异型淋巴细胞范文

导语：如何才能写好一篇异型淋巴细胞，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公文云整理的十篇范文，供你借鉴。

篇1

关键词：SysmexXS-500i血液分析仪；人工镜检；检测；异型淋巴细胞

传染性单核细胞增多症及病毒感染是由于外周血中出现异型淋巴细胞，临床上常采用血涂片染色人工分类计数的方法计数其比例[1]。随着检验技术的发展，SysmexXS-500i血液分析仪因其诊断准确率高，具有异型淋巴细胞提示功能，在临床上被广泛的运用。为此，本文特将两种检测技术的结果进行对比分析，现报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料 收集我院2011年4月～2014年5月进行异性淋巴细胞计数的标本150例，其中，以单核细胞型为主的标本有50例，以幼稚型细胞为主的标本有60例，以浆细胞型为主的标本有40例。

1.2方法 仪器及试剂：SysmexXS-500i血液分析仪；显微镜；乙二胺四乙酸二甲；血样采集采用硅化管抗凝。

检验方法：①人工镜检检测：将患者标本制成厚薄均一、体尾分明的涂片，采用瑞士-吉姆萨染液染色后，在显微镜观察下，选择体、尾处的血膜，计数100个白细胞。②SysmexXS-500i全自动血液分析仪检测：人工分类计数异型淋巴细胞计数大于20%的标本20份，人工异型淋巴细胞计数大于10%，小于20%的标本30份，人工异型淋巴细胞计数大于0%，小于10%的标本40份，人工异型淋巴细胞计数为0%的标本为60份。将人工分类的异型淋巴细胞送至SysmexXS-500i全自动血液分析仪检测，记录各标本的异型淋巴细胞提示信息。

1.3观察指标 观察SysmexXS-500i全自动血液分析仪与人工镜检的的检测符合率。

1.4统计学处理 SysmexXS-500i全自动血液分析仪与人工镜检的各项观察指标情况采用SPSS18.0软件进行统计处理。检测符合率采用？字2检验，以P

2结果

人工镜检结果：异型淋巴细胞计数大于20%的标本10份，符合率为50.00%，异型淋巴细胞计数大于10%，小于20%的标本15份，符合率为50.00%，异型淋巴细胞计数大于0%，小于10%的标本28份，符合率为70.00%，异型淋巴细胞计数为0%的标本为40份，符合率为66.67%。

SysmexXS-500i全自动血液分析仪检测结果：异型淋巴细胞计数大于20%的标本18份，符合率为90.00%，异型淋巴细胞计数大于10%，小于20%的标本29份，符合率为96.67%，异型淋巴细胞计数大于0%，小于10%的标本39份，符合率为97.50%，异型淋巴细胞计数为0%的标本有57份，符合率为95.00%。

由此可知，SysmexXS-500i全自动血液分析仪检测符合率明显优于人工镜检的总符合率（P

3讨论

异型淋巴细胞主要是由于病毒与B淋巴细胞受体结合形成，在不断的复制及增殖过程中，被T淋巴细胞识别，从而激发T细胞的增殖及转化，出现在循环血液中，形成细胞毒性效应，主要以T细胞及B细胞为主[2]。

近年来研究发现，异型淋巴细胞与EB病毒感染有关，EB病毒的囊膜主要由感染的细胞核膜组成，核膜上有识别淋巴细胞上的EB病毒受体，EB病毒导致的传染性细胞增多症中的异型淋巴细胞显著增多。根据异型淋巴细胞与病毒的关系，临床检验中应加强异型淋巴细胞的检查。在检测过程中，应采用最新的检查技术，提高异型淋巴细胞的检测率，确保传染性单核细胞增多症的及时确诊，及时治疗[3]。SysmexXS-500i自动化血液分析仪主要采用半导体激光照射分析技术，结合核酸染色技术，当半导体激光照射被检测细胞时，细胞内容物被侧向散射光反映出来，细胞体积被前向散射光反映出来，其中，侧向散射光被主要反映细胞内的DNA与RNA的含量，通过细胞产生的信号对异型淋巴细胞计数[4]。正常淋巴细胞的特点为体积小、颗粒少，在前向散射光及侧向散射光的二维三点图上表现为低前向散射光及侧向散射光。由于EB病毒的刺激，异型淋巴细胞表现为体积大、颗粒少等特点，在SysmexXS-500i自动化血液分析仪检测中，表现为高前向散射光、低侧向散射光，在正常的淋巴细胞上形成一个淋巴细胞群，并表现为向上拖尾的形状[5]。测定异型淋巴细胞比传染性单核细胞多了一个指标，但是由于异型淋巴细胞的形态具有多样性，大淋巴细胞的诊断难度较大，采用人工镜检技术会存在一定的误差。而SysmexXS-500i全自动化血液分析仪，可通过利用前向散射光及侧向散射光这一特性，为区分淋巴细胞提供了指标[6]。

综上情况可知，SysmexXS-500i全自动化血液分析仪检测符合率明显优于人工镜检的总符合率（P

总而言之，SysmexXS-500i全自动化血液分析仪检测异型淋巴细胞总符合率明显优于人工镜检，可将检测结果及时反馈至临床，为临床治疗提供依据。

参考文献：

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篇2

[关键词] 弥漫性大B细胞淋巴瘤；MYC；Bcl-2；临床特征

[中图分类号] R733.4 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2016）06（b）-0025-04

弥漫性大B细胞淋巴瘤（diffuse large B cell lymphoma，DLBCL）是弥漫性增生的大B细胞恶性肿瘤，瘤细胞核大于或等于正常巨噬细胞核，或超过2倍正常淋巴细胞，包括纵隔（胸腺）大B细胞淋巴瘤、血管内大B细胞淋巴瘤等。非霍奇金淋巴瘤（non-hodgkin lymphoma，NHL）中最为常见的一种类型，其在组织学、免疫表型、病因学、遗传学、临床病理特征和预后等方面都表现出高度的异质性[1]，不同亚类的弥漫性大B细胞淋巴瘤临床过程和预后不尽相同弥漫大B细胞淋巴瘤细胞不同的免疫表型可能与肿瘤的生物学行为和预后有密切关系。“双打击”B细胞淋巴瘤（double-hit lymphoma，DHL）是一种近年来被确认的B细胞淋巴瘤分子分型，主要涉及MYC和Bcl-2基因的重排[2]。近年来，MYC和Bcl-2蛋白的异常表达与弥漫性大B细胞淋巴瘤发生、发展的关系逐渐受到关注，本研究也通过检测MYC和Bcl-2蛋白的表达水平来了解弥漫大B细胞淋巴瘤患者的临床特征，从而判断患者的疗效及预后，可能具有重大的临床意义。同时本研究还通过分析MYC和Bcl-2蛋白阳性表达患者的临床特征差异，以期评估不同MYC或Bcl-2蛋白表达水平患者的疗效及预后。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析2012年1月～2016年1月第三军医大学附属大坪医院收治的61例弥漫性大B细胞淋巴瘤患者的临床资料，所有患者均为首发病例，且临床资料完整，均符合年世界卫生组织制订弥漫性大B细胞淋巴的诊断标准[1]。其中男33例，女28例；年龄45～70岁，平均（62.97±12.42）岁；原发部位：腹股沟淋巴结23例，胃肠道18例，颈部14例，其他6例；细胞来源：生发中心内亚型24例，生发中心外亚型37例；IPI评分0～1分13例，2分17例，3分19例，4～5分12例；临床分期：Ⅰ～Ⅱ期27例，Ⅲ～Ⅳ期34例；缓解40例，未缓解21例；1年总生存51例，3年总生存41例。所有患者均经知情同意并签署知情同意书，本研究经我院医学伦理会审核批准。

1.2 检测方法

将患者淋巴结组织蜡块标本经10%中性甲醛溶液固定，常规脱水，石蜡包埋，4 μm厚切片，常规脱蜡水化。0.3%过氧化氢（H2O2）阻断内源性过氧化物酶，10%小牛血清封闭切片，滴加一抗，4℃过夜。PBS洗后滴加广谱生物素化二抗（1∶200，北京中杉金桥生物科技有限公司），SP复合物（1∶200），DBA显色（DBA试剂盒购于北京中杉金桥生物科技有限公司），苏木精复染细胞核，脱水，透明，封片。分别设相应阳性、阴性、空白对照。所有病理标本切片用PBS液代替一抗作阴性对照。MYC蛋白主要表达在细胞核和细胞浆，Bcl-2蛋白表达在细胞质，主要表现为棕黄色或棕褐色细小颗粒。400倍高倍镜下对随机选取10个视野，每个视野计数100个细胞，计数阳性率，阳性率>10%为阳性表达。

1.3 观察指标及评价标准

观察患者MYC、Bcl-2的阳性表达率；观察患者的性别、年龄、原发部位、细胞来源、结外受侵情况、淋巴瘤国际预后指数（IPI）评分、临床分期、治疗效果及生存情况分布等临床特征；观察比较Bcl-2/MYC阳性及阴性表达患者的临床特征差异；观察MYC或Bcl-2阳性表达的临床特征差异。国际预后指数（IPI）评价标准：年龄≤60岁=0分，>60岁=1分；行为状态0、1为0分，2、3、4为1分；Ann Arbor分期Ⅰ或Ⅱ期为0分，Ⅲ、Ⅳ期为1分；LDH正常为0分，高于正常为1分；结外病变受侵部位数

1.4 统计学方法

采用SPSS 17.0统计学软件进行数据分析，计量资料数据用均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用t检验；计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 Bcl-2/MYC阳性与阴性表达患者的临床特征差异

Bcl-2/MYC阳性表达患者性别、年龄、原发部位及细胞来源与Bcl-2/MYC阴性表达患者比较，差异均无统计学意义（P > 0.05）；而Bcl-2/MYC阳性表达患者结外受侵情况、IPI评分、临床分期、治疗效果及生存情况比较，差异均有统计学意义（P < 0.05）。见表1。

2.2 Bcl-2阳性与MYC阳性表达患者的临床特征差异

Bcl-2阳性表达患者性别、年龄、原发部位、细胞来源、结外受侵情况、IPI评分、临床分期、治疗效果及生存情况分布相似，差异均无统计学意义（P > 0.05）。见表2。

3 讨论

弥漫大B细胞淋巴瘤作为常见的侵袭性淋巴瘤，是一种起源于淋巴组织的增殖性疾病，其临床疗效及预后的差异性较大。由于其恶性程度较高，发病原因及发病机制不甚明了，且该病常常呈进展性，大多数患者确诊时已为晚期。未予治疗的患者，1年生存率极低，若给予联合利妥昔单抗（美罗华）的方案化疗，可获得较为满意的临床缓解率和较长的无病生存率。但弥漫大B细胞淋巴瘤多发于老年人，本次研究中纳入患者的平均年龄为（58.97±12.42）岁，患者疗效及耐受性均较差，因此治疗前有效评估患者的临床疗效及预后对于临床治疗方案的制订尤为重要。由于IPI综合了年龄、侵犯部位、疾病进展程度和肿瘤负荷等多项参数，长期以来被广泛应用于弥漫大B细胞淋巴瘤患者预后的评估，并一直被用作弥漫大B细胞淋巴瘤判断预后的指标之一[3]。

研究显示，IPI每增加1分，死亡风险增加1.055倍[4]。大量研究发现，遗传学异常多可累及多条染色体，而弥漫大B细胞淋巴瘤常见的发生遗传学改变的基因为MYC、Bcl-2、Bcl-6[5-7]。MYC基因是位于染色体8q24的原癌基因，是一种转录因子，具有重要的细胞功能，对细胞生长、增殖、分化、代谢及促进新生血管形成等发挥重要作用[8]。大量研究表明，c-MYC基因异常与非霍奇金淋巴瘤不良预后相关，c-MYC重排是独立于IPI的不良预后因子[9-12]。Akkaya等[13]研究发现，MYC基因异常与弥漫大B细胞淋巴瘤预后密切相关，可作为预测弥漫大B细胞淋巴瘤的预后因素并指导治疗。c-MYC基因易位引起的重排较少见，淋巴结和结外弥漫大B细胞淋巴瘤中出现c-MYC重排的发生率分别为2%和10%，但胃肠道弥漫大B细胞淋巴瘤可高达28%，且治疗后完全缓解率较高[14-15]。Bcl-2基因易位是滤泡性淋巴瘤的遗传学特征，存在于20%～30%的弥漫大B细胞淋巴瘤患者中，提示肿瘤起自滤泡性淋巴瘤高度恶性转化[16]，大量的研究表明Bcl-2蛋白可以作为独立于临床分期和免疫类型的弥漫大B细胞淋巴瘤预后因子[17-20]。弥漫大B细胞淋巴瘤可包括中心母细胞型、免疫母细胞型、富于T细胞/组织细胞型、间变细胞型、浆母细胞型及表达ALK全长型，而常见型有以下3种亚型：①中心母细胞型：最为常见的一种，瘤细胞主要为中心母细胞；②免疫母细胞型：是DLBCL中与免疫母细胞相似的、数量占肿瘤细胞的绝大多数的类型；③间变细胞型：肿瘤细胞胞体大、异形多核。DLBCL变异型较少见，其病变部位可出现黏液间质和原纤维样基质。本次研究中，Bcl-2/MYC阳性表达患者其IPI评分情况总体高于Bcl-2/MYC阴性患者，而缓解率、1年生存率及3生存率均明显低于Bcl-2/MYC阴性患者，差异均有统计学意义（P < 0.05）。

国外大量研究显示，MYC和Bcl-2高表达，提示弥漫大B细胞淋巴瘤患者预后较差[21-22]。而国内张晓娟等[23]研究也发现，MYC和Bcl-2低表达均可使弥漫大B细胞淋巴瘤患者总生存时间及无进展生存期延长，MYC和Bcl-2的检测对弥漫性大B细胞淋巴瘤患者的预后具有判断价值，可作为判断预后的分子标志物。由此可见，MYC和Bcl-2在弥漫大B细胞淋巴瘤临床治疗效果及预后评估中具有重要的临床价值。Bcl-2和Bcl-6阳性表达提示近期疗效与预后不佳，其水平可被视为独立的弥漫大B细胞淋巴瘤分析因素，对患者治疗过程中病情发展的预测、个体化治疗策略的制订有重要意义[24]。Green等[25]研究发现，免疫组化法检测MYC和Bcl-2共阳性表达患者治疗后完全缓解率低，3年生存期及无进展生存期均短于非共阳性表达患者。但MYC与Bcl-2共存于弥漫大B细胞淋巴瘤的概率并不是很高，多数情况下是MYC或Bcl-2异常表达，有研究者回顾性分析了30例弥漫大B细胞淋巴瘤患者的临床资料，结果显示MYC、Bcl-2共阳性表达率为30%[26]。目前，关于MYC和Bcl-2的临床价值差异的相关研究极为少见，因此本研究观察比较了MYC阳性表达患者与Bcl-2阳性表达患者的临床特征差异，结果发现Bcl-2阳性表达患者性别、年龄、原发部位、细胞来源、结外受侵情况、IPI评分、临床分期、治疗效果及生存情况分布相似（P > 0.05），尚未发现MYC与Bcl-2异常表达对弥漫大B细胞淋巴瘤在疗效及预后评估方面的价值差异，但本次研究纳入的样本量较少，希望在以后的研究中扩大样本量，以进一步证实。

综上所述，Bcl-2或MYC阳性表达与弥漫性大B细胞淋巴瘤患者的病情严重程度及疗效相关，且MYC阳性表达与Bcl-2阳性表达患者的临床特征无明显差异，提示MYC与Bcl-2在弥漫性大B细胞淋巴瘤中存在相似的临床评估价值。

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篇3

患者女性，72岁，糖尿病9年。高血压8年。1年前右足麻木疼痛，四月前右足扭伤致轻度裂缝骨折，后右小腿肌肉开始肿胀。查体：患者呈贫血貌，浅表淋巴结未触及肿大。右小腿硬肿，皮温高，轻度指压性水肿。右足下垂，背曲，跖曲受限。深浅感觉均消失。

MRI检查示：右小腿后部肌肉体积不规则增大，信号不均，可见多发长梭形团块状、结节状异常信号，FST2WI呈稍高信号，T1WI呈稍低信号，FST1WI呈等信号，肌肉正常形态尚可辨认，肌间隙清楚，增强后，病变呈明显欠均匀团状强化。

讨论：恶性淋巴瘤是淋巴结和（或）淋巴组织的免疫细胞肿瘤【1-4】，来源于淋巴细胞组织的恶变，可分为霍奇金病（HD）和非霍奇金淋巴瘤（NHL）两类，近些年发病率逐渐上升，尤其是非霍奇金淋巴瘤，多以淋巴结受累常见，而原发于骨骼肌组织的则很少见，且大部分为NHL，继发者较原发者高近10倍。原发于骨骼肌的淋巴瘤主要表现为软组织团块及相邻重要器官受压迫而产生功能及形态改变。原发病灶多以长骨肌束为主，如下肢及臀部，一般沿肌束为中心向两端生长呈梭形，常伴皮肤及邻近骨膜受侵，多为有痛性、弥漫性生长且边界不清的肿块，区域淋巴结受侵少见。其中最多见的病理类型为弥漫性大B细胞淋巴瘤，T细胞淋巴瘤偶见。

原发于骨骼肌间的淋巴瘤影像学表现主要有；

（1）病变肌肉呈弥漫性增大，形态尚可分辨；

（2）肿瘤的供血丰富，且少见坏死，故行CT、MRI增强扫描肿瘤呈中度不均匀强化；

（3）相邻骨骼可多处受侵，表现为髓内多发水肿区。

（4）局部淋巴结及远处淋巴结可肿大。

（5）多见于四肢，尤以大腿及上肢部位好发。

（6）中老年人多见。

（7）临床表现为肿胀、疼痛及全身不适，可伴发热、消瘦，少数患者可无任何不适。

本例患者为老年女性，临床主要表现为右小腿肿胀，病变位于右小腿骨骼肌内，MRI上表现为小腿肌肉弥漫性肿大，受累肌肉形态仍可辨认，增强扫描病变呈明显不均匀强化，应考虑到恶性淋巴瘤可能，但由于该例患者有糖尿病病史，故本病例曾误诊为糖尿病肌病，经免疫组化确诊为大B细胞淋巴瘤。现回顾总结，以增加对本病的认识。

参考文献：

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篇4

【摘要】 本研究探讨造血干细胞移植（HSCT）对恶性淋巴系统血液病的疗效。通过8例非霍奇金淋巴瘤（NHL）及3例淋巴细胞白血病患者在前期化疗基础上进行造血干细胞移植，分别观察造血重建、并发症及生存期等指标，以了解造血干细胞移植对该类疾病的疗效。结果表明：HSCT后11例患者(其中自体移植7例，异基因移植4例)造血顺利恢复，均能达到完全缓解（CR）。随访3年，5例NHL患者无病生存，1例NHL患者于移植后2个月死亡，1例自杀；4例接受异基因造血干细胞移植的患者中，1例非霍奇金淋巴瘤（NK细胞型）移植后79天死亡，1例慢性淋巴细胞白血病患者无病生存，2例急性淋巴细胞白血病患者分别于移植后第54天、第17个月死亡。结论：造血干细胞移植是治疗恶性淋巴系统血液疾病的一个有效手段，但自体HSCT的患者尚有一定的复发率，而异基因HSCT患者有可能因严重的移植相关并发症而死亡。

【关键词】 造血干细胞移植；淋巴瘤；淋巴细胞白血病

Effect of Hematopoietic Stem Cell Transplantation in Malignant Hematologic Disease of Lymphatic System

AbstractThe study was aimed to investigate the effect of hematopoietic stem cells transplantation (HSCT) in treatment for hematologic maglignacies of lymphatic system. Through observing 8 patients with non-Hodgkin′s lymphoma (NHL) and 3 patients with lymphoblastic leukemia， who received auto or allo-HSCT after chemotheraphy， the hematopoietic reconstitution， complication and surviral time were evaluated. The results showed that 11 patients (7 patients after auto-PBSCT， 4 patients after allo-PBSCT) all achieved hematopoietic reconstitution and complete remission (CR). Within three years following-up， 5 patients with NHL were survival， but one case of NHL died at the 2 months after auto-PBSCT， one patient suicided. From 4 cases received allo-PBSCT， one patiant with NHL (NK cell) was died at 79 days later， one patient with chronic lymphoblastic leukemia was surviving， another 2 cases of acute lymphoblastic leukemia were dead at 17 months and 54 days respectively after allo-PBSCT. In conclusion HSCT is an effective treatment for hematologic maglignancies of lymphatic system， but the replase would occur in some patients received auto-PBSCT. The others by allo-PBSCT might die of severe complication of transplantation.

Key wordshematopoietic stem cells transplantation; lymphoma; lymphoblastic leukemia

造血干细胞移植（HSCT）已被公认为是治疗恶性血液病的有效方法，特别是对急慢性白血病及中高度恶性、初治耐药、易于复发等预后不良淋巴瘤效果尤为突出［1］。外周血造血干细胞移植（PBHSCT）是HSCT中的一种类型，因其采集方法简便，移植后造血重建迅速，痛苦相对较少，易于被患者个人或供者接受，而广泛应用于临床治疗。本研究在已有的造血干细胞移植研究基础上［2-7］，重点探讨HSCT治疗淋巴系统恶性血液病的效果。

材料和方法

病种和移植类型

11例移植患者中，男6例，女5例，年龄15-56岁（中位年龄35岁），其中非霍奇金淋巴瘤8例（弥漫性大B细胞型5例，B细胞源性2例，NK细胞型1例），急性淋巴细胞白血病2例，慢性淋巴细胞白血病1例。移植类型：自体外周血干细胞移植7例，异基因HLA单倍相合亲缘移植4例（其中2例为非清髓移植，2例为清髓移植）（表1）。 Table 1. Information of 11 patients with malignant hematologic disease of lymphatic system after HSCT（略）

干细胞的采集、动员、保存

对所有异基因造血干细胞供者均予粒细胞集落刺激因子（G-CSF）动员外周血干细胞，10 μg/（kg·d）分2次皮下注射共5天，所有自体造血干细胞移植患者先予环磷酰胺（cyclophosphamide，CTX）联合G-CSF动员外周血干细胞，再用CS-3000 plus (Baxter公司产品)分离外周血干细胞，每次循环血量10 L左右，如1次采集干细胞数量不足，可于第2日重复采集直至CD34+细胞数量超过3×106/kg，将采集到的外周血造血干细胞放置液氮中保存。

预处理方案及干细胞回输

自体造血干细胞移植（auto-HSCT)中，有6例采用CBV方案(CTX/VP-16/CCNU)，1例选用MA方案（MIT/Ara-C）进行移植术前预处理。异基因造血干细胞移植（allo-HSCT)中，2例非清髓干细胞移植者，1例采用环磷酰胺+阿糖胞苷+全身照射（CTX/Ara-C/TBI），1例采用氟达拉滨(fludarabine，FAMP)+环磷酰胺进行预处理；2例清髓干细胞移植者，1例采用CTX+TBI，1例采用CTX/VP-16/TBI进行术前预处理。所有患者在预处理结束后均予以输注含CD34+细胞数平均为5.5 ×106/kg的未去T细胞的移植物，移植后即开始使用G-CSF （300 μg/d），直至WBC ＞3 ×109/L后停用。

结果

造血重建

11例患者中性粒细胞（ANC）＞0.5×109/L平均天数为11（8-18）天，血小板（Plt） ＞20×109/L平均天数为12（8-23）天（表2）。Table 2. Hematopoietic reconstitution， complication and prognosis of 11 patients with malignant hematologic disease of lymphatic system after HSCT（略）

并发症

自体造血干细胞移植中，3例患者在骨髓抑制期间出现肛周、口咽部、颈静脉置管处感染，1例在造血功能恢复前因血小板低出现泌尿系出血。异基因造血干细胞移植中，1例出现移植物抗宿主病（GVHD）及肝静脉闭塞病（veno-occlusive diseease，VOD），1例出现移植物抗宿主病及出血性膀胱炎（hemorrhagic cystitis，HC）、间质性肺炎。

近期疗效

8例非霍奇金淋巴瘤患者中，5例为弥漫大B细胞型，2例为B细胞源性，1例为NK/T细胞型，移植前5例CR，3例PR，按文献［8］标准，外周血干细胞移植术后8例均为CR；3例淋巴细胞白血病患者中1例为CLL A期，2例为ALL，其中有1例多次复发，移植术后3例均达到CR。

生存期

随访3年，自体移植7例患者中，除1例自杀身亡，1例术后再次复发出现肝脏、中枢神经系统广泛浸润，于移植术后2月死亡外，其余5例均无病生存。异基因移植4例患者中，除1例CLL患者无病生存外，其余3例分别于移植后54天、2个月、17个月死亡。

讨论

上述7例auto-HSCT患者均为非霍奇金淋巴瘤弥漫大B细胞型或B细胞型，已有报道明确表明，放（化）疗大约可使30%的NHL病人长期存活，但对于中、高度恶性NHL病人的长期生存改善不明显，auto-PBSCT已成为中、高度恶性非霍奇金淋巴瘤病人治疗的标准方案之一［9］。对于初治未达到CR的侵袭性NHL病人，常规挽救治疗的效果比较差，长期无病生存率很低，而auto-PBSCT却能获得较高的CR率和PR率，5年生存率达37%［10］。我院所采用auto-PBSCT治疗的7例患者中，有3例为初治未达到CR的淋巴瘤，5例为中度恶性淋巴瘤，经过auto-PBSCT后7例均达到CR标准，其中1例弥漫大B细胞型患者移植前经CHOP方案、proMACE-cytoBOM方案、MACOP-B方案多次化疗后均不能缓解，行auto-PBSCT治疗后复查各项指标提示达到CR标准，但2月后再次复发，出现肝脏及中枢神经系统广泛侵润最终导致死亡。因此可以说，自体干细胞移植无供受者之间的免疫排斥，合并症少，造血重建快，既使出现骨髓抑制引发的感染、出血、贫血症状，予以细胞因子刺激造血，同时加强抗感染、输红细胞悬液、血小板及对症处理后也可迅速恢复，确实是治疗中高度恶性、初治耐药难治性恶性淋巴瘤的有效方法，但同时也要看到因为自体干细胞移植缺乏GVL效应，易于在移植之后再次复发，降低了auto-PBSCT对该类疾病的总体有效率。

鉴于auto-HSCT治疗NHL有一定的复发率，且国际上也存在采用异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）治疗侵袭性淋巴瘤的病例，遂予例8患者进行了非清髓allo-HSCT治疗，移植过程中患者造血重建恢复迅速，也未出现严重GVHD及其他相关移植并发症，可能与术中有效使用环孢素（CsA）、骁悉（MMF）进行移植物抗宿主病预防有关，但移植后患者再次复发，较术前有明显进展，出现颅内及脾脏多处浸润。有研究表明，对侵袭性淋巴瘤的治疗，可考虑采用allo-HSCT取代auto-HSCT， 但采用allo-HSCT仍有25%复发率，且移植相关死亡率较高，使其总体生存率（OS）仅有18%-35%［11，12］，近年来有报道显示采用allo-HSCT治疗恶性淋巴瘤OS可升至76%［13］，所以allo-HSCT对NHL具有治愈潜能，但因其高移植相关死亡率，同时也存在移植后复发可能，因此需有选择地对该类患者进行allo-HSCT。目前，allo-HSCT在治疗急性白血病方面已得到公认。在上述11例患者中，有2例ALL患者进行了清髓allo-HSCT，分别采用CTX+TBI、CTX+VP16+TBI作为预处理方案。例6患者造血重建略有延迟，例7造血重建迅速，分别出现Ⅱ度aGVHD和Ⅲ度aGVHD，移植后2例患者均完全缓解，但例7因同时存在出血性膀胱炎及巨细胞病毒感染导致的间质性肺炎于移植后第54天死亡，例6因广泛性cGVHD在移植17个月后死亡。虽然allo-HSCT治疗急性白血病效果已得到肯定，但上述2例患者无病生存时间较短可能与预处理强度、配型为单倍相合及严重移植相关并发症有关。此外，allo-HSCT在CLL中的应用也逐渐被重视起来。Pavletic等［14］报道了用allo-HSCT治疗23例CLL的情况，结果显示在这些移植后患者中完全缓解率达到87%，5年的无病生存率仅为65%，复发率为5%。虽然本研究中仅有1例为采用非清髓allo-HSCT治疗的CLL患者，但其移植后亦达到完全缓解并且无病生存。综上所述，虽然自体造血干细胞移植患者尚存在复发的可能，异基因造血干细胞移植患者有一定的移植相关死亡率，但造血干细胞移植仍然是治疗恶性淋巴系统血液疾病的一个有效方法，值得在临床工作中推广。

参考文献

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2陈宝安，熊辉霞，丁家华等.非清髓异基因外周血造血干细胞移植后嵌合体分析.中国实验血液学杂志，2006；14：313-317

3 陈宝安，张琰，丁家华等.非清髓造血干细胞移植后致敏供者淋巴细胞输注对嵌合状态及GVHD影响的实验研究.中国实验血液学杂志，2006；14：102-106

4 陈宝安，毕延智，丁家华等.非清髓性骨髓移植诱导异基因受者小鼠免疫耐受的实验研究. 中国实验血液学杂志，2005；13：1054-1057

5 丁家华，陈宝安，孙雪梅等.非清髓性外周血造血干细胞移植治疗慢性粒细胞白血病慢性期及加速期的疗效观察.临床血液学杂志，2005；18：292-294

6 丁家华，陈宝安，董伟民等.非清髓外周血造血干细胞移植治疗慢性粒细胞白血病.白血病·淋巴瘤，2004；13：136-138

7陈宝安，熊辉霞，丁家华等.非清髓异基因外周造血干细胞移植治疗难治性恶性血液病.临床肿瘤学杂志，2005；10：14-17

8张之南.血液病诊断及疗效标准.北京:科学出版社出版，1998: 342-349

9Gutierrez-Dekgado F，Maloney DG，Pressow OW，et al. Autologous stem cell trasplantation for non-Hodgkin′s lymphoma: comparison of rediation-based and chemotherapy-only preparative regimens. Bone Marrow Transplant， 2001；28;455-461

10 Vose JM，Zhang MJ，Rowlings PA，et al. Autologous transplantation for diffuse aggressive non-Hodgkin′s lymphoma in patients never achieving remission:a report from the autologous blood and marrow transplant registry. J Clin Oncol， 2001；19:406-413

11 Vaishampayan U， Karanes C， Du W， et al. Outcome of relapsed non-Hodgkin′s lymphoma patients after allogeneic and autologous transplantation. Cancer Invest，2002；20:303-310

12Mitterbauer M， Neumeister P， Kalh P， et al. Long-term clinical and molecular remission after allogeneic stem cell transplantation(SCT) in patients with poor prognosis non-Hodgkin′s lymphoma. Leukemia，2001；15:635-641

篇5

关键词：CD8阳性T细胞;乳腺癌;保护性免疫标记物

乳腺癌是世界范围内发生于女性中最常见、最致命的恶性肿瘤。虽然近年来通过早期诊断和多重疗法使得乳腺癌患者的预后有了改善，但评价期预后的方法仍然较为局限，因此目前迫切的需要能对其早期评价且筛选出能受益于高选择性的靶向治疗的预后标记物 [1]。通过基因表达检测，近段时间来一些免疫细胞相关的基因标记物被发现也是判断乳腺癌患者生存的良好预后判断因子[2]。目前为止很多实验证实了在直肠癌、肺癌、食管癌、卵巢癌、肾透明细胞癌和胰腺癌患者中，CD8+T细胞的阳性浸润与这些患者更长的生存时间密切相关[5-10]。本次实验的目的是通过免疫组化染色396例乳腺癌标本中浸润于癌巢和癌组织间质中的CD8+ T细胞，统计学分析其与患者DFS和OS之间的相关性。

1.材料与方法

1.1一般资料 本实验包括1990年至2003年岳阳市二医院普外科396例术前未做任何治疗的淋巴结阴性乳腺癌患者肿瘤组织标本。肿瘤分期为T1期至T3期，且在手术时无远处转移。每一例患者都有完整的相关随访资料。通过筛选，在这396例标本中，215（54.3%）例患者接受了经典根治术和放疗，181（45.7%）例患者接受了乳腺癌改良根治术。所有患者诊断时的年龄：33～89岁，平均年龄：（58.3±2.4）岁。有332例患者的经过福尔马林固定、石蜡包埋乳腺癌组织标本可用来进行免疫组化实验。平均随访时间为152个月，在此期间，53（15.6%）例患者死于乳腺癌复发、转移，46（13.6%）例患者死于与乳腺癌不相关的其他疾病，7（2.1%）例患者死亡原因不明，233例（68.7%）仍然生存，90（26.5%）例患者发生肿瘤的局部复发。进行统计学分析时我们剔除了死于其他原因的乳腺癌患者。

1.2方法 根据以前文献报道的免疫组化染色标准法[3]，我们对厚度为4？m的乳腺癌组织进行了免疫组化染色。福尔马林固定、石蜡包埋的乳腺癌组织依次浸泡于不同浓度梯度的酒精和二甲苯，置于PH10的柠檬酸盐缓冲液中并加热25分钟以行抗原修复，3%过氧化氢溶液在室温下反应5分钟，1：50稀释的单克隆CD8抗体在室温下反应60分钟，二抗在室温下反应30分钟，与DAB溶液在室温下反应5分钟，与苏木精溶液染色5分钟，盖玻片后将切片置于奥林帕斯显微镜下由本文中两位受过组织免疫组化诊断培训且不知所有标本临床病理情况的作者进行观察评价。所有实验都包含阳性（扁桃体）和阴性对照（未加一抗），所有的对照都显示出适当的实验结果。

1.3结果评价 CD8+ T细胞呈棕褐色细胞膜染。根据以往文献的报道[4]，我们评价了乳腺癌组织癌巢和癌间质中CD8+ T细胞的浸润强度，简而言之，癌巢CD8+ T细胞指浸润于乳腺癌细胞之间或与癌细胞直接接触的CD8+ T细胞，癌间质CD8+ T细胞指浸润于癌巢之外间质中不与癌细胞直接接触的CD8+ T细胞。我们采用了一种半定量评分法评价CD8+ T细胞的浸润强度：0，无CD8+ T细胞浸润;1+，CD8+ T细胞的弱阳性浸润;2+，CD8+ T细胞的中等阳性浸润;3+，CD8+ T细胞的强阳性浸润。如两位评价者对某一染色标本的评价结果不一致，切片会被重新评价讨论直到达成共识。

1.4统计学分析 Kaplan-Meier 法计算乳腺癌患者生存率。患者无病生存时间（DFS）定义为乳腺癌确诊至复发时间（包括局部复发，远处转移及发生对侧乳腺癌），总生存时间（OS）为乳腺癌患者确诊至死于该病的时间。单因素和多因素COX分析用于评价CD8+ T细胞和其他预后因子对乳腺癌3讨论

研究证实CD8阳性T细胞对人类多种恶性肿瘤的预后具有保护性效应[5-6]，然而其在乳腺癌中的预后意义目前尚存在争论。通过免疫组化染色CD8+ T细胞表面的CD8分子，我们测定了CD8+ T细胞在乳腺癌组织癌巢和癌间质中的浸润强度，然后分析了此细胞与332例淋巴结阴性乳腺癌患者预后的相关性。虽然癌间质CD8+ T细胞对患者生存没有保护性效应，但癌巢中CD8+ T细胞阳性浸润却与乳腺癌患者更长的DFS和OS密切相关，且独立于传统预后判断因子如确诊年龄、肿瘤大小、组织学分级、雌激素受体状态、孕激素受体状态、人类表皮生长因子受体2和Ki-67的表达。本实验的结果证实以CD8+ T 细胞为代表的细胞免疫系统，在乳腺癌的发生发展过程中起着重要的抗肿瘤作用。 本实验和其他研究证实CD8+ T细胞的阳性浸润与恶性肿瘤患者的更长的生存时间密切相关，表明虽然在恶性肿瘤抑制性微环境中CD8+ T细胞仍然发挥着抗肿瘤效应。Anz 等人的研究证实了虽然乳腺髓样癌中浸润有大量的FOXP3阳性调节性T细胞，CD8+ T细胞与患者良好的预后密切相关[7]，表明了在决定乳腺癌患者生存方面CD8+ T细胞的重要作用。

总而言之，本实验结果表明乳腺癌癌巢CD8+ T细胞对乳腺癌患者预后有着显著的保护性效应。能够改善其预后这就表明了以CD8+ T细胞代表的细胞免疫系统有着良好的抗肿瘤效应，这种对患者生存的保护性作用可作为一种新型的免疫治疗手段改善乳腺癌患者的预后。

参考文献：

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[2].Schmidt M， Hellwig B， Hammad S， Othman A， Lohr M et al. （2012） A comprehensive analysis of human gene expression profiles identifies stromal immunoglobulin Kappa C as a compatible prognostic marker in human solid tumor. Clin Cancer Res， 18（9）： 2695-2703. Available： doi：10.1158/1078-0432.

[3].Bianchini G， Qi Y， Alvarez RH， Iwamoto T， Coutant C et al. （2010） Molecular anatomy of breast cancer stroma and its prognostic value in estrogen receptor-positive and negative cancers. J Clin Oncol， 28（28）： 4316-4323. Available： doi：10.1200/JCO.2009.27.2419.

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篇6

[文献标识码]B

[文章编号]1005-0019(2009)7-0017-02

[摘要]目的:分析慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化及其临床意义。方法:慢性乙型肝炎患者152例,乙肝引起的肝硬化28例,健康对照者30例。采用流式细胞仪检测各自外周血淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+等,并进行统计学分析。结果:与健康对照组比较,重度慢性乙型肝炎、肝炎肝硬化患者外周血CD3+、CD4+、CD8+均有显著性下降(P0.05)。结论:重度慢性肝炎及肝硬化患者存在一定程度的细胞免疫功能紊乱,可能与其预后存在一定的相关性。

[关键词]乙型肝炎;慢性;T淋巴细胞亚群

HBV感染是一个全球关注的健康问题,也是世界范围内导致慢性肝脏疾病最常见的原因。乙型肝炎的临床表现、病变程度及预后差异很大。正常情况下,大多数免疫功能健全的成人感染HBV后可通过免疫应答的协调作用将其清除并获得对HBV再次感染的抵抗力。但仍有5~10%的HBV感染者或经垂直途径感染HBV的人群不能有效清除病毒,从而导致HBV的持续感染,甚至最终发展为肝硬化或肝癌。许多研究表明机体的细胞免疫功能参与了慢性乙型肝炎的发病过程并在其中起着重要作用[1]。为此,我们应用流式细胞仪检测慢性乙型肝炎患者T淋巴细胞亚群水平,研究这些指标测定的临床意义。

1资料与方法

1.1病例选择:收集2003年5月～2006年7月在龙口经济开发区医院住院的慢性乙型肝炎患者共152例。其中男性101例,女性51例;轻中度慢性乙型肝炎患者94例,重度慢性乙型肝炎患者58例。152例患者中HBVDNA定量检测阳性102例(HBVDNA>107拷贝/ml59例,HBVDNA

1.2方法

1.2.1标本采集:采集患者晨起空腹静脉血4ml,分成两份,每份2ml。一份不加抗凝剂,分离血清后用于肝脏功能、肝炎病毒血清标记物ELISA检测及HBVDNA定量检测;另一份用EDTAK2抗凝,用于流式细胞仪检测。

1.2.2外周血T淋巴细胞亚群的检测:采用常规免疫荧光标记三色FACSCalibur流式细胞仪(美国BD公司)6小时内测定CD3+、CD4+、CD8+绝对值计数。

1.2.3肝脏功能检测:全自动生化分析仪进行肝脏功能生化指标检测。

1.2.4肝炎病毒血清标记物ELISA检测:选用华美生物工程公司的肝炎病毒血清标记物ELISA检测试剂盒进行肝炎病毒血清标记物检测。

1.2.5HBVDNA定量检测:选用深圳匹基生物工程股份有限公司的HBVDNA荧光定量试剂盒。HBVDNA检测结果均大于1×103copies/ml为阳性。

1.3统计学分析:应用SPSS12.0进行统计学分析。所有数据以均数±标准差(x±s)表示,组间数据的显著性比较采用方差分析和两两比较的q检验。P

2结果

2.1患者的临床特点:轻中度慢性乙型肝炎组、重度慢性乙型肝炎组、肝炎肝硬化组患者的性别比、病程、ALT无统计学差异,具可比性。肝炎肝硬化组与重度慢性乙型肝炎组患者在血清总胆红素水平、凝血酶原时间、血清白蛋白水平与血浆凝血酶原活动度相比无显著差异,具可比性。

2.2外周血淋巴细胞各亚群特点:与正常对照组比较,轻中度慢性乙型肝炎患者CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+比值无统计学差异;重度慢性乙型肝炎患者及肝炎肝硬变组外周血中CD3+、CD4+、CD8+均有显著性下降(P

2.3HBVDNA不同复制水平患者的各亚群特点:102例HBVDNA定量检测阳性患者中HBVDNA>107拷贝/ml59例,HBVDNA

3讨论

乙型肝炎是一种免疫相关性疾病,其发病机制非常复杂。机体感染HBV后对肝细胞的损伤程度主要取决于机体的免疫应答[3]。一旦感染HBV,机体免疫状态的平衡将被打破,无论体液免疫还是特异性细胞免疫应答在乙肝患者的外周血和肝脏中都将会有所体现[4-6]。因此研究HBV免疫病理机制的一个重要方法就是分析慢性感染者的外周血或肝脏来源的淋巴细胞亚群的组成[7]。

本组资料主要通过对慢性乙型肝炎患者的外周血CD3+、CD4+、CD8+淋巴细胞及CD4+/CD8+比值进行分析了解不同疾病状态淋巴细胞的变化特点。结果表明,与健康对照组比较,轻中度慢性乙型肝炎患者的淋巴细胞绝对值变化不明显,而重度慢性乙型肝炎患者及肝炎肝硬化患者外周血中CD3+、CD4+、CD8+值则明显下降,并以肝炎肝硬化患者的下降最为显著(P

本组资料也对不同疾病状态下CD4+/CD8+比值变化进行分析,但未提示显著性差异(P>0.05)。对HBVDNA高水平和低水平组的分别分析也未发现T细胞亚群之间的统计学差异,提示乙型肝炎患者外周血T亚群细胞数和比值变化与HBV复制活跃程度无明显关系,进一步说明肝细胞病变与细胞内HBV数量无明显相关性。

既往曾有学者研究重型肝炎的免疫[8,9]反应,结果提示慢性重型肝炎患者CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞绝对值明显低于肝硬化患者,呈现出相似的相关性。

篇7

关键词：流产 封闭抗体 免疫治疗 主动

【中图分类号】R4 【文献标识码】B 【文章编号】1008-1879(2012)02-0068-02

流产是母胎之间的免疫状态失衡，复发性流产的发病率为1%～5%，原因不明者约有50%，其中大约80%以上是与免疫因素相关。对此可将复发性流产分为非免疫类复发性流产和免疫类复发性流产。不明原因的复发性流产是指排除染色体、解剖、内分泌、感染和自身免疫方面的因素后未能发现其他导致流产的原因，也叫同种免疫类复发性流产。我院自2009年9至2011年9月经门诊筛查出不明原因的复发性流产患者116例，予淋巴细胞免疫治疗，效果理想，现报道如下。

1 资料和方法

1.1 对象。

均为来本院门诊就诊的复发性流产患者，连续自然流产2～6次。经门诊常规筛查排除遗传、内分泌、感染、生殖器官解剖异常及自身免疫性疾病等，封闭抗体阴性的复发性流产患者共116例，年龄21～42岁，平均29.4岁。

1.2 方法。

1.2.1 封闭抗体检测方法。

采用补体依赖性淋巴细胞毒试验检测，患者血清为抗血清，丈夫淋巴细胞为靶细胞。

1.2.2 淋巴细胞免疫治疗方法。

充分向夫妻双方告知主动免疫治疗的意义和风险，并同意接受治疗。主动免疫原采用符合要求的丈夫（或无关第三个体）的淋巴细胞，抽取丈夫（或无关第三个体）抗凝外周血30ml，用Ficoll淋巴细胞分离液提取淋巴细胞，生理盐水洗涤3次，加1ml生理盐水稀释，于妻子前臂内侧分3点作皮下注射，每次0.1ml，活细胞数为 （3.0～4.0）×107/ml。

1.2.3 治疗时间。

于计划怀孕前3月开始行淋巴细胞免疫治疗，每3周1次,共计4次（一疗程）。末次免疫后2周复查封闭抗体,若已转为阳性,即可考虑怀孕。鼓励在疗程结束后3个月内怀孕，如成功妊娠后予以加强治疗。若阳转后仍未能怀孕，每隔8周左右再注射一次以维持封闭抗体的浓度。阴性者继续进行下一个疗程的免疫治疗直至封闭抗体转为阳性后再考虑受孕。确诊怀孕后每隔2周注射淋巴细胞一次直至妊娠12周。

1.3 妊娠成功标准指标。

封闭抗体阳性并成功妊娠至12周。

2 结果

接受丈夫（或无关第三个体）淋巴细胞主动免疫治疗116例，其中108例为接受一个疗程的淋巴细胞免疫免疫后复查封闭抗体阳性，转阳率93%；6例为接受2个疗程后复查封闭抗体阳性；2例进行2个疗程复查封闭抗体仍为阴性。成功妊娠者中有74例足月分娩，2例早产，1例晚孕失访，27例目前成功妊娠，治疗成功率为89.65%。接受免疫疗法患者分娩的76婴幼儿随访结果，2例早产儿体重2.2kg、2.0kg，出生后转儿科健康出院；其余体重均在2.5～3.7kg，出生时表型正常，生长发育均正常，子代身体发育与智力发育均与同龄儿童无显著性差异。

3 讨论

人类白细胞抗原是是广泛存在人体组织及有核细胞表面的并可引起强烈排除反应的抗原。现代生殖免疫学认为妊娠是成功的半同种免疫移植，正常妊娠时，夫妻双方HLA抗原不相容，胚胎所携带的父源性抗原能刺激母体免疫系统产生封闭抗体。封闭抗体是防止辅T淋巴细胞识别胎儿抗原的抑制物，可以和滋养细胞结合并将其伪装，防止母体对其的识别和排斥，并加速滋养细胞的生长。不明原因的复发性流产患者与母体缺乏封闭抗体有关。封闭抗体的不足导致母体对胚胎产生免疫攻击，母体对胚胎产生强烈排除以致反复流产［1］。

据此产生了采用患者丈夫或无关个体淋巴细胞进行主动免疫的治疗方法，以达到母胎间的细胞性免疫排斥反应减少流产率的发生。

在临床工作中应严格选用病例，对于同一的连续2次或2次以上流产者并排除遗传、内分泌、感染、生殖器官解剖异常及自身免疫性疾病等患者纳入治疗对象。供血者治疗前完善相关血液的检查包括血常规、凝血功能、肝炎系列全套、艾滋病抗体、梅毒血清学检查、Rh血型及致畸四项的检查。经过治疗后有114例封闭抗体转为阳性，101例成功妊娠，76例娩出健康活婴，子代身体发育与智力发育均与同龄儿童无显著性差异，与林其德等［2］的报道相似。这说明经过淋巴细胞免疫治疗后母体内封闭抗体形成，免疫耐受形成，可保护胚胎免受母体免疫攻击，可有效的治疗不明原因的复发性流产患者。同时淋巴细胞免疫治疗操作相对简单，成功率高，和其他混合型淋巴细胞治疗相比副作用小，有利于避免母体对红细胞或血小板等抗原致敏的优点。总之对于封闭抗体阴性的RSA患者应用淋巴细胞主动免疫治疗能提高封闭抗体的阳性率及妊娠的成功率。淋巴细胞主动免疫治疗复发性流产安全有效。

参考文献

篇8

【关键词】干扰素；胸腺五肽；慢性乙型肝炎；T细胞计数亚群

Interferon combined with thymopentin in patients with chronic hepatitis B lymphocyte subsets T

CHEN Li,LI Jin-qiang

【Abstract】 Objective To observe the joint Thymopentin interferon for chronic hepatitis B patients with T-lymphocyte subsets.Methods 78 cases of chronic hepatitis B patients were divided into interferon combined with thymopentin on the group (48 cases) and control group (30 cases), treatment for 24 weeks, were observed after treatment of ALT, HBV-DNA, HBeAg and T cell subsets change. Results of ALT, HBV-DNA, HBeAg were significantly decreased peripheral blood CD4 CD8T cell count and CD4/CD8 increased compared with before treatment and with the control group after only two, the differences were statistically significant (p

【Keywords】 interferon; thymopentin; chronic hepatitis B; T cell subsets count

【中图分类号】R156.3【文献标识码】B【文章编号】1005-0515(2011)12-0007-02

乙型病毒性肝炎临床主要表现为慢性或亚临床型，慢性乙型肝炎抗病毒治疗非常关键，本研究对我院2010年6月到8月48例慢性乙型肝炎患者采用干扰素联合胸腺五肽治疗，并同期以30例慢性乙型肝炎患者为对照，探讨干扰素联合胸腺五肽对慢性乙型肝炎患者肝功能恢复，病毒抑制，免疫状态的变化及意义。

我国是慢性乙型肝炎的高发国家，每年因肝病死亡人数众多。乙型病毒性肝炎临床主要表现为慢性或亚临床型，易发展为肝硬化，肝癌。慢性乙型肝炎抗病毒治疗非常关键，是防止病情进展，提高预后水平，改善肝病患者生活质量的重要方法。本研究对长沙市第一医院感染科2010年6月到8月48例慢性乙型肝炎患者采用干扰素联合胸腺五肽治疗，并同期以30例慢性乙型肝炎患者为对照，探讨干扰素联合胸腺五肽对慢性乙型肝炎患者肝功能恢复，病毒抑制，免疫状态的变化及意义。

1资料与方法

1.1 一般资料:78例患者均为长沙市第一医院2010年6月到8月住院患者，均为HBV-DNA，HBeAg阳性患者，ALT治疗前>2×ULN,诊断符合2010版慢性乙型肝炎防治指南[1]。入院前都未抗病毒治疗，并排除合并其他病毒感染。78例患者按随机数目表法分为治疗组48例，对照组30例。两组患者年龄、性别、丙氨酸氨基转移酶（ALT）及基线HBV-DNA，HBeAg水平比较，均无统计学差异。

1.2方法两组均采用保肝治疗：谷胱甘肽针（重庆药友生产，1.5g/每天），加入5%葡萄糖100ml静滴；复方甘草酸苷针（哈尔滨三联药业生产，80mg/每天），加入5%葡萄糖250ml静滴。治疗组在基础上加用a-2b干扰素（北京凯英科技股份有限公司生产，500万IU，肌注，隔日一次）联合胸腺五肽（海南中和药业有限公司生产，1mg，肌注，隔日一次），两组疗程均为24周。

1.3 观察指标治疗前后检测肝功能HBV-DNA，HBeAg及CD4 CD8T细胞计数及CD4/CD8。肝功能检测用日产OLYMRUS自动生化仪；HBV-DNA检测用美国PE公司荧光定量聚合酶链反应检测系统及试剂；HBeAg检测用ELISA法检测。

1.4 统计学分析应用SPSS10.0统计学软件，计量资料用均数±标准差（X±s）表示。记数资料采用x2检验，P

2 结果

2.1 治疗前后ALT，HBV-DNA，HBeAg的变化。治疗组治疗后ALT，HBV-DNA，HBeAg均有明显下降，与治疗前比较有统计学差异(P

2.2 治疗前后两组T细胞亚群的变化 治疗组治疗后外周血CD4 CD8T细胞计数及CD4/CD8升高，与治疗前比较有统计学差异(P

3 讨论

乙型肝炎病毒感染后的肝脏损害是一系列免疫反应造成的肝细胞的病理性的损害，机体的免疫功能几病毒逃避免疫的能力决定HBV感染的发生，发展和转归[2]。肝硬化,肝癌的发生率与持续高病毒载量有关，ALT，HBV-DNA，HbeAg是能够预测肝硬化发生的危险因素。乙肝的预后与抗病毒疗效密切相关，健全的免疫功能有助于清除乙肝病毒。乙肝病毒的清除主要靠自身毒性T淋巴细胞及激活的非特异性炎症和它们释放的炎性因子。宿主的细胞免疫功能特别市HBV特异性CD4 CD8T细胞反应对HBV的清除和疾病的转归有重要影响。免疫清除期的乙肝患者，往往存在不同程度的细胞免疫功能紊乱，T细胞亚群失衡，是病情进展的重要原因[3]。

干扰素具有抗病毒和免疫调节的双重作用，其抗病毒机制是产生抗病毒蛋白，促进感染的肝细胞组织相容性白细胞抗原Ⅰ类分子的表达，增强T细胞的抗病毒效果。[4]。胸腺五肽的作用之一是诱导T细胞分化，能活化CD4和CD8阳性细胞，使专一的Tc细胞寿命维持更长时间，同时也可活化Th细胞，诱导Ts细胞的功能。在抗感染免疫中适量胸腺五肽可明显增加干扰素的产生。诱导和促进T细胞分化成熟；调节T淋巴细胞亚群比例使CD4/CD8趋于正常。a-2b干扰素联合胸腺五肽治疗慢性乙肝患者，能够增强抗病毒疗效，改善肝功能，改善患者预后。本研究显示，经干扰素联合胸腺五肽治疗组患者，外周血CD4 CD8T细胞计数及CD4/CD8升高，反应患者的免疫功能有改善，ALT下降，HBV-DNA，HbeAg滴度下降，综合疗效好。

总之，经a-2b干扰素联合胸腺五肽治疗可以增强机体细胞免疫功能，有利于清除乙肝病毒，从而改善肝功能，减轻肝组织的炎症和纤维化，减慢病情的进展，改善患者的预后。

参考文献

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［2］Bertoletti A,Gehring AJ.The immune response during Hepatitis B virus infection［J］.J Gen Virol,2006,87(Pt6):1939-1449.

篇9

[关键词] 消化道肿瘤；化疗前后；T淋巴细胞亚群

[中图分类号] R734 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2014）08（a）-0040-03

Changes of lymphocyte subsets and its significance in patients with digestive tract tumor before and after chemotherapy

PENG Jieya1 HE Yajun1 ZENG Xiaodan2

1.Department of Clinical Laboratory， Guangzhou Red Cross Hospital， Guangdong Province， Guangzhou 510220， China； 2.Laboratory Medical Science， Guangzhou Medical University， Guangdong Province， Guangzhou 510182， China

[Abstract] Objective To investigate the T cell subsets （CD3+） T cells， T lymphocytes （CD4+）， T lymphocytes （CD8+） and CD4+/CD8+ ratio digestive tract tumor before and after chemotherapy changes and clinical significance of patients with digestive tract tumor before and after chemotherapy. Methods Flow cytometry was used to analyze the CD3+， CD4+， CD8+ cell percentage and the ratio of CD4+/CD8+ in different types of gastrointestinal cancer patients before and after chemotherapy and the healthy （control group）. Results Compared with the control group， the former chemotherapy CD3+， CD4+， CD4+/CD8+ ratio of gastrointestinal cancer patients were lower than that of control group （P < 0.05）， and CD8+ was higher than the control group （P < 0.05）， the differences were statistically significant. Colon cancer and stomach cancer patients after chemotherapy CD3+， CD4+ percentages were higher than before chemotherapy （P < 0.05）， the percentage of CD8+ was lower （P < 0.05）， the differences were statistically significant. Patients with rectal cancer after chemotherapy CD3+ percentage was higher before chemotherapy （P < 0.05）， the percentage of CD8+ was lower （P < 0. 05）， the differences were statistically significant； while CD4+ and CD4+/CD8+ ratio had no statistical significance （P > 0.05）. Conclusion For the digestive tract tumor， detecting the changes of T lymphocyte subsets to understand the immune dynamic， in determining the clinical curative effect， and assess the prognosis monitoring， etc.， all have very important clinical significance.

[Key words] Digestive tract tumor； Before and after chemotherapy； T-lymphocyte subsets

T淋巴细胞是一种胸腺依赖性淋巴细胞，是构成机体免疫防御系统的重要成分，随着对肿瘤免疫机制的了解和肿瘤免疫治疗的应用，越来越多的细胞免疫检测指标被用来监测肿瘤的发生、发展和判断治疗效果及预后，目前应用较广泛的是T细胞亚群的测定，对于判断癌症患者的免疫状态具有重要的意义。T淋巴细胞包括两个主要亚群（CD4和CD8）。在正常情况下，机体内两个T细胞亚群之间，保持一定的数量比例，维持平衡状态。当机体发生肿瘤时，该平衡状态被破坏，严重影响两个T细胞亚群之间的数量比例，导致机体免疫功能紊乱[1]。本研究通过总结各类消化道肿瘤患者化疗前后T淋巴细胞亚群变化，探讨各类消化道肿瘤患者化疗前后免疫功能的变化。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2010年1月～2013年6月广州市红十字会医院（以下简称“我院”）收治的各类消化道肿瘤患者在化疗前1 d及化疗后15 d均检测T淋巴细胞含量的166例成人患者资料，其中，男108例，女58例，年龄46～82岁。相关肿瘤类型均得到病理学形态证实。胃癌21例，结肠癌100例，直肠癌45例。按《临床病诊断及疗效标准》[2]中的消化道疾病诊断，经每周期方案化疗结束后15 d可经相关检验验证取得疗效。另以30名正常人（来自我院体检中心健康体检者）作为对照组，其中，男16名，女14名，年龄19～74岁。

1.2 方法

各类消化道肿瘤患者在化疗前1 d及化疗后15 d均检测T淋巴细胞含量。清晨空腹抽取静脉血2 mL，EDTA-2K抗凝，取患者新鲜抗凝血标本100 μL，放入样品测定管，加入相应的荧光标记单克隆抗体，振荡混匀，室温下避光孵育20～30 min，加入溶血素，溶血完毕后上机检测。采用流式细胞仪BD Facs calibur，上机获取10 000个淋巴细胞，对CD3+、CD4+、CD8+ T淋巴细胞的百分比进行检测分析。本次实验所有检测实行全过程质量控制。

1.3 统计学方法

采用SPSS 17.0统计学软件进行数据分析，计量资料数据用均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用独立样本t检验、配对t检验；以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

与对照组相比，消化道肿瘤患者化疗前CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比例均较低（P < 0.05），CD8+细胞百分比明显升高（P < 0.05），差异有统计学意义。消化道肿瘤患者化疗后CD3+、CD4+百分比和CD4+/CD8+比值较化疗前均增高，差异有统计学意义（P < 0.01或P < 0.05），CD8+降低，差异有统计学意义（P < 0.05）。见表1。

不同病理类型的肿瘤患者化疗前后T细胞亚群结果比较显示，结肠癌和胃癌患者化疗后CD3+、CD4+百分比较化疗前均增高（P < 0.05），CD8+降低（P < 0.05），差异均有统计学意义；直肠癌患者化疗后CD3+百分比较化疗前增高（P < 0.05），CD8+百分比降低（P < 0.05），差异均有统计学意义，化疗前后CD4+、CD4+/CD8+比值差异无统计学意义（P > 0.05）。见表2。

表1 消化道肿瘤患者化疗前后外周血T淋巴细胞亚群的表达（x±s）

注：与对照组比较，#P < 0.05；与化疗前比较，*P < 0.05，**P < 0.01

表2 不同病理类型消化道肿瘤患者化疗前后T细胞亚群比较（x±s）

注：与同类型化疗前比较，#P < 0.05，*P > 0.05

3 讨论

肿瘤与免疫的关系复杂，免疫功能低下或抑制均有可能导致肿瘤发生。外周血T细胞亚群是经研究证实能较好反映机体细胞免疫状态的指标。免疫学机制中，CD3+体现总细胞免疫状态。CD4+称为辅T淋巴细胞，和其他免疫细胞一起参与免疫应答，以达到抗肿瘤作用。文献报道[3-5]，CD3+、CD4+淋巴细胞减少会导致免疫功能低下。CD8+通过自身及抑制因子在免疫反应中起负向作用，抑制CD4+细胞和B细胞功能，从而抑制抗体形成及细胞免疫反应，CD8+细胞增多有利于肿瘤持续增长，而在肿瘤发展过程中又可诱导和激发CD8+细胞，进而促进肿瘤增殖。CD3+、CD4+细胞能促进效应细胞抗肿瘤作用，CD3+、CD8+细胞主要为抑制性T细胞，抑制机体免疫应答。研究证实，在肿瘤或其他疾病进展过程中，机体免疫功能常呈现紊乱，其中一个明显表现为T淋巴细胞亚群在数量上和功能上发生改变[6-7]。在消化道肿瘤形成中，由于肿瘤细胞会产生一些免疫抑制因子，使得CD4+减少，CD8+反应性增多；同时，由于增多的CD8+细胞可能是以抑制性T细胞（TS）居多，这变相对CD4+细胞产生一定抑制作用，使CD4+/CD8+比值下降。正常生理状态下，CD4+/CD8+处于相对稳定状态，实现机体细胞免疫功能稳定。若T细胞总数或CD4+/CD8+ T细胞比值发生异常时，反映机体正常T细胞亚群状态被打破，视为免疫调节紊乱，宿主免疫功能低下或受抑制，易发生肿瘤或自身免疫疾病，机体正常的免疫功能会发生变化，呈现下降趋势。

本研究结果显示，与对照组相比，消化道肿瘤患者化疗前CD3+、CD4+百分比较低（P < 0.05），CD8+较对照组升高（P < 0.05），差异有统计学意义。提示肿瘤患者确实存在免疫功能低下表现，与国内外报道相符[8-9]。而CD4+/CD8+比值明显下降，说明消化道肿瘤患者体内细胞免疫功能处于抑制状态，对识别和杀伤癌变细胞的能力下降，引起机体免疫平衡状态被打破。化疗后CD3+、CD4+较化疗前有所增高（P < 0.01），趋于正常，化疗后CD4+/CD8+比值较化疗前增高（P < 0.05），与文献报道相符[10-11]。提示消化道肿瘤患者体内免疫功能有不同程度的恢复[12]。CD4+/CD8+比值用于反映患者淋巴系统的机能状态，但目前对于肿瘤患者化疗效果、淋巴细胞亚群以及CD4+/CD8+并没有一个统一的参考标准。同时，不同肿瘤类型可导致T淋巴细胞亚群发生不同程度的改变，在临床中通过比较化疗前后淋巴细胞亚群变化情况，客观地反映机体的免疫状况，判断患者的病情进展以及评价疗效[13]。

本研究结果显示，直肠癌CD4+在化疗前后的变化不如结肠癌和胃癌CD4+在化疗前后的变化明显，说明直肠癌化疗对CD4+的影响不显著，这与部分文献报道[14]不符。探究其原因，可能由于本次研究病例中有部分患者已接受多周期化疗疗程，患者细胞免疫功能逐渐减低，且细胞活化能力较前减低，同时或许与患者T淋巴细胞水平、年龄有关，更与其选择的化疗方案，如FOLFOX4（奥沙利铂+5-氟尿嘧啶+亚叶酸钙）、FOLFRI（伊立替康+5-氟尿嘧啶+亚叶酸钙）或XELOX（奥沙利铂+卡培他滨）等方案的不同、疗程次数、疗程长短等因素有关。在不同病理类型的肿瘤患者中，化疗后CD4+/CD8+比值虽有增高，但直肠癌和胃癌化疗前和化疗后CD4+/CD8+的变化差异无统计学意义（P > 0.05），与部分文献报道不符[15-16]。究其原因主要为CD4+化疗前后变化值不明显所造成的。另外，消化道肿瘤患者外周血总T细胞CD3+、CD4+和CD4+/CD8+比值在化疗后均高于化疗前，提示化疗改变了体内的免疫状态，而T淋巴细胞增高提示化疗后肿瘤负荷减少，能一定程度恢复细胞免疫调控能力。

综上所述，通过检测消化道肿瘤患者T淋巴细胞亚群化疗前后的变化，对了解机体的免疫动态，有着重要的临床意义。同时，也为免疫调节治疗和免疫增强治疗提供理论依据。

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篇10

【关键词】 狼疮肾炎

关键词: 狼疮肾炎;淋巴细胞亚群;免疫球蛋白

摘 要:目的 探讨狼疮性肾炎（LN）患者外周血淋巴细胞亚群、活化状态和免疫球蛋白的变化及其相互关系. 方法 采用流式细胞仪和酶联检测仪对21例LN进行了研究. 结果 ①LN患者CD3+ +CD4+ （0.24±0.10），CD45RA+ （0.29±0.06），CD45RO+ （0.02±0.02），CD4+ +CD45RA+ （0.11±0.06），CD4+ CD45RO+ （0.05±0.04）细胞比例明显减少，与对照组（0.41±0.09，0.45±0.11，0.05±0.05，0.21±0.07，0.08±0.02）比较P

Keywords:lupus nephritis;lymphocyte subsets;immunglob-ulins

Abstract:AIM To investigate the distribution of activated state of lymphocyte in peripheral blood and levels of serum immunoglobulins in patients with lupus nephritis.METHODS The immunophenotype of peripheral blood lympho-cytes was analysed by flowcytometry with double-labeling an-ti-CD3，anti-CD4，anti-CD5，anti-CD19，anti-CD43，anti-CD45RA，anti-CD45RO，HLA-DR mAbs，while the levels of serum IgE，IgG，IgA，and IgM were detected by ELISA.The experimental groups were Group A（9cases with nephritic syndrome），Group B（12cases without nephritic syndrome）and control group（30cases of normal volunteers）.RESULTS ①The percentages of CD3+ +CD4+ （0.24±0.10），CD45RA+ （0.29±0.06），CD45RO+ （0.02±0.02），CD4+ +CD45RA+ （0.11±0.06），CD4+ +CD45RO+ （0.05±0.04）cells in LN patients were lower than those in normal volunteers（0.41±0.09，0.45±0.11，0.05±0.05，0.21±0.07，0.08±0.02）（P

+ （0.05±0.02）cells in LN patients were higher than those in normal volunteers（0.06±0.04，0.04±0.04，0.01±0.004，0.01±0.01）（P

0 引言

系统性红斑狼疮（SLE）是一种损伤多脏器的自身免疫性疾病，表现为多种自发抗体的产生和T淋巴细胞数量及功能异常［1，2］ .狼疮性肾炎（LN）免疫功能的紊乱与其不尽相同，我们应用流式细胞仪和酶联检测仪，对LN患者外周血淋巴细胞亚群活化状态及免疫球蛋白的变化及相互关系进行研究如下.

1 对象和方法

1.1 对象 我院1994-01/1999-12住院患者21例，均为女性，年龄19～44（27±9）岁.全部诊断符合1982年美国风湿协会修订的标准，且均处于活动期.根据有无肾病综合征（NS）表现分为NS组（9例）和非NS组（12例）.正常志愿者30例，均为女性，年龄25～49（33±8）岁.

1.2 方法 使用Ficoll（1077g・L-1 ）分离外周血单个核细胞，PBS洗涤2次，以2×1010 ・L-1 悬于PBS中，按文献［3］方法进行标记.所用的异硫氰酸荧光素（FITC）标记的mAb为CD4，CD19，HLA-DR，藻红蛋白（PE）标记的mAb为CD3，CD5，CD43，CD45RA，CD45RO，HLA-DR.以标记FITC的抗钥孔虫戚血蓝素mAb IgG2a和标记PE的抗钥孔虫戚血蓝素mAb IgG1处理细胞作为阴性对照.FACSort流式细胞仪读取数据，每个样本读5000～10000细胞.Cellquest软件分析.采用ELISA法检测血清IgE（试剂盒由天津新传生物技术有限公司提供），IgG，IgM，IgA水平，同时检测血尿素、血肌肝、血清白蛋白及24h尿蛋白排出量.

统计学处理:所有数值均采用x ±s表示，组间采用t检验分析.

2 结果

2.1 外周血淋巴细胞免疫分型 LN患者CD3+ +CD4+ ，CD45RA+ ，CD45RO+ ，CD4+ +CD45RA+ ，CD4+ +CD45RO+ 细胞比例明显减少（与对照组比较，P

表1 LN患者外周血淋巴细胞分布　略

2.2 外周血淋巴细胞活化状态 LN患者HLA-DR+ ，CD19+ +HLA-DR+ ，CD19+ +CD43+ ，CD19+ +CD5+ 细胞比例明显增高（与对照组比较，P

表2 LN患者外周血淋巴细胞活化状态　略

2.3 血清免疫球蛋白的变化 LN患者IgE水平明显升高（与对照组相比，NS组P

表3 LN患者血清免疫球蛋白水平　略

3 讨论

T淋巴细胞是参与机体免疫调节最重要的细胞群之一，其亚群之间相互协调作用维持着机体正常的免疫功能

［4］ .SLE是一种多系统、多脏器受累的自身免疫性疾病，存在着B细胞多克隆活化和T淋巴细胞的异常［1，2］ .而SLE患者外周血T淋巴细胞亚群的异常改变与LN患者并不相同［5］ .前者CD4+ /CD8+ 比值增高，而LN患者CD4+ /CD8+ 比值下降［5，6］ ，并且蛋白尿较重者CD4+ /CD8+ 比值下降更为明显.CD4+ 细胞有两种亚群，一种为CD4+ +CD45RO+ 细胞，它可作用于可溶性抗原，诱导B细胞分泌免疫球蛋白;另一种为CD4+ +CD45RA+ 细胞，可引起前CD8+ 抑制细胞转变成为CD8+ 效应抑制细胞.本结果显示LN患者CD45RA+ ，CD45RO+ ，CD4+ +CD45RA+ ，CD4+ +CD45RO+ 均降低，这可能与转化终止、中间型增加有关，有待于今后研究.作者等研究发现，伴有NS表现的LN患者CD4+ /CD8+ 比值下降较不伴有NS表现的LN患者更明显，且CD4+ /CD8+ 比值下降与CD4+ 凋亡增加有关［6］ ;活化的CD4+ 细胞减少可能是引起LN发病的原因［7］ .本结果提示，CD4+ +CD45RA+ ，CD4+ CD45RO+ 细胞减少可能是CD4+ 细胞减少另一个原因，但其真正原因目前尚无定论.

本结果显示，LN患者CD5+ 下降，CD19+ 升高，但与对照组相比P>0.05;HLA-DR+ ，CD19+ +HLADR+ ，CD19+ +CD43+ ，CD19+ +CD5+ 较对照组升高（P

参考文献:

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