乳铁蛋白十篇

时间:2023-04-11 08:34:07

乳铁蛋白

乳铁蛋白篇1

儿童吃乳铁蛋白对身体是有很大好处的。乳铁蛋白是母体中非特异免疫系统的重要成员之一,是母乳中的核心免疫蛋白。14公斤牛奶中仅提取1克,具有抗菌、抗病毒和调节机体免疫等功能,被誉为“健康的第一道防线”,对初生婴儿的营养需求和生产发育极其重要。秋冬之际,乳铁蛋白的重要性更加突出。乳铁蛋白是乳汁中一种重要的非血红素铁结合糖蛋白,中性粒细胞颗粒中具有杀菌活性的单体糖蛋白。而且乳铁蛋白还具有广谱抗菌作用,以及抗病毒的作用。

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乳铁蛋白篇2

关键词:乳铁蛋白 分离纯化 方法

中图分类号:S5 文献标识码:A 文章编号:1672-3791(2013)04(b)-0002-02

20世纪40年代,从乳清蛋白中分离得到了一种含Fe3+红色蛋白,作为血清铁结合传递蛋白(TF)的类似物,称之为乳铁蛋白(1actoferrin,Lf),又称乳转铁蛋白,主要存在于大多数哺乳动物乳汁中的铁结合糖蛋白。Lf分子量约为80000u,多肽链上有两条糖链,包括半乳糖甘露糖N一乙酞半乳糖胺、岩藻糖以及涎酸等。由于Lf具有一些非凡的生理功能作用,能够促进铁吸收、广谱抗菌、免疫增强、抗病毒、抗癌等,所以应用高新技术对Lf的进行分离、纯化和综合利用的研究,成为食品界和乳品行业关心的热点问题。

人们采用各种各样的方法来分离提纯Lf,例如盐析和有机溶剂法、超滤法、离子交换色谱法、亲和色谱法、吸附色谱法、固定化单克隆抗体法和混合模式扩张床吸附法等等。

1 盐析和有机溶剂法

根据蛋白等电点沉淀原理,Lf等电点为7.8~8.0,由于各种蛋白等电点范围交叉分布,所以很难将一种蛋白完全沉淀析出。曲练达等[1]用两次(NH4)2SO4和一次乙醇沉淀分离纯化Lf,纯度达45%左右。邬向东等[2]以饱和(NH4)2SO4盐析分离,经Sephadex G-100葡聚糖凝胶过柱纯化,并利用聚乙二醇浓缩获得了Lf。盐析法比色谱法简单,易于操作,且成本较低,但此方法得率低,产品纯度不高。但适用于保健品和食品添加剂等纯度要求不高的行业。

2 超滤法

根据膜孔径不同来实现不同分子质量和形状的大分子的分离。日本学者岛崎敬选用孔径分别为l0PS、30PS、50PS、l00PS、300PS、1000PS和3000PS的七种系列超滤膜膜,以干酪乳清为原料,先截留小分子量,再截留大分子量,其分子量分别为104、3×104、5×104、105、3×105、106、3×106,生产Lf基料的回收率为69%。卢蓉蓉等[3]用超滤法从初乳中初步分离得质量分数为26%的Lf粗品,虽适合大规模生产,但还无法提取高纯度的Lf。为强化传质和分离过程,Brisson等[4]在分离过程中添加了一个外加电场强化膜通量,降低膜污染,可用于组分复杂的料液。Ndiaye等[5]用电场强化的超滤膜过滤分离Lf,但其中含有β-乳球蛋白等杂蛋白,产品纯度不高,需进一步纯化。超滤法不加热或不发生相变,适合热敏性组分的分离。操作简便,费用相对较低,易于形成工业化规模,是生产食品用乳铁蛋白最具实现工业化潜力的方法之一。但纯度不如色谱法高,且膜孔堵塞需经常清洗,且不易清洗。

3 离子交换色谱法

3.1 传统离子交换色谱法

根据离子交换剂对不同离子或化合物的结合力不同实现物质分离,结合力的大小由离子交换剂决定。Grove使用DEAE纤维素阴离子交换树脂和磷脂纤维素交换色谱法分离出较纯的Lf。由Foley等[6]用羧甲基阳离子交换色谱法对此法加以改进,用pH值为7.7,浓度为0.05 mol/L磷酸钠或浓度为0.3 mol/L的NaCl洗脱液,把Lf分为a,b两种变异体,纯度为81%左右。树脂可用0.2 mol/LNaOH和0.2 mol/LHCI再生。徐丽萍[8]用Sephadex C-100柱,分别用含0.65 mol/LNaCl7.0,7.2,7.4和7.6的PBS缓冲液洗脱,得纯度为92%Lf。Maharjan等[7]用一种温度敏感型阳离子交换树脂,在50 ℃对Lf的最大吸附容量是20 ℃的3倍,通过调节温度选择性洗脱Lf。传统离子交换树脂虽然成本相对较低,但分辨率也较低,要得到高纯度的Lf需复杂分离工艺。

3.2 新型离子交换法

SPEC70SLS离子交换树脂是丙烯酸共聚合物,由一个AMPS(丙烯酰胺甲基-丙烷磺酸)多聚物和一个双功能试剂MBS(N,N-甲烷-双-丙烯酰胺)交联组成,拥有大孔通透性,能满足大面积表面接触和有效物质传送,实现蛋白的分离纯化,合成树脂可以数千次地重复使用。树脂吸附牛脱脂乳中的Lf可用330 mMNaCl洗脱,吸附容量为8.34 mg/g,纯度为96.7%,树脂对Lf的回收率为74.50%。SPEC70 SLS树脂被美国FDA认可为能与食品接触的物质,在工业化生产规模中具有巨大应用潜力。张振字等[9]采用强阳离子交换色谱梯度洗脱法,对牛乳中的乳铁蛋白进行分离和纯化。可较好地分离提取出乳铁蛋白,并利用SDS—PAGE定测分离出的乳铁蛋白显示为单一区带,每毫升牛乳能提取乳铁蛋白0.23 mg,纯度为95%。

4 亲和色谱法

4.1 传统亲合色谱法

Chen等[10]研究发现PGMA-肝磷脂超顺磁均匀分散微球能够高效的捕获酸乳清中的Lf,吸附量达164 mg/g树脂且纯度高于Lf标准品。亲合色谱法操作简单、分离效果非常好、获得的产品纯度极高,且没有生物活性损失,是生产医药用高纯度Lf最有效的方法之一,但是其操作成本昂贵。限制了其在工业化生产中的广泛应用。

4.2 新型亲和色谱法

一般结构是不容基质…连接物…隔离臂…连接物…配体,基质多用琼脂糖,隔离臂多为有一定长度且可连接基质的有机物如NH2—(CH2)n—NH2。林成招等[11]人用肝素琼脂糖色谱柱,填料为肝素与琼脂糖交联的产物。先用PBS洗脱至吸光值基线平稳后,分别用含0.1,0.3,0.5和1 mol/LNaCl的PBS洗柱,紫外分光光度计测得Lf纯度为90.02%。也可以首先从脱脂乳中萃取到神经节糖苷制成溶血衍生物,共价偶合于丁二酸化玻璃珠上,再利用固定化的神经节基质亲和吸附Lf,最后用缓冲液洗脱。此法可从廉价的乳清中大量制备Lf,方法简单,易于扩大规模可实现工业化。

5 吸附色谱法

利用固定基质和吸附物质问物理或化学吸附强度的不同来分离物质,使用颗粒状吸附剂的表面存在着许多随机分布的吸附位点,通过范德瓦尔引力和静电引力与蛋白质分子结合,其结合力大小与各种生物分子的结构和吸附剂的性质有关。一般以Toyopearl为基质,在(NH4)2SO4溶液中达到吸附平衡后装柱,用去离子水、0.25 mol/LHAc和0.2 mol/L NaOH洗脱,得到纯度为80%的Lf,其缺点是吸附容量小、效率低。傅维琦等[12]利用CM-SAPHAROSE FastFlow装柱,对脱脂牛初进行两步阶跃洗脱获得高纯度洗脱液,但此法成本较高,大大限制了分离工艺的工业化。

6 固定化单克隆抗体法

利用抗原-抗体之间的高特异性结合反应而实现目标物的分离。在6~8周的鼠腹中注入人或牛的乳铁蛋白进行免疫,经一系列分离出抗体,用抗体和异丙醇活化的亲合凝胶混合制得免疫亲合色谱。用脱脂牛初乳或常乳作为料液,用洗脱0.2 mol/LpH2.7醋酸缓冲液(含0.15 mol/LNaCI)洗脱,分离脱脂人初乳Lf纯度98%,分离脱脂牛乳Lf纯度97%。该法较成功的实现了Lf的一步分离,分离效果好纯度高,抗体被固定可重复使用,但是柱的制备工艺复杂,抗体成本昂贵,难以工业化生产。

7 混合模式扩张床吸附法

功能配基含有疏水和离子交换基团,兼具疏水和静电作用,通过静电相吸强化吸附或静电排斥协助解吸。同时配基密度比较高,有典型的耐盐吸附性,可以从较低浓度的体系中富集目标蛋白。将扩张床吸附和混合模式吸附层析有机结合充分发挥二者优势,实现混合模式扩张床吸附,达到低原料、高处理量和高选择性的分离目标。林东强等[14]采用混合模式扩张床吸附介质Streamline Direct HST的扩张床膨胀特性和流体混合性能好,膨胀率为2满足高处理量和床层稳定性的要求,该介质对Lf的吸附容量较大约为110 mg/g介质,具有一定的耐盐特性,采用pH值阶跃洗脱,20 mmol/LNaOH洗脱直接从牛乳清中得到Lf收率为87.8%。

8 各种分离技术综合运用

蒋超等[15]采用超滤、阳离子交换层析方法从干酪乳清中分离纯化乳铁蛋白。经预处理后的干酪乳清加入经过磷酸盐缓冲液(pH值为8.0)平衡的树脂中,分别用0.3 mol/L和0.8 mol/L的Nacl进行阶跃洗脱,纯度达93.6%。纪长谨等[16]试验通过等电沉淀、盐析和层析分离等方法从牛初乳中分离Lf,并用SDS-PAGE、Western Blot检测和鉴定,Lf其纯度>90%,方法简便、经济、安全,可用于工业化生产。

高纯度和高效的蛋白分离纯化需各种分离技术的结合,许多具体问题有待解决。总之随着高新技术的广泛应用,能够实现降低Lf的制造成本,完善工业化大规模生产和高效性的商品化工艺条件。

参考文献

[1] 曲练达,王术德,侯喜林,等.乳铁蛋白的分离纯化[J].黑龙江八一农垦大学学报,2006,18(3):61-63.

[2] 邬向东,李平华,陈如圣,等.牛初乳中乳铁蛋白的分离纯化及其抗菌活性研究[J].江西畜牧兽医杂志,2011,1:8-10.

[3] 卢蓉蓉,方民.预分离初乳中乳铁蛋白的超滤工艺[J].食品与生物技术,2002(1):67-70.

[4] Brisson,Q.Electrically-enhanced crossflow microfiltration forseparation of lactoferrin from whey protein mixtures.JMembrane Sci 2007:206-216,297.

[5] Ndiaye,N.Electroseparation of bovinelactoferrin from model and whey solutiOil5.Sep PurifTechnol 2010:74,93-99.

[6] Fee,C.J.Capture of laetoferrin and lactoperoxidase from raw whole milk bycation exchange chromatography.Sep PurifTechnol 48,1 43·1 49(2006).

[7] Maharjan,P.Development of a temperature-responsive agarose-based ion-exchange chromatographic resin.J ChromatogrA,2009:1216,8722-8729.

[8] 徐丽萍.牛初乳中乳铁蛋白的分离和纯化[J].食品工业科技,2007,3:170-171.

[9] 张振字,肖岚,王熙,等.牛乳中乳铁蛋白的分离纯化[J].食品研究与开发,2010,11:193-196.

[10] Chen,L.Isolation of lactoferrin from acid whey bymagnetic affinity separation.Sep PlfrTechnol,2007,56:168-174.

[11] 林成招.肝素亲和柱分离纯化乳铁蛋白[J].色谱,2003,7:434.

[12] 傅维琦,吴绵斌,陶银英,等.牛初乳中提取乳铁蛋白工艺的研究[J].浙江大学学报:工学版,2006,40(1):154—157.

[13] Hubbuch J J.Biochemical engi—neefing aspects of expanded bed adsorption [J].Ad—vanee inBiochemical Engineering,2005,92:101—123.

[14] 林东强,陈春琴,武元春,等.混合模式扩张床吸附从牛乳清中分离乳铁蛋白[J].浙江大学学报,2009,43(3):472-476.

乳铁蛋白篇3

关键词:粪乳铁蛋白,活动性UC,C反应蛋白

溃疡性结肠炎(UC)是一种病因尚不明确的累积直肠、结肠黏膜,甚至全结肠黏膜的慢性炎症性病变,可能与感染、免疫等多种因素有关[1]。临床肠镜等检查作为诊断依据,但较为痛苦,且有一定风险。乳铁蛋白作为一种肠道炎症的标记物,可以用来鉴别炎症性和非炎症性肠道疾病[2]。C反应蛋白(CRP)主要由肝脏产生的一种急性期蛋白,在炎症损伤后数小时即可升高。本文联合检测活动期UC患者中粪乳铁蛋白和CRP含量,旨在研究一种新的非侵入性筛选指标。

1. 资料与方法

1.1一般资料

   选取2007年7月至2010年12月在我院就诊的UC患者56例,其中男32例,女24例,平均年龄42.8岁,诊断依据临床表现、结肠镜及病理检查结果。通过sutherloud活动指数判断UC是否活动,≥2分为活动期,≤2分为缓解期。活动期患者38例,其中男23例,女15例。缓解期患者18例,其中男9例,女9例。患者均无慢性疾病史,无肝肾功能异常,无恶性肿瘤,无其它感染史,无急性出血,无吸烟史。同时选取50名健康体检者作为对照组,其中男28例,女22例,平均年龄43.5岁。与UC组比较,性别,年龄差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2检测方法

   粪乳铁蛋白采用Techlab公司生产的试剂盒,应用双抗体夹心法ELISA法和酶标法对粪乳铁蛋白进行定量定性检测。方法严格按照说明书操作。血清CRP采用比浊法测定,检测仪器为美国德灵公司生产的Dimension AR全自动生化分析仪。

   同时将CRP≥10 mg/L设定为阳性值,

1.3统计学方法

   采用SPSS11.0统计软件进行分析、计量资料采用t检验,计数资料采用X 2检验。

2.结果

2.1各组中粪乳铁蛋白与CRP测定结果

   活动期UC组中粪乳铁蛋白测定值为(730.53±50.28)ug/g,CRP测定值为(35.67±9.87)mg/L。缓解期UC组中粪乳铁蛋白测定值为(89.37±12.43)ug/g,CRP测定值为(8.75±2.82)mg/L。对照组粪乳铁蛋白测定值为(7.25±3.60)ug/g,CRP测定值为(3.96±1.07)mg/L。粪乳铁蛋白,CRP在活动期UC中明显升高,与缓解期UC,对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。缓解期UC患者粪乳铁蛋白与CRP含量也高于对照组(P<0.05)。

2.2 活动期UC患者在LF、CRP、LF+CRP阳性者中所占百分率比较

                         

3.讨论

  溃疡性结肠炎是一种病因不明的慢性非特异性炎症性肠病,诊断依据的肠镜检查是一种侵入性检查,往往会给患者带来痛苦和风险,而目前又缺乏敏感性高,特异性强的其他检查方法。乳铁蛋白(LF)是一种在嗜中性粒细胞内表达相对分子质量约80000的糖蛋白[3]。有研究显示,粪乳铁蛋白对活动性UC和CD诊断都有较高的敏感性和特异性[4]。戴军等[5]研究表明,UC和CD患者粪乳铁蛋白浓度分别≥324ug/g和240ug/g时,对活动性的诊断较敏感。我们研究结果,活动期和静止期UC患者间粪乳铁蛋白浓度差异显著,这与之前研究结果一致。CRP主要由肝组织产生的一种急性期蛋白,研究发现,CRP是冠心病,高血压,糖尿病,急性胰腺炎等独立危险因素之一。许多研究表明CRP与炎症性肠病临床活动程度、内镜表现活动性和组织学分级有明显的相关性[6]。本研究发现活动期UC患者中CRP水平比缓解期及对照组明显升高。同时本研究显示,粪乳铁蛋白诊断活动性UC的符合率为85.71%,CRP诊断活动性UC符合率为87.87%,两者结合检测诊断符合率为96%,明显优于单一检测。因此在UC患者临床诊治过程中,同时测定粪乳铁蛋白与CRP含量,不但方法简单,同时对UC患者的诊断,治疗和预后有重要指导意义。

参考文献:

1.Xavier RJ, Podoisky DK. Unravelling the pathogenesis of inflammatory bowel disease. J Nature, 2007,448(7152):427-434.

2.Guerrant RL, Araujo V, Soares E, et al. Measurement of fecal lactoferrin as a marker of fecal leukocytes. J Clin Microbiol.1992,30:1238-1242.

3.Levay PF, Viljoen M. Lactoferrin: a general review. Haematologica, 1995,80:256-267.

4.Hammer J, Talley NJ. Diagnostic criteria for the irritable bowel syndrome. J Med,1999,107:5-11.

乳铁蛋白篇4

乳铁蛋白(lactoferrin,LF)是一种存在于人体多种组织中的糖蛋白,具有抗细菌、真菌及病毒等特性,参与构成非特异性免疫系统,也是口腔唾液防御系统的重要组成部分[3-5]。LF可以通过干扰LPS引发的[专业提供写作论文和论文写作服务,欢迎您的光临dylw.net]TLR4免疫反应来抑制内毒素毒性,进而抑制炎症发展。抑制LPS激发的TLR4反应从而调控相关的炎症反应,是近年来研究炎症治疗方法的热点。本研究采用实时定量聚合酶链反应(real-time quan-titative polymerase chain reaction,RT-PCR)和细胞免疫荧光染色法,检测LF对LPS引发的牙周膜细胞TLR4表达的影响,以期了解LF在牙周炎免疫治疗方面的作用。

1 材料和方法

1.1 主要材料和设备

大肠杆菌LPS、Ⅰ型胶原酶、乳铁蛋白(Sigma公司,美国),胎牛血清、高糖DMEM细胞培养液(Hyclone公司,美国);RNAiso Plus(总RNA提取试剂),反转录试剂盒、RT-PCR试剂盒(Takara公司,日本);抗荧光衰减封片剂、山羊血清封闭液、4,6-联脒-2-苯基吲哚 (4’,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色液(武汉博士德生物工程有限公司);鼠抗人TLR4一抗(Abcam公司,英国),山羊抗小鼠二抗(Santa Cruz公司,美国);流式抗体CD29、CD90、CD105、CD44(eBioscience公司,美国);流式细胞仪(BD公司,美国);Real-time RQ RT-PCR仪(Applied Biosystems公司,美国);生物安全柜、离心机(Thermo Electron公司,美国);显微镜及照片获取系统(Olympus公司,日本)。

1.2 人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)分离培养和鉴定

1.2.1 hPDLCs分离和培养 取南方医科大学南方医院口腔科15~25岁因正畸减数拔除的志愿者牙周组织健康的前磨牙,牙齿拔出后立即置于含双抗的DMEM培养液中,低温转移至实验室,用含双抗的PBS冲洗3遍,无菌湿润条件下刮取根中1/3的牙周膜组织,剪成1 mm3大小的组织块,PBS冲洗并离心后加入200 μLⅠ型胶原酶,37 ℃培养箱内消化10 min,终止消化并离心后将组织块平整置于六孔板中,上盖无菌盖玻片,每孔加入2 mL含10%体积分数胎牛血清的DMEM培养液,37 ℃、5%CO2孵箱中培养。次日换液,以后每3 d换液,待细胞从组织块中爬出并铺满瓶底达80%时进行首次传代。

1.2.2 hPDLCs鉴定 1)Ⅰ、Ⅳ型胶原的PCR检测。取第3代生长良好的细胞,以1×106个·mL-1的密度接种于6孔板,常规培养24 h至细胞贴壁后,TRIzol法提取总RNA,并以此作为模板合成cDNA,以磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde phosphate dehydroge-nase,GAPDH)为内参,引物序列见表1。半定量PCR条件:95 ℃ 5 min, 95 ℃变性30 s,58 ℃退火30 s,68 ℃延伸45 s,共35个循环;68 ℃ 5 min,

4 ℃结束。取PCR产物2 μL用1.2%琼脂糖进行凝胶电泳(100 V,30 min),凝胶成像分析系统进行分析并拍照。2)流式细胞术检测细胞分子表型。取第3代hPDLCs,PBS洗2次,制成密度为1×106个·mL-1的单细胞悬液,分别加入小鼠抗人CD105、CD29、CD44、CD90单抗,室温孵育1 h;再次洗涤后分别加入羊抗鼠Ig-FITC,室温避光45 min;PBS洗涤3次,弃上清,PBS重悬,流式细胞仪检测细胞表面分子。

1.3 RT-PCR检测TLR4 mRNA的表达

取第4代生长良好的hPDLCs,以1×106个·mL-1接种于6孔板中,37 ℃、5%CO2、饱和湿度条件下培养24 h至贴壁后,弃原培养液,加入含1%双抗、10%胎牛血清的DMEM,随机分成空白对照组、LPS组、LPS+LF组。空白对照组不加任何刺激,且于0 h用TRIzol法提取总RNA,-80 ℃冻存备用;LPS组加入0.1 μg·mL-1 LPS;LPS+LF组在加入0.1 μg·mL-1 LPS 2 h后,加入10 μg·mL-1 LF。以加入LF时开始计算时间,4 h后用TRIzol 法提取总RNA。以各组总RNA为模板,用Takara逆转录试剂盒分别合成cDNA,引物由英潍捷基(上海)贸易有限公司合成,以β-actin为内参(引物序列见表1),然后进行RT-PCR。每组各取2 μL cDNA作为模板,按表1所列引物在ABI Prism 7500 Real-Time PCR System(Applied Biosystems公司,美国)检测系统中进行扩增,分别检测各组细胞中的TLR4 mRNA,以β-actin作为内参同时进行检测。 RT-PCR反应体系为:SYBR Premix Ex Taq(2×)10.0 μL,引物(10 mol·L-1)各0.8 μL,模板cDNA 2.0 μL,dH2O补足总体积至 20 μL;其中DNA聚合酶、PCR buffer、dNTP以及SYBR GreenⅠ均已事[专业提供写作论文和论文写作服务,欢迎您的光临dylw.net]先混合于商品化的SYBR Premix Ex Taq中。PCR优化反应条件为95 ℃ 30 s,95 ℃ 5 s,60 ℃ 34 s,95 ℃延伸15 s,循环40次。最后利用ABI Prism 7500 Real-Time PCR System联机软件进行Ct值相对定量分析。

1.4 细胞免疫荧光化学染色法检测TLR4蛋白的表达

将生长良好的第4代hPDLCs以5×104个·mL-1密度接种于每孔底部放有盖玻片的24孔培养板,加入适量DMEM培养液,37 ℃、5% CO2、饱和湿度条件下培养至贴壁并基本铺满盖玻片后,弃原培养液,分别加入800 μL含1%双抗、10%胎牛血清的DMEM,随机分成空白对照组、LPS组、LPS+LF组。空白对照组不加任何刺激;LPS组加入0.1 μg·mL-1 LPS;LPS+LF组加入0.1 μg·mL-1 LPS 2 h后,加入10 μg·mL-1 LF。以加入LF时开始计算时间,24 h后收集各组细胞爬片,按下列步骤操作:4%多聚甲醛固定10 min, PBS漂洗5 min,0.5%triton穿孔15 min,PBS漂洗2次各

5 min,1%牛血清白蛋白封闭30 min,加一抗4 ℃孵育过夜(各组分别取一张爬片以PBS代替一抗为阴性对照),PBS漂洗2次各5 min,加二抗37 ℃孵育1 h,PBS漂洗2次各5 min,5 μg·mL-1 DAPI染色2 min,甘油封片后用光学显微镜观察。利用多功能真彩色细胞图像分析管理系统对染色标本进行图像分析,每张爬片随机选择5个高倍视野(×400),用免疫组织化学十三点评分方法进行免疫评分[6],分别计算TLR4在各组的阳性细胞数分值与荧光强度分值乘积。

1.5 统计学分析

使用SPSS 13.0软件对所得数据进行单因素方差分析,RT-PCR结果两两比较用Dunnett T3检验,免疫荧光计分的比较用LSD检验,检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 hPDLCs的培养和鉴定

组织块酶消化法分离培养hPDLCs游出时间为5 d左右,且游出率和成活率较高。形态学观察:游出细胞多为梭形和星形,体积较小,核卵圆形且位于细胞质中央,为成纤维细胞样细胞(图1)。流式细胞仪分子表型检测显示:CD44、CD29、CD90和CD105标志的阳性细胞率分别为99.13%、98.17%、100%和78.21%,说明培养细胞为间充质来源。半定量PCR产物电泳结果见图2:Ⅰ型胶原阳性,Ⅳ型胶原阴性,此为牙周膜细胞特异性标记,证实培养细胞为牙周膜细胞。

2.2 LF对LPS激发的hPDLCs TLR4 mRNA表达的影响

RT-PCR检测结果显示:空白对照组、LPS组、LPS+LF组mRNA相对表达量分别为1.444±0.439、4.558±1.580、1.704±0.481。LPS刺激后hPDLCs的TLR4 mRNA表达增高;加入LF后,TLR4 mRNA表达下降;LF作用后TLR4 mRNA的表达与空白对照组无明显差异(P>0.05),但明显低于LPS刺激组(P<0.05)。

2.3 LF对LPS激发的hPDLCs TLR4蛋白表达的影响

hPDLCs爬片的免疫荧光染色结果显示:TLR4主要表达于细胞膜和细胞质中,阳性表达为绿色荧光,细胞核呈蓝色(图3);以PBS代替一抗的阴性对照组染色均为阴性,无任何刺激的空白对照组TLR4呈弱阳性表达(图3A),LPS刺激24 h后TLR4表达明显增强(图3B),加入LF后TLR4表达减弱(图3C)。免疫评分[专业提供写作论文和论文写作服务,欢迎您的光临dylw.net]结果:空白对照组、LPS组、LPS+LF组的评分分别为8.000±0.000、11.500±1.256、9.056±0.816;LPS+LF组与空白对照组相比无明显差异(P>0.05),与LPS组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。

3 讨论

Toll样受体信号通路是重要的炎症通路之一,其下游炎症信号的级联式反应往往会使疾病朝不良的方向发展。TLR4介导的炎症反应与牙周炎的发生发展有极为紧密的联系[7-8]。牙周炎的主要感染细菌为革兰阴性厌氧菌,LPS作为该类细菌的主要毒力因子,是炎症侵袭牙周组织的关键因素。TLR4通过PAMP识别LPS后,启动细胞内信号传导,诱发细胞炎症因子分泌[1-2],启动牙周炎症免疫反应,从而造成牙周组织破坏。

LF是口腔唾液防御系统中的重要组成部分。研究[9-10]证实:LF可减少口腔细菌如牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌等在牙周的吸附,阻止细菌破坏牙周组织。Drago-Serrano等[11]研究发现,LF与LPS的结合限制了LPS与细胞表面配体复合物的形成,可干扰Toll样受体通路的激活,起到免疫防御的作用。LF通过干扰LPS引发的TLR4免疫反应,可以抑制内毒素毒性,限制TLR4下游信号传导通路中核转录因子(nu-clear transcription factor kappa B,NF-κB)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis-factor receptor-associated factor-6,TRAF6)、核因子-κB 抑制蛋白(inhibitor of NF-κB-α,IκBα)和IκB激酶β(inhibitor kappa B kinase β,IKKβ)等因子的活性,从而抑制LPS引发的炎症损害[12-13]。这些研究结果均表明,LF对LPS引发的炎症有一定的抑制作用。

本研究结果显示:LPS刺激后,hPDLCs的TLR4表达明显升高,表明LPS激发了细胞的TLR4反应。这一结果与其他学者[14-15]的研究结果类似。本研究在LPS刺激2 h后加入LF,TLR4表达较LPS刺激组明显下降,说明LF对LPS激发的TLR4反应有抑制作用,提示LF在调控TLR4信号传导通路进行炎症治疗方面有一定的作用。Drago-Serrano等[11]证明,LF可以限制LPS引发的细胞TLR4通路反应,从而起到免疫防御作用;Inubushi等[13]则直接证明LF可通过干扰LPS引发的TLR4免疫反应抑制内毒素毒性,从而减少LPS引起[专业提供写作论文和论文写作服务,欢迎您的光临dylw.net]的骨吸收。这些研究结果预示LF可用于治疗牙周炎、关节炎等伴有骨缺损的炎症性疾病。本研究还发现,LF作用后hPDLCs的TLR4表达与空白对照组无明显差别,这意味着LF对TLR4的抑制作用并不会影响正常牙周膜细胞的TLR4表达。在正常牙周膜细胞中,TLR4的表达与牙周自身免疫防御功能有关,为达到炎症治疗的目的过度抑制TLR4表达会影响牙周膜细胞自身的免疫防御功能[16]。

通过调控TLR4炎症免疫通路来抑制LPS引发的炎症反应,是近年来炎症免疫治疗的研究热点。已有研究[17-18]证明,通过受体阻断剂或RNA干扰等方法可以抑制TLR4的表达和信号传导,在某些程度上可以控制LPS引发的炎症反应;然而,调控TLR4介导的炎症免疫传导通路可能会干扰细胞自身的免疫防御功能,引发新的问题。本研究结果证实,LF可以下调LPS引发的牙周膜细胞TLR4表达至正常水平,这对其在炎症治疗中的应用无疑有着积极的意义;但LF对牙周组织其他免疫防御功能是否有影响,还需进一步研究和探讨。此外,因为LPS引发的牙周炎症免疫通路及其信号转导较为复杂,各通路间存在一定的影响,因此LF对多通路共同作用下牙周炎症的调控作用还需进行大量的深入研究。

[参考文献]

乳铁蛋白篇5

临床资料

随机抽取2013年儿保体检中检出的缺铁性贫血16例,男9例、女7例,患病年龄6个月7例、9个月5例、12个月3例、2岁1例,均是轻度贫血,患儿体重评价达中上以上的有10例,有3例患过慢性腹泻消化不良、1例患过上呼吸道感染、其余为没有合理添加含铁丰富的辅食和偏食等喂养不当引起。均给予铁剂治疗、疗程3个月,并增加含铁、蛋白质及维生素C丰富的辅食如铁强化米粉、蛋黄、动物肝脏、瘦肉等治疗。结果,一个月复查时14例血红蛋白达到110g/L以上、2例因未按医嘱服用铁剂血红蛋白未达到110g/L,继续饮食和铁剂治疗至3个月均达到正常。下面举一例缺铁性贫血的病例来介绍我社区对缺铁性贫血的诊治和管理。

患儿 男 2012年7月11日出生 6个月到社区儿保门诊常规体检。既往史:5个月时腹泻一次。个人史:第一胎、第一产、单胎、足月顺产、出生体重3.1kg,满月体重4.5kg。喂养史:母乳和奶粉(非强化铁奶粉)、开始添加蛋黄3次、未添加强化铁米粉。查体:体重7.6kg、身长70cm、头围43cm、前囟1.5*1.5cm、精神可、口唇略苍白、余(-)。辅助检查:血红蛋白101g/L。初步诊断:轻度缺铁性贫血。根据儿保管理要求收体弱儿专案管理:给予琥珀酸亚铁和维生素C,并嘱继续母乳喂养,指导添加含铁、蛋白质、维生素C丰富的辅食如铁强化米粉、蛋黄、动物肝脏等。一个月后复查,患儿口唇红润、精神好,查血红蛋白121g/L, 说明铁剂治疗有效,诊断正确。继续饮食和铁剂治疗,2个月后复查血红蛋白124g/L稳定不降,及时给予结案,转为正常儿管理。

讨论:

1 引起缺铁性贫血的病因分析:

1.1 缺铁性贫血的高危发病年龄是6-24个月小儿。

1.2 母亲母乳不足、所补充的奶粉为非强化铁奶粉、添加含铁丰富的辅食不足等引起铁的摄入不足。

1. 3 患有慢性感染性疾病影响了铁的吸收或铁的丢失过多。

1. 4 婴儿体内储存的铁只能满足4个月内生长发育的需要,而4-6个月的宝宝,体重、身高增长迅速,对铁的需求量也高,未添加含铁丰富的辅食,易发生铁缺乏引起缺铁性贫血。

2 诊断标准:Hb降低,符合WHO儿童贫血诊断标准即6个月~6岁

3 缺铁性贫血的体弱儿专案管理方法:

3.1 喂养指导: 6个月以内的婴儿强调纯母乳喂养、母乳不足时添加铁强化配方奶粉,6个月以上及时添加含铁、蛋白质及维生素C丰富的辅食如铁强化米粉、蛋黄、动物肝脏、瘦肉等,添加维生素C丰富的蔬菜、水果等。乳母多吃含铁、蛋白质及维生素C丰富的食物如鱼肉蛋、动物肝脏、绿叶蔬菜水果等。

3.2 铁剂治疗:给予口服铁剂如琥珀酸亚铁、硫酸亚铁等铁剂和维生素C,两餐之间服药,有利于铁的吸收,铁剂治疗至少3个月。

3.3 定期随访。给予饮食和药物治疗1个月后复查、患儿症状体征消失、血红蛋白达110g/L以上、说明铁剂治疗有效,继续饮食和铁剂治疗2个月、复查血红蛋白稳定不降,及时给予结案、转为正常儿管理。如血红蛋白未达110g/L要查找原因或转上级医疗单位进一步检出。

4 对家长的健康教育指导:预防儿童缺铁性贫血主要应从饮食着手。

4.1 婴幼儿期:宣传母乳喂养与人工喂养相比所具有的优点,鼓励母乳喂养,指导喂养方法,强调6个月纯母乳喂养,适当增加哺乳期母亲铁的摄入,母乳中含铁质虽少一些,但人体吸收率高,可达50%-70%,母乳确实不足者应给予铁强化奶粉,及时添加含铁丰富的辅食(如铁强化米粉、蛋黄、鱼泥、肝泥、肉末、动物血等)。要重视培养婴儿从小喜欢吃蔬菜和水果的习惯,以获取足够的维生素C,增加食物中铁的吸收利用;纠正不良的饮食习惯,如强迫进食、引诱进食、挑食、偏食等。

4.2 对早产儿、低出生体重儿应早期(约2个月左右)给予铁剂预防。体重越小,补充时间宜越早。

乳铁蛋白篇6

哺乳期一般持续6个月以上,健康乳母在此期间,饮食应多样化,不能限制过多,必须兼顾乳母泌乳的营养需求以及对婴儿的影响。

乳汁质与量的关键:营养摄入

哺乳期妈妈的生理特点主要表现在基础代谢率高,一方面要逐步补偿妊娠和分娩时所损耗的营养素储存,促进器官和各系统功能的恢复,另一方面要分泌乳汁、哺育婴儿,因此科学合理地安排乳母膳食不仅与其产后身体恢复有关,还将通过乳汁质和量的变化影响婴儿的生长。

能量:

人乳的能量含量平均约为70千卡/100毫升,母体能量转化为乳汁能量的有效转化率为80%,因此乳母要合成1升的乳汁,约需900千卡的能量。妇女在正常妊娠条件下,脂肪储备可为泌乳提供约1/3的能量,其余2/3能量需要由膳食来提供。乳母每天需要增加的能量是500千卡。乳母摄入的能量是否充足,可根据母乳的量和母亲的体重来判断。

蛋白质:

乳母膳食中蛋白质的质和量不足时,乳汁分泌量将大为减少,并动用乳母组织蛋白以维持乳汁中蛋白质含量的恒定。哺乳妈妈应每天增加蛋白质摄入20克,约相当于1杯牛奶、1只鸡蛋和半盒豆腐的量。

脂肪:

膳食中脂肪的种类可影响乳汁中的必需脂肪酸的含量及组成,而婴儿神经系统和大脑的正常发育离不开必需脂肪酸的参与。在南方有些地方习惯月子里吃胡麻油,一方面可以促进子宫收缩、恢复身体,另一方面其丰富的亚麻酸,可以提高母乳中的DHA含量。

钙:

每日通过乳汁分泌损失钙约300毫克,当乳母膳食钙摄入量不足时,可消耗母体的钙储备以维持乳汁中钙含量的恒定,如不能及时补充,母体很可能发生骨质疏松。

铁:

不能通过乳腺输送到乳汁,增加乳母铁的摄入可以补充母体分娩时的消耗,矫正或预防乳母贫血状态。

维生素:

维生素A能部分通过乳腺,维生素D几乎完全不能通过,故婴儿必须多晒太阳或补充鱼肝油。水溶性维生素大多数能通过乳腺进入乳汁,特别是维生素B1还能促进乳汁分泌,但膳食中维生素B1转化为乳汁中维生素B1的转化率仅为50%,因此乳母维生素B1的需要量要高,乳母缺乏维生素B1时婴儿易患脚气病。

水分:

乳母摄入水分不足将直接影响乳汁的分泌量,乳母平均每日泌乳量为0.8升,每日应从食物及饮水中比成人多摄入约1升水。

10条乳母营养建议

1、膳食多样化、粗细粮搭配:主食不能只选择精白米面,应适当搭配些粗杂粮,如小米、燕麦、红小豆等。

2、蛋白质的摄入要充足,品种尽量丰富,蛋类100克,豆制品50~100克,鸡鸭肉鱼100~200克,以炖或煮为宜,食用时要同时喝汤,可促进乳汁分泌。

3、保证钙的摄入量,一天需补充1200毫克的钙,故产妇每天至少要喝250~500毫升牛奶,同时,要多吃海带、虾米、蟹类等含钙丰富的食品。

4、多选含铁丰富的食物,如瘦肉、动物肝脏、动物血等。

5、每日蔬菜量不少于500克、水果1~2个。蔬菜尽量选择颜色深的,以红绿色为主,这些蔬菜含有丰富的膳食纤维。

6、海产品应尽可能多吃,每周不少于1次。

7、少吃或不吃冰冷的食物,以免影响牙齿及消化系统功能。

8、少吃或不吃辛辣、刺激性大的食物:包括白酒、浓咖啡、很辣的辣椒,它们易造成胃肠充血、便秘以及婴儿的烦躁不安等。

9、饮食宜淡不宜咸,有利于产后体内水钠排泄,减轻心脏负担。

10、忌暴饮暴食,宜少食多餐:每日正常三餐之外,可适当加餐2~3次,以利机体对营养素的吸收利用。

未必科学的老习惯

1、蛋白多多益善。民间认为,产后气血大亏,需要大补大养,主张坐月子吃得越多越好,而且多半是鸡鸭鱼肉蛋和甜食。但是蛋白质并非越多越好,蛋白质过多会加重胃肠道负担,引起消化不良,同时蛋白质的分解代谢加重了肝脏的代谢负担,其代谢产物又需要肾脏的排泄,而过量的蛋白质食物也是造成肥胖的原因之一。因此蛋白质摄入要充足但不过量,保证均衡营养。

2、汤比肉、鱼有营养,光喝汤不吃肉、鱼。从营养学上讲,鸡汤、鱼汤、肉汤等汤类不仅味道鲜美,还能刺激胃液分泌,帮助消化,尤其是汤中还含有一定量的可溶性氨基酸、维生素和无机盐等营养成分。产妇的基础代谢比一般人高,容易出汗,又要分泌乳汁,所以需水量比一般人高,另外汤比较容易消化,营养素的摄取也比较完全,因此产妇多喝汤是有益的。但是溶解在汤里的蛋白质、维生素、矿物质等营养物质毕竟只有少数,主要还是存在于肉中,即使是号称原汁原味、较长时间煨的汤,其营养价值也远远不及原来的肉。建议肉和汤一起吃,既保证获得充足营养,又能保证乳汁分泌。

3、喝骨头汤补钙最好。众所周知产妇需要补钙,但最佳的办法并不是多喝骨头汤,骨头汤中虽含有钙,但量不多,补钙的最佳食品是奶和奶制品,以及豆与豆制品,它们不仅含钙多,吸收率也高,是天然钙的极好来源。

4、喝牛奶吃鸡蛋补铁。民间常说的贫血大部分是由缺铁引起的。产妇因为分娩失血,对铁的需要量大,若不及时补铁就容易发生缺铁性贫血。虽然牛奶含蛋白质、钙等很丰富,但含铁却很少;鸡蛋中含铁略高,但由于蛋黄中含卵黄高磷蛋白,会干扰铁的吸收。因此,仅吃鸡蛋、喝牛奶是不足以纠正贫血的。瘦肉类、动物肝脏和血不仅含铁丰富,而且铁的利用率也高,是补铁的最理想食物。同时还应多进食富含维生素C的新鲜蔬菜和水果,以促进铁的吸收。

5、产妇要多吃糖。在产褥期的前期多吃些高糖食物是有必要的,但在经过1~2周的调理后,再维持高糖饮食就不太合理了。因为我们所谓的高糖饮食,一般都是血糖指数较高的食物,或者在食物中直接加了红糖、白糖的食物,长时间的高糖饮食将导致体内脂肪的堆积、胆固醇的增高,脂肪肝与肥胖是其必然的结果。“坐月子”时可以多吃些糖,但不宜维持2周以上,期间与以后都应以淀粉为主。即使是红糖水也不是喝得越久越好,通常产后喝红糖水的时间以7-10天为宜。

6、经常喝茶水。多进汤汁固然可增加乳汁分泌,但茶叶中含有的鞣酸会影响肠道对铁的吸收,而且茶水中还含有咖啡因,产妇饮用茶水后不仅难以入睡,影响体力恢复,还可通过乳汁进入婴儿体内,导致突然无故地啼哭。

瘦身秘方是哺乳

产后最佳的瘦身秘方就是哺乳。因为哺乳妈妈比不哺乳者每天要多消耗500千卡热量,自然就较容易恢复产前的身材,而未哺乳者就只能靠额外的运动来消耗体内过剩的脂肪,并且有效的运动必须每周至少3次,每次30分钟以上,运动后心跳达130次以上,才有减肥效果。但是哺乳期减肥首先应保证不影响泌乳,在保证均衡膳食的基础上,根据自己的身高、体重适当增减食物量,同时要注意掌握好3条:一不吃甜食;二坚持适量运动;三保证每天不少于7小时的睡眠。另外,产后饮食最好是少食多餐,既不影响营养摄取,又有利于体型恢复、避免肥胖,还有利于保持乳量充足持久。

哺乳期食谱推荐

1、红菇炖乌鸡

原料:乌鸡1只、红菇150克、红枣50克、枸杞10克,盐、味精、料酒少许。

做法:红菇洗净去蒂,水中浸软,乌鸡洗净切块;锅中放油烧热,倒入鸡块炒片刻,加入红菇、红枣、枸杞,注入清水,烧沸后再小火炖1小时,菇烂鸡脱骨时调入味精、盐及料酒即可。

功效:补肝益肾,益气补血,养颜祛斑。本道食谱具有低脂肪、低胆固醇的特点,产后宜经常食用,对体形健美、美白养颜有益。

2、鲈鱼番茄汤

原料:鲈鱼500克、番茄100克、姜丝6克,清汤500克,料酒、盐、味精、白糖适量。

做法:鲈鱼去鳞、内脏,切成3段,番茄洗净切厚片;锅中下少量油烧热,放入姜丝爆香,放入鱼段,加入清汤、盐、料酒,煮熟时加味精、白糖、番茄片即可。

功效:养血健胃、养颜生肌、增加乳量

3、蛏干排骨汤

原料:蛏干50克、上排150克、海带50克

做法:蛏干泡软,海带洗净泡软切成长条,上排切块汆水。一同放入锅中,加姜片和适量清水,大火烧沸后,改小火煮40分钟,至海带烂熟,加入盐和味精调味。

功效:补虚滋阴、催奶养颜、润肠利湿、大增食欲。本道汤菜鲜美清香,含有丰富的碘、锌、硒等微量元素,产妇常食能使婴儿健壮活泼。

4、什锦鸡汤

原料:鸡1只,香菇6朵,黄花菜100克,胡萝卜80克

做法:鸡洗净切块,香菇及黄花菜洗净浸泡,胡萝卜洗净切长条,将其一起放入锅中,注水约1500毫升,淹过原料,加入姜片,煮至酥烂,加料酒、盐、味精,淋上麻油即可。

功效:黄花菜、胡萝卜、麻油、香菇均能有效润肠通便,还可通络催乳,适合产后常吃。

5、 芥菜虾米粥

原料:芥菜200克,虾米15克,糯米100克

乳铁蛋白篇7

妈妈们不禁要问:哺乳期如何增加饮食呢?又该增加哪些营养呢?

1. 补充热能

哺乳期妈妈们的营养除了满足自身的能量代谢需求外,还要供给泌乳过程中所消耗的能量,所以补充热能是非常必要的。羊肉、狗肉、桂圆、韭菜、核桃、小米等食物热量较高,能很好的补充身体的热量。

2.补充优质的蛋白质

妈妈对蛋白质摄入的多少对乳汁分泌的质与量有很大的影响,因为妈妈摄入的蛋白质会转换为乳汁中的蛋白,蛋白质的量越少,转换率就越低。因此建议妈妈每天应保证90克的蛋白质摄入,故应多食动物性食物,如牛奶和鸡蛋,特别是鸡蛋中含有高质量的蛋白质,仅次于母乳,是天然存在的最接近母乳的蛋白质,不过因为蛋黄中含胆固醇较高,所以妈妈每天吃蛋黄不要超过2个哦!而大豆及其制品也具有许多肉的“特质”,干豆中的蛋白质含量超过30%,且有利于身体的消化吸收与利用,所以也是补充优质蛋白质的一大原料。

3.补充脂肪

乳汁中的必需脂肪酸能促进婴儿神经系统的发育,所以妈妈补充脂肪也是必须的,而食用植物油则是最佳选择。

4.补充无机盐

无机盐即矿物质,钙、铁、锌、碘这四种物质是妈妈最需要补充的四种无机盐。

① 钙:钙参与形成婴儿的骨骼和牙齿,如果妈妈的饮食中钙的摄入不能满足需要, 乳腺就会从母亲的骨骼中吸取钙质, 来补充乳汁中的钙, 从而引起妈妈自身缺钙, 出现腰腿酸痛, 腿脚抽筋的现象,如果宝宝也有钙的缺乏, 将会得佝偻病,所以妈妈应多吃含钙丰富的食物,如牛奶(每日至少喝250~350ml)、虾皮、海带、小鱼干等海产品。

② 铁:铁的缺乏易引起贫血,由于妈妈在分娩过程中已经大量失血,所以哺乳期时更应补充铁质,应多食菠菜、肝、血制品来增加铁的摄取。

③ 锌:锌能促进宝宝的生长发育,增加食欲,锌缺乏时,宝宝会出现食欲不振, 生长发育迟缓,而食物中鱼、肉、海产品含锌较高,所以建议妈妈可多吃此类食品。

④ 碘:碘参与脑及神经细胞的发育,碘的缺乏可以造成宝宝的智力障碍,所以妈妈摄入碘的量既要满足自己的需要,也要满足宝宝的需要,海带和海产品都含有丰富的碘。

5.补充维生素

乳铁蛋白篇8

关键词:乳猪,生理特点,饲养管理

 

1.乳猪的生理特点

1.1调节体温能力差

仔猪出生时大脑皮层发育不够健全,通过神经系统调节体温的能力差。初生乳猪从母体带出来的营养少,以血糖为例,仅够维持乳猪数小时的需要,而且乳猪的体脂肪蓄存有限,不可能长时间为乳猪提供能量,在寒冷环境中又不能及时哺乳的情况下,乳猪很容易出现由于饥饿造成的死亡。

1.2缺乏先天免疫力

仔猪出生时没有先天免疫力,是因为免疫抗体是一种大分子球蛋白,胚胎期由于母体血管与胎儿脐带血管之间被6-7层组织隔开,限制了母体抗体通过血液向胎儿转移。因而仔猪出生时没有先天免疫力,自身也不能产生抗体。只有吃到初乳以后,靠初乳把母体的抗体传递给仔猪,以后过渡到自产抗体而获得免疫力。

1.3消化器官不发达,消化腺机能不完整

仔猪出生时胃内仅有凝乳酶,胃蛋白酶很少,由于胃底腺不发达,缺乏游离盐酸,胃蛋白酶没有活性,不能消化蛋白质,特别是植物性蛋白质。这时只有肠腺和胰腺发育比较完全,胰蛋白酶、肠淀粉酶和乳糖酶活性较高,食物主要在小肠内消化。所以,初生小猪只能吃乳,而不能利用植物性饲料。哺乳仔猪消化机能不完善的又一表现是,食物通过消化道的速度特别快,食物进入胃内排空的速度,15日龄时为1.5小时,30日龄时为3-5小时,60日龄时为16-19小时。

1.4生长速度快

乳猪生长快,是因为物质代谢旺盛,特别是蛋白质代谢和钙、磷代谢要比成年猪高得多。出生后20日龄时,每Kg体重沉积的蛋白质,相当于成年猪的30-35倍,每Kg体重所需代谢净能为成年猪的3倍。所以,仔猪对营养物质的需要,无论是在数量还是质量上,都高于成年猪,对营养不全的饲料反应特别敏感。因此,对仔猪必须保证各种营养物质的充足供应。

2.乳猪的饲养管理要点

乳猪饲养管理的目的,是根据乳猪的生长发育和生理特点,采取相应的饲养管理措施,提高哺育成活率和最大断奶窝重和断奶个体重,使仔猪安全渡过断奶关,以利于育成和育肥期正常生长发育。。下面介绍的是在乳猪饲养管理应该注意的要点。。

2.1做好防寒保温工作

乳猪舍应保持清洁干燥,保温区温度第一天保持32-35℃;第一周末27℃以上,以后每周下降2℃,直至适当温度断奶第一周29℃。应该强调指出的是春秋季节昼夜温差大,不要忽视了乳猪的晚间保温工作。保温方法有:A.保温灯,多采用250W的红外线灯在仔猪栏内供暖;B.睡床或电热板;C.用炒热的统糠放人麻袋内做成暖窝,让乳猪睡在上面可以保暖。

2.2断脐、剪齿与断尾

乳猪出生待脐带跳动微弱后,用手向脐方向挤回血液并握紧脐带,离脐孔4-5cm处钝性断脐。在仔猪齿乳前毛干后,剪掉8颗獠牙,以防仔猪咬伤母猪乳头。与此同时,进行断尾,并用2-5%的碘酒消毒脐部和尾部断端,以防感染。

2.3出生后尽快哺乳

乳猪应该尽早吃到足量的初乳。母猪在产后24小时内分泌的乳汁叫初乳,其中含有丰富的免疫球蛋白,这些免疫球蛋白被乳猪吸收进入到血液中去,在乳猪体内形成有效的抗病功能,所以在乳猪出生后尽快吃足初乳是提高乳猪抗病功能、减少乳猪死亡的关键。同时,母乳中含有大量的脂肪、糖和蛋白质,这些营养物质极其容易被乳猪消化吸收,对于处于饥饿状态下而且体内营养蓄存有限的乳猪来说,及时哺乳尤为重要。统计资料表明:死亡的出生乳猪中,15%左右的乳猪是由于未能及时获得母乳而出现低血糖死亡。

2.4应提供充足清洁的饮水

母乳当中的水不能完全满足乳猪生长的需要,从乳猪出生的第一天开始,就应该为乳猪提供大量清洁的饮水,在冬天应供给温水。水槽应保持清洁,并经常更换清洁的饮水,饮水充足可增大采食量,有助于消化吸收,在饮水加入复合维生素B,葡萄糖,还可调节胃肠机能,增加抵抗力。

2.5合理的补饲

应该抓好乳猪的早期补饲,科学的补饲可有效的降低断乳后腹泻的发生。

2.5.1补铁:铁是红细胞必不可少的组成部分,乳猪初生时从母体带来的铁非常有限,只能维持3-5天的生长需要,而母乳不能提供足够的铁来补充乳猪的生长需要。缺铁会造成乳猪的贫血,乳猪贫血表现为苍白、无力、皮毛杂乱、食欲不振、疾病抵抗能力差,最后发展成"僵猪"为了有效的防止乳猪缺铁,应该在乳猪出生后进行铁剂注射。注射可分为两次进行,一次在出生后的1-2天中,第二次在10-14日龄。常用的是右旋糖苷铁制剂,注射部位在颈部后侧皮下。

2.5.2补硒:在缺硒的地区,有效的补硒,可以预防白肌病的发生。

2.5.3补料:又叫抓开食过补料关,早期补料是提高乳猪断奶体重的关键步骤。母猪的泌乳量在14-20天达到高峰,以后逐渐下降,此时乳猪生长加快,对营养需求越来越高,这就形成了仔猪营养需要与母猪乳汁供应的矛盾。一般从初生后5-7天开始补料,使用专用乳猪颗粒料(要求营养全面丰富、适口性好、易消化,具有一定的抗菌能力,而且颗粒型乳猪喜欢采食。原料组成包括维生素、微量元素、氨基酸、乳清粉、优化鱼粉、酸化剂、香味剂、抗菌促生长剂、抗氧化剂、防霉剂、豆粕、玉米,后两者经过膨化处理效果更好)。仔猪补料,每隔2-3小时洒一次,原有剩料给母猪吃,补料时将仔猪全部关在补饲间中,让其先吃料再吃奶。对个别不吃的仔猪应人工协助,把料放入仔猪嘴中,作到循序渐进,少吃多餐,逐渐增加,以提高断奶体重。

2.6去势和驱虫

仔猪15-20日龄进行阉割去势,驱除体内外寄生虫,可采用阿(伊)维菌素口服法或敌百虫溶液喷雾法进行。

2.7断奶

断奶日龄一般在28-35日龄,一般在3-5天内完成断奶工作。断奶后5-6天内要控制仔猪采食量,以喂7-8成饱为宜,实行少喂多餐(一昼夜4-6次),逐渐过渡到自由采食。。

2.8免疫接种

根据国家的强制免疫计划和自己的防疫程序做好乳猪期免疫接种工作。

乳铁蛋白篇9

doi:103969/jissn1004-7484(x)201309657文章编号:1004-7484(2013)-09-5404-01

我院2012年调查了60名小儿营养性贫血患病情况。根据WHO缺铁性贫血的诊断标准,血红蛋白90g/L-110g/L(轻度贫血)53例;60g/L-90g/L(中度贫血)7例;60g/L-30g/L(重度贫血)0例。60例营养性缺铁性贫血患儿中,男32例,女28例;1个月至1岁33例,1岁至2岁27例;面色苍白53例,厌食偏食33例,异食癖2例,体质量不增l1例;早产儿6例,双胎2例;人工喂养15例,母乳喂养18例,混合喂养27例;慢性肠道疾病6例,发热2例,原因不明3例;临床表现为面色微黄,皮肤、黏膜苍白,以甲床、结膜及唇黏膜最为明显,食欲减退、疲乏无力、异食癖、烦躁不安或精神不振等。本调查结果,都是轻、中度贫血,未见重度贫血。

治疗结果:治愈48例,好转12例。轻度贫血患儿多为饮食结构不合理造成,在纠正饮食,添加辅食的基础上,给予铁剂治疗,1个月后复查血常规,45例血红蛋白达到正常,其余继续铁剂治疗3个月后,15例血红蛋白均达到正常。

在上述贫血患儿中,实验室检查,根据红细胞压积测定及红细胞指数计算,为低色素贫血,可认为是属于缺铁性贫血。但其中典型的小细胞低色素贫血1175%,这可能是由于本调查中仅有1909%的小儿血红蛋白低于100g/L。而缺铁性贫血时,血红蛋白低于100g/L,才会出现典型的小细胞低色素改变。分析发现大细胞低色素贫血占3493%,这些小儿临床上均无明显的大细胞贫血症状,可能属于混合性贫血。本调查用电子计算机处理10种与患贫血有关的因素,经逐步回归筛选,发现营养性贫血与喂养方式有关,牛乳喂养组患病率高于母乳喂养组,与国外报告一致。因此,建议提倡全母乳喂养,母乳喂养至六个月后,应添加辅食。还发现80%左右的小儿虽添加辅食,但所加辅食品种单调,多数只是满足于加鸡蛋。鸡蛋虽含铁较高,但吸收率低。而对含铁丰富而吸收率高的瘦肉食品类却重视不够,故应加强合理喂养知识的宣传普及。

通过分析还发现,营养发育良好的组,其贫血患病率高于营养发育中等的组。近年小儿体格发育状况已超过教科书所载水平,说明小儿生长发育越好,体重越大,如不能及时增加铁的摄入量,就容易发生相对性铁的缺乏。婴幼儿需要补充含铁量比较高的食物,才能维持生理的需要,如小儿膳食供给不足,食物搭配不合理是发生缺铁性贫血的重要原因,因此,我们认为除提倡全母乳喂养外,在生长发育快的小儿,还应适量添加铁强化食品以及一定剂量的铁剂,以预防缺铁性贫血的发生。

乳铁蛋白篇10

辅食类别1:维生素AD制剂

1.无论是母乳喂养还是人工喂养的婴儿,自出生后2~3周起,需每日给服维生素D约10微克(400国际单位)的预防剂量,可连续服用2~3年。

2.如婴儿采用配方乳喂哺,此乳已强化维生素A、D,可酌量减少剂量。

3.对早产儿、双多胎、冬春分娩的婴儿、北方阳光照射较差地区的婴儿,应尤其注意每日摄入的维生素D总量(包括各种维生素D强化食品中所含的量),应避免用量过大导致中毒。

4.由于瓶装滴剂开封后经常与空气接触,活性下降迅速,所以目前大多采用以软胶囊密封的维生素AD制剂,临喂前开封,活性维持较久。

5.如每日服用有困难,也可服维生素D2或D3,每月1次,每次5万国际单位,主要在冬、春季应用。

6.阳光充足的季节应多晒太阳,使其皮内的7-脱氢胆固醇得到紫外线照射自制维生素D供婴儿所需,避免发生佝偻病。

辅食类别2:果汁和菜水

1.维生素C不能在体内大量储存,如果不持续供给,容易出现缺乏。

2.牛奶及其制品含维生素C极少(除配方乳强化外),而人乳中维生素C含量相对较高,但是也随母亲的维C摄入量而定,容易发生不足。

3.婴儿自满月起,需添加果汁和菜水。可以挤出新鲜柑橘汁、番茄汁、山楂汁等以及绿黄色蔬菜水,进行喂哺。每日1~2次,每次从10毫升(约1汤匙)开始,渐渐增至30~60毫升,6~7个月后可增加到120~150毫升。

4.开始喂食时,可用温开水稍加稀释,待习惯后可喂原汁。

5.果汁制法:新鲜水果洗净,去皮、核,或者无皮水果洗净、消毒后,用挤汁器或粉碎打浆器将果肉打碎、挤汁、去渣,将汁倒入奶瓶中喂或用小匙喂、用杯喝。

6.菜水制法:取洗净的嫩菜叶,摘好后盛满一饭碗,放入沸水滚至5分钟后,用匙略挤压菜叶出汁混入水中,去渣,即成菜水,可喂婴儿。

辅食类别3:谷类或淀粉食品

6个月以前

1.婴儿以乳汁为主食,可在哺乳后添喂少量米糊(以不影响母乳量为标准),而6个月后谷类辅食可代替1~2次乳类。

2.此时婴儿食物已渐多样化,蛋、奶、鱼、肝、菜等食物可以加入粥、面中喂食,以保证足够的能量、蛋白质、维生素和矿物质。

6~7个月起

1.可让婴儿试食馒头干片、烤面包片或松脆的饼干,这样可以促进乳牙萌出,并可训练婴儿用手抓取自喂,学习咀嚼、吞咽固体食品。

2.米、面不宜去麸皮过多、打磨太细,以免损失维生素B族,影响营养价值。

3.对于稍大婴儿,米面制品中还可加入小米粉或大豆粉等,以增加维生素、矿物质及蛋白质含量,使之更有营养。

辅食类别4:富含蛋白质及铁锌等食物

4个月起

1.足月新生儿的肝脏中存有多量铁,至5~6个月时逐渐告竭,须自满4个月起授以富含铁质的食品。

2.动物血、蛋黄及鱼类可提供铁、锌等微量元素,动物血含铁质较多且为血红素铁,易被人体消化吸收。

3.可将鸡、鸭血或猪、牛、羊血蒸熟,切末加入粥、面内喂;或单独切成丝、末煮成羹,与米粉、粥、面同食。

4.禽蛋黄中含铁及维生素A、B、D族及维生素E、卵磷脂,都是婴儿十分需要的营养素。初食时,煮熟整个蛋,取出蛋黄研成细末,取1/4个喂起;先单独喂食,如无不良反应,可混入粥、面中同喂,逐渐增至1个。

5.鱼肉虽含铁不多,但吸收率高,同时可提供优质蛋白质以及矿物质、铁、锌等,故不失为小婴儿良好的辅助食物;且鱼肉细嫩,易为婴儿食用,有利于消化,可较早选用。

7~8个月

1.婴儿7~8个月时可渐渐喂食全蛋(蒸蛋羹)、鱼肉、鸡鸭肉、肝泥(鸡、鸭肝较猪肝细嫩,易消化)、豆腐、红豆或绿豆泥等食物;母乳喂养儿也应尝试奶粉或牛乳,以补充蛋白质的不足。

2.有的婴儿可对鸡蛋清或别的动物蛋白质发生过敏,虽属少见,但也应预防,所以通常先尝试蛋黄,再尝试蛋白。

3.待食至1个蛋黄后,可加少量蛋清试喂,再逐渐增加至适量。6~7个月婴儿可喂食蒸蛋羹,每日1个鸡蛋。

4.肝类所含的营养素十分丰富,尤其是铁及维生素A、B族含量超过一般动物蛋白。

5.肝泥制法:禽肝或猪肝洗净、煮熟,切捣成泥;或将洗净的生猪肝快刀切成断面,用刀刮下断面上肝浆,置于沸水中煮熟,然后捣压成泥食用。

6.鸡鸭肉或猪、牛肉切成的细肉末,营养较为丰富,可于婴儿7~8个月开始喂食,从少量至适量(约1~1.5汤匙),也可混入粥、面中进食。

7.若为母乳喂养儿做断乳准备,可在8~9个月时试喂奶粉或牛乳,每天1~2次,逐渐增量,使婴儿习惯喝奶粉或牛乳;并且可用杯喂,不用奶瓶。

辅食类别5:蔬菜和水果

1.各类蔬菜和水果中含有丰富的维生素、矿物质和膳食纤维,都是婴儿需要的营养素。

2.小婴儿可加喂果汁和菜水。

3.满4个月后可加食菜泥,从细到粗;可取有色蔬菜(例如青菜、菠菜、苋菜、胡萝卜、番茄、南瓜、土豆等)洗净、去皮、切碎,在沸水中滚煮3~5分钟取出,捣烂成细泥喂食给婴儿。

4.初食每次1/2茶匙,逐渐增至每日1~2汤匙。

5.先单喂,后可加入到米糊、粥面中同食;习惯几种蔬菜后,也可制成混合蔬菜泥。

6.待婴儿乳牙长出后,可喂粗菜泥或碎菜。

7.婴儿大便中可见到菜叶残渣,属正常现象,仍可继续喂食。