梅毒血清学十篇

梅毒血清学篇1

1.1一般资料

随机选取云南省昭通市三类哨点监测人群的血清（孕产妇402份；医院无关联人群400份；吸毒者481份）合计1283份。

1.2方法

全部抽取一份抽血分为两份，一份用ELISA进行梅毒筛选，阳性者在用TPPA确证；一份用TRUST进行梅毒筛选，阳性者用用TPPA确证。其中：ELISA检测试剂来至丽珠公司；TRUST检测试剂来至北京万泰公司；TPPA检测试剂来至日本富士公司。

1.3统计学处理

采用SPSS11.0统计软件。

2、结果

2.1三类人群采用TRUST、ELISA两种方法做平行实验检测结果比较

在对孕产妇、医院无关联人群、吸毒者三类人群的血清采用TRUST、ELISA两种方法做平行实验检测后，明显发现，TRUST检测阳性数低于ELISA检测阳性数，特别是在对吸毒者的检查中。

2.2三类人群TRUST和ELISA两种方法检测的阳性样本再用TPPA复核结果比较

在对孕产妇、医院无关联人群、吸毒者三类人群的血清采TRUST和ELISA两种方法检测的阳性样本再用TPPA复核后，我们明显发现，TRUST阳性样本复核阳性数较少，准确性较低，假阴性数较多；ELISA阳性样本复核阳性准确性很高，符合率可达95%以上。

3、讨论

梅毒血清学篇2

【关键词】 梅毒抗体； TPPA； RPR； 实验方法学

梅毒螺旋体属于密螺旋体属、苍白螺旋体的苍白亚种，是引起人类梅毒的病原体。梅毒是一种系统性、常见的慢性性传播疾病之一，其传播途径为性传播、血液传播和母婴垂直传播。不良的、共用注射器等均可引起梅毒病原体的感染。感染后几乎可以累及全身各个器官，且病程长、危害大、临床表现复杂，呈多样性，即可以产生多种多样的症状和体征，又可以很多年没有症状而呈潜伏状态，容易被漏诊和误诊。同时育龄妇女还可通过胎盘传给胎儿引起先天性梅毒。据全国流行病学调查表明，我国从1991年～2001年的性病呈增长趋势，其中梅毒的增长速度最快，达到61.63%【sup】［1］【/sup】。2005年国家卫生部公布的法定报告传染病中，梅毒的发病人数，从2002年的第7位跃居第5位【sup】［2］【/sup】。近年来为控制梅毒的传播，多数医院对手术、输血及各种创伤性检查的患者都进行梅毒的实验室检查。因此选择敏感性高的实验室检测方法，对梅毒的早期诊断提供准确及时的依据有助于梅毒的准确诊断和早期治疗，尤其对控制其蔓延至关重要。为了解TPPA和RPR敏感度和特异度的差异，笔者对32份梅毒阳性标本和32份梅毒阴性标本分别进行检测，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集笔者所在地区2006年1月～2011年1月门诊及病房确诊为梅毒患者的32份阳性血清作为实验组，其中男性21例，女性11例，年龄19～73岁；经健康体检为健康人群32份梅毒阴性血清作为对照组，男性20例，女性12例，年龄为21～60岁。

1.2 试剂 TPPA法采用日本富士瑞必株式会社提供的梅毒螺旋体抗体诊断试剂（凝集法）；RPR法采用上海科华生物有限公司提供的梅毒快速反应素诊断试剂，两种试剂均在有效期内使用。

1.3 方法 （1）两种方法的操作均严格按试剂盒内的操作说明书进行，质控血清由广西区临检中心提供。（2）敏感度和特异度计算方法：敏感度（%）真阳性/（真阳性+假阴性）×100%，特异度真阴性/（真阴性+假阳性）×100%。

2 结果

实验组和对照组的32例血清用两种方法进行测定，其结果表明TPPA和RPR敏感度分别为100%和75%，特异度均为100%。TPPA法和RPR法的敏感度比较，差异有统计学意义（χ【sup】2【/sup】9.14，P0.0025），见表1。

表1 两种方法梅毒血清学检测结果比较 （n，%）

注:TPPA法与RPR法比较，χ【sup】2【/sup】9.14，【sup】*【/sup】P

3 讨论

梅毒的诊断需要依据病史、临床表现及实验室检查。目前梅毒的实验室检查方法有病原体直接检查法和血清学检查法。病原体直接检查法是用暗视野显微镜镜检测特征性的梅毒螺旋体，主要适用于人体感染梅毒的初期即一期梅毒和二期梅毒，但阴性不能完全排除，多数实验室特别是基层实验室不作此实验。血清学实验是目前国内外检测梅毒螺旋体的主要方法，人体一旦感染梅毒螺旋体后，将引起一系列血清免疫学反应，产生两种抗体。一类是磷脂反应素即非特异性抗体；另一种是针对梅毒螺旋体的特异性抗原而产生的抗体，即梅毒的特异性抗体。TPPA实验是特异性梅毒血清学实验；RPR实验是非特异性梅毒血清学实验；由于梅毒早期的临床表现不典型，血清学的实验室检测成了梅毒诊断的主要手段，TPPA法检测的是梅毒特异性抗体，以明胶颗粒为载体，吸附梅毒螺旋体-Niohols株菌体抗原，克服了血细胞自溶而造成漏检的弊端，有很高的敏感度和特异度，临床实验室常以TPPA法阳性作为确诊梅毒的依据【sup】［3］【/sup】。RPR是非特异性梅毒血清实验，它将VDRL抗原吸附于活性碳颗粒的表面，若待测血清中存在反应素时，即发生凝集，具有与TPPA法同样的特异度，且血清不需要灭活、操作简单、所需时间短、试剂成本价格低廉，故被临床大多基层实验室广泛使用。本研究以TPPA法为金标准对RPR法进行评价，结果显示，TPPA法和RPR法的敏感度比较，差异有统计学意义（χ【sup】2【/sup】9.14，P0.0025）。由于RPR法检测32份阳性标本的检出率只有75%，有25%是假阴性而漏检。也有相关报道称由于RPR法会产生假阴性，阳性结果可以直接报告，但阴性结果必须用TPPA法再确证【sup】［4,5］【/sup】。由于基层医院检测对象大多数为手术、输血、各种创伤性检查的患者及产妇，并非性病门诊的高危患者，梅毒的阴性结果是远远高于阳性结果。鉴于RPR法阴性结果的不确定性，须用TPPA法再确证，这既浪费试剂成本又增加工作人员的工作量。建议基层医院实验室使用TPPA法检测梅毒，即高效又准确，从而有效提高梅毒的检出率，对梅毒进行早诊断、早治疗，控制蔓延至关重要。

参 考 文 献

［1］ 龚向东,叶顺章,张君炎,等.1991～2001年我国性病流行病学分析.中华皮肤科杂志,2002,35（3）:178-182.

［2］ 程玉萍.梅毒研究近况.医学综述,2007,13（19）:1470-1472.

［3］ 尹跃平,施美琴,王洪春,等.快速梅毒螺旋体抗体检测实验的实验室初步评价.岭南皮肤性病科杂志,2009,16（1）:11-14.

［4］ 陈远贵,梅毒不.同血清学检测方法的比较.临床输血与检验,2009,11（2）:174-175.

梅毒血清学篇3

【摘要】 目的 了解梅毒在我区的感染情况并进行方法学探讨。方法 对2021例疑为梅毒感染的患者进行梅毒血清学检查。结果 梅毒阳性者占37.01%。其中男性占30.02%，女性占46.36%，先天梅毒10例。结论 选择敏感性、特异性均高的梅毒检测方法有助于梅毒的早期诊断与治疗，对控制其蔓延至关重要。

近年来，我国性病发病率有上升趋势，梅毒是其中的一种 ［1］ 。这在我国较早开放地区和经济较发达地区多有报道，对该病的早期诊断与治疗已成为当前首要问题。因此，笔者对2021例疑为梅毒的患者进行甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）和梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）。现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 所有患者均选自我院性病中心自2000年1月～2003年12月疑为梅毒患者。其中，或生殖器有溃疡或皮肤有梅毒疹、或配偶有梅毒共2021例，其中男性1156例，女性865例。年龄3天～60岁。

1.2 检验方法

1.2.1 试剂 TRUST试剂盒由上海荣盛公司提供;TPHA由英国OMEGA诊断试剂公司提供。

1.2.2 取材 抽取静脉血3ml，离心淀淀后，吸取上层血清。

1.2.3 操作步聚 TRUST过筛试验:分别滴1滴待检血清于反应板上的各圈内，将血清涂开至整个圈;向各圈中各加1滴抗原悬液;将卡片置水平摇床上，按100转/min，摇匀8min观察结果（同时各做一份阴阳对照）。

TPHA确证试验:（1）加释释剂:取25μl至孔1，100μl至孔2，25μl至孔3，25μl至孔4。（2）加标本:取25μl标本加入孔1，混匀。（3）从孔1中取25μl至孔2，混匀。从孔2中取25μl至孔3，混匀;从孔3中取25μl丢弃。从孔2中取25μl至孔4，混匀;从孔4中取25μl丢弃。（4）取未致敏红细胞悬液75μl加至孔3。（5）取致敏红细胞悬液75ul加至孔4。（6）轻拍板壁或摇床30s使其混匀。（7）盖上微孔盖，常温下静置1h观察效果。

1.2.4 结果判定

1.2.4.1 TRUST过筛试验 在漆圈中出现肉眼可见红色凝集块为阳性;若红色颗粒均匀分布未见凝集为阴性。

1.2.4.2 TPHA确证试验 （凝集）++++:红细胞形成膜状覆盖整个孔底，边缘形成皱褶;（凝集）+++:形成膜状覆盖部分孔底;（凝集）++:形成膜状，边缘成圆环;（凝集）+:成薄膜状，周围边有粗大圆环;（可凝）±:成纽扣状，中心稍薄;（不凝集）-:成光滑扣状。

2 结果

2021例疑为梅毒感染的患者中梅毒阳性者748例［15例TRUST（+）、TPHA（-）和50例TRUST（-）、TPHA（+），经过血清稀释或1个月后复查TRUST和TPHA均为阳性。］，阳性率为37.01%。其中男性阳性率为30.02%（347/1156），女性阳性率为46.36%（401/865），先天梅毒10例。试验结果及年龄分布结果分别见表1、表2。

表1 2021例初检血清的TRUST和TPHA血清检测结果试验结果 略

表2 748例梅毒阳性患者的年龄分布略

3 讨论

梅毒是由苍白螺旋体引起的一种性传播疾病，这种病原体通过粘膜或有破损的皮肤进入人体后，经淋巴系统及血液循环播散到全身，几乎可以侵犯全身各脏器和组织。梅毒主要通过性接触传染，也可通过胎盘传染下一代。根据传染途径的不同可将梅毒分为获得性梅毒和先天梅毒，每种又可根据其病期分为早期梅毒和晚期梅毒。

获得梅毒为通过性接触传播的梅毒，包括早期梅毒和晚期梅毒，早期梅毒为感染后2年以内发病，包括一期梅毒（硬下疳）、二期梅毒和早期潜伏梅毒。晚期梅毒为感染后2年以上的病变，有皮肤粘膜、骨、眼等梅毒、心血管梅毒、神经梅毒和晚期潜伏梅毒等。早期梅毒有传染性，晚期梅毒无传染性。

TRUST属性病研究实验室试验（VDRL）的改良试验，由于在抗原中加入了氯化胆碱和EDTA等试剂，使血清不必加热处理即能达到灭活和延长抗原保存期的目的，在抗原中加入了胶性碳和甲胺红便于肉眼观察结果，且设备要求简单、报告快速、有较高的敏感性，可作为梅毒疗效观察或随访有否复发或再感染的指标 ［2］ 。而TPHA是将提纯的梅毒螺旋体（Nichd珠）抗原包被（致敏）鸡红细胞，遇血中存在的梅毒螺旋体抗体时，可出现肉眼可见的红细胞凝集反应。TPHA能排除各种非特异性反应，因此其敏感性和特异性较高，常作为梅毒的确证试验。验证非螺旋体试验阴性结果，特别适于潜伏梅毒及非螺旋体试验阴性而已高度怀疑梅毒者（先天性梅毒小儿母亲、梅毒患者配偶及其它性伴者等） ［3］ 。梅毒治疗后，该类抗体终身阳性，不能做为治疗效果的观察。

本组有15例TRUST（+）、TPHA（-）和50例TRUST（-）、TPHA（+）患者经过血清稀释或1个月后复查TRUST 和TPHA均为阳性，这说明对于梅毒早期患者体内非特异性抗体和特异性抗体产生均需一定的时间或由于二期梅毒患者血清中的心磷脂含量过多而抑制TRUST阳性反应出现，即所谓的前滞现象 ［4］ 。因此梅毒血清检查应同时做TRUST过筛试验和TPHA确证试验，这将对梅毒早期诊断与治疗及控制其蔓延起到至关重要的作用。

另值得注意的是2021例疑为梅毒患者中发现10例先天梅毒。新生儿手掌足跖、口周、臀部出现红斑、丘疹、水疱，鼻腔分泌物多。患儿及母体TRUST、TPHA均为阳性。故提倡孕妇在产前、产中及分娩前均应查TRUST和TPHA以避免先天性梅毒患儿出现。

从表1和表2可看出梅毒阳性率占37.01%。37.70%位于20～30岁，30.88%位于31～40岁。20～40岁年龄段是性活跃最高的年龄段，也是性病发病率最高的时期;本组多数患者都承认有过性乱史，此年龄段既是主要的传染源也是主要的患者年龄段，所以对其进行性教育及性病的预防与治疗也就特别重要。

参考文献

1 乐嘉豫.性病实验室诊断的应用.中华皮肤科杂志，1996，29（3）:151.

2 董雅荣，李桂娥，马季，等.TRUST与USR，RPP在梅毒筛选试验中的对比观察.中华皮肤性病学杂志，1994，5（2）:114-115.

梅毒血清学篇4

【关键词】 梅毒；血清学检测方法；梅毒酶联免疫吸附试验 ；甲苯氨红不加热血清试验；梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验

DOI：10.14163/ki.11-5547/r.2015.18.047

梅毒是由苍白梅毒螺旋体（treponema palliolum， TP）感染的性传播疾病， 临床表现较为复杂、多样、病程长， 对人体危害严重， 而且具有较强的传染性。目前本院主要采用三种检测方法协助梅毒的诊断， 包括TP-ELISA、TRUST和TPPA。本研究中对这三种检测方法进行对比研究， 现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 纳入本研究中的62例患者均为在2012年1月～2014年12月在本院就诊， 且快速血清反应素环状卡片试验（RPR）筛查阳性、TPPA确诊阳性， 包括男38例， 女24例， 年龄22～68岁， 平均年龄（28.6±9.3）岁。其中早期潜伏梅毒12例， 一期梅毒21例， 二期梅毒20例， 三期梅毒9例。

1. 2 试剂与仪器 本研究中所使用的TP-ELISA试剂由上海实业科华生物工程有限公司提供， TRUST试剂盒由上海荣盛生物技术有限公司提供， TPPA试剂盒由日本富士瑞必欧株式合社提供， TP-ELISA使用仪器为Thermo MUL TISKANASCENT 全自动酶联免疫分析仪。雷度RT-6100型酶标仪及Egate2310洗板机各1台。

1. 3 检测方法 所有纳入本研究的患者于清晨空腹状态下抽取静脉血5 ml放置于促凝管中， 离心10 min后分离上层血清后放在1.5 ml的Eppendorff管中备用， 对全部患者的标本同时采用TRUST、TPPA和TP-ELISA 三种检测方法检测血清标本的梅毒螺旋体抗体， 按照试剂说明书的要求并严格遵守正规的操作程序进行检测， 正确判断检测的结果。

1. 4 观察指标 对三种检测方法各期梅毒的阳性检出率、灵敏度进行分析比较。

1. 5 统计学方法 采用SPSS18.0统计学软件对数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验；计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P

2 结果

采用TP-ELISA检测方法早期梅毒阳性率为83.3%（10/12）， 一期梅毒阳性率为100.0%（21/21）， 二期梅毒阳性率为100.0% （20/20）， 三期梅毒阳性率为100.0%（9/9）， 合计阳性率为96.8% （60/62）， 灵敏度为96.8%；采用TPPA检测方法早期梅毒阳性率为91.7%（11/12）， 一期梅毒阳性率为100.0%（21/21）， 二期梅毒阳性率为100.0%（20/20）， 三期梅毒阳性率为100.0%（9/9）， 合计阳性率为98.4%（61/62）， 灵敏度为98.4%；采用TRUST检测方法早期梅毒阳性率为58.3%（7/12）， 一期梅毒阳性率为71.4%（15/21）， 二期梅毒阳性率为95.0%（19/20）， 三期梅毒阳性率为77.8%（7/9）， 合计阳性率为77.4%（48/62）， 灵敏度为77.4%。TRUST检测方法对早期梅毒、一期梅毒及三期梅毒阳性检出率明显低于TP-ELISA检测方法及TPPA检测方法的检出率， 差异具有统计学意义（P0.05）。经统计学分析， 采用TP-ELISA检测方法及采用TPPA检测方法的灵敏度要明显高于TRUST检测方法， 差异具有统计学意义（P

3 讨论

血清学检测是发现和诊断梅毒最常用的方法， 快速、准确的实验室诊断是治疗和控制梅毒蔓延的有效措施， 科学、合理的检测方法可以提高检测的准确性， 避免漏诊的发生[1]。TRUST是采用牛心中提取的心磷脂、胆固醇、卵磷脂组成的性病研究室VDRL抗原重悬于含有特制的甲苯胺红溶液制成， 是非特异性梅毒筛选试验[2]， 由于该检测方法价格低廉、操作方便、检测迅速， 在梅毒筛查工作中广泛应用。但是近些年来许多学者研究证实， 该项检测敏感性不高， 在梅毒感染的不同时期阳性检出率存在较大的差异， 本研究中对于早期梅毒、一期梅毒及三期梅毒的阳性检出率分别为58.3%、71.4%及77.8%， 而二期梅毒的检出率却为95.0%， 与相关报道接近。因此作者认为TRUST并不适合应用于梅毒筛选试验， 可用于对患者疗效的监测。TPPA检测是将梅毒螺旋体株制成抗原， 从而检查患者血清中的梅毒特异性抗体[3]， 特异性和敏感性均较高， 在梅毒诊断中具有较高的临床价值。TP-ELISA检测法通过将基因重组表达的梅毒螺旋体抗原包被在微孔板上， 采用双抗原夹心法测定[4]， TP-ELISA与TPPA在强特异性与高敏感性方面相近， 操作简单， 可以作为梅毒血清学诊断的首选检测方法， 特别是在传染病医院进行大批量体检及大批量标本筛选时这两种检测方法是最适用的。本研究中采用TP-ELISA检测方法及采用TPPA检测方法的灵敏度要明显高于TRUST检测方法， 而且TPPA检测方法阳性检出率最高， 为98.4%， 这个结果与相关报道相符。因此目前国内推荐的确诊梅毒最重要、最可靠的方法是TPPA检测， 成为目前公认的梅毒确诊的首选检测方法[3]。但是不足之处是该项检测操作繁琐， 需要手工进行操作， 用肉眼判断结果， 有时会不可避免地出现主观偏差性， 要求检验医师具有较高的操作水平， 而且价格较贵， 对于大量样本的检测不适合采用此方法， 可适用于对TRUST、TP-ELISA等检测后阳性的标本进行验证[4]。

综上所述， 作者认为将三种检测方法联合应用， 可减少漏诊及误诊的发生。

参考文献

[1] 泽周艳. 三种梅毒血清学检测方法在梅毒诊断中的应用评价. 大家健康：学术版， 2012， 6（16）：36-37.

[2] 李娟， 李乐之. 探讨三种血清学检测方法在梅毒诊断中的应用. 医学综述， 2012， 18（10）：1542-1544.

[3] 游媛， 陈岚， 肖鄂. 血清学实验室检查在梅毒临床诊断中的应用研究. 吉林医学， 2012， 33（20）：4282-4284.

梅毒血清学篇5

【关键词】 梅毒;血清学;检测方法

梅毒是由梅毒螺旋体(TP)的病毒引起的一种慢性性传播疾病。近年来,梅毒在我国的发病率呈上升趋势,而血清学检测是诊断梅毒的重要依据之一。目前使用的方法较多,本文采用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)3种血清学检测方法,并将结果进行比较分析,以期为临床合理选择检测方法提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料 标本来源于2009年6～12月住院的6988例患者,年龄最高96岁,最低1 d,平均53岁;男168例,女200例,男女比例为1:1.9。

1.2 试剂 TRUST试剂盒由上海荣盛生物科技有限公司提供; ELISA试剂为英科新创(厦门)科技有限公司; TPPA为日本富士瑞必欧株式会社生产。所有试剂均经过卫生部生物制品鉴定所批批检合格,并在有效期内使用。

1.3 方法 采用ELISA法对住院患者进行梅毒筛查。阳性者再用TPPA确诊,并检测TRUST(血清作1∶1、1∶2、1∶4、1∶8稀释)。ELISA阳性,TRUST阴性标本再将血清作1∶16、1∶32、1∶64稀释后重检,以排除前带现象所致的假阴性。3种试验严格按试剂盒说明书操作,并在试剂盒有效期内使用。

1.4 仪器 Alisei全自动酶免疫分析仪(意大利SEAC公司生产),梅毒旋转震荡器,恒温水浴箱。

2 结果

ELISA法检出380例,阳性检出率为5.44%,经TPPA证实阳性368例,两种试验结果基本吻合,阳性符合率100%。380例阳性标本进行TRUST法检出阳性270例,阳性符合率为71.05%。

3 讨论

3.1 近年来,我国梅毒的患病率快速上升。因此,对梅毒的早期诊断及正确地评价,为临床提供准确、及时的依据显得尤为重要[1]。人体感染梅毒螺旋体后约4～6周血清中即可产生抗类脂抗原的非特异性抗体和抗梅毒螺旋体抗原的特异性抗体。临床梅毒检测常用的血清学试验分为非梅毒螺旋体抗原试验(如VDRL, TRUST,RPR)和梅毒螺旋体抗原试验(如TPPA, ELISA等)。

3.2 ELISA方法是通过基因工程途径生产重组TP蛋白酶多肽作为抗原,将TP重组抗原包被在微孔测定板上,测定患者血清中的特异性TP抗体作出诊断,其特异性和灵敏度高达100%和99.5%。TPPA是将纯化的致病性梅毒的精致菌株成分包被在人工载体明胶粒子上检测血清中相应的抗体;本组TPPA对一期梅毒的阳性率为93.8%;二期梅毒的阳性率为100%;潜伏梅毒的阳性率为100%。TRUST是用类脂质为抗原以检测血清中的抗类脂质抗体的方法,检测的是梅毒非特异性抗体。TRUST在一、二期梅毒的检出率可高达96%～100%,而在一期梅毒潜伏期及晚期梅毒中的检出率仅为60%～85%[2]。本组TRUST对一期梅毒的阳性率仅为80.0%,二期梅毒达到阳性率为98.0%;潜伏梅毒的阳性率为8.3%,如果仅以TRUST作为梅毒血清学检查,将会有相当一部分梅毒患者被漏诊和其他一些疾病患者被误诊,将延误其临床诊断和治疗。

综上所述,TPPA是目前公认的梅毒血清学确证试验,特异性好、灵敏度高,其缺点是成本较高; ELISA试验具有灵敏度高、特异性好,操作简便,结果易判断,全自动或手工操作都可以保存读板后的原始数据等优点,是大批量标本筛查的理想方法;而TRUST对于一期梅毒的检测灵敏度较高,可指导临床治疗。笔者建议3种试验方法结合应用能更有效地提高梅毒检测效果,对及早确认梅毒患者和进行治疗及防止梅毒蔓延十分重要。

参 考 文 献

梅毒血清学篇6

关键词：梅毒血清学；血液；TP-ELISA；TRUST；TPPA

梅毒属于性传播疾病，其主要诱因为梅毒螺旋体感染。梅毒主要传播方式为血液传播与性传播，且病情具有时显时隐特征，可对全身各个器官或者组织进行侵犯，亦可在胎盘传播下导致胎传梅毒[1]。对梅毒蔓延予以有效控制的关键在于快速且精准的实验室检查，因此在对梅毒螺旋体予以检测时一定要选用最科学的方法，作为采供血机构，既要保护献血者，又要保证献血安全。当前发现并诊断梅毒最主要的方法为血清学检测，且方法较多，各有优劣。本文为探讨TPPA、TP-ELISA以及TRUST检测梅毒螺旋体的效果，选取我站无偿献血者标本1500份，回顾性分析其资料，将详细情况报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料 选取我站2014年4月～8月无偿献血者血液标本1500份，所有献血者在献血前均接受体格检查，按照《献血者健康要求》判定为合格。

1.2检测方法 采用TPPA、TP-ELISA以及TRUST这三种方法对所有血样予以平衡检测，将TPPA法结果作为主要确诊标准，以探讨TRUST与TP-ELISA的阳性率。双孔复查TPPA法阳性样本，若结果仍为阳性则代表梅毒阳性。

1.2.1TRUST主要用于性病研究实验室开展，将抗原在有特制甲苯胺红溶液中重悬后制作，试验于特制白色卡片上，以对血浆或者血清进行检验。先使用生理盐水对血清进行倍比稀释，再开展定量试验，用专用针头与滴管分别对TRUST试剂予以滴加，加入血清后摇动，速度为100转/min，持续8min后对结果予以观察，试验条件主要为23～29℃。

1.2.2 TPPA试验载体主要为生物红细胞，对TP粉碎物予以吸附后对血清中抗体进行抗原检测，且在人工载体明胶颗粒上对存在于致病性梅毒（纯化）中的精致菌株成分进行包被，降低生物学假阳性率，存在非特异性凝集现象但是出现率极低。

1.2.3 TP-ELISA主要制成试剂包括混合酶标记基因工程抗原、包被于梅毒螺旋体基因工程混合抗原的微孔反应板以及其他试剂，主要使用双抗原夹心法检测。在实验中均需设置阴阳性对照组孔（各3个）与空白对照组孔（1个），添加样本后孵育于37℃条件下，60min后洗板加酶，30min后再将底物添加进去以显色，主要使用的酶标仪为SUNRISE 450/630nm，空白置零后对各个孔吸光度值予以读取。

1.3统计学方法 应用软件SPSS21.0对所有数据行统计学处理，若P

2结果

TPPA、TP-ELISA以及TRUST梅毒血清学试验结果对比：1500份样本采用上述3种方式检测后有1例同时阳性，TPPA、TP-ELISA两种检测法6例同时阳性，TPPA以及TRUST1例同时阳性，TP-ELISA单种检测法阳性例数为3例，见表1。

3讨论

梅毒螺旋体主要于人体脊液或者血液中存在，不会生长繁殖于人工培养基上[2]。梅毒有先天性与后天性之分，先天性主要是胎儿被母体传播或者被血液感染，后天性感染方式主要为性传播。机体遭受梅毒病毒感染后3～6w检查患者血清会发现有两种抗体存在，其一为非螺旋体抗原抗体，其二为螺旋体抗原抗体。梅毒特异性抗体具有很早出现与很迟消失的特点，就算患者接受了正规抗梅毒疗法，再行血清检测时还是可将特异性抗体检测出来，有些甚至具有终身性。在对梅毒螺旋抗体感染进行诊断时主要依据为抗-TP，临床检测梅毒病毒主要采用血清学试验，包括TPPA、TP-ELISA、TRUST以及化学发光免疫分析法等。

据临床研究证实[3，4]，在梅毒螺旋体中其表面抗原分类较多，分类依据主要为相对分子质量，包括TP47、TmpA等。TP-ELISA法主要是对人工合成基因重组抗原进行利用再在反应板上包被，对特异性抗体IgM与IgG予以检测。在本研究中TRUST与TP-ELISA灵敏度为27.41%、100.0%，对比差异明显（P

TRUST法主要对梅毒感染机体予以检测后，组织被螺旋体破坏后会将心磷脂这一抗原物质释放出来[5]，其会刺激机体出现反应素，其性质为抗体，且为非特异性，受到自身免疫疾病或传染病影响会产生假阳性。机体感染梅毒后特异性抗体比非特异性抗体早出现，而接受治疗后又会转阴，故而假阴性现象也存在。TRUST法检测出1例阳性，不存在假阳性现象，原因在于献血者已接受体格检查，排除红斑狼疮且类风湿患者，但是漏检率高。

TPPA法抗原主要为纯化梅毒螺旋体，再对特异性抗体进行检测，有较高的特异性与敏感度。但是由于该检测法为手工操作，吸液次数较多，若在大批量标本中使用会增加出错几率，因此该法在筛查无偿献血大批量血液样本中不具有适用性。

综上所述，TRUST法有较高漏检率，且灵敏度低，不适合筛查献血者血液；TPPA法则在确证梅毒阳性标本中比较适用；TP-ELISA法有优良特异性与高灵敏度，在批量较大样本中使用具有自动化检测与集中化优点，可用于筛查献血者血液。

参考文献：

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梅毒血清学篇7

【关键词】 梅毒； 细胞免疫； 血清固定； 影响因素

【Abstract】 Objective：To explore the related factors of sero-resistence after antisyphilitic treatment for patients with syphilis.Method：77 patients with syphilis in our hospital from January 2013 to December 2014 were selected as the observation group and 77 normal persons who received physical examination at the same time were selected as the control group.The incidence of sero-resistence was determined and the related influencing factors of sero-resistence were made clear through comparison.Result：Among patients with syphilis in phase I，the formation rate of sero-resistence of more than or equal to 12 months was obviously higher than that of less than or equal to 6 months and 6 to 12 months and the difference was statistically significant（P

【Key words】 Syphilis； Cellular immunity； Sero-resistence； Influencing factor

梅毒是苍白螺旋体所引起的系统性、慢性性传播疾病，严重危害人类身体健康，已经成为公共健康问题之一[1]。WHO调查资料统计结果显示，全球每年新发梅毒病例在1200万左右，其中超过90%的患者在发展中国家[2]。我国疾病控制中心统计结果显示，我国梅毒发病率从2010年的9.1%增长到2014年的23.2%，呈直线上升趋势[3]。梅毒患者患病早期侵犯皮肤与生殖器，晚期几乎侵犯全身所有组织、器官及系统，产生多种多样临床症状，并且可通过胎盘传播引发早产、流产、死产、胎传梅毒等，梅毒治疗战略意义重大。血清反应素抗体转阴是评价梅毒治疗效果的指标，但目前发现，梅毒患者血清固定发生率也在呈现增高趋势。多数患者经正规驱梅方案治疗后，梅毒血清反应素抗体一定时间内会转阴，但部分患者梅毒血清反应素抗体滴度降低至一定水平后无法再降低，呈血清抵抗或血清固定状态[4]。血清反应素抗体持续阳性，患者临床症状反复、经久不愈，对患者、家庭及社会均造成较大危害。梅毒血清固定确切原因尚不明确，临床多认为与治疗不规则、神经系统受累、机体细胞免疫功能受抑制有关。本文将本院收治的梅毒患者与健康人群进行对比，探析梅毒患者驱梅治疗后血清固定相关影响因素，现报告如下。

综上所述，T细胞、NK细胞水平对梅毒患者血清固定有重要影响，需尽早筛查及治疗，有助于血清治愈。

参考文献

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梅毒血清学篇8

[关键词] 血清固定；梅毒；头孢曲松钠他唑巴坦钠

[中图分类号] R514 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）12（a）-0096-02

梅毒是我国目前主要的性传播疾病之一，是一种慢性传染性疾病，其病原体是梅毒螺旋体（又叫苍白密螺旋体），可以侵犯人体的多系统、多器官，近年来在我国流行蔓延较快[1]。部分患者接受正规的驱梅治疗后，早期梅毒6个月、晚期梅毒12个月内梅毒血清反应素抗体仍不转阴，称为血清固定梅毒[2]。血清固定可能与梅毒类型、治疗用药的选择、开始治疗时间、机体免疫功能低下及存在神经系统感染有关[3]。临床治疗最常使用普鲁卡因青霉素，但该药无法通过血-脑脊液屏障，用于治疗血清固定梅毒效果不佳。本文以本院收治的血清固定梅毒患者为研究对象，采用头孢曲松钠他唑巴坦钠治疗，现将治疗效果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2010年6月～2012年12月本院收治血清固定梅毒患者44例为研究对象，男性16例，女性28例，年龄21～35岁，平均（29.6±3.7）岁，随机分为观察组和对照组，每组各22例。所有患者均接受过正规的驱梅治疗，即苄星青霉素2 400 000 U两侧肌内注射，1次/周，连续3次，临床表现基本消失，按规定时间进行随访，6个月后，患者梅毒血清反应素抗体仍不转阴。所有患者均未感染艾滋病、免疫功能正常、无肿瘤或糖尿病病史、未发现再次感染。两组患者的性别、年龄、病程、早期梅毒快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）滴度下降情况比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

观察组患者给予头孢曲松钠他唑巴坦钠治疗，1.0 g/次，1次/d，静脉滴注，疗程为15 d；对照组患者给予苄星青霉素2 400 000 U肌内注射，1次/周，疗程为21 d。所有患者完成治疗后，分别于3、6个月复诊，测定RPR滴度。

1.3 疗效评定标准

痊愈：治疗后未出现临床复发，血清RPR转为阴性；有效：治疗后RPR下降≥2个滴度；无效：治疗后RPR下降

1.4 统计学方法

采用SPSS 17.0统计软件对数据进行分析和处理，计数资料采用χ2检验，以P

2 结果

2.1 两组患者治疗3个月效果的比较

治疗3个月后，观察组患者总有效率为68.2%，明显高于对照组的40.9%，差异有统计学意义（P

表1 两组患者治疗3个月效果的比较[n（%）]

与对照组比较，*P

2.2 两组患者治疗6个月效果的比较

治疗6个月后，观察组患者总有效率为81.8%，明显高于对照组的54.5%，差异有统计学意义（P

表2 两组患者治疗6个月效果的比较[n（%）]

与对照组比较，*P

3 讨论

梅毒是由梅毒螺旋体感染导致的一种慢性系统性传播疾病，几乎可以侵犯全身各个器官，对多个脏器造成不同程度的影响[4]。影响梅毒发生血清固定的主要因素：①梅毒螺旋体膜多肽抗原、脂蛋白或基因发生变异；②临床常用的苄星青霉素无法有效通过血-脑脊液屏障，不能有效杀灭脑脊液中的梅毒螺旋体；③梅毒存在隐匿感染的可能，部分患者临床症状不明显，常规治疗后体内往往残存病原体而发生慢性感染。相关研究显示，梅毒发生血清固定的主要原因是梅毒患者细胞免疫功能明显低下或免疫抑制，尤其是细胞免疫受到抑制，不仅增加了梅毒螺旋体感染和复发的机会，而且在很大程度上影响病情的进展和转归[5]。

Mahony于1943年首次提出青霉素可以有效治疗梅毒，目前治疗梅毒的首选药物依然是青霉素[6]。头孢曲松钠他唑巴坦钠为复方制剂，属头孢三代抗生素，头孢曲松钠和他唑巴坦钠的标量比为3∶1，能有效透过血-脑脊液屏障。国内有学者使用头孢曲松钠他唑巴坦钠治疗早期血清固定梅毒，发现效果好于苄星青霉素，原因可能是两种药物在血-脑脊液屏障通透性方面的差异。RPR转阴是评价梅毒患者治疗效果非常重要的指标[1]。有研究显示，血清固定梅毒患者约35%出现复发，对于出现血清固定者应予以复治[7]。

本研究显示观察组患者治疗3、6个月的效果明显优于对照组，说明头孢曲松钠他唑巴坦钠治疗血清固定梅毒有效率明显高于苄星青霉素。造成两种药物有效率差异的原因可能是头孢曲松钠他唑巴坦钠可通过血-脑脊液屏障[8]，能有效清除脑脊液中的梅毒螺旋体，使病原体大部分被消灭，不至于过多残留体内而引起反复感染。研究还发现头孢曲松钠他唑巴坦钠治疗总有效率未能达到100%，结合相关文献推测，其可能与病原体的耐药性或患者自身免疫功能不平衡有关[9]。长期以来抗生素药物的易购买性加剧了其滥用[10]，由于患者早期存在侥幸和羞耻心理，导致梅毒患者自行用药的不规范治疗，延误治疗时机，使社会总体梅毒治愈率很不理想。为提高梅毒患者血清治愈率，本文研究了应用头孢曲松钠他唑巴坦钠用于血清固定梅毒治疗的临床效果，发现头孢曲松钠他唑巴坦钠较单纯使用苄星青霉素治疗梅毒效果更佳。青霉素一直以来价格低廉、使用方便，被临床较多应用于治疗梅毒，但其综合治愈率仍无法与头孢曲松钠他唑巴坦钠相比。

综上所述，头孢曲松钠他唑巴坦钠治疗血清固定梅毒较苄星青霉素可明显提高治疗效果，有效降低RPR滴度，值得临床推广应用。

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梅毒血清学篇9

关键词：血清学分析；梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验；快速血浆反应素环状卡片试验；梅毒

梅毒（syphilis）是一种慢性、系统性性传播疾病，是由苍白螺旋体（treponemapallidum，TP）引起的[1]。性传播是一种传播方式，除此之外，血液传播也是梅毒传播的重要途径之一，因此特别地对于无偿献血等场合下，对梅毒的检测与诊断显得非常重要。本研究对RPR以及TPPA检测在梅毒诊断领域中的应用做了相应的试验，并对试验结果进行了分析与总结，以下是资料的详细情况。

1 资料与方法

1.1一般资料 抽取我科确诊的梅毒患者120例，其中潜伏期梅毒患者40例，一期梅毒患者40例，二期梅毒患者40例，非梅毒患者40例，此外40例健康人士作为结果对照。以上患者或非患者均在空腹情况下静脉采血然后分离血清。此外对40例已治愈6、9个月的梅毒患者进行跟踪检测。

1.2选取试剂 快速血浆反应素环状卡片试验使用上海科华公司的产品，梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验使用珠海丽珠试剂股份有限公司的产品。试剂均在有效期范围内。

1.3检测方法 RPR的使用方法：根据使用说明书操作，注意判断结果时保证光线充足。

TPPA的使用方法：根据说明书并参考王育瑛[2]所述方法进行操作。

1.4统计学方法 对结果利用统计学专用软件SPSS13.0进行录入与分析，P

2 结果

2.1两种方法的检测结果 对于潜伏期梅毒患者，利用RPR检测40例中有33例阳性，TPPA检测40例中40例阳性；对于一期梅毒患者，利用RPR检测40例中有31例阳性，TPPA检测40例中40例阳性；对于二期梅毒患者，利用RPR检测40例中有40例阳性，TPPA检测40例中40例阳性；对于非梅毒患者，利用RPR检测40例中有1例阳性（后确诊此患者患有其它疾病，此例属假阳性），TPPA检测40例中40例无阳性；对于健康人士，RPR、TPPA两种方法均显示阴性（见表1）。从结果可以看出除了对于二期梅毒患者，RPR的检测准确度都不如TPPA，因此可以将TPPA作为梅毒的确认手段。梅毒患者与对照组结果差异有统计学意义（P

3 讨论

梅毒的传播路径有性传播、胎传播[3]和血液传播。很多错误的行为会将早期梅毒患者的梅毒传播给同伴。人体感染梅毒之后，梅毒螺旋体以很快的传播速度侵蚀全身，螺旋体几乎可以侵犯全身所有的器官和组织[4]。由于梅毒患者的病程比较长，而且症状比较复杂，因此某些医生在诊治的过程中会出现误诊的现象。

针对梅毒的血清试验包括特异性试验和非特异性试验。RPR是非特异性梅毒血清试验，检测患者血清中的反应素（抗脂质抗体），如果检测血清中存在反应素即产生凝集反应，因此检测时间短，步骤简便且检测所需成本较低，使用率比较高。但是RPR存在一个缺点，就是准确度不够高，这是由它的非特异性决定的，在梅毒一期、梅毒潜伏期都有可能性出现检测假阴性。因此RPR检测方法的局限性较大，特别的应该提出它不适合进行筛检实验，比如不允许假阴性存在的无偿献血检测中，如果使用RPR法检测血液，可能将梅毒患者的血液漏检，如果不正常血液流通到医院中使用，危害将不可想象，因此有必要对RPR法诊断的结果进行再次确认，这就可以用到下面的TPPA检测方法。

TPPA法是梅毒特异性抗体的检测，试验载体是明胶颗粒，TPPA方法的优点是避免了血细胞自溶造成的漏检[5]，因此TPPA法相比RPR法的准确度要高出不少，因此可以利用TPPA作为确诊梅毒的一种工具。TPPA也有它的局限性，那就是它不能判断梅毒的治疗效果。而RPR没有这个问题，因此对于治疗效果的判别可以通过RPR检测确认。TPPA的另一个缺点就是试剂的成本比较贵，操作步骤上也比RPR繁琐和复杂，因此在面对规模和数量很大的试验时这个检测方法显然在成本和时间上都不经济。

总的说来，并没有完美的适合各种场合的试验方法，RPR检测法成本低操作简便，但是它的准确率并不是非常高，因此可以利用TPPA检测进行确认检测，但是TPPA成本高且操作周期长步骤麻烦，因此不适用于大规模的检测，且TPPA不能对梅毒的疗效进行判别，这个时候可以利用RPR的优点来进行补充。当然，将RPR和TPPA两种方法结合起来进行诊断准确率和可信度更高，因此不同的场合应该选取不同的方法。

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梅毒血清学篇10

【摘要】目的 探讨梅毒抗体的有效检验方法。方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和梅毒螺旋体特异性抗体明胶凝集试验(TPPA)对575份献血者血清标本进行检测比较。结果 对于75份梅毒阳性血清,TP-ELISA检出阳性74份、TPPA检出阳性73份,两法的阳性检出率分别为98.7%和97.3%。对于500份非梅毒患者血清,TP-ELISA检出1份阳性,TPPA均为阴性,后经临床及实验确认,该例为假阳性,TP-ELISA的假阳性率为0.2%。结论 ELISA和TPPA结果无显著性差异(P>O.05)。ELISA试剂成本低,操作方便,是大批量样本筛查的理想方法,应作为目前临床、血站诊断和筛查血清梅毒特异性抗体的首选。

【关键词】ELISA;TPPA;梅毒抗体

为了探讨梅毒抗体的有效检验方法,笔者采用ELISA和TPPA对575份献血者血清标本进行了检测比较,现报道如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源575份血清标本来自献血者,男318例、女257例,其中包括75份确诊的梅毒阳性血清。

1.2 试剂ELISA检测试剂为上海科华公司产品,TPPA试剂由日本富士瑞必欧株式会社提供,所用试剂均在有效期内。

1.3 方法所有标本均采用 ELISA和TPPA进行血清梅毒螺旋体抗体平行检测 ,具体操作和结果判定均按试剂盒说明书进行。

1.4 统计学处理使用SPSS 12.0软件进行X2检验。

2 结 果

对于75份梅毒阳性血清,TP-ELISA检出阳性74份、TPPA检出阳性73份,两法的阳性检出率分别为98.7%和97.3%。对于500份非梅毒患者血清,TP-ELISA检出1份阳性,TPPA均为阴性,后经临床及实验确认,该例为假阳性,TP-ELISA的假阳性率为0.2%。

3 讨 论

梅毒螺旋体感染后机体可产生特异性抗螺旋体抗体和非特异性抗类脂质抗体。梅毒螺旋体特异性抗体明胶凝集试验 (TPPA)检测血清中梅毒特异性抗体,灵敏度高,特异性好。梅毒螺旋体感染后,此抗体在体内持续存在,可终身保留,检测结果不随病情发展和治疗而变化,故TPPA作为梅毒的确诊试验,对各期梅毒的检测结果都有较好的稳定性,不易出现假阳性反应[1],本组 TPPA无一例出现假阳性。ELISA法是利用基因重组工程合成抗原,检测血清中梅毒特异性抗体,在梅毒各期均有较高敏感性,TP-ELISA是利用重组梅毒螺旋体的特异性抗原包被酶标板孔,并采用双抗原夹心法检测血清标本中的梅毒特异性IgM 和IgG 抗体,对早期和晚期梅毒都有较高的检出率,但ELISA法也存在着假阳性问题[2],本文所用ELISA法的假阳性率为0.2%。通过本组实验,笔者发现ELISA和 TPPA都具有较高的敏感性和特异性,两法的检测结果无显著性差异(P>O.05)。因TPPA用肉眼判断结果,易受主观因素影响,并且试剂昂贵,操作复杂,检测时需将样本作系列稀释,不利于大批量样本筛查,也不便用于疗效判断。ELISA法可用酶标仪判断结果,结果较为客观,原始数据易于保存,且与TPPA的相关性好。

总之,笔者认为ELISA试剂成本低,操作方便,是大批量样本筛查的理想方法,应作为目前临床、血站诊断和筛查血清梅毒特异性抗体的首选。

【参考文献】