牛耳枫与辣蓼提取物研究论文

1材料与仪器

1.1试药肠胃康颗粒剂（海口市制药厂生产，批号060709，规格：每袋袋装8g）；牛耳枫与辣蓼提取物(NLWE)（黑色粉末，自制，每克样品相当于原生药10.0g）；阿司匹林肠溶片（昆明云健制药有限公司生产，批号20060320，规格25mg）；硫酸阿托品注射液（天津药业集团新郑股份有限公司生产，批号0601181，规格：2ml∶1mg）；伊文思蓝（中国医药集团上海试剂公司生产，批号20030714，规格1.0g）；乙酰胆碱（Ach）（上海三爱思试剂有限公司生产，批号20030620，规格：1）；氯化钡（BaCl2）（广州化学试剂厂生产，批号040503-2，规格500g）。

1.2动物昆明种小鼠，体重18~22g，合格证号2006A070；Wistar大鼠，体重180~220g，合格证号2006A07；豚鼠，体重250~300g，合格证号2006A067。以上动物均由中山大学实验动物中心提供。适应环境一周，自由饮水进食。

1.3仪器YLS-6B智能热板仪（山东省医学科学院设备站）；BL-420E生物机能实验系统（成都泰盟科技有限公司）；ZH-Z型离体器官测量系统（安徽省淮北正华生物仪器设备有限公司）；UV22401PC紫外分光光度计(日本岛津)；分析电子天平（北京瑞利，精度0.1mg）。

1.4统计学方法本实验数据结果均以±s表示,剂量资料比较，采用t检验，统计软件为SPSS13.0。

2方法及结果［1，2］

2.1对醋酸致小鼠毛细血管通透性增加的影响实验方法：取50只昆明种小鼠，体重18~20g，雌雄各半，随机分为5组(n=10)，正常对照组：灌胃(ig)给予等容生理盐水；肠胃康颗粒阳性对照组10.0g·kg-1ig；阿司匹林阳性对照组0.2g·kg-1ig；牛耳枫与辣蓼提取物剂量为生药20.0和10.0g·kg-1ig高、低剂量组（以下简称提取物高、低剂量组）。各组动物按0.5ml/20g体重给药，每天分别给药1次,连续给药3d，末次给药后0.5h，各鼠尾静脉注射0.5%伊文思兰盐水溶液0.1ml/10g随即腹腔注射醋酸溶液0.2ml/只，20min后处死动物，轻揉腹部1min吸取4ml冲洗液，于3000r/min离心10min，取上清液于610nm处比色测定吸光度，记录A值，计算抑制率，进行组间比较。结果见表1。

抑制率(%)=(对照组A-给药组A)/对照组A×100%

结果表明：牛耳枫与辣蓼提取物高剂量、提取物低剂量组、阿司匹林组均对醋酸诱导的小鼠腹腔毛细血管通透性增高有显著抑制作用（P<0.01），肠胃康颗粒组对醋酸诱导的小鼠腹腔毛细血管通透性增高无抑制作用。

表1肠胃康颗粒及提取物对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响（略）

与正常对照组比较,△P<0.01,△△P>0.05；n=10

2.2对热板所致小鼠疼痛的影响［3］实验方法：筛选痛阈值为5~30s之间的雌性昆明小鼠75只，体重18~20g，随机分成5组（n=15），正常对照组，肠胃康颗粒阳性对照组，阿司匹林阳性对照组，牛耳枫与辣蓼提取物剂量高、低剂量组。各组动物给药方法，给药途径及剂量均同“2.1”项，每天分别给药1次，连续给药3d后，末次给药后15，30，60，90，120min用热板法测量痛阈值。结果见表2。

表2肠胃康颗粒及提取物对热板法所致小鼠疼痛的影响（略）

与自身药前痛阈比较,**P<0.01,*P>0.05

结果表明，正常对照组实验过程中无变化，阿司匹林组90minP<0.05，均值大于自身给药前痛阈值；而其他组，P>0.05或P<0.05但其平均痛阈值均小于自身给药前痛阈值。结果显示，除阿司匹林外，其他组受试药均无镇痛作用。

2.3对离体豚鼠回肠平滑肌的影响［4，5］取豚鼠，按常规法制备离体回肠标本，标本置于18ml盛有台氏液的浴槽中，通氧，(38.0±0.5)℃恒温，张力负荷1g，用记录仪描记运动曲线，平衡30min，稳定后加入0.1ml0.1%Ach，记录收缩高度；随后用台氏液清洗回肠及浴槽两次，5min后注入0.5ml10%牛耳枫与辣蓼提取物高剂量溶液，30s后，再注入0.1%0.1mlAch，记录反应高度，用台氏液清洗浴槽两次，更换回肠，按照以上方法进行多次实验，记录数据作为一组数据值。随后将牛耳枫与辣蓼提取物低剂量溶液0.5ml组、26%肠胃康颗粒溶液0.5ml组及0.05%阿托品0.05ml组，按以上实验同法操作。对0.6ml1%BaCl2组所致豚鼠回肠收缩的影响，亦按上述方法进行实验操作，记录实验结果，进行组间比较，计算抑制率。结果见表3~4。

抑制率（%）=（给药前收缩幅度-给药后收缩幅度）/给药前收缩幅度×100%

表3肠胃康颗粒及提取物对豚鼠回肠平滑肌的作用（略）

与BaCl2比较,*P<0.001;与提取物高剂量组比较,#P>0.05；n=10

表4肠胃康颗粒及提取物对豚鼠回肠平滑肌的作用（略）

与Ach比较,#P>0.05,*P<0.001；n=10

结果表明：肠胃康颗粒、提取物高剂量、提取物低剂量皆对BaCl2引起的肠痉挛有明显的解痉作用（P<0.001），提取物高剂量组、提取物低剂量组作用结果无明显差别（P>0.05），颗粒组亦无明显差别，对乙酰胆碱引起的肠痉挛均无解痉作用。

2.4对乙醇致胃粘膜损伤的作用［6，7］取40只Wistar大鼠随机分为4组(n=10)，雌雄各半,正常对照组，灌胃(ig)给予等容生理盐水；肠胃康颗粒阳性对照组10.0g·kg-1ig；牛耳枫与辣蓼提取物剂量为生药5.0g和10.0g·kg-1ig剂量组。各组动物按2ml/200g体重给药，每天分别给药1次，连续给药3d，禁食48h，最后1次给药后1h灌胃95%乙醇1ml，正常饮水，1h后处死大鼠，结扎贲门和幽门，取出注入5ml生理盐水，于10%甲醛溶液中固定10min，沿胃大弯剪开冲洗观察结果。计算腺胃部出现溃疡点的数目及测量溃疡长度，依据GUTH法计算胃黏膜损伤指数，(每个出血点计1分，糜烂计2分，溃疡长度小于1mm计3分，大于1mm小于2mm计4分，长度在2mm以上计5分)将计分相加即为该只动物的溃疡指数，比较组间差异并计算出溃疡抑制率。结果见表5。

抑制率（%）=（空白对照组溃疡指数-药物治疗组溃疡指数）空白对照组溃疡指数×100%

表5肠胃康颗粒及提取物抗乙醇引起胃粘膜损伤的作用（略）

与正常对照组比较，*P<0.05；与提取物高剂量组比较，#P>0.05；与肠胃康颗粒组比较，△P<0.05；n=10

结果表明，各组与空白组比较均有效（P<0.05），但肠胃康颗粒组效果最好。而且提取物高低剂量组作用结果无明显差别（P>0.05），与肠胃康颗粒比较差别较大（P<0.05）。

3讨论

本实验结果表明，牛耳枫与辣蓼提取物具有降低毛细血管通透性、解痉及抗乙醇引起的胃粘膜损伤作用，但无镇痛作用，可用于急性胃肠炎的治疗。

Ach是胆碱受体激动剂，激动胃肠道平滑肌上的M胆碱受体，可引起平滑肌收缩。阿托品是胆碱受体阻断药，通过阻断M受体而拮抗Ach对平滑肌的收缩作用。离体豚鼠回肠实验结果显示，NLWE对Ach引起的肠痉挛则无解痉作用，提示其无阻断M受体的作用。Ca2+在介导平滑肌收缩反应中起核心作用，平滑肌收缩通过兴奋-收缩偶联过程而实现［8］。BaCl2是通过释放细胞内的Ca2+而引起肠管平滑肌痉挛［9］。NLWE对BaCl2引起的肠痉挛有明显的解痉作用，提示其具有钙拮抗作用。因此，可以推测NLWE是通过拮抗Ca2+而不是通过阻断M胆碱受体来起到解痉作用的。

【参考文献】

［1］姚干，何宗玉，方泰惠.芩栀胶囊抗炎、镇痛和解热作用的实验研究［J］.中成药,2006,28(5):694.

［2］陈奇.中药药理研究方法学，第二版［M］.北京：人民卫生出版社,2006:300.

［3］徐叔云，卞如廉，陈修.药理实验方法学［M］.北京：人民卫生出版社，2002：886.

［4］陈奇.中药药理研究方法学，第一版［M］.北京：人民卫生出版社,2000：442.

［5］陶勇,肖玉秀,石米扬,等.连钱草乙醇提取物对豚鼠离体肠平滑肌和小鼠肠运动功能的影响［J］.中国医院药学杂志,2004,24(2)：65.

［6］杨苹,马世平.复方丹蒲汤抗实验性胃溃疡的作用［J］.中成药,2006,28,(3)：391.

［7］谢秀琼.中药制剂开发与应用［M］.北京：人民卫生出版社,2000：441.

【摘要】目的研究牛耳枫与辣蓼提取物的抗急性胃肠炎的作用。方法采用冰醋酸致小鼠毛细血管通透性法、热板法、豚鼠回肠平滑肌运动法和95%乙醇致大鼠胃溃疡法来观察提取物的抗炎、镇痛、解痉和抗胃溃疡作用。结果牛耳枫与辣蓼提取物对醋酸诱导的小鼠腹腔毛细血管通透性增高有显著抑制作用（P<0.01），而无镇痛作用，对BaCl2引起的肠痉挛有明显的解痉作用（P<0.001），对乙酰胆碱引起的肠痉挛无解痉作用，同时具有减小95%乙醇对大鼠胃粘膜损伤的作用。结论牛耳枫与辣蓼提取物具有很好的抗炎、解痉及抗乙醇引起的胃粘膜损伤作用，对胃肠道有很好的保护作用。

【关键词】牛耳枫辣蓼提取物抗炎镇痛解痉