思恋短信范文
时间：2023-03-19 18:56:07
导语：如何才能写好一篇思恋短信，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公文云整理的十篇范文，供你借鉴。
篇1
世纪佳缘是个比较垂直化的服务商。目前世纪佳缘的主营收入来自世纪佳缘网和手机佳缘两个方向，线下活动和51猎婚两个品牌完全基于线下服务。线下活动是世纪佳缘最早获得现金收入的产品和服务。随着移动互联网步伐的加大，世纪佳缘开始探索移动端的商业模式，力求商业模式的完美化。
婚恋网站的突破口
世纪佳缘成立的十年是典型的互联网创业公司历程。从2003年创立到后来吸收投资，再到商业模式从免费变成收费，再到依托电视媒体、传统媒体和数据报刊的宣传，通过多种途径进行推广和传播。
世纪佳缘的大数据核心是9200万左右的注册用户，其中会员占10%。有了这样的数据，世纪佳缘在移动端的用户量就得到了保障，所以世纪佳缘手机家园的重心就放在了LBS位置服务。
“说到位置，我们不得不提到国外的Foursquare和Color，这两者不管是从之前的签到服务，还是到现在的无线支付，国内很多团队都在争相模仿。不同的是，Color从媒体方面获得报道，在产品没上市之前就得到了投资人的亲睐，获得了大概几千万美元的投资。其实Color还是一个典型的技术流产品，两年前的产品创新和概念都是获得投资人亲睐的关键点，这也是世纪佳缘移动端目前要努力的方向”，司说。
移动端的LBS即通过手机的传感器获得用户环境，通过环境，无论是图片、声音还是辅助的GPS定位，都能获得用户在近场内的数据位移，由此产生近场定位的概念。司指出，到目前为止国内团队很少能看到精准位置服务的产品。现在来看，国内很多产品经理在设计产品时一是区别借鉴，借鉴一些新的经验，在原有的产品上做些优化。另外，根据用户的数据做些微创新。
世纪佳缘在基于位置服务方面，把位置服务划分成五个纬度：第一是低于坐标的点，就是每个GPS坐标点基于点行程的轨迹。基于这种散点行程面积的区域以及加上时间后，可以判断用户的行为；再加上空间的三维坐标和真实场景，就可以定位在某个纬度上。
司表示，很多基于位置的产品都是基于点坐标去扩展，而基于轨迹的目前有一些偶遇性的产品或者叫匹配产品。机遇轨迹交叉是说两个用户相遇时会有一个交叉点；基于区域是指虽然在真实场景里两人没有互相关注，但事实上两人却处于一个很近的位置。同一个位置在现实生活中可能无法达成见面的效果，但基于世纪佳缘的位置数据可以让用户实现这个效果。
移动端服务定位为重
基于位置的服务一般选择多为列表，或者采用地图模型呈现，但是这种模式的视觉冲击力不够。为了弥补产品在视觉上的缺陷，世纪佳缘采用了大幅的表现方式，即有思想上的沟通，又有视觉上的沟通。
基于位置的轨迹服务，目前技术能够达到的程度离用户的真实场景差别还很大。其实用户的真实场景通过目前的技术手段只有加大获取位置的频次，或者拉长获取位置的时间才可以尽量还原。但这种做法会带来一些弊端。第一会影响用户体验，第二会加剧用户的流量消耗。所以基于轨迹的位置服务目前来看还没有达到真正理想的环境。
篇2
挂职锻炼半年来，我对司法行政工作有了更新的认识、更深的了解。身处这样一个开拓奋进的集体,我时刻面临着压力和挑战,工作丝毫不敢懈怠。挂职锻炼近半年来，在分管领导的直接带领下，我和社矫科的同志一道创造性地开展工作，召开了公、检、法、司分管领导及相关部门负责人参加的社区矫正工作联席会议，营造了各方齐抓共管、注重实效的良好氛围；加强与县检察院对接，实现了监外执行人员信息共享，落实监管安全责任；加大集中教育的力度，会同县检察院监所科在山阳镇开展社区矫正对象集中法纪教育试点活动，并在全县推广，增强了社区矫正对象的法纪意识；成立县社区矫正教育（心理矫正）中心，并从县卫生局、职业技术学校聘请了两名具有心理咨询师资格的工作人员，为社区矫正对象提供心理咨询与救助服务，提高了社区矫正教育、改造质量；利用省厅拨付社区矫正专项资金的契机,及时制定出台了《社区矫正百分考核办法》，将对社区矫正工作的考核与社区矫正专项经费挂起钩来，强化了考核的力度；针对一些社区矫正对象不报到入矫、逃避矫正的现状，积极撰写了《社区矫正入矫工作漏洞及立法思考》的调研文章，建议尽快立法堵塞漏洞，以此来进一步指导实际工作；分别不同对象,先后去南通、镇江监狱对宝应籍在押犯人开网展多形式的延伸帮教工作，帮教效果明显，受到狱方的热烈欢迎。以上工作在接受市局年终检查时，得到了市局领导的充分肯定。
我对自己挂职锻炼的要求是：首先，摆正位置。挂职锻炼是一个难得的机遇，更是一次终生难忘的经历。挂职不是镀金，不是享受，而是学习，更是锻炼。“挂职”是一种特殊身份，代表的不只是自己的形象，更是组织的形象。因此在实际开展工作时，我注意对自己进行准确定位。一方面,协助分管领导为开展好全县的社区矫正和安置帮教工作而发挥积极的组织、协调、领导作用；另一方面，将自己看成社区矫正科的一员，主动参与社区矫正的各项具体工作，分解科长的工作责任和压力。其次,转变角色。挂职锻炼是一种新的工作体验，需要学习、思考与实践的有机结合。随着工作环境、工作对象的变化，我注意适时转变自己的工作角色和工作方式,适应从强权部门向弱权部门工作的转变。以前我一直从事反贪侦查工作，以查处经济犯罪为主要工作内容，工作对象相对处于劣势地位，让别人适应自己的情形非常明显；现在从事司法行政管理工作，特别是身处局机关，更多的是要考虑大局利益，为基层司法所正常开展工作搭建平台、创造有利的外部环境和为地方经济建设提供法律服务是现在的主要工作内容，工作对象彼此地位平等，要我主动去适应别人的情形相对比较突出。正因为我事先思想准备充分，因而实际开展工作时能够得心应手。
挂职锻炼半年来，我对司法行政工作有了更新的认识、更深的了解，既解放了思想，更新了观念,开阔了眼界，丰富了经验,增长了才干;同时也认识到自己还存在差距和不足。一年的挂职时间已经过半，在感叹光阴易逝的同时，更感到了一种责任感和危机感。社区矫正、安置帮教工作关系到全县的社会稳定，任重道远，且社区矫正目前尚处于试点阶段，无现成经验可言。俗话说：“机遇与挑战并存！”接下来，我必须始终保持奋发有为的精神状态，始终保持蓬勃朝气、昂扬锐气和浩然正气，围绕局制定的“一条主线、四个重点”的工作思路,在社区矫正工作中不断探索，积极思考，打造亮点特色,为全局争创“全省优秀司法局”的目标作出自己应有的努力，为全县经济社会的和谐稳定奉献自己绵薄的力量。
篇3
挂职锻炼半年来，我对司法行政工作有了更新的认识、更深的了解。身处这样一个开拓奋进的集体,我时刻面临着压力和挑战,工作丝毫不敢懈怠。挂职锻炼近半年来，在分管领导的直接带领下，我和社矫科的同志一道创造性地开展工作，召开了公、检、法、司分管领导及相关部门负责人参加的社区矫正工作联席会议，营造了各方齐抓共管、注重实效的良好氛围;加强与县检察院对接，实现了监外执行人员信息共享，落实监管安全责任;加大集中教育的力度，会同县检察院监所科在山阳镇开展社区矫正对象集中法纪教育试点活动，并在全县推广，增强了社区矫正对象的法纪意识;成立县社区矫正教育(心理矫正)中心，并从县卫生局、职业技术学校聘请了两名具有心理咨询师资格的工作人员，为社区矫正对象提供心理咨询与救助服务，提高了社区矫正教育、改造质量;利用省厅拨付社区矫正专项资金的契机,及时制定出台了《社区矫正百分考核办法》，将对社区矫正工作的考核与社区矫正专项经费挂起钩来，强化了考核的力度;针对一些社区矫正对象不报到入矫、逃避矫正的现状，积极撰写了《社区矫正入矫工作漏洞及立法思考》的调研文章，建议尽快立法堵塞漏洞，以此来进一步指导实际工作;分别不同对象,先后去南通、镇江监狱对宝应籍在押犯人开网展多形式的延伸帮教工作，帮教效果明显，受到狱方的热烈欢迎。以上工作在接受市局年终检查时，得到了市局领导的充分肯定。
我对自己挂职锻炼的要求是：首先，摆正位置。挂职锻炼是一个难得的机遇，更是一次终生难忘的经历。挂职不是镀金，不是享受，而是学习，更是锻炼。“挂职”是一种特殊身份，代表的不只是自己的形象，更是组织的形象。因此在实际开展工作时，我注意对自己进行准确定位。一方面,协助分管领导为开展好全县的社区矫正和安置帮教工作而发挥积极的组织、协调、领导作用;另一方面，将自己看成社区矫正科的一员，主动参与社区矫正的各项具体工作，分解科长的工作责任和压力。其次,转变角色。挂职锻炼是一种新的工作体验，需要学习、思考与实践的有机结合。随着工作环境、工作对象的变化，我注意适时转变自己的工作角色和工作方式,适应从强权部门向弱权部门工作的转变。以前我一直从事反贪侦查工作，以查处经济犯罪为主要工作内容，工作对象相对处于劣势地位，让别人适应自己的情形非常明显;现在从事司法行政管理工作，特别是身处局机关，更多的是要考虑大局利益，为基层司法所正常开展工作搭建平台、创造有利的外部环境和为地方经济建设提供法律服务是现在的主要工作内容，工作对象彼此地位平等，要我主动去适应别人的情形相对比较突出。正因为我事先思想准备充分，因而实际开展工作时能够得心应手。
挂职锻炼半年来，我对司法行政工作有了更新的认识、更深的了解，既解放了思想，更新了观念,开阔了眼界，丰富了经验,增长了才干;同时也认识到自己还存在差距和不足。一年的挂职时间已经过半，在感叹光阴易逝的同时，更感到了一种责任感和危机感。社区矫正、安置帮教工作关系到全县的社会稳定，任重道远，且社区矫正目前尚处于试点阶段，无现成经验可言。俗话说：“机遇与挑战并存!”接下来，我必须始终保持奋发有为的精神状态，始终保持蓬勃朝气、昂扬锐气和浩然正气，围绕局制定的“一条主线、四个重点”的工作思路,在社区矫正工作中不断探索，积极思考，打造亮点特色,为全局争创“全省优秀司法局”的目标作出自己应有的努力，为全县经济社会的和谐稳定奉献自己绵薄的力量。
篇4
【摘要】 目的 探讨急性下壁心肌梗死心前导联ST段压低的意义。方法 对87例急性下壁心肌梗死中有冠脉造影的26例病人心前导联ST段改变与冠脉血管病变的关系进行比较分析。结果 以CPK峰值、左室射血分数、多支血管病变数为指标进行了统计对照，差异有非常显著性（P值分别为P<0.001、P<0.001、P=0.0077）。结论 急性下壁心肌梗死心电图心前导联ST段压低可能成为预测病人有多支血管病变的一项指标。
关键词 急性下壁心肌梗死 ST段压低 心电图
急性下壁心肌梗死早期心前导联对应性ST段压低的临床意义和发生机制各文献报道不一。本文从87例急性下壁心肌梗死中有冠脉造影的26例病人心前导联ST段改变与冠脉血管病变的关系进行了比较分析。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选择2000～2001年收住冠心病监护室87例急性下壁心肌梗死病人，所有病人均符合WHO诊断标准。其中有心前导联ST段压低者68例（78%），无ST段压低者19例（22%）。68例中有冠脉造影的18例（组Ⅰ）:15例为多支血管病变，3例单支血管病变;19例中有冠脉造影 的8例（组Ⅱ）:2例为多支血管病变，6例单支血管病变。组Ⅰ平均年龄（61±6.5）岁，组Ⅱ平均年龄（54.1±9.6）岁。
1.2 方法 （1）心电图选择:为入冠心病监护室即刻描记的一帧心电图。（2）对应性ST段压低的测量:V 1～6 导联至少2个相邻导联QRS综合波J点0.08秒ST段水平或斜行下移>1mm ［1］ 。（3）多支血管病变:冠脉造影有2支或2支以上血管腔径狭窄≥70% ［2］ 。
2 结果
两组间的年龄、CPK峰值、左室射血分数、多支血管病变例数的比较见表1。
表1 急性下壁心肌梗死心前对应导联ST段压低组与无ST段压低组各因素比较表 （略）
3 讨论
急性下壁心肌梗死病人心前导联ST段压低发生率71.9%～87.5% ［3，4］ 。本文87例中68例有ST段压低（78%），与文献一致。近年来关于急性下壁心肌梗死早期伴对应性ST段压低的发生机制颇有争议。Odemyiwa O ［5］ 等对51例下壁心肌梗死病人冠脉造影发现血管病变率及严重程度不因有无对应性ST段改变而有所不同。他们认为急性下壁心肌梗死早期对应性ST段压低可能是梗死部位的电生理改变在心脏对侧面的反映（镜像反映），不能预测相应区域的冠状动脉有严重病变。Croft ［6］ 等对47例下壁心肌梗死病人心电图分析发现，心前导联ST段压低与下壁导联ST段抬高数呈正相关，与上述观点一致，而Shan ［7］ 等以平衡法放射核素心室造影对急性下壁心肌梗死研究发现，有对应性ST段压低者比无ST段压低者左室射血分数明显降低。Katz ［4］ 等研究的结果是下壁心肌梗死伴对应性ST段压低血清心肌酶水平显著高于无ST段压低者。本文组Ⅰ左室射血分数显著低于组Ⅱ（P<0.001），组ⅠCPK峰值显著高于组Ⅱ（P<0.001），与文献报道相似。
Roubin GS ［2］ 等对84例下壁心肌梗死病人冠脉造影观察到伴前间壁ST段压低的多支血管病变率高（53%），左前降支狭窄发生率也高（36%）。他们认为下壁心肌梗死伴前间壁ST压低者多为多支血管病变或供应梗死区的血管供应区域较大，而不伴有对应性ST段压低者可排除多支血管病变。认为对应性ST段压低是远离梗死部位的心肌缺血。其发生机制可能是梗死部位血管闭塞后，经其侧支流向对应部位的血流减少或通过“窃血现象”使相对应部位血流经侧支流向梗死区增加。本文组Ⅰ15例为多支血管病变（83%），显著高于组Ⅱ的2例多支血管病变（25%）（P=0.0077）。与文献 ［2］ 相符。急性下壁心肌梗死伴心前导联ST段压低对于识别多支血管病变的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为88%、83%和75%。
另外，本文下壁心肌梗死伴对应性ST段压低病人的平均年龄显著高于无ST段压低的病人（P<0.02）。提示ST段压低和多支血管病变发生率可能在老年下壁心肌梗死时多见。总之，急性下壁心肌梗死伴对应性ST段压低时不只是心电图在远隔导联的“镜像反映”，可能同时提示有广泛心肌缺血和多支血管病变的存在。所以，急性下壁心肌梗死心电图心前导联ST段压低可能成为预测病人有多支血管病变的一项指标。
参考文献
1 Strasberg B.Important of reciprocal ST segment depression in Leads V 5 and V 6 as an indicator of disease of the left anterior descending coronary in acute inferior wall myocardial infarction.Br Heart J，1990，63:339.
2 Roubin GS.Anterolateral-ST segment depression in acute inferior myˉocardial infarction;angiographic and clinical implications.Am Heart J，1984，107:1177.
3 Tzironi D.Reciprocal electrocardiographic changes in acute myocardial infarctiom.Am J cardial，1985，56:23. 4 Katz R.The actiology and prognlstic plicution of reciprocal electrocarˉdiograp changes in acute myocardial infarction.Br Heart J，1986，55:423.
5 Odcmuyiwa O.Reciprocal ST deprssion in acute myocardial infarction.Br Heart J，1985，54:479.
篇5
用户在哪里，媒体关注的目光就要投向哪里，媒体用户的迁移深刻改变了媒体的运作模式，新闻客户端也日益成为国内传媒集团发展的热点。2015年1月21日，由湖北日报传媒集团重点打造的动向新闻客户端正式上线，承载着党报党网在移动互联网上延伸的使命。
动向新闻客户端的重要性和承载的使命，意味着其在重大新闻事件报道中的角色日益重要。2015年1月26日，湖北省进入两会时间。尚在襁褓中的动向新闻客户端，就迎来了第一场“重大战役”。动向新闻客户端凭借技术优势，通过系列创新，全方位、多媒体化呈现了两会热点，并运用互联网思维增强了用户使用过程中的参与感，赢得了众多用户的好评。
产品推广：线上线下影响有影响力的人
影响有影响力的人。动向在不遗余力地全方位报道湖北两会的同时，收获了良好的推广效果。
“动向新闻”的定位是“党媒属性、省域门户、资讯管家、舆论引领”。湖北两会便是动向的新闻盛宴。参加两会的人大代表、政协委员、工作人员、媒体记者是“动向新闻”最重要的目标用户。让这些用户了解动向、下载动向，是“动向新闻”作好推广的第一步。
会前，3300个动向新闻客户端宣传台签，两会期间随同《湖北日报》进入到代表、委员的房间，告知代表委员，动向将全程关注湖北两会，手机看两会，更快更方便。这一招是借力湖北日报的渠道优势及品牌号召力，成功给用户营造了权威、创新的第一印象。
会中，“动向”记者配带印有“动向”LOGO的胸牌，穿梭忙碌于会场内外，犹如流动的风景。这再一次加深目标用户的品牌印象。
最后，“动向”在会场外的显要处搭建了新闻直播间，代表委员走出会场后，接受新闻采访的同时关注并下载动向，使两会新闻报道和“动向”产品推广实现了双赢。
为方便用户下载安装，“动向”直播间摆放了10多个应用猫，用户插上手机就可以自动下载、安装应用。这项新奇的设备，既吸引了用户，也促进了产品推广安装，给用户带来了很好的体验。
面对目标用户，从告知信息到影响态度再到促发行为，动向每一步都精心布局，形成了一条完整的推广链条。
新闻推送：天下武功，唯快不破
互联网时代是快鱼吃慢鱼，而不是大鱼吃小鱼。因此，以快制胜是互联网思维的重要表现。
采、编、播、发最新最快的新闻资讯，是媒体人的行为准则；独家、快速、准确、权威的首发新闻，是媒体人不懈的追求。“动向”更不例外。
依托湖北日报传媒集团各媒体新闻采集优势，利用现场报道记者的双料身份，第一时间新闻。在省两会现场，经常可以听到这样的声音：“我是湖北日报记者，同时也是动向新闻客户端记者……”“我是荆楚网和动向新闻客户端记者……”
改进并完善了内容生产流程，实行24小时值班制度，建立了符合全媒体特点的生产机制。省两会期间，动向新闻客户端24小时滚动更新，完全打破了传统媒体的生产周期，第一时间向用户信息。省政协委员戴辉点赞：“‘动向’几乎是实时播报，移动新媒体，就是不一样！”
前方记者和后方编辑联动，新闻快准深。1月29日，参加两会的人大代表和政协委员，听取了省高级人民法院和省人民检察院的工作报告。在此之前，后方编辑提前做好了报告的分析解读，前方记者在会场将新闻动态和现场图片即时传给后方编辑，“动向”第一时间的新闻快准深。
充分利用4G通信技术实现快速发稿。动向新闻客户端对新闻图片的像素要求不高，一般10万像素即可，因此手机拍照完全可以胜任这一要求。事实上，通过4G网络，一般的新闻图片几乎是秒传，而一张达27M的高清图片传送也只用了2秒不到。
1月27日上午，人大会议开幕式上，动向新闻客户端开创性地进行了视频、图文双料现场直播。用户无论身在何处，只要轻触手机屏幕，省长作政府工作报告的现场就会呈现在眼前。而当主持人宣布大会休会时，语音刚落，动向新闻客户端关于大会开幕的综合性图文报道，就第一时间在用户手机上弹出了。
2月1日，人大代表表决通过“湖北全面禁烧秸杆”决定后，不到5分钟的时间，动向新闻客户端就在第一时间弹出了新闻。正是依靠快速的新闻报道，动向新闻客户端在用户中树立了口碑，也慢慢有了一些名气。省人大代表方正说，作为省报集团打造的新闻客户端，“动向新闻”一定能够扛起移动端主流媒体的旗帜。
技术驱动：方寸屏幕可施大拳脚
媒体融合，不是简单的“搬砖”工作，不是简单地将传统媒体的稿件搬到手机屏幕上，而是需要一种话语方式与表现形态和传播方式的变革，需要符合互联网的传播特性。而媒介整合的基础，就是技术融合。
手机专题，当下最火的就是HTML5页面的呈现。这种融合漫画、图表、文字、声间、视频的呈现方式，使方寸屏幕施展了大拳脚。
秸秆禁烧及综合利用的决定出来第二天，“动向”就推出了一个创意十足的HTML5专题――秸秆群聊。该专题以微信群聊的页面，以简洁、生动的聊天形式将一个决定轻松道来，集合文字、图表、动画等多种表现形式，解读视角巧妙独特的，呈现形式新颖别致。聊天头像可点击，将次要却必要的人物身份等信息分配到第二级页面，大大提高了新闻信息的传播效率，同时，该专题交互性强，使用户在阅读新闻的读者又有娱乐体验。
政府工作报告手机阅读版，可视化报道增强了用户体验，点击量和转发量均十分庞大。
粉丝效应：让用户生产内容
互联网时代，是去中心化的时代。媒体不再是精英和权威的专利，让用户生产内容成为新媒体最显著的特征之一。
湖北省两会期间，动向新闻客户端在媒体联动、用户互动方面，做出了一些探索：与湖北日报传媒集团内各媒体联动，引领网民互动参与，直接为动向新闻客户端导入了用户流量。
“动向”与湖北手机报合作――广泛征集读者议政建言，“捎话”给两会上的代表委员，从而实现与代表、委员的会内会外连线互动；湖北手机报则通过短网址链接指向“动向”，从而为客户端导入流量。
“动向”与湖北日报合作――将征集的读者建议、心声反馈给前方采访的记者，记者带着问题去采访代表、委员，从而实现读者点采；湖北日报则在新闻稿件旁配发“动向”下载二维码，实现流量转化。
“动向”与荆楚网合作，邀请用户共同参与“拍案叫绝”话题讨论，共同引导用户跟评留言、热议两会，一吐为快。
此外，动向新闻客户端还与东湖社区论坛、荆楚网微博微信等多种新媒体产品联动，形成了新媒体融合传播态势。
引导代表、委员、读者，甚至会场工作人员给“上头条”频道报料，直接参与内容生产。
篇6
[关键词] 氯吡格雷；阿司匹林；非ST段抬高型心肌梗死；临床观察
[中图分类号] R972 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2012）06（a）-0065-02
Clinical observation of clopidogrel and aspirin in the treatment of non ST segment elevation myocardial infarction
LI Mingyu
The People''s Hospital of Tumen City in Jilin Province, Tumen 133100, China
[Abstract] Objective To observe the clinical curative effect of clopidogrel combined with aspirin in the treatment of non ST segment elevation myocardial infarction. Methods Ninty six patients were randomly divided into the treatment group 50 cases and control group of 46 cases, based on the routine treatment, the treatment group were treated with clopidogrel 75 mg daily (the first dose of 300 mg), aspirin 100 mg daily, the control group was only given aspirin 100 mg, observed for 4 weeks, the clinical efficacy and adverse reaction of two groups patients were observed. Results After 4 weeks treatment, the total effective rate of the treatment group was 85.7%, the control group was 63.3%, the two groups had significant difference (P < 0.05). Conclusion The clopidogrel and aspirin in the treatment of non ST segment elevation acute myocardial infarction is effective in reducing cardiovascular events, has good curative effect, less adverse reaction, it is worthy of popularization and application.
[Key words] Clopidogrel; Aspirin; Non ST segment elevation myocardial infarction; Clinical observation
冠状动脉粥样硬化性心脏病指由于冠状动脉粥样硬化管腔狭窄、痉挛或阻塞导致心肌缺血、缺氧或坏死而引起的心脏病，它是动脉粥样硬化导致器官病变的最常见类型[1]。急性心肌梗死由于冠状动脉急性狭窄或闭塞，供血持续减少或终止，所产生的心肌严重缺血和坏死。分为ST段抬高型心肌梗死和非ST段抬高型心肌梗死，治疗上在严格掌握适应证的情况下及早进行溶栓、介入治疗与外科手术治疗基础上，积极抗凝、抗血小板治疗尤为重要，并能明显降低患者心血管事件、脑梗死、再发心肌梗死，提高远期疗效、生活质量。本文旨在观察氯吡格雷与阿司匹林联合治疗非ST段抬高型急性心肌梗死的临床疗效。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择本院心内科2010年6月～2011年4月住院诊治的非ST段抬高性心肌梗死患者96例，具有典型的胸痛，时间大于30 min，血清肌酸激酶（CK）增高；心肌坏死标志物升高；心电图表现ST段明显压低0.4～0.6 mV，T波倒置。入选前均未服用氯吡格雷，将96例患者随机分为治疗组50例，其中，男35例，女15例，平均年龄（60±8）岁，吸烟3例、高血压4例、糖尿病3例、血脂异常2例；对照组46例，男28例，女18例，平均年龄（65±7）岁，吸烟者4例、高血压3例、糖尿病3例、血脂异常2例；两组患者在吸烟、性别、高血压、糖尿病、血脂异常、心功能等方面差异无统计学意义（P ＞ 0.05），具有可比性。
1.2 方法
两组患者均接受常规治疗，包括阿司匹林片、硝酸酯类、血管紧张素转换酶抑制剂、β受体阻断剂、他汀类以及注射低分子肝素5 000 U，每12小时1次，连用7 d。治疗组在此基础上给予氯吡格雷每日75 mg（首剂300 mg），对照组仅给予阿司匹林100 mg，观察比较两组在治疗期间内心脑血管事件（包括心绞痛复发、ST段抬高型急性心肌梗死、心源性猝死、缺血性脑卒中）的情况，以及药物不良反应。
1.3 临床疗效评定标准
显效：症状消失或心绞痛发作次数减少85%，心电图缺血或损伤性改变恢复正常；有效：心绞痛发作次数减少55%～85%，心电图压低的ST段回升0.5 mV以上；无效：心绞痛的发作次数减少55%，心电图ST段下移较入院时改善。总有效为显效加有效。
1.4 统计学处理
采用SPSS 11.5软件进行统计学处理。计量资料以x±s表示，进行t检验，计数资料采用χ2检验。P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
住院治疗4周后，治疗组50例中，显效35例，有效9例，无效6例，总有效率为88%；对照组46例中，显效21例，有效8例，无效17例，总有效率为63%。两组比较差异有统计学意义（P < 0.05）。
再发非致死性心肌梗死治疗组2例，对照组5例；心律失常治疗组2例，对照组4例；心力衰竭治疗组1例，对照组5例；心血管性死亡治疗组1例，对照组3例；两组心泵功能治疗组好于对照组。
4周内两组均未出现严重出血、胃肠道反应，治疗组较对照组发生率低，骨髓抑制、皮疹无显著差异。
3 讨论
心肌梗死是心肌缺血性坏死，在冠状动脉病变的基础上发生冠状动脉血供急剧减少或中断，使相应的心肌严重而持久地急性缺血所致[2]。冠状动脉病变或粥样硬化斑块的慢性进程，即使可导致冠状动脉严重狭窄甚至完全闭塞，由于侧支循环的渐渐形成，通常不易产生心肌梗死，相反冠状动脉的粥样硬化病变在进展过程中即使狭窄程度不重，当侧支循环尚未建立，狭窄的冠状动脉管腔内有血栓形成，心肌血供急剧下降，中断使心肌持久缺血达30 min以上，即可发生心肌梗死。急性心肌梗死起病急而凶险，死亡率高，预后差，是冠心病极其危重的表现类型，已成为危害健康的重大的卫生问题[3]。
目前治疗急性心肌梗死主要是及早进行血运重建，尽早恢复冠状动脉的血流和增加心肌的灌注，以挽救濒死的心肌、防止梗死范围扩大、缩小心肌缺血范围，保护心脏功能。但基于血栓形成的病理生理，抗血栓形成也是AMI治疗的重要环节之一[4]。
临床上已将血小板聚集的药物列为治疗AMI的常规用药。氯吡格雷与阿司匹林都有抗血小板聚集作用。氯吡格雷通过选择性抑制ADP和血小板受体的结合，抑制ADP介导的血小板活性，抑制血小板聚集，也通过其代谢产物发生作用。氯吡格雷起效快，口服后代谢产物在2 h达到抗血小板的高峰[5]。阿司匹林又名乙酰水杨酸，作用机制主要通过抑制血小板环氧化酶，阻止活化四烯酸代谢合成血栓素，选择性抑制通过血栓素A2（TXA2）途径诱导的血小板聚集。阿司匹林的这种抑制作用持久不可逆，一次用药抑制作用可持续近7 d，直到骨髓细胞产生新的血小板才能重新合成TXAt2。但由于更新10%的血小板即可使血小板功能低下的状态恢复，故仍需每日服用才能维持疗效。阿司匹林口服后吸收迅速，胃肠道吸收，血浆浓度在1～2 h达高峰，半衰期为18～20 min[6]。氯吡格雷耐受性好，无阿司匹林胃肠道反应。
本文中氯吡格雷与阿司匹林联合治疗非ST段抬高型急性心肌梗死有效降低治疗期间心脑血管事件，再发非致死性心肌梗死、心律失常、心力衰竭、心血管性死亡和心肌梗死复发率减少36%，而严重并发症未增加，值得临床借鉴。
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篇7
【关键词】 急性心肌梗死 替罗非班 经皮冠状动脉介入治疗
目前，直接经皮冠脉介入治疗(PCI)已成为STEMI的基本治疗方式[1、2]。但由于“再灌注损伤”和“无复流现象”的存在，即使梗死相关动脉血运完全重建(TIMI3级)，梗死区仍存在微循环缺血状态，对左室功能恢复和临床预后产生不良影响。有效的抗凝、抗血小板辅助治疗能显著改善微循环状态，从而进一步改善急性STEMI患者PCI术后左室功能和临床预后。
一 资料和方法
(一） 研究对象
从2008年10月至2009年10月连续入住我科的急性ST段抬高型心肌梗死患者，并且接受急诊PCI治疗，且发病时间距发病不大于12小时。符合其中任意两条即可诊断。典型胸痛持续30min或以上，且含服硝酸甘油不能缓解；心电图至少2个或2个以上相关导联ST段抬高≥0.1mV或胸导联ST段抬高≥0.2mV；典型的心肌坏死生物化学标记物（优选心肌肌钙蛋白I，TNI）阳性。主要排除标准为符合以下任意一项者急性非ST段抬高型心肌梗死；急性STEMI发病时间>12h或合并机械并发症；近期内重大手术、外伤、出血性疾病、脑血管意外和血小板减少症；已知抗血小板药物过敏史未签署知情同意书。
（二） 实验分组
根据不同的用药时间病人分成三组:PCI术前接受替罗非班治疗组（A组）；PCI术后接受替罗非班治疗组(B组)；PCI时不使用替罗非班组(C组)。所有患者均于术前在我科（CCU病房）顿服阿司匹林300mg和氯吡格雷300mg。替罗非班组于术前在我科静脉推注替罗非班(商品名：欣维宁，武汉远大制药集团有限公司)10μg/kg，继以静脉滴注0.15μg.kg.min维持36h—48小时；B组病人于成功PCI术后持续静脉滴注0.15U.g.kg.min维持36h—48小时，C组病人不应用替罗非班。
（三） 观察指标
（1）TIMI3级血流
观察三组间的PCI术前和术后TIMI3级血流。
（2）严重心脏不良事件（MACE，死亡，再梗死，严重心绞痛）发生率
记录三组病人在住院期间和90天随访内的严重心脏不良事件，比较三组住院期间和随访90天内严重心脏不良事件发生率。
(四) 统计学分析
应用统计学软件SPSS13.0（美国伊利诺州芝加哥SPSS公司）数据分析系统对所有数据进行统计学分析，正态分布计量资料以X±s表示，多组间单因素采用F检验，多样本间采用多行和多列的计数的检验方法，样本间使用X2分割法。用P
二 结果
本实验共有144名急性心肌梗死患者符合标准入选该项研究。术前给与替罗非班组（A组）有51人占总体（35.4%），术后应用替罗非班组（B组）和未使用替罗非班组（C组）分别有49人和44人，占总体的35%和29.6%。A组、B组和C组，组间年龄、性别、高血压、糖尿病、高脂血症、吸烟、既往PCI和CABG史、胸痛到PCI时间、梗死部位、TNI等基础临床情况都没有差异及统计学意义。术前使用替罗非班组（A组）梗死相关动脉（IRA）TIMI3级血流明显增加达到15.7%与术后使用替罗非班组（B组，4.1%）及未使用替罗非班组（C组，2.1%）有明显差异，并且达到了统计学差异（P
三 讨论
急性STEMI的治疗原则是早期、持续、完全开通梗死相关动脉，持续恢复心肌细胞水平的血液灌注，从而能缩小心肌梗死面积，改善左室功能和临床预后。以往研究证实，急诊经皮冠脉介入治疗（PCI）能显著改善预后[1，2]。
STEMI病人是冠状动脉内斑块破裂，随后血小板粘附、聚集，血小板通过激活凝血系统使血栓形成。STEMI病人在冠脉内通常有较为严重血栓，急诊PCI时由于手术操作的机械因素，导致微小血栓和破碎的动脉粥样斑块，引起远端微循环栓塞、血小板激活和血管活性因子活化，心肌微循环出现慢血流或无复流，进而降低心肌水平再灌注[3，4]。临床常用的抗血小板药物阿司匹林和氯吡格雷可分别阻断血小板聚集过程中的花生四烯酸途径和二磷酸腺苷途径。血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa（GPⅡb/Ⅲa）受体拮抗剂作为阻断血小板聚集的最后通路，通过其强有效的抗血小板作用，减少病变部位血栓负荷，抑制血小板激活过程中缩血管物质和炎性因子的释放，减少PCI过程中微血栓的脱落和微栓塞的发生。同时还能增加内皮细胞介导的扩血管作用，扩血管作用主要是通过增强N0的生物活性来改善内皮细胞的功能，还能通过抑制过量的氧自由基从而起到抑制缩血管作用，从而显著提高PCI后梗死相关血管TIMI3级血流和梗死相关区域心肌灌注水平[5，6，7]。血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa（GPⅡb/Ⅲa）受体拮抗剂替罗非班为一种可逆性非肽类GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂，静脉注射可以剂量性的抑制血小板聚集和血栓形成。
我们尚不知道PCI时理想的替罗非班的剂量，最近发表的ON-TIME-2[8]研究都使用高剂量替罗非班（25ug/kg0.125ug.kg.min）与安慰剂对比，在ON-TIME-2研究有984名病人入选分为入院前应用高剂量替罗非班为早期组和安慰剂组，研究发现在早期组中不论是在PCI术前（10.9mm±9.2 mm VS 12.1 mm±9.4 mm，P=0.028）还是PCI术后一小时（3.6 mm±4.6 mm VS4.8 mm±6.3 mm，P=0.003）平均ST段偏移程度早期应用高剂量替罗非班组都明显优于对照组，显著改善STEMI患者临床预后，明显降低MACE(死亡，再梗死，再次血运重建)发生率，而出血并发症无显著增加。这些研究表明，急性心肌梗死病人，应用高剂量替罗非班不仅可以显著降低缺血和血栓的并发症的发生，而且时安全的。
关于应用时间的选择上，在ON-TIME[9]研究共入选507例AMI患者，分入院前应用替罗非班为早期组，在导管室应用者为晚期组。早期组提早59min应用替罗非班。虽然早期组术前的TIMI2～3级的比率高于晚期组(分别为43%和34%)，但是两组术后的TIMI3级比率、心肌灌注分级（MBG）3级比率，校正的TIMI帧计数（correted TIMI freme count，CTFC）差异无统计学意义，两组的30天1年联合事件差异亦无统计学意义。
四 结论
早期应用替罗非班能提高急性ST段抬高型心肌梗死急诊PCI术前和术后的梗死相关动脉开通率和TIMI3级血流，住院期间和90天随访MACE发生率无差异。 参 考 文 献
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篇8
【关键词】通心络胶囊；阿司匹林；短暂性脑缺血短暂性脑缺血发作是指某一脑动脉血流量突然降低到临界值以下所出现的一组神经功能障碍症候群, 临床表现为24 h内完全恢复, 但反复发作。短暂性脑缺血发作容易发展为脑梗死和脑缺血性疾病, 进而导致致残或病死［1］, 因此临床将短暂性脑缺血发作作为神经科急症进行处理。本科室采用通心络胶囊联用阿司匹林进行小规模治疗短暂性脑缺血发作, 取得了满意的疗效。
1资料与方法
1. 1一般标准获得院内伦理委员会同意, 纳入2011年10月~2013年12月依据2010版中国急性缺血性脑卒中诊治指南［2］诊断的短暂性脑缺血发作患者126例, 其中男72例, 女54例, 年龄34~86岁, 均伴有突然发生的神经功能缺损, 症状和体征在24 h内完全消失, 经头CT和MRI检查证实无出血、占位及可以解释症状的责任病灶。126例患者随机分为对照组62例和治疗组64例, 两组一般资料, 差异无统计学意义(P>0.05), 具有可比性。
1. 2排除标准合并严重原发心、肺、肝、肾疾病者；多发性损伤伴有血气胸或肺挫伤、或腹部脏器损伤、或失血性休克者；精神病患者及老年痴呆患者及由其他脏器疾病引起意识障碍者。
1. 3治疗方法对照组每天给予盐酸丁咯地尔200 mg静脉滴注, 治疗组予通心络胶囊, 4粒/次, 3次/d, 疗程4周, 两组患者同时给予阿司匹林肠溶片100 mg/次, 1次/d, 疗程1个月。并视病情加用降压、降脂药, 不用其他的血管活化剂。4周后观察治疗结果, 疗程结束至出院后病患服用50 mg/d的阿司匹林。
1. 4疗效评价两组病患均在治疗前和治疗后4周采用临床神经功能缺损标准, 即欧洲脑卒中 (The European Stroke Scale) 评分。治疗后6个月电话随访病患的情况, 分为治愈、显效、有效和无效。出现梗死和出血出现时即刻脱离本研究, 转其他治疗方案。
1. 5统计学方法采用SPSS13.0软件进行分析, 检测指标采用均数±标准差( x-±s)表示, 组间计量资料采用t检验, P
2结果
2. 1两组康复功能评分治疗组对短暂性脑缺血患者的生活和神经等改善较为明显, 评分显著减少(P
2. 2两组有效率比较6个月随访发现对照组有4例, 治疗组有1例因病情恶化脱失, 其余病例并无显著的不良反应, 生活质量良好。见表2。
3讨论
短暂性脑缺血发作起病突然, 多数短暂性脑缺血发作患者就诊时症状已消失便不再继续治疗。但部分患者在短暂性脑缺血发作发生后的短期内可进展为脑梗死［3］。临床上采取何种治疗措施来有效预防短暂性脑缺血的反复发作, 减少卒中的发生率值得探讨。
通心络具一种具有降脂、抗凝和保护内皮功能的中成药, 有益气活血、通络止痛之功效, 可有效地延缓动脉硬化, 改善脑供血［4］。而作为防治心脑血管疾病的基石, 在预防与治疗心脑卒中效果明显, 很多医院心血管疾病住院患者阿司匹林的使用率也已超过85%, 两者合用能减轻各种原因引起的血管内皮损伤, 显著降低缺血的发生率, 能尽快控制短暂性脑缺血。实验联合两种药物进行治疗, 效果显著。
参考文献
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篇9
【关键词】 食管鳞癌;nf?κb;rna interference;cyclin d1
effect of sirna?mediated inhibition of nf?κb combination with 5?fu on cell cycle of escc cell lines
tian fang1，2，chai yu?rong3，xu pei?rong2，liu hong?tao2，xue le?xun2
1. department of pathophysiology, basic medical college of zhengzhou university, zhengzhou 450052, china，2. laboratory for cell biology，3. department of histology and embryology
corresponding author：xue le?xun，e?mail：abstract：objective rna interference (rnai) was employed to inhibit the expression of p65 and to evaluate the effects of nf?κb signaling pathway as a target for gene therapy in escc cell lines. methods a fluorescein?labeled non?special sirna was used to monitor efficiency in ec9706. ec9706 and eca109 were transfected with 50 nm p65sirna, p65 and cyclind1 protein levels were determined using western blotting. after transfected with or without p65sirna at 72h, cells were tested for nuclear activity of nf?κb using nuclear extracts by emsa. escc cells were treated with or without p65sirna, 5?fu or combinations thereof for 48h. the cells were stained with pi and analyzed cell cycle by flow cytometry. results a fluorescein?labeled non?special sirna was used to monitor efficiency in ec9706, demonstrating nearly 90% transfection efficiency. the protein level of p65 and cyclind1 decreased after transfected with p65sirna at 72h. and p65sirna also suppressed the nf?κb?dna?binding. p65sirna?transfected cells showed an increase in the percentage of cells in the g0/g1 phase and a decrease in the percentage of cells in the s phase. while combination with 5?fu, the results were more prominence. conclusion p65sirna inhibits the constitutively active nf?κb signaling pathway, and downregulats the expression of cyclind1. the strong constitutive nf?κb signaling pathway in escc makes nf?κb a target for the development of novel therapeutic strategies.
key words：esophageal squamous cell carcinoma;nf?kappab;rna interference;cyclin d1
食管鳞癌是一种侵袭性很强的肿瘤，它的预后差，临床进展迅速，多伴有淋巴结转移，且易复发。核因子nf?κb (nuclear factor?kappa b) 是近年来发现的转录调控因子，最常见的形式是由 p50 和p65组成的异源二聚体，在绝大多数静止期的细胞中，nf?κb 与其阻抑物iκbα蛋白相结合，以非活性形式存在于细胞质中。许多刺激物可以通过对iκbα的磷酸化而使其降解，使解离的nf?κb进入到核内并暴露它的核识别位点，从而促进靶基因的转录。活化的nf?κb信号通路可增强肿瘤细胞对放化疗药物的抵抗力，从而产生耐药性。有研究表明，在许多人类肿瘤中nf?κb信号通路的激活在肿瘤的发生发展中起着重要的作用[1?3]。
rna干扰(rna interference，rnai)是由双链rna(double?stranded rna，dsrna)引发的转录后基因静默机制，是目前研究基因功能强有力的工具之一[4]。rnai 的功能是由21～23 个碱基长的短双链rna完成的 ,即sirna(small interference rna ,sirna)，它具有与目的基因互补的序列。目前这一方法被用于体外细胞水平的基因敲除或基因表达抑制,为其成为基因治疗的手段开辟了广阔的前景。本研究拟应用rna干扰技术，使用针对nf?κb信号通路中p65的特异性sirna,观察其对p65表达的抑制作用及联合化疗药5?fu对食管鳞癌ec9706和eca109细胞周期的影响，探讨将nf?κb作为基因治疗靶点的价值。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 细胞系及细胞培养 食管癌细胞系eca109由本室保存，食管癌细胞系 ec9706由中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室惠赠。两株细胞在含有10%的胎牛血清，100u/ml青霉素，100μg/ml链霉素的1640培养液(gibco公司)中于37 ℃、5% co2 的条件下培养，实验细胞均处于对数生长期。
1.1.2 抗体和试剂 鼠抗人p65(sc?8008)单克隆抗体和兔抗人cyclin d1(sc?753)购自santa cruz biotechnology 公司;细胞核和细胞质蛋白提取试剂盒、生物素3′末端标记试剂盒(89818)、化学发光emsa 试剂盒(78833)均购自 pierce 公司。nf?κb p65 sirna干扰试剂盒购自cell signaling technology公司，碘化吡啶pi购自美国sigma公司。
1.2 方法
1.2.1 sirna的转染及效率检测 按照cell signaling technology公司sirna干扰试剂盒说明书的要求，进行转染。在转染前，ec9706(5×104) 和eca109(6×104)按一定细胞数铺于6孔板中，使用无抗生素的培养基培养24h。将含有sirna的转染试剂或荧光素标记的对照sirna与细胞共孵育5h后，加入新鲜培养基孵育24h。用日本nikon公司显微荧光摄像/照相系统检测荧光素标记的对照sirna在ec9706细胞中的转染效率并照相。
1.2.2 胞浆、胞白的制备 按照细胞核和细胞质蛋白提取试剂盒说明书，分别提取细胞质、细胞白，bradford 法检测蛋白质的含量，-70℃保存。
1.2.3 western blot测定蛋白的表达 转染p65sirna72h后，从ec9706和eca109细胞中取细胞质蛋白，与预染的蛋白质分子量标准一起上样。检测p65和非靶向mapk蛋白表达，及细胞周期蛋白cyclin d1的表达，经12%sds?page分离，电转到硝酸纤维膜上。5%的脱脂奶粉tbst溶液封闭2h，抗体按1∶100 孵育4℃过夜，tbst溶液洗涤10min×3次，硝酸纤维膜分别与辣根过氧化物酶标记的二抗(1∶50 000)室温孵育1h后，tbst溶液洗涤10min×3次，dab显色。实验重复三次。
1.2.4 凝胶电泳迁移率(electrophoretic mobility shift assay，emsa)检测nf?κb与 dna的结合活性 ec9706和eca109细胞转染p65sirna 72h后，收集转染细胞和未转染细胞提取细胞白，检测转染前后p65与dna结合活性的变化，方法如下：采用生物素3′末端标记法将nf?κb探针5′?agt tga ggg gac ttt ccc agg c?3′，3′?tca act ccc ctg aaa ggg tcc g?5′进行标记。将细胞核提取物(10μg)与生物素标记的探针在20μl的缓冲液(10m tris?hcl，ph 8.5，0.5 mm edta，5mm mgcl2，1m kcl，0.05% np?40，2.5% glycerol，1μg/μl poly (di·dc) and 0.2μg/μl bsa)中充分结合，行6%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后，采用毛吸转移法转移至带正电荷的尼龙膜上，120mj紫外交联5min。生物素标记的dna探针与hrp标记的亲和素之间相结合，通过化学发光，显影，定影。
1.2.5 流式细胞仪检测细胞周期 转染和未转染p65 sirna的食管鳞癌细胞，在50ml培养瓶中培养，5?fu单独或联合应用，进行试验分组和处理，作用48h后，收集细胞;1 000 r/min离心5min，弃去上清;用pbs洗两遍，离心后弃去，加入70%冰乙醇固定，4℃过夜;上机前，1 000 r/min离心5min，弃去乙醇，pbs洗三遍;加入1ml pbs制成细胞悬液，加rnasea(终浓度50μg/ml)，室温放置1h;调整细胞浓度为1×106，加1ml pi(100μg/ml)，避光30min，上机检测细胞周期，每个样本检测10 000个细胞。
2 结果
2.1 sirna转染食管鳞癌细胞ec9706的效率
将荧光素标记的对照sirna，在同样条件下转染到ec9706细胞中，置37℃、5%co2孵育箱内培养48h，通过荧光显微镜观察转染效率，见图1。sirna转染食管鳞癌细胞的效率可达90%以上。
2.2 食管鳞癌细胞转染p65sirna后p65蛋白的表达水平
western blot检测细胞中p65的蛋白表达水平，见图2。结果表明，与未转染p65 sirna的ec9706和eca109细胞相比，转染后的ec9706和eca109细胞，p65蛋白的表达水平下调，而非靶向蛋白mapk的表达无影响。
2.3 食管鳞癌细胞转染p65sirna后，nf?κb与κb位点结合活性的改变
ec9706和eca109细胞转染p65sirna72h后，收集各组细胞提取细胞白，emsa检测nf?κb与dna结合活性的变化。结果发现，与未转染p65 sirna的ec9706和eca109细胞相比，转染p65 sirna的ec9706和eca109细胞中，nf?κb与dna的结合活性明显下降，见图3。提示：p65 sirna可以抑制p65的表达，下调nf?κb与靶基因的结合活性。
2.4 p65sirna阻断nf?κb信号通路下调cyclind1的表达
食管鳞癌细胞ec9706和eca109在转染p65 sirna72h后，分别提取细胞总蛋白检测细胞周期cyclin d1蛋白的表达情况。结果表明，与未转染的细胞相比，cyclin d1的表达在转染72h后开始下降，见图4。
2.5 p65sirna单独或联合5?fu对食管鳞癌ec9706和eca109细胞周期的影响
食管鳞癌细胞ec9706和eca109按以下方法分组：未转染组;转染p65 sirna72h组;单独使用5?fu组;转染p65 sirna48h后，使用5?fu治疗24h组。各组细胞使用pi染色，以未转染组为对照，检测细胞周期变化情况。结果显示，ec9706和eca109在转染p65 sirna后，g0/g1期的细胞开始增加，同时s期的细胞逐渐减少;当转染细胞联合使用5?fu时，g0/g1期的细胞明显增加，同时s期的细胞明显减少，见表1、2。
3 讨论
研究表明，活化的nf?κb信号通路存在于多种人类肿瘤中，作者以往的研究已证实在两种食管鳞癌细胞中存在有激活的nf?κb信号通路[5]。但是，激活的nf?κb信号通路在食管鳞癌细胞的增殖及对化疗药的耐受性等机制中是否起作用，尚不清楚。本研究使用rna干扰技术，特异性的阻断nf?κb亚单位p65的表达，研究nf?κb信号通路在食管鳞癌的发生发展中的作用。western blot实验中，将终浓度为50nm的p65 sirna分别转染ec9706和eca109细胞，持续作用72h，检测p65的蛋白表达水平，结果发现，在转染72h后，与未转染细胞相比，p65的蛋白表达水平也明显下降，而非靶向抗体mapk的表达水平未受到影响。表1 p65 sirna转染前后与5?fu单独或表2 p65 sirna转染前后与5?fu单独或联合
活化的nf?κb可以进入到核内，与下游调控基因上共同的κb序列结合，参与细胞的增殖、转化、浸润及抗凋亡。抑制nf?κb信号通路的活性，最终是抑制nf?κb与κb的序列结合，阻断它促进下游基因表达的功能。本研究采用凝胶滞留实验检测nf?κb与dna的结合，结果发现，在转染72h后，nf?κb与dna的结合活性明显下降。以上实验结果表明，p65 sirna可以高效的转染到食管鳞癌细胞中，特异性的抑制目的基因p65在mrna和蛋白水平上的表达，导致nf?κb与dna结合能力下降，从而抑制nf?κb信号通路的活化。
cyclin d1的高表达存在于多种肿瘤中，如mega等[6]的研究发现，在食管鳞癌组织中，cyclin d1和e2f1的高表达会促进肿瘤的发展，导致病人的预后欠佳。在研究中国南方的食管癌组织中发现，cyclin d1的高表达存在于61%的样本中，提示cyclin d1的表达是食管癌发生的早期事件，并在肿瘤的进展中cyclin d1的表达不断积累[7]。本研究采用western blot法，检测转染p65sirna，阻断nf?κb信号通路后，是否能够下调nf?κb下游基因cyclin d1的表达。将终浓度为50nm的p65 sirna分别转染ec9706和eca109细胞，72h后收集细胞总蛋白，结果发现，与未转染细胞相比，转染细胞中cyclin d1的表达受到抑制。本研究还采用流式细胞仪检测食管鳞癌细胞在转染前后及单独或联合应用5?fu后，对细胞周期的影响。ec9706和eca109在转染p65 sirna后，g0/g1期的细胞开始增加，s期的细胞逐渐减少;当转染细胞联合使用5?fu时，g0/g1期的细胞明显增加，同时s期的细胞明显减少。以上这些结果表明，由于cyclin d1是细胞周期进行中一个重要的调节者，当使用p65 sirna阻断食管鳞癌细胞中nf?κb信号通路时，cyclin d1的表达下调，肿瘤细胞被停滞在g1期，提示cyclin d1是受nf?κb调节的一个重要的下游基因，nf?κb可以通过对cyclin d1的调控来促进食管鳞癌细胞的增殖。p65 sirna阻断食管鳞癌细胞中nf?κb信号通路并联合使用5?fu，可以明显抑制食管鳞癌细胞的增殖，使更多细胞停滞在g1期，减少细胞的分裂。
因此，激活的nf?κb信号通路在食管鳞癌细胞的增殖及耐药中起着重要的作用，通过转染p65 sirna可以特异性的阻断nf?κb信号通路，抑制食管鳞癌细胞的增殖，增加细胞对化疗药的敏感性，提示nf?κb信号通路可以成为食管癌基因治疗中一个强有力的作用靶点。
【参考文献】
[1] wang jh，huang qk，chen mx. the role of nf?κb in hepatocellular carcinoma cell[j]. chin med j, 2003,116(5):747?752.
[2] yu hg，yu ll，yang y. increased expression of rela/nuclear factor?kappa b protein correlates with colorectal tumorigenesis[j]. oncology, 2003,65(1):37?45.
[3] nair a，venkatraman m，maliekal tt. nf?κb is constitutively activated in high?grade squamous intraepithelial lesions and squamous cell carcinomas of the human uterine cervix[j]. oncogene, 2003, 22(1):50?58.
[4] takahashi y, nishikawa m, kobayashi n, et al. gene silencing in primary and metastatic tumors by small interfering rna delivery in mice: quantitative analysis using melanoma cells expressing firefly and sea pansy luciferases[j]. j control release, 2005, 105(3):332?343.
篇10
【关键词】 心肌肌钙蛋白I；超敏C反应蛋白；急性心肌梗死
1 材料与方法
1. 1 仪器 美国强生全自动生化分析仪
1. 2 试剂 超敏C反应蛋白试剂（英科新创科技有限公司， 生产批号：APRK001）。心肌肌钙蛋白I试剂（太原市川至生物有限公司， 生产批号：111123）。
1. 3 病例选择 AMI组：选择本院心内科患者中确诊为AMI的患者80例， 男49例， 女31例。对照组：本院的健康体检者40例。
1. 4 实验方法 采用免疫透射比浊法对患者血清中心肌肌钙蛋白I的含量进行检测， 同时采用乳胶凝集比浊法对其血清中超敏C反应蛋白的含量进行检测并比较。
1. 5 统计学方法 检测结果用χ2 检验进行比较， P
2 实验结果
2. 1 患者血清中cTnI和hsCRP的检测结果AMI组cTnI阳性：男42人， 女28人；hsCRP阳性：男38人， 女27人：而对照组cTnI阳性：男2人， 女0人；hsCRP阳性：男4人， 女3人.AMI组和对照组男性和女性患者检测结果为阳性的人数比较， 男性患者比女性患者有升高的趋势。
2. 2 cTnI阳性和hsCRP阳性与cTnI+hsCRP阳性患者比较AMI组患者人数80人， cTnI阳性70人， hsCRP阳性65人， cTnI+hsCRP阳性76人；对照组患者人数40人， cTnI阳性2人， hsCRP阳性7人， cTnI+hsCRP阳性9人。cTnI和hsCRP的检测在AMI组中的阳性率均明显高于对照组， 有显著性差异。
2. 3 cTnI阳性率和hsCRP阳性率与cTnI+hsCRP阳性率的比较AMI组患者人数80人， cTnI阳性率88%， hsCRP阳性率81%， cTnI+hsCRP阳性率95%；对照组患者人数40人， cTnI阳性率5%， hsCRP阳性率18%， cTnI+hsCRP阳性率23%， AMI组中cTnI+hsCRP检测的阳性率明显高于cTnI和hsCRP单独检测的阳性率。
3 讨论
本研究表明当某一患者为疑似急性心肌梗死时， 应该同时进行cTnI和hsCRP两项指标的测定。①当测定结果为cTnI阳性， hsCRP阴性时， 此人有患AMI的趋势， 同时结合临床， 诊断疾病；②当检测结果为hsCRP阳性， cTnI阴性且患者有典型的AMI临床症状时， 此人有患AMI的趋势， 同时选用其他心肌损伤标志物辅助诊断疾病；③当检测结果为cTnI和hsCRP同时升高时， 应该引起临床足够重视， 此人患AMI的几率很大， 应及时对患者进行治疗（注意：以上情况时， hsCRP含量增高应排除创伤、感染、炎症， 外科手术和肿瘤浸润等除心肌损伤原因之外可引起其升高的因素）。综上所述， cTnI与hsCRP两个指标联合检测对AMI早期诊断有重要意义， 有助于提高AMI的检出率和诊断的准确性。
参考文献
[1] 崔杰峰，潘柏申.急性心肌梗死血清酶标志物沿革.上海医学检验杂志， 2000，15（1）：13-14.