、谷蛋白(22%)、球蛋白(1.2%)和白蛋白[9].醇溶蛋白不溶于水,也不溶于无水乙醇,却溶于60%~90%的乙醇水溶液,还能溶于十二烷硫酸钠(SDS)、丙二醇、强碱和醋酸等有机溶剂.中性及碱性条件下不稳定,酸性条件下稳定.亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸的含量高于苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的量,由此可知玉米蛋白粉的氨基酸存在不平衡现象,这也是制约蛋白粉利用的一个方面,同时也是一个有利方面.

3 高F值低聚肽

德国医学博士Fischer等人在20世纪70年代,发现肝病病人血液中支链氨基酸(Val、Leu、Ile)对于芳香族氨基酸(Tyr、Phe、Trp)摩尔数之比对于正常人要低3~3.5倍或更低.支链氨基酸对于芳香族氨基酸的摩尔比称为F值(Fischer ratio),高F值寡肽是蛋白质水解得到的有3~6个氨基酸组成的寡肽,其支链氨基酸与芳香族氨基酸的比值在20以上.即:

研究证明:肝脏是芳香族氨基酸代谢分解的主要场所,当肝功衰竭时,分解氨基酸的能力大大降低,氨基酸积累在血液中,而骨骼肌是支链氨基酸分解的主要位置,肝脏的病变并不会影响支链氨基酸的分解,但是,当肝功衰减时,胰岛素在肝脏内的灭活功能明显降低导致了胰岛素过量,而胰岛素能促进支链氨基酸进入肌肉,从而过多耗用血液中的BCAA(单链氨基酸),导致了芳香族相对支链氨基酸积累,即F值降低,从3~3.5降低到1.0或更低.

4 高F值寡肽混合物的功能

大家都认为蛋白质是消化为氨基酸后才被吸收,但是医学界及生物界已公认:由于寡肽的渗透压低于相对应的氨基酸,在胃肠中的消化吸收比蛋白质和游离氨基酸均要好而且速度快;另外肽的吸收方式是主要依靠H+或Ca+离子浓度电导而进行的耗能的转运过程,这与主要依靠Na+泵主动运输游离氨基酸是不同的,所以在消化道的吸收率上寡肽要高于相对应的氨基酸.实质上蛋白质的营养作用就是多肽和L-氨基酸的作用,其中小分子多肽在生命过程中所起的作用比氨基酸更加积极.根据最新发现高F值氨基酸还可以增加小鼠寿命,是提高人类寿命潜在的药物资源.自70年代初期对支链氨基酸的特殊生理和药理有所认识后、设计了相应氨基酸混合口服液和输液用于临床.

4.1 辅助治疗肝性脑病

血浆中的AAA是中枢单氨能神经递质的前体.一种氨基酸进入人脑中的量取决于它在血浆中的水平和与其他氨基酸的竞争能力.肝硬化病人的血浆中氨基酸模式处于一种非正常的状态(高AAA浓度,低BCAA浓度)从而AAA通过血脑屏障的比例更高.而过高的AAA在大脑中会使中枢单胺神经递质发生紊乱.因此,能够提高血浆中的BCAA浓度,就能够恢复神经系统正常的单胺神经递质的代谢.改善肝昏迷和神经状态,改善营养状态,降低血氨,减轻或消除了肝性脑病的症状.Z在临床试验,高F值制剂疗效很好,可使大部分病人在6~24h内清醒.

4.2 改善卧床病人和术后的蛋白质营养状况

支链氨基酸不仅是骨骼肌能量代谢的底物,而且还有促进蛋白质合成,抑制蛋白质的分解的作用,目前广泛用于一些高代谢手术和疾病的临床治疗,如外科手术、烧伤、脓毒血症和卧床病人的蛋白质营养输液,并取得了显著的疗效.另外,寡肽在蛋白质合成效率高于有利氨基酸的效率,所以利用高F值寡肽可以提高总蛋白质合成.

4.3 增强抗疲劳功效

在人体内,5-羟色胺核多巴胺分别是抑制性神经递质和脑内中枢兴奋性神经递质,5-羟色胺以降低中枢向外周发射神经冲动来降低运动能力,后者调节肌肉紧张.在大脑皮层冲动的触发下发动动作,如果血液中的氨基酸失去平衡含量升高,进入大脑的游离色氨酸增多,导致5-羟色胺合成增多,运动机能下降,产生疲劳.因此补充BCAA可以改善血液中氨基酸平衡,改善运动后骨骼肌线粒体功能,改善运动性疲劳.张铁华等通过玉米高F值寡肽对小鼠游泳时间、血清尿素氮、肝糖原和肌糖原和血乳酸的影响结果表明高F值具有调节体内代谢和抗疲劳作用.郭玉荣,蒲新秀等通过动物实验证明,白鼠饮用富含支链氨基酸饮料后,体重显著增加,运动能力增强,抗疲劳能力明显提高.

4.4 解酒醉功能

酒精在人体内氧化和排泄速度缓慢,其氧化的主要场所是肝脏.在肝内通过2个以NAD+为辅酶的乙醛脱氢酶和乙醇脱氢酶的作用,分别将乙醇转化为乙酸和乙醛.因此稳定的NAD+能加速酒精的转化.研究证明,高F值寡肽可以提高血液中的丙氨酸和亮氨酸进而产生稳定的NAD+来降低血中的乙醇浓度,达到解酒的作用.

4.5 缓解苯丙酮尿症对神经系统的损害

所谓苯丙酮尿症就是由于患者体内缺失苯丙氨酸羟化酶而不能正常的将苯丙氨酸氧化为酪氨酸,最终苯丙氨酸会在转氨酶的作用下形成苯酮酸,进一步氧化成苯乙酸.研究证实,苯乙酸会对神经系统造成一定的损害,而高F值制剂可以大大降低苯丙氨酸的摄入,改善苯丙酮尿症,从一定程度上缓解苯乙酸对神经系统的损害、

4.6 富含亮氨酸肽可降低血清胆固醇浓度

富含亮氨酸的寡肽能够刺激肠高血糖素和甲状腺素分泌,加速内源性胆固醇的代谢,加快粪便中类甾醇的排泄,从而有效降低血清种胆固醇的含量.当前,国内外市场上大部分的高F值制品,如国内的六合氨基酸静脉输入液、肝醒灵、国外的A622、F080等,都是用结晶氨基酸配制而成的,这些产品质量优功效显著还可静脉注射,但是价格也是非常昂贵,普通收入家庭承担不起.我国人口众多,重体力劳动者.得症病人总量随之也多.甚至肝病患者之量也是数以亿计.价格低廉,当有功效的高F值食品和保健品推向市场时,不仅可取得良好的经济效益,也是造福百姓的举措.

5 利用玉米蛋白粉制取高F值寡肽

通过酶解法水解玉米蛋白粉的一般流程为:玉米蛋白粉粉碎预处理酶解灭酶分离纯化浓缩干燥成品.预处理玉米蛋白粉的主要步骤包括:脱色脱淀粉增溶,目的是使酶解时酶充分发挥作用,并有利于后提取.黄粉的脱色主要采用有机溶剂浸提法,有机溶剂主要为乙醇.浸提后采用正己烷进行液液萃取.脱色后的黄粉利用酶解法去除淀粉,纯化后,可获得蛋白含量在90%以上的玉米蛋白粉.常用的玉米蛋白粉酶解蛋白酶包括碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶.碱性蛋白酶是一种内切酶,分子量为27300.木瓜蛋白酶属于外切酶,在酸性、中性、碱性环境下均能分解蛋白质的蛋白酶.中性蛋白酶是一种内切酶.碱性蛋白酶水解物中苏氨酸、缬氨酸、组氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸的含量高于木瓜蛋白酶和中性蛋白酶.碱性蛋白酶中的疏水氨基酸的总量高于其他氨基酸.水解玉米蛋白质一般采用二次酶解生产工艺,第一次是将蛋白质水解成苯丙氨酸在肽链末端的肽,第二次是用另一种酶脱下肽链末端的苯丙氨酸,使其游离,然后用吸附法将脱下来的芳香族氨基酸除去,剩下支链氨基酸,经过超滤吸附,浓缩加热灭菌,最后得到产品.所得的产品由于吸附条件和活性炭的添加量不同而有不同的F值.当提取率约为15%时,产品的F值大于20,含氮量的平均分子量为200~600d.采用复合酶水解玉米蛋白可以节省投入,缩短生产流程,大大节省成本.是当今酶解玉米蛋白粉制备高F值寡肽的一种趋势.

6 展望

我国玉米产量很大,如果对玉米产淀粉后的福产物玉米黄粉进行二次开发,变废为宝,增加农产品加工的附加值.开发高F值功能性食品或药物是纯天然、无毒副作用,符合未来药物的发展.我国人口众多,需求量大,开发高F值制品必将为企业社会带来巨大的经济和社会效益,前景十分广阔.

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氨基酸的功效与作用篇3

“生命活动的主要承担者――蛋白质”是人教版高中生物学教材“分子与细胞”第2章“组成细胞的分子”第2节内容。其中的教学难点较多,如,氨基酸的结构特点、脱水缩合反应的过程、蛋白质结构多样性的原因等。本节内容比较抽象,高一学生没有有机化学的知识基础,对于氨基酸的结构通式以及氨基酸如何脱水缩合等理解起来有一定困难。根据心理学的首因效应,新授课的教学效果会直接影响到学生对上述疑难问题理解的深度。因此,我将新知识进行分层引导,以简单知识作为理解疑难问题的台阶,让学生能够顺利地掌握难度较大的知识。

二、教学目标

1.知识目标

阐明氨基酸的结构特点,以及氨基酸形成蛋白质的过程;概述蛋白质的结构和功能。

2.能力目标

尝试建立氨基酸结构通式的球棍模型,以及使用球棍模型演示脱水缩合过程;能够利用多媒体搜集相关信息,学会鉴别、选择、运用和分享信息。

3.情感、态度与价值观目标

认同蛋白质是生命活动的承担者,体验合作学习的快乐;初步形成生物体的结构与功能、局部与整体、多样性与共同性相统一的观点。树立辩证唯物主义自然观,逐步形成科学的世界观。

三、教学过程

1.创设情境,引入新课

多媒体展示2004年安徽阜阳出现的“大头婴儿”照片和2008年三鹿奶粉添加三聚氰胺事件照片,激发学生的学习兴趣,还有哪些食品富含蛋白质?展示不同食品,学生思考回答。为何食物中蛋白质如此重要?蛋白质在我们生命活动中有哪些作用?学生结合生活经验,引导学生总结蛋白质的主要功能。蛋白质能够承担多种多样的功能,这与它的结构有什么关系呢?展示“瑞年氨基酸片”的图片、说明书,启发学生思考:瑞年氨基酸片为什么能够促进生长并提高免疫力?我们需要服用吗?从而引出氨基酸的结构。

设计意图:从学生熟悉的事件入手,引导学生思考归纳蛋白质的功能,从保健品“瑞年氨基酸片”引导学生思考蛋白质和氨基酸之间的关系,从而理解氨基酸是组成蛋白质的基本单位。

2.以甲烷模型为例,构建氨基酸结构模型

展示甲烷结构模型,以学生熟悉的乙酸(CH3COOH)引入化学基团羧基(―COOH)的概念,以学生熟悉的氨气(NH3)引入化学基团氨基(―NH2)的概念。接着要求学生利用所给的球棍(红、黑、绿、蓝色球分别代表氢原子、碳原子、氧原子、氮原子,小铁棍代表化学键,弹簧棍代表碳氧双键)模仿甲烷的结构模型组装出甘氨酸。组装完后请学生从不同角度识别氨基、羧基,并比较氨基酸空间结构与平面结构的区别。展示四种不同的氨基酸图片,请学生比较归纳出氨基酸的结构通式及其结构特点。

设计意图:在学生没有相关有机化学知识的情况下,通过学生熟知的甲烷、乙酸、氨气等知识引入羧基、氨基新概念,通过动手操作构建氨基酸模型,多角度比较使学生掌握氨基酸的结构特点,从而突破该教学难点。

3.学生活动,模拟氨基酸脱水缩合反应

展示氨基酸脱水缩合的Flas,利用前面组装的氨基酸

球棍模型构建两个氨基酸的脱水缩合反应模型。由学生活动模拟多个氨基酸的脱水缩合反应。具体做法:(课前用A4纸分别打印好羧基、氨基、肽键、水,其中肽键用彩色纸打印最好)若干名学生(身躯代表碳原子,头代表R基,腿代表H)每人一手拿羧基,另一只手拿氨基,互相之间找同学(代表氨基酸)发生脱水缩合反应,一名同学专门负责取下消耗的氨基和羧基并换上肽键。教师引导学生观察并思考学生模拟脱水缩合反应过程中肽键与水分子、氨基酸数目及肽链数目的关系。

设计意图:通过学生模拟脱水缩合反应,变抽象为直观,降低学生理解的难度,使学生在活动中体验合作学习的快乐。

4.蛋白质结构的多样性决定其功能的多样性

展示因氨基酸种类、数目、排列顺序、肽链折叠空间结构不同而形成的蛋白质,让学生归纳出蛋白质结构多样性的原因。蛋白质结构的多样性与其功能的多样性有怎样的关系?引导学生得出生物界的普遍规律:结构与功能相统一。

设计意图:学生通过观察,自主归纳出蛋白质结构多样性的原因,进而理解生物体的结构与功能相统一的观点,使学生树立辩证唯物主义自然观,逐步形成科学的世界观。

四、教学反思

本节内容因学生缺少相关化学基础知识,学生不容易理解和掌握。笔者通过对新知识进行分层引导,化抽象为直观,学生活动模拟实验,既激发了学生的学习兴趣,调动了学生的多种感官,突出知识的主要矛盾,促进学生理解蛋白质是生命活动的主要承担

氨基酸的功效与作用篇4

肝性脑病(hepaticencephalopathy,HE)系严重的肝功能失调或障碍所致、以代谢紊乱为主要特征的中枢神经系统功能失调性综合征,主要临床表现为意识障碍、行为异常及昏迷[1]。肝性脑病是重型肝炎和失代偿期肝硬化患者常见的严重并发症和常见死亡原因之一,积极讨肝性脑病的治疗方法是降低病死率的措施之一。我们在综合治疗的基础上加用门冬氨酸鸟氨酸及乳果糖治疗HE68例,临床疗效显著,现报道如下。

1资料与方法

1.1临床资料对2007年9月至2011年6月间沈阳市第九人民医院消化科符合HE诊断标准[2]的住院患者68例,男50例,女18例,年龄35-75岁,平均55.09±10.06岁,其中肝硬化患者58例(乙型肝炎肝硬化38例,丙型肝炎肝硬化6例,酒精性肝硬化12例,原发性胆汁性肝硬化2例),重型肝炎10例(亚急性重型肝炎2例,慢性重型肝炎8例)。随机分为治疗组36例和对照组32例,在综合治疗的基础上治疗组给予门冬氨酸鸟氨酸及乳果糖(肝硬化30例,重型肝炎6例),对照组给予精氨酸(肝硬化28例,重型肝炎4例),两组年龄、性别、病因、病程、肝功能以及HE临床分期等比较差异无统计学意义(P>0.05)均有可比性,见表1。

1.2治疗方法出现HE后立即给予低流量吸氧、心电监护、低蛋白饮食、保肝、维持水电解质平衡、抗感染等对症综合治疗。在综合治疗的基础上治疗组给予门冬氨酸鸟氨酸10-20g加入5%葡萄糖注射液250ml中,1次/d静脉滴注,乳果糖口服液20-30ml加0.9%氯化钠溶液稀释至100ml加温至39-40℃,2次/d保留灌肠;对照组给予精氨酸20g加入5%葡萄糖注射液250ml中,1次/d静脉滴注,0.9%氯化钠溶液,2次/d清洁灌肠。疗程均为7天。

1.3观察指标密切观察患者的临床表现(包括精神神经症状改善、意识改变、计算能力恢复、行为异常消失、扑翼样震颤变化、昏睡或昏迷情况的恢复等),治疗前后分别查空腹血氨和肝肾功能等。

1.4疗效判断标准显效:意识清醒,一般情况好转;有效:由昏迷状态减轻1个级别而未完全清醒者;无效:意识障碍无改变或进一步加重而改用其他药物治疗,或患者治疗过程中死亡。以显效和有效病例计算总有效率。

1.5统计学方法应用SPSS13.0统计软件分析,计量资料用(χ±s)表示,采用t检验,计数资料用x2检验,P

2结果

2.1两组治疗前后血氨、肝功能的变化治疗组与对照组比较,患者血氨、AST、TBil均明显下降(P﹤0.05),差异有显著性,见表2。

2.2两组患者治疗后疗效情况经过7天治疗,治疗组显效15例(41.7%),有效18例(50%),无效3例(8.3%),总有效率为91.7%;对照组显效9例(28.1%),有效13例(40.6%),无效10例(34.4%),总有效率为65.6%。两组比较,差异有显著性意义(x2=7.027,P=0.008

2.3不良反应治疗组中神志清醒后3例轻度恶心,2例出现轻度烦躁。对照组未出现药物不良反应。

3讨论

HE病死率极高,其发病机制复杂,目前认为与HE发病机制有关的学说包括氨中毒学说、假性神经递质学说、γ-氨基丁酸/苯二氮卓(GABA/BZ)复合体学说、氨基酸代谢失衡学说等,其中氨中毒学说占最主要地位[3]。因此,减少氨的吸收,促进氨的排泄,加速氨的转化,是临床治疗HE的常用措施。

门冬氨酸鸟氨酸是L-鸟氨酸-L-冬氨酸复合,鸟氨酸参与尿素循环,促进氨甲酰磷酸合成及谷氨酰胺的合成,增加了肝脏的解毒功能,改善支链氨基酸与芳香氨基酸的比值,临床上可显著降低血氨[3],门冬氨酸作为底物可生成谷氨酸和草酰乙酸,谷氨酸进一步转化为谷氨酰胺和谷胱甘肽,谷胱甘肽具有抗氧化和解毒功能,草酰乙酸参与三羧酸循环,为组织细胞提供能量,促进损伤肝细胞的修复与再生,降低转氨酶,提高肝细胞摄取、转化、排泄胆红素及对血氨的解毒能力,恢复肝脏功能[5]。另外,门冬氨酸鸟氨酸还可促进肝细胞能量的生成和新陈代谢,从而增强肝细胞对胆红素的摄取、结合和排泄[6],故具有迅速降低转氨酶,恢复肝功能,促进胆红素代谢的作用。

乳果糖为合成双糖,口服后在小肠不会被分解,到达结肠后被乳酸杆菌、粪肠球菌等分解为乳酸和乙酸而降低肠道内pH值,有利于NH3转化成NH4+,同时由于其渗透性通便和酸性代谢物可刺激肠道黏膜,增强肠蠕动,也有利于肠道NH4+和内毒素随粪便排出。乳果糖保留灌肠可减少其对整个消化道的刺激作用,又能直接刺激肠道,促进排便,减少肠内毒物的吸收,达到降低血氨的效果。

本资料显示使用门冬氨酸鸟氨酸联合乳果糖治疗1周后患者血氨、ALT、TBiL均较对照组明显下降,差异有统计学意义,治疗肝性脑病总有效率显著高于精氨酸对照组。以上表明门冬氨酸鸟氨酸联合乳果糖在改善肝功能、纠正肝性脑病有较好疗效且不良反应少,值得临床推广。

参考文献

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[4]巫协宁.临床肝胆系病学(新版)[M].上海:上海科学技术文献出版社,2002:199.

氨基酸的功效与作用篇5

【关键词】太子参;氨基酸;柱前衍生;HPLC

【中图分类号】R927 【文献标志码】A 【文章编号】1007-8517(2013)19-0007-03

太子参为《中国药典》收载的常用补益中药,别名孩儿参、童参、四叶参、米参等,系石竹科植物孩儿参[Pseudostellaria heterophylla(Miq.)Pax]的干燥块根,具有益气健脾、生津润肺等功效。临床用于脾虚体倦、食欲不振、病后虚弱、气阴不足、自汗口渴、肺燥干咳等症状。研究表明,太子参中含有环肽、氨基酸、多糖等化学成分。其中,氨基酸是太子参滋补功能的重要药用成分,与太子参的补益功效有着非常密切的关系。因此,太子参中氨基酸成分应作为质量标准控制的一个重要指标,但在中国药典尚未制定氨基酸含量测定的相关标准。

氨基酸分析常用的方法主要有衍生化离子交换色谱法和衍生化高效液相色谱法,前者需要使用氨基酸分析仪,后者使用一般分析实验室常规配备的高效液相色谱仪和C18色谱柱即可完成,且分析时间短,灵敏度高,已逐渐取代氨基酸分析仪在许多领域中的应用。常用的柱前衍生化HPLC测定氨基酸的方法有AQC(6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯)法、DNFB(2,4-二硝基氟苯)法、DABS(磺酰氯二甲胺偶氮苯)法、PITC(异硫氰酸苯酯)法和OPA-FMOC(邻苯二甲醛和9-芴甲基氯甲酸酯)法等。前4种方法需手工衍生,反应活性差、速度慢且易受试剂干扰。OPA-FMOC法可克服上述缺点,应用广泛

本文采用邻苯二甲醛(OPA)与—氯甲酸芴甲酯(FMOC)联用全自动柱前衍生化高效液相色谱法建立了太子参中精氨酸的含量测定方法。分离效果好,谱图重现性好,分析和检测结果令人满意,可推广应用于中药材中氨基酸类成分含量测定。

1 仪器与试药

氨基酸的功效与作用篇6

【关键词】林可链霉菌;林可霉素;发酵;生物合成;响应面法

Effectsofbiotinandaminoacidsonbiosynthesisoflincomycin

LiXiao1,ChuJu1,ZhangSiliang1,HangHaifeng1,

ZhuangYingping1andGeYouqun2

(1StateKeyLaboratoryofBioreactorEngineering,EastChinaUniversityofScienceandTechnology,Shanghai200237;

2JiangxiGuoyaoPharmaceuticalCo.,Ltd,Nanchang330052)

ABSTRACTStreptomyceslincolnensiswasutilizedtoproducelincomycinbyfermentationinchemicallydefinedmedium,enormouseffectontheyieldoflincomycinwouldoccurwhenbiotinandaminoacidswereaddedtothemedium.Inthisresearch,firstly,6significantfactorswerefoundwithtwolevelfactorialdesign,namelyDbiotin,Lglutamicacid,Lvaline,Lmethionine,LleucineandLtyrosine;secondly,theoptimizedingredientsof6factorsmentionalabovewereobtainedwithcentralcompositedesign,theywere30μg/Land100.5,83,29,117.5and58.5mg/Lrespectively;finally,verificationtestwasaccomplishedinshakingflasks,thetitreofthefermentedbrothwas2116μg/mlontheoptimizedconditions,butthetitresofthecontrolI(withoutDbiotinandaminoacidsinthemedium)andcontrolII(adding6significantfactorstomediumaccordingtooriginalingredients)were893μg/mland1481μg/mlrespectively,compairedwithcontrolIorII,increasedby136.62%and42.88%.

KEYWORDSStreptomyceslincolnensis;Lincomycin;Fermentation;Biosynthesis;Responsesurfacemethod

林可霉素是一种高效广谱抗生素,临床用于由抗革兰阳性菌引起疾病的治疗[1]。林可霉素A的分子式为C18H34N2O6S,分子量为406.56,它与林可霉素B在结构上的区别[2,3]为:林可霉素A4位上为正丙基,而林可霉素B4位上是乙基,两者在药理上存在着很大的区别,林可霉素B的抑菌活性比林可霉素A低,但对人的毒副作用较大。我国药典要求成品中B含量小于5%。

林可霉素属于林可胺类抗生素,由L酪氨酸和磷酸戊糖循环(戊糖5磷酸和景天糖7磷酸)的中间产物缩合而成,整个生物合成途径包括两个分支[4]:一个由L酪氨酸合成丙脯氨酸(PPL),另一个由景天糖7磷酸构成α甲硫林可胺(αMTL)。林可霉素A的推测生物合成途径已有文献报道[5],并提出酪氨酸是上述第一个分支途径的主要前体。

关于提高林可霉素产量的方法比较多,可在发酵液中加入前体[6],也可用磷酸盐对发酵过程进行调节[7~10]。在实际的大生产中,常常采用少量多次补入玉米浆来实现发酵过程的调节。玉米浆的主要成分为每100g干物质中含生物素1mg、蛋白质43g和结合氨基酸22.8g等,随着玉米浆的补入,细菌中辅酶Q的合成量提高,细胞的呼吸强度也增加[11]。

D型生物素是许多微生物必不可少的生长因子。生物素是乙酰CoA羧化酶、丙酮酸羧化酶、丙酰CoA羧化酶和3甲基巴豆酰CoA羧化酶4种羧化酶的辅酶成分[12],它对糖代谢、脂肪酸代谢及蛋白质和氨基酸代谢有较大的影响。L型氨基酸对微生物的生长和代谢具有很重要的作用,它们一方面可经过脱氨或转氨基反应生成对微生物的生长有刺激作用的物质,如分支脂肪酸,另一方面经过脱羧等多步反应生成丙酮酸、草酰乙酸、丙酰CoA及琥珀酰CoA等,对三羧酸循环有一定的强化作用[13,14]。

本文采用合成培养基进行摇瓶发酵实验,选择玉米浆中含量较丰富的D生物素、L谷

氨酸、L缬氨酸等15个因子首先进行两水平因子设计实验,以筛选出显著影响因子,然后进行响应面设计实验,通过软件分析得到优化的发酵培养基配方。

1材料与方法

1.1菌种

林可链霉菌(Streptomyceslincolnensis)L427,由江西国药有限公司提供。

1.2培养基

种子培养基(%)淀粉1.9,葡萄糖2.5,黄豆饼粉2.3,玉米浆2.6,硫酸铵0.2,硝酸铵0.14,氯化钠0.07,硝酸钠0.086,磷酸二氢钾0.005,碳酸钙0.68。

玉米浆购自华北制药康欣有限公司,批号20060701。

发酵培养基(%)葡萄糖3.0,硫酸铵0.1,硝酸铵0.2,氯化钠0.05,磷酸氢二钾0.25,柠檬酸钠0.3,硫酸锌0.0001,硫酸亚铁0.0001,硫酸镁0.15,碳酸钙0.8。

实验设计所用D生物素和L型氨基酸购自Sigma公司。

1.3培养条件与培养方法

种子培养种子摇瓶于30℃,220r/min培养48h。

摇瓶发酵培养按30%的接种量将种子液接入发酵培养基,30℃,220r/min,培养168h。

1.4生物效价的测定

采用管碟法[15]。鉴定菌为藤黄八叠球菌[Sarcinalutea,CMCC(B)28001],由江西国药有限责任公司提供。林可霉素(lincomycin)标准品购自Sigma公司。

2结果与讨论

2.1实验设计

本文中发酵培养基采用化学合成培养基,通过两水平因子设计(2LevelFactorialDesign)实验可迅速找出生物素和氨基酸中对林可霉素的发酵生产有显著影响的因子,进一步对显著影响因子进行响应面设计(responsesurfacedesign,RSD)实验,对结果进行优化分析可得到优化配方。所采用的实验设计、数据分析软件为DesignExpert7.0[16]。

在大量实验基础上,选用D生物素(A)、L谷氨酸(B)、L苏氨酸(C)、L丝氨酸(D)、L缬氨酸(E)、L脯氨酸(F)、L甘氨酸(G)、L蛋氨酸(H)、L天冬氨酸(J)、L精氨酸(K)、L丙氨酸(L)、L亮氨酸(M)、L赖氨酸(N)、L苯丙氨酸(O)和L酪氨酸(P)共15个因子作两水平因子设计实验,影响因子的浓度范围分别为50~200μg/L,30~110、10~60、10~60、15~70、25~90、20~80、5~50、20~80、20~80、25~90、25~90、15~70、10~60和5~50mg/L,设计表中采用“-1”、“0”和“1”分别表示对应影响因子的最低浓度值、中间浓度值和最高浓度值。

(1)两水平因子设计该设计可从大量影响因子中快速找出显著影响因子,设计方案和结果如表1所示。

用软件进行分析,得知设计模型的F值为18.05,由于噪声影响而出现大于F值的概率仅为0.02%,故本设计模型是显著的。A(D生物素)、B(L谷氨酸)、E(L缬氨酸)、H(L蛋氨酸)、M(L亮氨酸)和P(L酪氨酸)的F值分别为46.2、13.87、12.83、6.82、11.42和17.16,由于噪声影响而出现比各自F值大的概率在5%以下,故它们对模型的影响显著。曲率的F值为19.62,出现比F值大的几率仅为0.16%,说明模型的响应曲面图显著弯曲,提示模型具有很强的显著性。鉴于此,选择生物素、谷氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、亮氨酸和酪氨酸作为影响发酵生产林可霉素的关键因素,进行响应面设计。其他可信度较小的因素对林可霉素的发酵生产无显著影响,在下一步的培养基优化中不予考虑。表1两水平因子设计和实验结果

(2)响应面设计将6个显著影响因子进行响应面设计中的中心组合设计(centralcompositedesign,CCD),可得出响应值(生物效价)关于各显著影响因子的多项二次拟合方程,再对响应面进行分析,可得响应值与各因子之间、因子与因子之间的相互关系,经过综合分析得出整个响应区域中响应值的最优值和影响因子含量的最佳组合。

①中心组合设计6个显著影响因子D生物素(a)、L谷氨酸(b)、L缬氨酸(c)、L蛋氨酸(d)、L亮氨酸(e)和L酪氨酸(f)的浓度范围分别为30~100μg/L,90~190、30~130、20~120、40~1400和20~120mg/L。设计方案和实验结果如表2所示,“-1”、“0”和“1”分别表示对应影响因子的最低浓度值、中间浓度值和最高浓度值。

方差分析结果如表3所示。该模型的F值为61.79,比F值大的几率仅为0.01%,说明该模型是显著的;由于ab、ad、ae、af、bc、cd、ce和ef各项的F值均比较大,大于各自F值的概率均在5%以下,故这些交互项对模型的影响是显著的;ac项大于其F值的概率为5.22%,由于缬氨酸(c)在玉米浆中含量较多,它对微生物的生长有刺激作用,也可认为ac项对模型的影响是显著的;失拟项的F值仅为0.25,比模型的F值要小得多,实验数据与模型不相符的情况不显著,提示本设计模型能充分反映实际情况。表2响应面设计和实验结果表3方差分析表

软件分析得知,模型的拟合度(RSquared)为0.997,说明预测值与实测值之间具有高度的相关性;校正决定系数(AdjRSquared)为0.9809,说明该模型能解释98.09%响应值(Titres)的变化,仅有总变异的1.91%不能用此模型来解释;模型的信噪比(AdeqPrecision)为23.723,一般来说,模型的信噪比大于4就是较好的模型,进一步说明本模型设计是非常成功的。

②分析与优化利用软件对生物效价预测值与显著影响交互项ab、ac、ad、ae、af、bc、cd、ce、ef之间的响应面图进行分析,得知上述交互作用项对生物效价的影响很大,在低浓度范围内,生物素浓度越低,生物效价的预测值越大;谷氨酸和缬氨酸之间、缬氨酸和亮氨酸之间以及亮氨酸和酪氨酸之间对生物效价的影响具有显著的正协同效应;缬氨酸和蛋氨酸对生物效价的影响存在拮抗效应,缬氨酸浓度较高和蛋氨酸浓度较低时,预测效价值较高。

对上述结果进行分析可知,低浓度的生物素对林可链霉菌的糖代谢、脂代谢和氨基酸代谢有促进作用;林可链霉菌对谷氨酸的需求量较高,可能是因为其参与较多的脱氨基和转氨基反应,生成了较多的α酮戊二酸等中间产物,一方面对三羧酸循环有强化作用,另一方面可为林可霉素的生成提供丰富的中间产物;缬氨酸和亮氨酸为分支氨基酸,它们脱氨基可生成支链脂肪酸,对林可链霉菌的生长有刺激作用;酪氨酸为林可霉素A合成的前体,补入适量的前体,可提高林可霉素A的合成速率和产量;蛋氨酸为去甲基林可胺转甲基反应的甲基供体,它对林可霉素的合成速率可能具有较大的限制作用,而缬氨酸对林可霉素的生长具有刺激作用,菌体生长与林可霉素的合成在某种程度上说是一种相互制约的关系,这样就表现为蛋氨酸和缬氨酸之间的拮抗作用,而且林可霉素的合成要求有较高的菌浓,故培养基中应适当增加缬氨酸的浓度,相应适当降低蛋氨酸的浓度。

应用DesignExpert7.0软件进行优化分析,得到生物效价的最大预测值为2275μg/ml,对应的D生物素、L谷氨酸、L缬氨酸、L蛋氨酸、L亮氨酸和L酪氨酸的浓度为:30μg/L及100.5、83、29、117.5和58.5mg/L。由江西国药厂林可链霉菌L427发酵得到的林可霉素产品中B组分含量很低,所以本研究未用HPLC测定B组分含量。

2.3验证实验

为了检验优化结果的有效性,在摇瓶中同步进行了优化组、对照组I(培养基中无生物素和氨基酸)和对照组II(培养基中按原配方加入6个显著影响因子)的验证实验,结果如表4所示。

3结论

在化学合成培养基中用林可链霉菌发酵生产林可霉素,通过两水平因子设计实验对生物素和氨基酸组分进行筛选,得出六个对生物效价有显著影响的因子:D生物素、L谷氨酸、L缬氨酸、L蛋氨酸、L亮氨酸和L酪氨酸;通过响应面设计实验和软件的优化分析表4验证实验设计与结果

a:发酵培养基配方为原始配方(材料与方法)与表4配方的组合;b:生物效价为每组3个平行样的平均值。

得到上述六个显著影响因子的含量分别为30μg/L及100.5、83、29、117.5和58.5mg/L时,最终发酵液的最大预测效价为2275μg/ml。

采用优化配方进行摇瓶实验,最终发酵液的生物效价为2116μg/ml;而采用对照I和II配方进行摇瓶实验,最终发酵液的生物效价分别为893和1481μg/ml,即采用优化配方相对于采用对照I和II配方在生物效价方面提高的百分含量分别为136.62%和42.88%。

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氨基酸的功效与作用篇7

肝性脑病的主要诊断依据为:①急性肝衰竭或有慢性肝病史,有肝硬化门脉高压症的体征;②精神紊乱、行为失常、昏睡或昏迷等各期的临床表现;③明显肝功能损害;④有血氨增高或血浆氨基酸谱的变化;⑤有引起肝性脑病的诱因;⑥扑翼样震颤阳性和有脑电图诱发电位的异常改变。早期患者并无意识障碍,外表如常人,容易漏诊。对肝硬化患者进行常规的简易智力测验可发现亚临床肝性脑病。肝性昏迷还应与可引起昏迷的其他疾病,如糖尿病、低血糖、尿毒症、脑血管意外、脑部感染和镇静剂过量等相鉴别。进一步追问肝病病史,检查肝脾大小、肝功能、血氨、脑电图等项将有助于诊断与鉴别诊断。

鉴于肝性脑病的发病机制较为复杂,而且其发病是多因素综合作用的结果,目前尚无特效疗法,因此治疗应采取综合措施。

消除诱因

消除诱因、避免肝性脑病的发生和发展是最基本的策略。肝性脑病发生的常见诱因有上消化道出血、大量放腹水、大量排钾利尿、便秘、高蛋白饮食、服用安眠药或、感染等,在临床上是可避免或可治疗的。

减少肠内毒物氨的生成和吸收

饮食指导肝性脑病开始数日内禁食蛋白质,有肝性脑病病史的病人蛋白质摄入不宜超过70g/d,但不能低于40g/d,以免引起负氮平衡。每日供给热量1200~1600大卡和足量维生素,以碳水化合物为主要食物,昏迷不能进食者可经鼻胃管供食,脂肪可延缓胃的排空宜少用。来源不同的蛋白质致昏迷的趋势有所不同,一般认为肉类蛋白致脑病的作用最大,牛乳蛋白次之,植物蛋白最小,故纠正患者的负氮平衡,以用植物蛋白为最好。植物蛋白含蛋氨酸、芳香族氨基酸较少,含支链氨基酸较多,且能增加粪氮排泄。此外,植物蛋白含非吸收性纤维,被肠菌酵解产酸有利于氨的排除,且有利通便,故适用于肝性脑病患者。

灌肠或导泻,清洁肠道,降低肠腔内pH值 肠腔内的生成与吸收决定于肠腔内的pH值。结肠内pH>6时,生成大量的NH3并吸收入血,使血NH3升高。结肠内pH

抑制细菌生长 人体肠道中的氨约50%产生于结肠细菌,抑制细菌生长,减少氨的生成与吸收。口服新霉素2~4g/日或选服巴龙霉素、卡那霉素、氨苄青霉素均有良效。长期服新霉素的患者中少数出现听力或肾功能减损,故服用新霉素不宜超过1个月。口服甲硝唑0.2g,每日4次,疗效和新霉素相等,适用于肾功能不良者。

不吸收的双糖 口服后不被小肠吸收,在结肠中被细菌分解为乳酸和醋酸,即使肠腔呈酸性,又能增加大便次数,从而减少氨负荷,降低血氨水平。乳果糖因其治疗有效性和无严重的不良反应,长期以来是使用最多的治疗肝性脑病的药物,对忌用新霉素或需长期治疗的患者,乳果糖或乳山梨醇为首选药物。乳果糖有糖浆剂和粉剂,日剂量30~100ml或30~100g分3次口服,从小剂量开始,以调节至每日2~3次软便。不良反应为饱胀、腹绞痛、恶心、呕吐等。乳山梨醇是乳果糖类的衍生物,代谢方式和疗效与乳果糖相同,口服更易被吸收,可制成片剂或糖浆剂,易保存,日剂量30g,分3次口服。近年发现乳糖在乳糖酶缺乏的人群的结肠中,经细菌发酵产酸后也降低粪便pH,减少氨含量,用以治疗肝性脑病,效果和乳果糖一样,但价格较便宜。

纠正氨基酸代谢的紊乱

降氨药物 ①鸟氨酸-a-酮戊二酸和鸟氨酸门冬氨酸均有显著的降氨作用。现在国内商品名为雅博司。其中鸟氨酸与氨结合,通过尿素循环,生成尿素;鸟氨酸还直接参与尿素循环,激活尿素合成过程中的关键酶,提供反应底物;门冬氨酸间接参与三磷酸循环及核酸合成:还可通过转氨作用,生成谷氨酸盐。该药可以静脉使用,每日静滴10~20g,加入生理盐水。②谷氨酸盐,包括谷氨酸钠和谷氨酸钾,应用临床已40余年,谷氨酸钠(每支5.7g/20m1,含钠34mmol)和谷氨酸钾(每支63g/20ml,含钾34mmol),每次用4支,加入葡萄糖液中静滴,每日1~2次。谷氨酸钾、钠比例视血清钾、钠浓度和病情而定,尿少时少用钾剂,明显腹水和水肿时慎用钠剂,现在认为,该类药物只能暂时降低血氨,对脑组织内氨的浓度没有改善,并且易导致脑水肿和代谢性碱中毒而加重肝性脑病,国外已淘汰。

支链氨基酸 肝性脑病的发生与血氨基酸比例失调有关,主要为支链氨基酸含量降低,芳香族氨基酸水平增加。口服或静脉注射以支链氨基酸为主的氨基酸混合液在理论上可纠正这种氨基酸代谢的不平衡,抑制大脑中假神经递质的形成,从而改善HE症状。目前对门体分流性脑病的治疗效果尚有争议。应用含有支链氨基酸的六合氨基酸治疗HE,取得了良好的疗效。这种六合氨基酸含异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸、鸟氨酸醋酸盐,此方以支链氨基酸为主,以纠正支链氨基酸之不足,谷氨酸为传统降氨药物,可与氨结合成谷氨酰氨而除氨,门冬氨酸是三羧酸循环中的重要物质,因此可达到降氨的作用。

GABA/BZ复合受体拮抗药 GABA受体的拮抗剂已有荷包牡丹碱(bicu-culline),弱安定类药受体的拮抗剂为氟马西尼(flumazenil)。氟马西尼应用的剂量有较大的幅度,有报道用氟马西尼15mg静滴3小时以上,45%的暴发性肝衰竭脑病、78%的肝硬化患者的症状和躯体诱发电位(sEP)有明显改善,但停药数小时后症状复发。

肝移植

对于许多目前尚无其他满意治疗方法可以逆转的慢性肝病,肝移植是一种公认有效的治疗。由于移植操作过程的改良和标准化,供肝保存方法和手术技术上的进步,以及抗排异的低毒免疫抑制剂的应用,患者在移植后的生存率已明显提高。

其他对症治疗

纠正水、电解质和酸碱平衡失调每日入液总量以不超过2500ml为宜。肝硬化腹水患者的入液量应加控制(一般约为尿量加1000ml),以免血液稀释、血钠过低而加重昏迷。及时纠正缺钾和碱中毒,缺钾者补充氯化钾:

碱中毒者可用精氨酸盐溶液静滴。

保护脑细胞功能 用冰帽降低颅内温度,以减少能量消耗,保护脑细胞功能。

保持呼吸道通畅 深昏迷者,应作气管切开给氧。

防治脑水肿 静滴高渗葡萄糖、甘露醇等脱水剂以防治脑水肿。

防止出血与休克 有出血倾向者,可静滴维生素K。或输新鲜血,以纠正休克、缺氧和肾前性尿毒症。

护肝治疗 减轻肝细胞损伤,促进损伤肝细胞的修复及再生,一般采用非特异性的支持疗法用能量合剂、新鲜血制品或白蛋白以及多种维生素特别是大量维生素C静滴。

综上所述,避免诱发因素,合理饮食,尽量减少肝性脑病的发生,应引起临床医生的重视。对已发生的肝性脑病,在祛除诱因的基础上首先选用药物治疗。药物选用原则为:先选用价格便宜、不良反应小者,如口服乳果糖、乳梨醇等保持大便通畅(每日2~3次软便),降低血氨。对蛋白质耐受着者可给予支链氨基酸治疗以恢复正氮平衡,并调节氨基酸代谢紊乱。氟马西尼因价格昂贵,建议在上述药物治疗无效时选用。若病人对所有药物均无效,且无手术禁忌证,可根据病人情况及医院条件行肝移植术。

劳累性心悸2年,间断咯粉红色泡沫痰半年

病历简介

患者,女,24岁,自2年前开始,每当走路稍快或上楼梯时,自觉心悸、气短,休息后可缓解。未曾治疗,仍坚持正常文秘工作。症状逐渐加重,上楼需要途中休息多次,平时走路也要放慢脚步。平素自觉乏力,不爱活动,食欲欠佳。1年前,突然出现睡眠中因气短而憋醒,立即坐起后症状可慢慢缓解,此时伴有咯粉红色泡沫样痰,因精神紧张,次日到当地诊所就医。疑诊“肺结核”,予以抗结核治疗无效,晚间憋醒的次数越来越多,有时即或坐起,症状也长时间难以缓解,咯粉红色泡沫样痰加重。发病以来无发热、尿少、水肿等症状。

既往史:在中学时期(约15岁)曾患风湿病,并有四肢大关节肿痛。至今有时还感觉关节疼痛不适。

体格检查 T36.4℃,P112次/min,R22次/min。BP85/58mmHg。强迫端坐住,口唇发绀,颈静脉怒张不明显。胸部外形正常,两肺底可闻及小水泡音。叩诊心浊音界向左扩大,心率104次/min,心尖部第一心音亢进,各瓣膜听诊区未闻及杂音,P2亢进伴分裂。腹部平坦,软,肝、脾均未触及,脊柱、四肢活动正常,双下肢无水肿。

辅助检查 ①WBC8.0×109/L,RBC3.8×1012/L,②胸部X线检查:左房和左室扩大,肺动脉段突出,双肺淤血。③心电图检查:窦性心律,P波0.13s,呈双峰型,峰间距大于0.04s,RAVR 0.7mK RVll.14mV, RV5+SV5=1.15mV。心电轴+120°。

氨基酸的功效与作用篇8

关键词:建昌鸭;氨基酸螯合锌;生长性能;免疫功能

中图分类号:S816.7;S834 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2014)05-1117-03

建昌鸭是优良的地方鸭种之一,主产于四川凉山彝族自治州境内的安宁流域河谷地带,以生长快、成熟早、肉品质好等优点著称,市场价格稳定,需求量大[1]。氨基酸螯合锌是第三代微量元素添加剂,具有改善畜禽生产性能,增强免疫能力,提高免疫应答反应,促进动物细胞和体液免疫的功效[2,3]。近年来氨基酸螯合锌在畜禽饲养中应用较多,均能达到提高生产性能和免疫力的作用,但在建昌鸭中的应用尚未见报道。本试验以28日龄的建昌鸭为研究对象,探讨氨基酸螯合锌对建昌鸭生产性能、屠宰性能和免疫功能的影响,为氨基酸螯合锌的开发利用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

饲料级氨基酸螯合锌,氨基酸总含量≥25%,有机锌含量≥15%,从四川西昌饲料门市购入。

1.2 试验鸭的选择和分组

试验于2012年10月14日至11月18日在四川西昌市樟木乡黄静建昌鸭养殖场进行,选择28日龄的建昌鸭400只,按体重相近的原则随机分为5组,即试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组,每组80只,每组5个重复,每个重复16只。各组间生长速度差异不显著(P>0.05)。采用地面平养,预饲期7 d,试验期28 d。

1.3 试验设计

采用自配全价饲料作为基础日粮,该饲料营养成分含量为:蛋白质18.2%,代谢能11.71 MJ/kg,钙 1.2%,磷0.6%,粗纤维3.2%。在各组日粮中分别按0、25、50、75、100 mg/kg添加氨基酸螯合锌进行饲养试验。

1.4 饲养试验和屠宰试验

分别于试验开始和试验结束清晨空腹称重,试验结束的当天,每个重复随机抽取2只鸭,空腹12 h后颈静脉放血处死,摘取脾脏、胸腺、法氏囊、肝脏,剔除脂肪和系膜,用滤纸吸干血液后进行称重,并按照杨宁[4]的方法测定其屠宰性能指标,整个试验期准确记录试验鸭的采食量。

1.5 测定指标

测定指标有:日增重、料重比、胴体重、胸腺指数、脾脏指数、法氏囊指数、吞噬指数。

免疫器官指数=免疫器官质量(g)/屠体质量(kg)。

吞噬指数:在试验期的第28天,预先用生理盐水将印度墨水稀释3倍,给待测个体按2 mL/kg体重静脉注射后,立即计时,分别在第2分钟和第10分钟从翅下静脉抽血20 μL,用2 mL 0.1%Na2CO3溶液稀释后在600 nm波长处测其吸光度(A),用0.1% Na2CO3溶液做空白对照。其测定方法参考卫生部卫生法制与监督司《保健食品检验与评价技术规范》(2003),根据下列公式计算出碳廓清指数(K)和吞噬指数(a)。

K=(1gA1-1gA2)/(t2-t1)

a=■×体重/(肝重+脾重)

式中,A1为第一次(第2分钟)测得的吸光度,A2为第二次(第10分钟)测得的吸光度,t2-t1为两次采血的间隔时间。

1.6 数据处理

试验数据均以平均数±标准差表示,采用SPSS 10.0统计软件对数据进行方差分析,用Duncan’s法进行多重比较。

2 结果与分析

2.1 氨基酸螯合锌对建昌鸭生长性能的影响

由表1可见,氨基酸螯合锌能够提高建昌鸭的生长性能和饲料利用率。平均日增重方面,试验Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组显著(P

2.2 氨基酸螯合锌对建昌鸭屠宰性能的影响

由表2可见,试验Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组胴体重极显著(P0.05)。

2.3 氨基酸螯合锌对建昌鸭肉用品质的影响

由表3可见,胸肌中的水分含量各组间差异不显著(P>0.05);而胸肌中粗蛋白质含量方面试验Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组显著(P0.05);氨基酸螯合锌对胸肌的pH影响不大。

2.4 氨基酸螯合锌对建昌鸭免疫功能的影响

由表4可见,试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组与试验Ⅰ组相比较,其脾脏指数、胸腺指数、法氏囊指数和吞噬指数均有所提高;试验Ⅳ、Ⅴ组的脾脏指数、胸腺指数、法氏囊指数显著(P

3 讨论

3.1 氨基酸螯合锌对建昌鸭生长性能的影响

锌是动物生长发育及维持正常生理功能的必需微量元素之一,对动物生长发育、免疫功能、生殖能力、创伤愈合等方面有着重要影响[5]。氨基酸螯合锌既是机体吸收金属离子的主要形式,又是动物体内合成蛋白质的中间物质,不仅吸收快而且可减少许多生化过程, 节约体内能量消耗,具有较高的生物学效价[6,7]。试验结果表明,在建昌鸭饲料中添加氨基酸螯合锌,能明显提高其饲料利用率、生长速度和屠宰率,主要原因是有机锌提高了锌的生物学效价,促进了动物有机体内蛋白质的合成,这与虞泽鹏等[8]的研究结果是一致的。

3.2 氨基酸螯合锌对建昌鸭免疫功能的影响

胸腺、法氏囊是机体的中枢免疫器官,对机体体液免疫功能的发挥起着重要的作用;脾脏是机体的外周免疫器官,可清除机体衰老死亡的红细胞和血液中的大部分抗原,三者的质量可用来衡量机体的免疫状态。锌可维持动物免疫器官的生长发育和组织结构,缺锌可导致动物的胸腺、脾脏、法氏囊等免疫器官发育不良,器官萎缩,质量减轻。本试验结果表明,在基础日粮中添加适量的氨基酸螯合锌,可提高建昌鸭的免疫功能,其中以75 mg/kg的添加量较为适宜。主要是因为氨基酸螯合锌具有增强动物机体的抗菌能力、提高免疫应答反应、促进动物细胞和体液免疫的功效,同时还具有良好的抗应激功能[9,10]。饲料中添加氨基酸螯合锌,增加了锌的含量,提高了锌的利用率,这与苏莉娜等[11]的试验结果是一致的。

4 小结

本试验结果表明,每千克基础日粮中添加75 mg氨基酸螯合锌,对建昌鸭生长性能、屠宰性能均有明显提高,还能够提高其免疫器官指数和吞噬指数。

参考文献:

[1] 王福明,陈 莉.杜仲粉对建昌鸭生长速度和屠宰性能的影响[J].水禽世界,2012(1):36-38.

[2] 吴玉臣,杨国宇,王 艳,等.氨基酸螯合锌的应用效果[J].饲料博览,2004(6):28-29.

[3] 张 伟,陈志虹.氨基酸螯合锌的营养及应用研究进展[J].饲料博览,2001(11):10-12.

[4] 杨 宁.现代养鸡生产[M].北京:北京农业大学出版社,1994. 620-621.

[5] 王福明.氨基酸螯合锌对凉山岩鹰鸡生产性能和免疫功能的影响[J].饲料工业,2012(24):5-7.

[6] 邝声耀,唐 凌, 张 纯,等.有机锌在动物营养中的研究与应用[J].中国畜牧兽医,2006,33(7):18-21.

[7] 王素仙,付雪峰.氨基酸螯合锌在动物生产中的应用[J].饲料研究,2009(3):36-38.

[8] 虞泽鹏,吴晋强.饲喂Zn-Met水平对肉用仔鸡生产性能及组织器官锌含量和碱性磷酸酶(AKP)活性的影响[J].饲料博览,2002(5):1-3.

[9] 刘 曦,黄应祥.锌、硒与畜禽免疫功能的关系[J].中国畜牧兽医,2005,32(10):5-7.

氨基酸的功效与作用篇9

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关键词 学生资源 生态课堂 蛋白质 结构和功能

中图分类号 G633.91 文献标志码 B

学生资源是一种最活跃的人力资源。它不仅包括学生已有的知识、能力和生活经验,还包括学生探究问题的过程和方法以及认识此问题的情感、态度与价值观。正如奥苏伯尔所说:“影响学习中最重要的因素是学生已经知道了什么,我们应当根据学生原有的知识状况去进行教学。”生态课堂是以学生为主体,通过现代课堂教学手段,实现教学与学生发展的真正统一的课堂。下面以“蛋白质的结构和功能”一课为例,探索构建生态课堂,发展学生能力的方法和途径。

1 教材分析与学情分析

“蛋白质的结构和功能”是苏教版高中生物《必修1?分子与细胞》第二章第二节,也是本章的重点和难点。蛋白质作为生命活动的主要承担者,具有多种结构和功能,与“细胞的结构和功能”“光合作用和细胞呼吸”“细胞增殖”等关系密切,与遗传变异、稳态调节都有紧密的联系,是细胞代谢和生命活动的基础。对于刚刚入学的高一学生来说,由于还没有学到有机化学方面的知识,因此有一定的难度,对生物大分子的结构不易理解。教学中,教师通过多种课程资源的整合利用,以激发学生兴趣和潜能为目的有序的开展活动,提高学生观察、动手、探究、比较、分析的能力,逐步掌握知识点。

2 教学目标

2.1 知识目标

说明氨基酸的结构特点以及氨基酸形成蛋白质的过程;概述蛋白质的结构和功能。

2.2 能力目标

运用所学的蛋白质知识解释一些生命现象;在动手操作中,理解结构多样性与功能多样性的原因及关系;能正确处理蛋白质的相关计算。

2.3 情感、态度与价值观目标

认同蛋白质是生命活动的主要承担者;关注食品与健康。

3 教学重难点

3.1 教学重点

氨基酸的结构特点,氨基酸形成蛋白质的过程;蛋白质的结构和功能。

3.2 教学难点

氨基酸形成蛋白质的过程;蛋白质的结构多样性的原因。

4 教学过程

4.1 情境导入

教师播放一段洗发水广告视频,广告词中强调了该品牌洗发水富含多种蛋白质,可以给头发提供更多营养,用“大家好才是真的好”,激起了学生的兴趣。进而引导学生思考并举例说出:在日常生活中有哪些食物富含蛋白质。教师展示相关图片,引入课题。

4.2 探索新知

4.2.1 学生讨论,探索氨基酸

教师展示蛋白质的基本组成单位氨基酸的结构图,引导学生观察分析:组成蛋白质的元素有哪些?再通过几种不同的氨基酸对比,请学生归纳氨基酸结构的共同点,进而总结出氨基酸的结构通式,即每个氨基酸都至少有一个氨基和一个羧基连接在同一个碳原子上,此外还含有一个氢原子和一个R基,各种氨基酸的区别在于R基的不同。教师以自己的身体为例,请学生思考可与氨基酸的哪些部分相对应。如:中间的躯干部分代表碳原子,两只手臂可分别代表氨基和羧基,分开的两腿可代表氢原子,头部代表R基,人脸不同R基不同。此举寓教于乐,大大加深了学生对氨基酸结构通式的记忆。接着,展示几种有机化合物的结构式,让学生讨论,然后指出氨基酸,以此进一步强调氨基酸的判断要点。

4.2.2 人体模拟,理解脱水缩合

学生观看氨基酸连接形成肽链的动画过程,明确脱水缩合、肽键、二肽、多肽、肽链等概念。教师找几名学生作为模特,代表多个氨基酸,要求学生思考:如何能连接在一起?学生自然而然地想到要把手拉起来,构成了一条肽链,中间拉着的手就可以代表肽键。将抽象的问题形象化,将复杂的问题简单化,这种方式可以帮助学生更好的理解和记忆。

4.2.3 问题引导,画图寻找规律

教师在黑板画出2个及3个氨基酸脱水缩合的过程,边画边让学生总结:2个氨基酸连接成1条肽链脱去了1分子水,形成了1个肽键;3个氨基酸连接成1条肽链脱去了2分子水,形成了2个肽键。进而引出问题:(1) n个氨基酸形成一条肽链时,脱去几个水分子?形成几个肽键?学生答:n-1个肽键;脱去n-1个水分子。

(2) 如果n个氨基酸形成m条肽链呢?学生答:n-m个肽键;脱去n-m个水分子。师生共同找出规律:氨基酸数-肽链的条数=脱去的水分子数=肽键的个数。再请学生仔细观察板图,会发现每条肽链上至少有一个游离的氨基和一个游离的羧基分别位于肽链的两端。接着即时应用,通过具体题目检查学生的掌握情况,对易错点进行及时的纠正。教师可适当扩展,如判断氨基酸的个数和种类,几个氨基酸和几种氨基酸是否完全相同,蛋白质分子量的计算等。

4.2.4 制作模型,分析蛋白质结构多样性的原因

教师要求学生以小组为单位制作肽链模型。教师分发事先用彩色卡纸剪好的纸条和圆形、三角形小纸片,让学生随机抓取若干纸片,用透明胶带随意粘贴在纸条上,然后让各组代表到讲台前展示成果。结果,每组制作的肽链都不相同,再让他们将手中的肽链任意折叠扭曲,又会形成不同的形状(图1、图2)。分析其原因,学生们得出:(1)形成肽链的氨基酸的种类不同;(2)形成肽链的氨基酸的数目不同;(3)形成肽链的氨基酸的排列顺序不同;(4)肽链的盘曲方式及其形成的空间结构不同。教师指出:这就是蛋白质结构多样性的原因,而其结构的多样性决定了其功能也是多种多样的。

4.2.5 联系实际,总结蛋白质功能的多样性

教师利用课件展示多幅图片,健美的肌肉、纤细的蛛丝、黑亮的头发、漂亮的羽毛以及胰蛋白酶、血红蛋白、胰岛素和抗体的结构图等。学生结合教材总结出蛋白质的功能主要有:构成细胞和生物体结构的重要物质;催化作用;运输作用;调节作用;免疫功能。最后得出:蛋白质是生命活动的主要承担者。

氨基酸的功效与作用篇10

[关键词] 甲钴胺;针灸;脑梗死;同型半胱氨酸;预后

[中图分类号] R743.3 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2013)08(b)-0100-04

脑梗死是临床常见的心脑血管疾病之一,其发病机制为机体脑部血液供应发生障碍,造成局限性脑组织的缺血缺氧,容易发生脑软化或者缺血性坏死,一旦出现脑血栓、腔隙性梗死、脑栓塞等病症将危及患者生命[1-3]。有研究表明,脑梗死患者多伴有不同程度的同型半胱氨酸水平异常升高,因而高同型半胱氨酸血症可作为缺血性脑卒中、动脉粥样硬化等疾病的独立危险因素[4-6]。甲钴胺是维生素B12的第四代产品,在同型半胱氨酸生成蛋氨酸过程中,无需活化而直接发挥辅酶作用,加速同型半胱氨酸转化,可达到快速降低患者体内同型半胱氨酸水平的目的[7-9]。为了探讨早期静注甲钴胺联合针灸治疗对脑梗死伴高同型半胱氨酸患者预后的影响,本研究选取脑梗死伴高同型半胱氨酸患者83例,随机分为两组,实施不同的治疗方案进行对比,现报道如下:

1 资料与方法

1.1 一般资料

广东省韶关市粤北人民医院(以下简称“我院”)2010年10月~2012年10月收治的脑梗死伴高同型半胱氨酸患者83例,年龄51~72岁,平均(61.5±10.3)岁,其中男51例,女32例。患者均符合1995年第四次全国脑血管学术会议制订的诊断标准,且经CT或MRI确诊为脑梗死。入选标准:患者均为脑梗死首次发病,瘫痪侧肢体运动功能评分不足50分,发病时间在72 h以内,患者知情同意。排除标准:患有意识障碍、智能障碍、Wernicke失语、完全性失语、抑郁症、甲钴胺过敏、药物禁忌证、脑损伤、脑肿瘤、脑部寄生虫、脑炎、脑出血、血管炎并发脑梗死、行颅脑手术、继发性脑部改变、近期服用过抗抑郁药、严重内科疾病的患者。将入选患者随机分为两组,41例患者实施常规治疗为对照组,42例患者实施早期静注甲钴胺联合针灸治疗为观察组。两组患者年龄、性别、病程、梗死部位、并发症等一般情况比较,差异无统计学意义(P > 0.05),具有可比性。见表1。此次研究已取得患者同意,且经我院伦理委员会通过。

1.2 方法

对照组实施常规治疗。早餐后口服拜阿司匹林肠溶片(拜耳公司生产)100 mg/次和阿托伐他汀钙(辉瑞制药)20 mg/次,1次/d,疗程30 d。将20 mL丹参注射液加入到250 mL生理盐水中,将0.5 g胞二磷胆碱注射剂加入到250 mL生理盐水中,于患者的健侧行常规静脉滴注,1次/d,疗程15 d。在用药3 d后行针灸治疗,待输液结束后,可行适度的功能性训练。

观察组实施早期静注甲钴胺联合针灸治疗。早餐后口服拜阿司匹林肠溶片(拜耳公司生产)100 mg/次和阿托伐他汀钙(辉瑞制药)20 mg/次,1次/d,疗程30 d。确诊后立即给予0.5 mg甲钴胺注射剂[卫材(中国)药业有限公司]于患者的健侧行常规静脉注射,1次/d,余药物同对照组,疗程15 d。在用药0.5~1 h内行针灸治疗,待输液结束后,可行适度的功能性训练。

此次研究中,对照组与观察组患者均行相同的针灸治疗方案,具体方法为醒脑开窍针刺法,基于中医上中风病的相关病机“神窍匿闭”与针刺法“启闭开窍”而确定,针灸中以“泻”为主,首先针刺患者的双侧内关,然后直刺1.0~1.5寸,使用捻转提插泻法,持续针灸1 min,然后针刺患者的水沟,使用雀啄手法,当患者出现流泪或眼球周围充满泪水时方可停止,然后对患者的三阴交沿胫骨后缘进针,控制针尖向后斜刺,使其与皮肤呈45°,然后再进针1.0~1.5寸,使用提插补法,刺激患者的患侧下肢,使之发生抽动3次为宜,再依次针刺患者的极泉循经离原穴1寸处,进针1.0~1.5寸,使用提插补法,刺激患者的患侧上肢,使之发生连续抽动3次为宜,然后指导患者仰卧,取委中仰卧位,抬腿取穴,控制1.0~1.5寸,使用提插补法,刺激患者的患侧下肢,使之发生抽动3次为宜,再由合谷针向三间处进针,使用提插补法,刺激患者的食指抽动3次为宜。1次/d,每次保持留针30 min,疗程为15 d。

1.3 疗效评定标准

脑梗死伴高同型半胱氨酸患者瘫痪侧肢体运动功能评分的评定标准参考葛林通等[11]研究:上肢33个项目,每项2分,共计66分,下肢7个项目,每项2分,共计34分,总分100分,50分及以下患者属于严重运动障碍,50~84分患者属于明显运动障碍,85~95分患者属于中度运动障碍,96~99分患者属于轻度运动障碍,100分患者无运动障碍。

脑梗死伴高同型半胱氨酸患者临床疗效的评定标准参考吴彬[9]的研究。显效:患者脑梗死的临床病症与体征均消失,同型半胱氨酸水平恢复正常,随访3个月内未见复发。有效:患者脑梗死的临床病症与体征均明显减轻,同型半胱氨酸水平基本恢复正常,随访3个月内病症未见加重。无效:患者脑梗死的临床病症与体征均未见明显改善,同型半胱氨酸水平也未恢复正常,随访3个月内病症加重。总有效=显效+有效。

1.4 统计学方法

数据资料均采用SPSS 16.0统计学软件进行分析和处理,计量资料采用(x±s)表示,组间比较采用t检验,计数资料采用χ2检验,以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组治疗前后同型半胱氨酸水平比较

两组患者治疗前后同型半胱氨酸水平比较结果显示,治疗后,两组患者同型半胱氨酸水平均显著下降,观察组同型半胱氨酸水平明显低于对照组,差异均有统计学意义(P < 0.05)。见表2。

2.2 两组治疗前后瘫痪侧肢体运动功能评分比较

两组患者治疗前后瘫痪侧肢体运动功能评分比较结果显示,治疗后,两组患者瘫痪侧肢体运动功能评分均显著升高,观察组瘫痪侧肢体运动功能评分明显高于对照组,差异均有统计学意义(P < 0.05)。见表3。

2.3 两组治疗后临床效果比较

两组患者治疗后临床效果比较显示,观察组总有效率(97.6%)明显高于对照组(78.0%),差异有统计学意义(P < 0.05)。见表4。

2.4 两组不良反应情况比较

两组患者不良反应情况比较结果显示,观察组不良反应发生率(4.8%)明显低于对照组(19.5%),差异有统计学意义(P < 0.05)。见表5。

3 讨论

脑梗死多为患者脑部发生了动脉粥样硬化,使得血管内膜受到了不同程度的损伤,造成脑动脉的管腔变得非常狭窄,在多种危险因素的引导下可诱发局部血栓的形成,造成动脉狭窄病症的进一步加重,严重时可发生完全闭塞,使得脑组织发生缺血、缺氧、坏死,可造成不同程度的神经功能障碍。脑梗死多发于45~70岁的中老年人,多伴有冠心病、高血压病、高脂血症、糖尿病等合并症,脑梗死的常见临床类型包括腔隙性梗死、脑栓塞、脑血栓等,其中脑梗死占了脑卒中的绝大部分。有研究表明,脑梗死患者多伴有不同程度的运动功能障碍和认知功能障碍[10-12],其中运动功能障碍是脑梗死患者最为常见的病症之一,也是最为主要的临床病症,是治疗脑梗死过程中需要解决的关键问题。

高同型半胱氨酸血症是脑梗死患者较为常见的并发症之一,是机体动脉粥样硬化、脑卒中的独立危险因素,在机体内的代谢主要与维生素B6、维生素B12、叶酸有关,维生素B6、维生素B12、叶酸缺乏后会造成体内同型半胱氨酸水平的显著升高,同型半胱氨酸水平升高后会增加动脉粥样硬化、脑卒中的风险,发病机制如下:同型半胱氨酸可加速体内氧肌细胞增生和低密度脂蛋白氧化,加速泡沫细胞生成,激发血小板黏附与聚集,进而诱发动脉粥样硬化与脑栓塞,同型半胱氨酸还可降低血管内皮细胞中一氧化氮合酶的活性,减少其生成,诱发血管痉挛,加速细胞变性与坏死,同时同型半胱氨酸可选择性抑制血栓调节素在机体内的表达,有效干扰内皮蛋白C的调节,明显降低抗血栓形成因子活性,造成血凝亢进,容易诱发血栓。

甲钴胺是维生素B12的第四代产品,其中央钴分子结合了一个甲基基团,在同型半胱氨酸生成蛋氨酸过程中无需经过活化就可直接起到辅酶作用,进而加速同型半胱氨酸在体内的转化,达到降低血浆同型半胱氨酸水平的目的。甲钴胺可以有效提高蛋氨酸合成酶活性,提高脂质卵磷脂的合成效率,这是构成髓鞘的主要结构,进而达到加速髓鞘生成的目的,甲钴胺还可促进轴索结构蛋白输送正常化,加速轴索的再生,有利于机体的神经功能恢复。而针灸可有效调节机体内脑缺血部位的TXA2-PGI2系统,有效改善机体脑部的微循环和代谢,发挥抗氧自由基损伤的功能,良好保护机体脑血管的内皮细胞,可以有效抑制兴奋性氨基酸释放,进而影响个别基因的表达,发挥抑制神经细胞凋亡的效果,进而促进神经元的再生。

本次研究表明,治疗后,两组患者同型半胱氨酸水平均显著下降,瘫痪侧肢体运动功能评分均显著升高,说明经对症治疗后,脑梗死伴高同型半胱氨酸患者的临床病症可得到良好控制,显著降低体内的同型半胱氨酸水平,提高瘫痪侧肢体的运动功能。观察组同型半胱氨酸水平[(10.6±4.2)μmol/L]明显低于对照组[(18.4±3.9)μmol/L],观察组瘫痪侧肢体运动功能评分[(91.4±5.7)分]明显高于对照组[(73.1±6.9)分],观察组总有效率(97.6%)明显高于对照组(78.0%),说明早期静注甲钴胺联合针灸治疗脑梗死伴高同型半胱氨酸的临床疗效要明显好于常规治疗,可更为显著的改善患者的临床病症,改善瘫痪侧肢体的运动功能,提高治疗效果。观察组不良反应发生率(4.8%)明显低于对照组(19.5%),说明早期静注甲钴胺联合针灸治疗脑梗死伴高同型半胱氨酸的安全性较高,引发的胃痛、肺炎、下肢静脉血栓等不良反应较少,临床疗效显著。

综上所述,早期静注甲钴胺联合针灸是治疗脑梗死伴高同型半胱氨酸的有效方法,可明显降低患者同型半胱氨酸水平,改善肢体运动功能,临床疗效显著且安全性较高,值得临床推广使用。

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