抗肿瘤范文10篇

抗肿瘤范文篇1

【关键词】肿瘤血管抑制因子综述

近年来中药或有效成分抑制肿瘤血管生成研究非常活跃,也具有明显的广度和深度。

1中草药研究动态

1.1去甲斑蝥素范跃祖等观察了去甲斑蝥素(NCTD)对胆囊癌肿瘤血管生成的抑制作用及其机制NCTD可有效抑制、破坏胆囊癌肿瘤血管生成,进而抑制胆囊癌的增殖与生长。其机制可能与NCTD诱导血管内皮细胞凋亡、直接破坏血管内皮细胞、改变血管内皮细胞PCNA/凋亡比、下调血管生成因子VEGF、Ang2和上调血管抑制因子TSP、TIMP2表达有关［1］。

1.2小檗碱小檗碱(berberine)为黄连(毛茛科植物)、黄柏等(芸香科植物)植物的一种生物碱,作为抗菌药已有悠久的历史。初步研究表明它在体内、体外对多种肿瘤细胞具有较强的抑制和杀伤作用［2］。娄金丽等研究小檗碱对bFGF活化人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响,探讨其对肿瘤新生血管形成作用的机制。方法:MTT法检测小檗碱对bFGF活化HUVEC的增殖作用;流式细胞仪检测用药后细胞周期的变化;激光共聚焦扫描显微镜下观察药物对细胞形态、细胞内钙的影响;流式细胞仪检测小檗碱对细胞凋亡的作用。结果:小檗碱能明显抑制bFGF活化的HUVEC增殖,且存在剂量依赖关系;使细胞在G0G1期的比例明显增多;使细胞核浓缩、甚至裂解成碎块,同时使细胞内钙增多;并诱导活化HUVEC发生细胞凋亡。结论:小檗碱可能通过将bFGF活化的HUVEC细胞周期阻滞在G0G1期,抑制活化HUVEC的增殖;诱导活化HUVEC细胞发生凋亡等机制,阻止新生血管形成,发挥其抗肿瘤作用［3］。

1.3白藜芦醇白藜芦醇是广泛存在于葡萄、花生和多种药用植物中的一种多酚类化合物，目前至少已经在21个科，31个属的72种植物中发现了白藜芦醇。早期研究发现，白藜芦醇具有保护心血管，调节血脂、抗病原微生物、护肝等多种生物学作用。自从Jang等于1997年系统报道了白藜芦醇的抗肿瘤作用后，迄今已发现白藜芦醇能通过多种途径抑制肿瘤细胞的起始，促进，发展三个阶段，而且可以抑制肿瘤血管形成。1.对内皮细胞的作用，能够直接抑制血管内皮细胞的增生，迁移及诱导其凋亡，从而抑制血管的生成。2.对血管生长因子及受体的调控，可以通过下调各种血管生成促进因子及受体的水平，近而抑制血管的形成。3.对基质金属蛋白酶（MMP）的影响，白藜芦醇能够直接抑制MMP2的表达及活性，同时体外实验发现白藜芦直接抑制HUVEC细胞分泌MMP2溶解明胶的活性，从而抑制细胞的生长，管形的形成.4.抗凝作用，研究表明，白藜芦醇可以通过抗凝作用阻止血管的生成。5.对黏附分子的影响，白藜芦醇抑制肿瘤坏死因子（TNF）激活的人HUVEC和人单核细胞产生ICAM1及VCAM1，降低细胞之间的黏附能力。6.对环氧化酶的影响，白藜芦醇使肿瘤组织环氧化酶2（COX2）MRNA的表达减少，从而抑制肿瘤的血管的形成。7.对INOS的影响，研究表明白藜芦醇通过抑制巨噬细胞中脂多糖诱导的NFKB而减少胞质蛋白稳定的MRNA水平［4］。

1.4姜黄姜黄主要活性成分是姜黄色素和挥发油,具有抗炎、抗氧化、降血脂和抗肿瘤等多种作用。近年来,姜黄活性成分的抗肿瘤作用引起了广泛关注。姜黄素、脱甲氧基姜黄素和双脱甲氧基姜黄素是姜黄中的三种主要色素,混称姜黄色素。李剑明等研究证明，3种姜黄色素单体能够抑制内皮细胞生长,表明抑制血管生成是其抗肿瘤的主要机制之一［5］。

1.5逆癌酮以往研究发现丹参酮具有抗肿瘤作用。逆癌酮是以丹参酮为主要成分的中药制剂。作者以逆癌酮对A549细胞系和PLA801D细胞系恶性表型的逆转作用研究结果表明,在体外状态下,逆癌酮可下调肿瘤细胞VEGF、CD44V6的表达水平,上调PLA801D细胞的nm23H1的表达水平。提示逆癌酮有抗肿瘤血管生成效应［6］。

1.6海参实验研究证实,海参的活性成分具有抗凝血、抗肿瘤、增加免疫力及抗病毒等作用。胡人杰等发现海参与可的松合用有极为明显的抑瘤增效作用。肝素与可的松合用具有肿瘤血管生成抑制作用,而海参的化学结构、生物活性与肝素有相似之处,故推测海参与可的松合用能抑制肿瘤血管生成［7］

1.7乌三颗粒乌三颗粒主要功效为益气养阴、软坚散结。石锦萍等进行了乌三颗粒对肿瘤新生血管形成干预的研究。作者采用免疫组化染色法、病理彩色图像定量分析法,对小鼠S180肉瘤组织进行了MVD、VEGF、bFGF表达的检测。结果显示,乌三颗粒能明显下调MVD、VEGF、bFGF的表达,表明乌三颗粒对肿瘤血管生成有明显的干预作用,这可能是乌三颗粒抗肿瘤的重要机制之一［8］。

中国论文联盟-1.8人参皂苷Rg3人参皂苷Rg3是中药人参中的四环三萜皂苷,其分子式为C24H72O13。研究表明,人参皂苷Rg3体外对小鼠腹水肝癌细胞(MM1)、黑素瘤B16FE7细胞、人小细胞肺癌细胞(OC10)和人胰腺癌细胞(PSN1)的浸润具有较强的抑制作用。人参皂苷Rg3对高转移性小鼠黑素瘤B16FE7细胞肺转移及Balb/C小鼠结肠癌细胞肺转移具有抑制作用。其抗肿瘤转移机制与其抑制肿瘤细胞浸润、黏附和抗血管生成的活性有关［9］。中国论文联盟

1.9大豆异黄酮选用人乳腺癌细胞株MCF7裸鼠异种移植,探讨大豆异黄酮及其主要有效成分金雀黄素对人乳腺癌细胞裸鼠移植瘤生长及其血管生成的影响,通过观测移植瘤的重量、出瘤时间、成瘤率,同时,应用免疫组化技术观察MVD。结果显示,肿瘤组织内可见形态不规则,且无明显管腔的新生血管,血管分布以肿瘤组织的边缘处为多见,各组微血管计数金雀黄素组最少,出瘤时间及成瘤率各治疗组都明显减少,以金雀黄素组最为明显,其次是高黄酮组和低黄酮组。根据实验可以看出,大豆异黄酮的主要有效成分金雀黄素能减少肿瘤血管生成,从而抑制裸鼠移植瘤在体内生长［10］。

1.10鲨鱼软骨提取物近10年来,不同的实验室从不同的鲨鱼软骨中获得了相对分子量大小不一、生物活性也有差异的鲨鱼软骨血管生成抑制因子(SCAIF)。它们都具有抑制血管生成的生物活性和对荷瘤小鼠的确切抑瘤效果。2000年和2001年,有学者从我国沿海鲸鲨软骨中提取分离子两种高度纯化了的血管生成抑制因子SCAIF1和SCAIF80,它们对内皮细胞的增殖与迁移具有显著抑制活性。对鸡胚尿囊膜血管生成也有明显抑制作用,并且均呈剂量依赖关系［11］。

2结语

综上所述，笔者认为:“血瘀”←→血管内皮细胞损伤←→血管内皮细胞增殖←→肿瘤血管生成，这其中存在着互为影响的内在联系。活血化瘀药物通过修复血管内皮细胞损伤,抑制其增殖,可能有效改善组织缺血缺氧的"血瘀"状态,而消除肿瘤新生血管生成的条件,在血管形成前期阻断肿瘤病变进一步向恶性发展。加强活血化瘀与恶性肿瘤血管生成调节因子关系的研究,对明确不同类型的活血化瘀治疗肿瘤的适应证,筛选更具针对性和有效性的抗肿瘤血管生成的活血化瘀方药,探索活血化瘀治疗恶性肿瘤的机制等都具有较大的意义和指导作用。

【参考文献】

［1］范跃祖，陈春球，赵泽明，孙伟.去甲斑蝥素对胆囊癌肿瘤血管生成的作用及机制研究［J］.中华医学杂志，2006，86（10），693699.

［2］TrapeJ，BuxoJ，DeOlaguerJP.Serumconcentrationsofvascularendothelialgrowthfactorinadvancednonsmallcelllangcancer［J］.ClinChem，2003，49(3)：523524.

［3］娄金丽.小檗碱抗肿瘤新生血管形成作用机制的研究［J］.中国免疫学杂志，2006，22（3），235236，243.

［4］曾文涛，白藜芦醇抗肿瘤血管生成机制［J］.国际肿瘤学杂志，2006，33（12）：918921.

［5］李剑明,杨和平,刘松青.3种姜黄色素单体抑制人内皮细胞作用的实验研究［J］.重庆医学，2002，31(9)：804.

［6］秦建军,周清华,袁淑兰.逆癌酮对人肺癌恶性表型的逆转作用［J］.实用癌症杂志，2002，17(5)：463.

［7］聂卫,王士贤.海参的药理作用及临床研究进展［J］.天津医学，2002，14(1)：12.

［8］石锦萍,杨红,周毅,等.乌三颗粒对肿瘤新生血管形成的干预作用及机制研究［J］.中药药理与临床，2003，1(1)：22.

［9］高勇,王杰军,许青.人参皂苷Rg3抑制肿瘤新生血管形成的研究［J］.第二军医大学学报，2001，22(21)：40.

抗肿瘤范文篇2

【关键词】冬凌草冬凌草素抗癌

冬凌草Rabdosiarubescensvar.taihangensis，又名冰凌草。冰凌花、雪花草，因其植株冬季凝结薄如蝉翼、形态各异的蝶状冰凌片而得名。

冬凌草系唇形科香茶莱属植物碎米桠的变种，曾被收入1977年版《中国药典》，并编人《全国中草药汇编》。其对冬凌草的一般描述为：味苦、甘，性微寒。功能清热解毒，活血止痛。主治咽喉肿痛、扁桃体炎、感冒、头痛、气管炎、慢性肝炎、关节风湿痛、蛇虫咬伤。而近年来经过多家研究单位多学科的综合研究发现，冬凌草全株对食管癌、贲门癌、乳腺癌、直肠癌、白血病等有缓解症状并延长生存时间的作用，冬凌草重新受到重视，被称为“中华神草”。检索文献发现，关于冬凌草的文章有半数是关于其抗肿瘤作用的研究报道，有体外实验也有临床观察的实例。现报道如下。

1冬凌草抗肿瘤体外实验研究

张俊峰等［1，2］通过实验证明冬凌草甲素能抑制人肝癌细胞BEL-7402和白血病原代细胞的生长及诱导细胞发生凋亡，而且呈现出明显的量-效与时-效关系；刘加军等［3～7］以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的NB4细胞、白血病HL-60细胞株、白血病K562细胞、U937细胞，MTT法检测细胞生长抑制率，结果表明冬凌草甲素能抑制细胞的生长并诱导细胞发生凋亡；王洪琦等［8］通过小鼠灌胃给药实验表明冬凌草提取物可以使腹水肝癌H22细胞大量坏死和凋亡；刘艳秋等［9］研究冬凌草甲素促进人淋巴瘤细胞U937分化的巨噬细胞吞噬凋亡小体的机制。肖大江等［10］通过观察发现冬凌草甲素对人鼻咽癌细胞系CNE细胞生长有明显的抑制作用，且抑制率均随着浓度的增加而增加。薛宏伟等［11］探讨发现冬凌草甲素(RuA)对人胆囊癌细胞株(GBC-SD)有诱导凋亡的统计学显著作用；刘明月等［12］观察了冬凌草甲素体外诱导人结肠癌HCT8细胞凋亡的作用，且凋亡率随着浓度的增加而增加；张春玲等［13］研究了冬凌草甲素诱导人黑色素瘤A375-S2细胞凋亡的作用，发现其作用呈明显的量效关系和时间依赖性；张守伟等［14］研究复方冬凌草甲素对肺癌SPCA-l细胞株的体外抗肿瘤作用，以不同浓度的复方冬凌草甲素作用于体外培养的SPCA-l细胞，检测不同药物浓度对细胞端粒酶活性的影响，在普通及倒置显微镜下观察细胞生长状态，结果不同浓度的药物作用一定时间后均可诱导细胞发生凋亡，流式细胞仪的检测表明细胞凋亡率在一定范围内随作用时间的延长而增加。杨胜利等［15］探讨发现，冬凌草甲素具有明显的抗DNA突变作用。

2冬凌草抗肿瘤临床实验研究

徐培元等［16］通过临床实验观察发现冬凌草液热疗对预防浅表性膀胱移行细胞癌术后复发的效果可靠，复发率降至5%以下。车新平等［17］用冬凌草液腔内热灌注治疗腺性膀胱炎92例，治愈率77%；管仪周等［18］的研究表明，冬凌草素注射液对缩小肝癌瘤体、缓解症状、提高患者生活质量有比较满意的疗效。李登宝等［19］通过与健康对照组进行比较发现冬凌草液膀胱腔内热疗可以提高膀胱癌患者的免疫功能。王瑞林等［20］观察了437例食管癌患者的临床治疗效果。陈绍棠等［21］观察了鲁山冬凌草治疗食管、贲门癌的80个病例，结果是完全缓解（X线钡餐食管摄片及体检见肿瘤完全消退，维持＞1个月）3例，部分缓解（摄片及体检见肿瘤缩小50%，维特＞1个月）4例，有效（肿瘤缩小＜50%，维持＞1个月）24例，总有效率38.8%。王瑞等［22］观察了加热冬凌草液膀胱灌注预防膀胱肿瘤复发的临床疗效，结果40个病例，未复发38例，复发2例。陆灿红等［23］在残留白血病的中医治疗中、张申英［24］在30例贲门癌中医治疗复方中都应用了冬凌草，疗效满意。

3讨论

由以上的论述可以看出，冬凌草对食管癌、贲门癌、乳腺癌、直肠癌、白血病等多种肿瘤具有抑制作用，陈美芳［25］在其食道癌的中医防治中、苏同义等［26］在防治食管贲门癌研究近况中、韩锐［27］在抗癌中草药研究进展中都无一例外地论述了冬凌草的价值，因此，冬凌草是一种很好的有待进一步研究开发的抗肿瘤植物资源。

【参考文献】

［1］张俊峰,陈规划,陆敏强.冬凌草甲素对人肝癌BEL-7402细胞的增殖抑制作用及其作用机制［J］.中成药，2006,28(9)：1325.

［2］张俊峰,刘加军,陈规划.冬凌草甲素对急性白血病原代细胞的增殖抑制作用［J］.热带医学杂志，2006,6(3)：256.

［3］刘加军,陆惠玲,黄仁魏.冬凌草甲素对白血病NB4细胞的生长抑制作用［J］.中药新药与临床药理，2004,15(6)：384.

［4］刘加军,黄仁魏,潘祥林.冬凌草甲素对白血病HL-60细胞的诱导凋亡作用及其作用机制［J］.中成药，2004,26(12)：1027

［5］刘加军,潘祥林,伍新尧.冬凌草甲素诱导白血病K562细胞凋亡的机制［J］.肿瘤研究与临床，2003,15(4)：222.

［6］刘加军,伍新尧,潘祥林.γ-干扰素联合冬凌草甲素对白血病U937细胞的增生抑制作用［J］.白血病·淋巴瘤，2003,12(6)：342.

［7］王筠,刘清芸.冬凌草甲素诱导HL-60细胞凋亡［J］.中国药理学通报，2001,17(4)：402.

［8］王洪琦,崔娜娟,胡玲.清热解毒和补益中药对小鼠腹水肝癌H22细胞的作用及免疫学机制比较［J］.广州中医药大学学报，2006,23(2)：156.

［9］刘艳秋,游松,田代真一.冬凌草甲素通过激活ERK途径诱导U937细胞凋亡［J］.中国中药杂志，2005,30(23)：1856.

［10］肖大江,朱国臣,王晓岚.田基黄、冬凌草甲素对人鼻咽癌细胞系CNE细胞毒作用的研究［J］.齐齐哈尔医学院学报，2005,26(12)：1396.

［11］薛宏伟,潘祥麟,杨尚军.冬凌草甲素诱导GBC-SD细胞凋亡及表达的影响［J］.山东大学学报：医学版，2005,43(4)：336.

［12］刘明月,范魁生,樊青霞.冬凌草甲素诱导结肠癌细胞凋亡的实验研究［J］.河南肿瘤学杂志，2004,17(3)：167.

［13］张春玲,吴立军,左海军.冬凌草甲素通过改变Bax/Bcl-xL表达激活caspase-3诱导A375-S2细胞凋亡［J］.中国药理学通报，2004,20(6)：669.

抗肿瘤范文篇3

1.1去甲斑蝥素范跃祖等观察了去甲斑蝥素(NCTD)对胆囊癌肿瘤血管生成的抑制作用及其机制NCTD可有效抑制、破坏胆囊癌肿瘤血管生成,进而抑制胆囊癌的增殖与生长。其机制可能与NCTD诱导血管内皮细胞凋亡、直接破坏血管内皮细胞、改变血管内皮细胞PCNA/凋亡比、下调血管生成因子VEGF、Ang2和上调血管抑制因子TSP、TIMP2表达有关［1］。

1.2小檗碱小檗碱(berberine)为黄连(毛茛科植物)、黄柏等(芸香科植物)植物的一种生物碱,作为抗菌药已有悠久的历史。初步研究表明它在体内、体外对多种肿瘤细胞具有较强的抑制和杀伤作用［2］。娄金丽等研究小檗碱对bFGF活化人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响,探讨其对肿瘤新生血管形成作用的机制。方法:MTT法检测小檗碱对bFGF活化HUVEC的增殖作用;流式细胞仪检测用药后细胞周期的变化;激光共聚焦扫描显微镜下观察药物对细胞形态、细胞内钙的影响;流式细胞仪检测小檗碱对细胞凋亡的作用。结果:小檗碱能明显抑制bFGF活化的HUVEC增殖,且存在剂量依赖关系;使细胞在G0G1期的比例明显增多;使细胞核浓缩、甚至裂解成碎块,同时使细胞内钙增多;并诱导活化HUVEC发生细胞凋亡。结论:小檗碱可能通过将bFGF活化的HUVEC细胞周期阻滞在G0G1期,抑制活化HUVEC的增殖;诱导活化HUVEC细胞发生凋亡等机制,阻止新生血管形成,发挥其抗肿瘤作用［3］。

1.3白藜芦醇白藜芦醇是广泛存在于葡萄、花生和多种药用植物中的一种多酚类化合物，目前至少已经在21个科，31个属的72种植物中发现了白藜芦醇。早期研究发现，白藜芦醇具有保护心血管，调节血脂、抗病原微生物、护肝等多种生物学作用。自从Jang等于1997年系统报道了白藜芦醇的抗肿瘤作用后，迄今已发现白藜芦醇能通过多种途径抑制肿瘤细胞的起始，促进，发展三个阶段，而且可以抑制肿瘤血管形成。1.对内皮细胞的作用，能够直接抑制血管内皮细胞的增生，迁移及诱导其凋亡，从而抑制血管的生成。2.对血管生长因子及受体的调控，可以通过下调各种血管生成促进因子及受体的水平，近而抑制血管的形成。3.对基质金属蛋白酶（MMP）的影响，白藜芦醇能够直接抑制MMP2的表达及活性，同时体外实验发现白藜芦直接抑制HUVEC细胞分泌MMP2溶解明胶的活性，从而抑制细胞的生长，管形的形成.4.抗凝作用，研究表明，白藜芦醇可以通过抗凝作用阻止血管的生成。5.对黏附分子的影响，白藜芦醇抑制肿瘤坏死因子（TNF）激活的人HUVEC和人单核细胞产生ICAM1及VCAM1，降低细胞之间的黏附能力。6.对环氧化酶的影响，白藜芦醇使肿瘤组织环氧化酶2（COX2）MRNA的表达减少，从而抑制肿瘤的血管的形成。7.对INOS的影响，研究表明白藜芦醇通过抑制巨噬细胞中脂多糖诱导的NFKB而减少胞质蛋白稳定的MRNA水平［4］。

1.4姜黄姜黄主要活性成分是姜黄色素和挥发油,具有抗炎、抗氧化、降血脂和抗肿瘤等多种作用。近年来,姜黄活性成分的抗肿瘤作用引起了广泛关注。姜黄素、脱甲氧基姜黄素和双脱甲氧基姜黄素是姜黄中的三种主要色素,混称姜黄色素。李剑明等研究证明，3种姜黄色素单体能够抑制内皮细胞生长,表明抑制血管生成是其抗肿瘤的主要机制之一［5］。

1.5逆癌酮以往研究发现丹参酮具有抗肿瘤作用。逆癌酮是以丹参酮为主要成分的中药制剂。作者以逆癌酮对A549细胞系和PLA801D细胞系恶性表型的逆转作用研究结果表明,在体外状态下,逆癌酮可下调肿瘤细胞VEGF、CD44V6的表达水平,上调PLA801D细胞的nm23H1的表达水平。提示逆癌酮有抗肿瘤血管生成效应［6］。

1.6海参实验研究证实,海参的活性成分具有抗凝血、抗肿瘤、增加免疫力及抗病毒等作用。胡人杰等发现海参与可的松合用有极为明显的抑瘤增效作用。肝素与可的松合用具有肿瘤血管生成抑制作用,而海参的化学结构、生物活性与肝素有相似之处,故推测海参与可的松合用能抑制肿瘤血管生成［7］

1.7乌三颗粒乌三颗粒主要功效为益气养阴、软坚散结。石锦萍等进行了乌三颗粒对肿瘤新生血管形成干预的研究。作者采用免疫组化染色法、病理彩色图像定量分析法,对小鼠S180肉瘤组织进行了MVD、VEGF、bFGF表达的检测。结果显示,乌三颗粒能明显下调MVD、VEGF、bFGF的表达,表明乌三颗粒对肿瘤血管生成有明显的干预作用,这可能是乌三颗粒抗肿瘤的重要机制之一［8］。

1.8人参皂苷Rg3人参皂苷Rg3是中药人参中的四环三萜皂苷,其分子式为C24H72O13。研究表明,人参皂苷Rg3体外对小鼠腹水肝癌细胞(MM1)、黑素瘤B16FE7细胞、人小细胞肺癌细胞(OC10)和人胰腺癌细胞(PSN1)的浸润具有较强的抑制作用。人参皂苷Rg3对高转移性小鼠黑素瘤B16FE7细胞肺转移及Balb/C小鼠结肠癌细胞肺转移具有抑制作用。其抗肿瘤转移机制与其抑制肿瘤细胞浸润、黏附和抗血管生成的活性有关［9］。

1.9大豆异黄酮选用人乳腺癌细胞株MCF7裸鼠异种移植,探讨大豆异黄酮及其主要有效成分金雀黄素对人乳腺癌细胞裸鼠移植瘤生长及其血管生成的影响,通过观测移植瘤的重量、出瘤时间、成瘤率,同时,应用免疫组化技术观察MVD。结果显示,肿瘤组织内可见形态不规则,且无明显管腔的新生血管,血管分布以肿瘤组织的边缘处为多见,各组微血管计数金雀黄素组最少,出瘤时间及成瘤率各治疗组都明显减少,以金雀黄素组最为明显,其次是高黄酮组和低黄酮组。根据实验可以看出,大豆异黄酮的主要有效成分金雀黄素能减少肿瘤血管生成,从而抑制裸鼠移植瘤在体内生长［10］。

1.10鲨鱼软骨提取物近10年来,不同的实验室从不同的鲨鱼软骨中获得了相对分子量大小不一、生物活性也有差异的鲨鱼软骨血管生成抑制因子(SCAIF)。它们都具有抑制血管生成的生物活性和对荷瘤小鼠的确切抑瘤效果。2000年和2001年,有学者从我国沿海鲸鲨软骨中提取分离子两种高度纯化了的血管生成抑制因子SCAIF1和SCAIF80,它们对内皮细胞的增殖与迁移具有显著抑制活性。对鸡胚尿囊膜血管生成也有明显抑制作用,并且均呈剂量依赖关系［11］。

2结语

综上所述，笔者认为:“血瘀”←→血管内皮细胞损伤←→血管内皮细胞增殖←→肿瘤血管生成，这其中存在着互为影响的内在联系。活血化瘀药物通过修复血管内皮细胞损伤,抑制其增殖,可能有效改善组织缺血缺氧的"血瘀"状态,而消除肿瘤新生血管生成的条件,在血管形成前期阻断肿瘤病变进一步向恶性发展。加强活血化瘀与恶性肿瘤血管生成调节因子关系的研究,对明确不同类型的活血化瘀治疗肿瘤的适应证,筛选更具针对性和有效性的抗肿瘤血管生成的活血化瘀方药,探索活血化瘀治疗恶性肿瘤的机制等都具有较大的意义和指导作用。

【参考文献】

［1］范跃祖，陈春球，赵泽明，孙伟.去甲斑蝥素对胆囊癌肿瘤血管生成的作用及机制研究［J］.中华医学杂志，2006，86（10），693699.

［2］TrapeJ，BuxoJ，DeOlaguerJP.Serumconcentrationsofvascularendothelialgrowthfactorinadvancednonsmallcelllangcancer［J］.ClinChem，2003，49(3)：523524.

［3］娄金丽.小檗碱抗肿瘤新生血管形成作用机制的研究［J］.中国免疫学杂志，2006，22（3），235236，243.

［4］曾文涛，白藜芦醇抗肿瘤血管生成机制［J］.国际肿瘤学杂志，2006，33（12）：918921.

［5］李剑明,杨和平,刘松青.3种姜黄色素单体抑制人内皮细胞作用的实验研究［J］.重庆医学，2002，31(9)：804.

［6］秦建军,周清华,袁淑兰.逆癌酮对人肺癌恶性表型的逆转作用［J］.实用癌症杂志，2002，17(5)：463.

［7］聂卫,王士贤.海参的药理作用及临床研究进展［J］.天津医学，2002，14(1)：12.

［8］石锦萍,杨红,周毅,等.乌三颗粒对肿瘤新生血管形成的干预作用及机制研究［J］.中药药理与临床，2003，1(1)：22.

［9］高勇,王杰军,许青.人参皂苷Rg3抑制肿瘤新生血管形成的研究［J］.第二军医大学学报，2001，22(21)：40.

［10］河福金.大豆异黄酮抑制裸鼠移植瘤生长及其血管生成的实验研究［J］.中国药理学报,2003，19(1)：73.

［11］贾福星,沈先荣.鲨鱼软骨血管生成因子的研究发展［J］.解放军药学学报，2000，18(1)：34.

抗肿瘤范文篇4

1免疫增强作用

肿瘤的发生和发展与整个机体的免疫功能减退密切相关。临床观察表明，免疫功能活跃的肿瘤病人比免疫功能低下的病人预后好；保持免疫记忆反应能力的病人比失去免疫记忆反应能力的病人预后好。实验研究表明，某些中药能保护或提高机体的免疫功能，如地黄多糖可提高S180荷瘤小鼠脾脏T淋巴细胞的增殖能力，并可较长时间维持在较高水平，也能部分阻碍瘤株对脾脏NK细胞活力的抑制作用，相对改善荷瘤小鼠由于肿瘤而引起的IL-2分泌能力下降，显著提高CTL细胞活力，从而发挥抗肿瘤免疫效应（1）。杨传标（2）等报道中药健脾康复汤（党参、白术、茯苓、薏苡仁、卷柏、仙鹤草等）治疗大肠癌脾虚证，能增强患者免疫功能，治疗后自然杀伤（NK）细胞活性及T细胞亚群活性明显增强，同时临床症状改善，生存质量得到提高。此外，中药人参、黄芪、白术等都具有很好的增强机体免疫功能的作用。

2诱导肿瘤细胞分化

细胞恶变是增殖和分化两者平衡的失调，从细胞增殖角度说恶性肿瘤的增殖是失去控制的，从分化方面讲恶性肿瘤细胞是丧失分化或分化异常的细胞。诱导恶性肿瘤分化，抑制其增殖是肿瘤现代研究的重要领域，西药中维甲酸等诱导分化剂，因有严重副作用，限制了临床应用，而许多中药具有良好的抑制肿瘤细胞增殖和诱导分化作用，且无副作用。如丹参酮ⅡA可诱导人急性早幼粒细胞白血病细胞向终末细胞分化，并使细胞生长明显抑制，丹参酮还对人宫颈癌细胞株K562具有良好的诱导分化作用，其效果与维甲酸相仿（3）。曾小莉等（4）用人参总皂甙处理人肝癌细胞HepG2后其生长明显受到抑制，细胞质增多，线粒体数量增加，糖原增多，高尔基复合体体积增大，发育较完善，粗面内质网和游离核蛋白体增多，提示HepG2细胞趋于成熟分化。同时人参总皂甙能够有效动员HepG2细胞由G1/G0期进入S期，阻止S期细胞向G2/M期移行，造成大量S期细胞堆积。大量该期细胞DNA解旋，DNA单链暴露出更多的活性部位，为抗肿瘤药物提供更多的作用位点。并且临床上可进一步与细胞周期特异性抗肿瘤药物联合应用，更有效地杀伤S期肿瘤细胞。中药淫羊藿甙作用于人高转肺癌细胞PG，采用多种手段检测表明，淫羊藿甙能影响PG细胞周期的时相分布，并能升高细胞内cAMP/cGMP比值；同时降低PG细胞对外基质的粘附性及侵袭、运动能力，从而逆转肿瘤细胞的恶性表型（5）。

3促进肿瘤细胞凋亡

细胞凋亡是有机体为调控机体发育，维持内环境稳定，由其内在基因编程调节，通过主动的生化过程，使细胞自杀死亡的现象。一旦细胞的增殖或凋亡发生异常，即可导致细胞的恶性转化形成肿瘤，而促进肿瘤细胞凋亡可能达到肿瘤缩小，癌症消退的目的。许多研究表明，中药和化疗药的抗癌效果均与其促进肿瘤细胞凋亡有关。中药莪术中的抗癌活性成份榄香烯能阻止肿瘤细胞从S期进入G2期，促进肿瘤细胞凋亡，榄香烯处理HL-60细胞2小时，即可发现清晰的DNA梯状带；处理HL-60细胞24小时，可观察到细胞凋亡的特征性形态学改变（6）。白首乌甙50μg/ml作用于体外传代培养KB细胞72小时可诱导细胞出现核固缩和早期凋亡现象；流式细胞仪测定出现凋亡峰，凋亡率高达41.9%，并将KB细胞周期阻滞于G0/G1期（7）。中药雄黄的的主要成份砷可促进急性早幼粒细胞白血病细胞凋亡，使抗凋亡基因PML-RAR和Bcl-2基因表达下降（8），乳香提取物能诱导急性粒细胞白血病细胞株HL-60，急性单核细胞白血病细胞株U937及急性粒细胞白血病原代细胞，促使其凋亡，并已用于临床治疗急性非淋巴细胞白血病，取得良好效果（9）。

4影响拓扑异构酶

拓扑异构酶在DNA复制、转录重组，以及在形成正确的染色体结构，染色体分离、浓缩中发挥着重要作用，真核细胞DNA的拓扑结构由两类关键酶，即酶拓扑异构酶Ⅰ和拓扑异构酶Ⅱ的调节（10）。干扰拓扑异构酶是抗肿瘤的重要途径之一。如传统中药喜树树皮中的生物碱及其衍生物能够特异性的抑制DNA拓扑酶Ⅰ，使细胞周期停滞于G2期或生成S期的细胞凋亡（11）。螺旋藻提取物的水溶性成份和DMSO可溶性成份浓度分别为2.3μg/ml和80μg/ml时能完全抑制拓扑异构酶Ⅰ介导的负超螺旋藻Pbr322解旋反应，且水溶性成份在高浓度时可直接引起DNA的双链断裂（12）。表鬼臼毒素类药物能干扰拓扑异构酶Ⅱ，抑制DNA重新组合且在DNA内引起蛋白断裂，使染色体畸变和细胞死亡。中药蟾酥成分中的蟾毒配基之一Bufalin有显著抗癌效果，进一步研究表明，Bufalin为拓扑异构酶Ⅱ的抑制剂，主要作用于细胞周期的S期（13）。此外，灵芝（14）、半边旗（15）等均对DNA拓扑异构酶有抑制作用从而临床上有抗肿瘤效果。

5抑制微管蛋白活性

微管在真核细胞中呈网状分布，可以与其它蛋白共同组装成纺锤体、中心粒等，参与细胞形态的维持，细胞运动和细胞分裂。研究表明，大量的天然和合成化合物能干扰微管蛋白的功能，抑制微管蛋白的聚合，使纺锤体无法形成，从而使细胞分裂停止在有丝分裂的中期。或促进微管蛋白的聚合，抑制微管解聚从而抑制细胞分裂。如紫杉醇及其衍生物紫杉特尔等均能促使微管蛋白迅速聚集成微管，并结合到微管上抑制微管的解聚，从而使细胞有丝分裂终止，临床研究对卵巢癌、乳腺癌、非小细胞性肺癌、头颈部恶性肿瘤等有显著疗效（16）。秋水仙素、长春花碱也可以与微管蛋白结合，干扰微管的聚合和解聚（17）。

6抗肿瘤血管生成

实体肿瘤的生长和转移与新生血管的形成有密切关系。临床与动物实验都证明，如果没有新生血管供应营养，肿瘤在达到1~2毫米直径或厚度后，即107个细胞左右将不再增大而长期处于这样的微小状态，一旦新生血管形成，肿瘤得到充分的营养供给便会快速生长，而且新生血管为肿瘤细胞经血液循环向远处转移提供了有利条件（18）。刘重贞（19）用免疫组化法对62例结直肠癌组织石蜡切片进行染色和微血管计数，结果显示伴有淋巴结转移和远处转移患者的癌组织中的微血管计数显著高于无转移的病人。肿瘤的新生血管系统已经成为十分有希望的抗肿瘤治疗靶点，研究开发能破坏或抑制肿瘤血管生成的药物是抗肿瘤研究中最活跃的领域之一。中医药抗肿瘤血管生成具有坚实的理论基础，某些中药及其有效成份如十全大补汤、小柴胡汤和虫草多糖、云芝多糖、香菇多糖等均能诱生TNF，提高TNF活力（20），黄芪、党参、当归、芍药和猪苓多糖等皆可诱生IFN（21）。TNF、INF是促进肿瘤坏死的有效物质，其机制在于能够抑制肿瘤血管生成。Lee等（22）用原代培养的牛主动脉内皮细胞在Ⅰ型胶原蛋白三维培养基中生成的毛细管样网络结构为模型，观察中药蟾酥中的蟾毒配基Bufalin对血管生成的影响，绘图像分析仪定量检测5nmol/L的Bufalin即可显著抑制毛细管的生成，FCM分析可见血管内皮细胞阻滞于G2/M期，血管内皮细胞增殖受到明显抑制。姜晓玲（23）通过比较实验发现10μg/ml薏苡仁注射液对肿瘤血管生成的抑制作用非常显著，其效果优于0.1mg/ml维生素E（p<0.01）。华海清等（24）报道，亚砷酸注射液有明显抗肿瘤血管形成作用，能显著抑制内皮细胞增生，破坏血管形成中的内皮细胞的结构，降低肝癌转移模型肝移植瘤血管内皮生长因子的表达。可见，从中药中研究抗肿瘤血管生成抑制药物具有广阔的前景。

7调节相关基因表达

恶性肿瘤的发生发展是多因素、多阶段的复杂过程，各种肿瘤相关基因异常表达的长期积累是癌变过程中的重要环节。因而，调节肿瘤相关基因表达成为治疗恶性肿瘤的重要手段。实验表明，许多经临床证实有效的抗癌中药的作用机制之一就是能够调节肿瘤相关基因的异常表达。ras癌基因位于真核生物的细胞核中，其编码的p21ras蛋白，在结构和功能上与G蛋白相似，与GTP结合后，参与细胞生长分化信号的传导。ras基因发生点突变后可使细胞增殖信号持续增强，导致细胞无限增殖和癌变。p53是一个抑癌基因，正常的p53基因（即野生型p53基因）能够抑制细胞增殖，防止发生癌变。p53突变后丧失了抑癌功能，而且突变的p53基因具有促进细胞恶性转化的作用。杨传标等（25）研究显示，中药连黛胶囊（黄连、清黛、吴茱萸等）治疗胃肠肿瘤治疗后患者血清中p21ras和突变型p53蛋白含量显著下降，说明连黛胶囊具有调节胃肠肿瘤ras和突变型p53基因表达的作用。bcl-2基因有很强的抑制细胞凋亡作用，能抑制多种细胞的凋亡，有助于肿瘤生长。bax基因与bcl-2同族，在功能上二者相反，bax的表达可加速细胞凋亡进程。二者表达的比例程度决定细胞的生存或死亡。凌昌全等（26）发现人参皂甙能够抑制白血病细胞株（6T-CEM）bcl-2基因的表达，降低bcl-2/bax比率，从而诱导6T-CEM的凋亡。另有报道（27~29），中药对c-myc、c-fos、Rb等等其它相关基因的表达均有很好的调节作用。

8逆转多药耐药性

多药耐药性（multidrugresistance,MDR）是由一种药物诱发而同时对其它多种结构和作用机制完全不同的抗癌药物也产生的交叉耐药性。MDR是肿瘤化疗失败的主要原因之一，临床上许多新发肿瘤化疗效果明显，化疗后复发者再次给予多种化疗方案均效果甚差，其主要原因是肿瘤细胞因化疗产生的多药耐药性。目前公认肿瘤细胞多药耐药性产生的主要原因是多药耐药基因编码的P-糖蛋白（P-gp）的高度表达。克服此障碍，抗肿瘤药物的疗效将有可能明显提高。中医药抗肿瘤细胞多药耐药有很大优势，有关的研究已经出现较好势头，如张慧珠等（30）采用MTT法从多种中药单体或提取物筛选肿瘤细胞多药耐药逆转剂，结果显示，钩藤总碱、药根碱、靛玉红对KBv200细胞耐药具有逆转作用，而姜黄素与长春新碱合用在KB及KBv200细胞均有增敏作用。复方三根制剂（藤梨根、虎杖根、水杨梅根等）对K562/ADR和K562/VCR两株细胞的多药耐药性有逆转作用，其逆转机制是在转录水平下调MDR1mRNA,从而降低多药耐药细胞P-gp的表达（31）。中药莪术的有效成份榄香烯不但可以抑制BEL-7402细胞的生长，且对耐药株BEL-7402/DOX仍有较强的杀伤作用。同时经榄香烯乳剂长期作用，未能诱导出BEL-7402细胞的P-gp表达，说明已经耐药的肿瘤细胞对榄香烯仍然敏感，且不易使肿瘤细胞产生耐药性，特别适用于对化疗药物产生耐药的恶性肿瘤治疗（32）。这些均显示了中医药在逆转肿瘤细胞多药耐药方面的优势。现代医学研究的多药耐药逆转剂在体外实验中被证实，多数为钙拮抗剂，因其毒副作用大，靶点单一，半衰期短等问题，难以推广于临床，更增加了研究和应用中医药逆转肿瘤细胞多药耐药的必要性。

9其它抗肿瘤机制

中药防治恶性肿瘤的作用机理十分复杂，在抑制端粒酶活性，抗代谢，抗浸润转移等方面也均有报道。如陈泽雄等（33）研究表明，由莪术、半枝莲、柴胡等组成的复方在药物浓度为10%时对结肠癌细胞端粒酶活性的抑制能力为50%。贯众（34）和土贝母（35）水提物均可明显降低线粒体代谢活性，抑制肝癌细胞的生长。川芎嗪、苦参碱能明显抑制肿瘤细胞与内皮细胞的粘附，抑制粘附分子的表达，减轻内皮细胞的通透性，从而减少肿瘤转移（36）。

10结语

综上所述，中药抗肿瘤的作用机制是复杂的，不管是单味中药还是复方制剂，都含有多种成份，因此其作用不是单一的，它们可能具有多方面的作用，如人参具有诱导肿瘤细胞分化、调节肿瘤基因表达、增强免疫等多重作用。如何从多层次、多学科对中药抗肿瘤的作用机制进行具体、客观、定性定量的研究，以进一步揭示其奥秘，尚待中医药科学工作者的不断努力。相信，以数千年中医药理论和实践经验为基础，结合现代药物理论和生物技术，中药的抗肿瘤作用机制研究和临床应用将会有更大的进展。

参考文献

1刘福君，茹祥斌。地黄及六味地黄汤的免疫药理及抗肿瘤作用。中草药1996；27（2）：116

2杨传标，殷平善，薛军。中药健脾康复汤治疗大肠癌脾虚证临床疗效观察。河南中医药学刊2002；102：22

3梁勇，羊裔明，袁淑兰，等。丹参酮ⅡA诱导原代培养人急性早幼粒细胞白血病细胞分化。华西医科大学学报2000；31（2）：207

4曾小莉，涂植光。人参总皂甙诱导人肝癌细胞分化初探。肿瘤防治研究2000；27（3）：188

5毛海婷，张铃，王芸，等。淫羊藿多甙抗癌作用机制的实验研究。中药材2000；23（9）：554

6杨骅，王仙平，郁琳琳，等。榄香烯抗肿瘤作用与诱发肿瘤细胞凋亡。中华肿瘤杂志1996；18（3）：169

7曾郁敏，顾立刚，王月齐，等。白首乌甙诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究。中国中医药信息杂志2000；7（6）：25

8ChenGQ,ZhuJ,ShiXG,etal.Invitrostudiesoncellularandmolecularmechanismsofarsenictrioxide(AS2O3)inthetreatmentofacutepromyeolcyticleukemia:AS2O3inducesNB4cellapoptosmwithdown-regulationofbcl-2expressionandmodulationofPMLRARd/PMLproteins.1996;88(3):1052

9齐振华，谭柏林，钟美佐，等。乳香提取物与化疗药物联合治疗急性非淋巴细胞性白血病临床研究。湖南中医学院学报1999；19（3）：37

10丁健。抗肿瘤药物研究新进展。中国新药杂志2000；3：150

11LiuLF,DesaiSD,LiTK,etal.Mechnismofactionofcamptothecin.Ann-N-Acad-Sci.2000;92:21

12蒙凌华，将超，刘兆乾，等。螺旋藻提取物对DNA拓扑异构酶活性的抑制及对DNA的直接影响。癌症2000；19（8）：661

13徐瑞成，陈小义，陈莉。Bafalin抗癌机制研究进展。国外医学肿瘤学分册2000；27（4）：201

14蒋超，卿晨，蒙凌华，等。灵芝提取物对DNA拓扑异构酶的抑制作用及诱导K562细胞凋亡。癌症1999：18（6）：661

15李金华，何承伟，梁念慈，等。半边旗抗肿瘤有效成份对HL-60细胞DNA拓扑异构酶活性及其细胞周期的影响。中国药理通报1999；20（6）：541

16KayeSB.ProgressinthetreatmentofovarianCancer.AntiCancerDruges.1999;9:2731

17廖美德，梁世中。中药抗肿瘤机理的研究进展。贵阳中医学院学报2001；23（4）：52

18FolkmanJ.Clinicalapplicationsofresearchonangiogenesis.NEng/JMed1995;333:1775

19刘重贞。结直肠癌患者肿瘤血管形成的临床病理意义初探。临床消化病杂志2000；11（4）：175

20陈瑞东。对癌症有效的中药方剂。北京：中国医药出版社1992：317

21李家琦，夏英。中药诱导干扰素作用的探索。上海中医药杂志1994；（1）：34

22LeeDY,YasudaM,YamamotoT,etal.Bufalininhibitsendothelialcellproliferationandangiogenesisinvitro.LifeSci.1997;60(2):127

23姜晓玲。薏苡仁注射液对血管生成的影响。肿瘤2000；20（4）：313

24华海清,秦叔逵,王锦鸿,等。三氧化二砷抗肿瘤血管形成研究。世界华人消化杂志2004；12（1）：27

25杨传标，陈蔚文，王建华，等。连黛胶囊对胃肠肿瘤p21ras和突变型p53蛋白表达调节作用的临床研究。中国中西医结合杂志2001；21（10）：736

26凌昌全，俞超芹，潘瑞萍，等。人参皂甙对人T淋巴细胞白血病细胞株凋亡基因的影响。中医杂志2000；41（3）：176

27何於鹃。苦参碱对K562细胞早期原癌基因表达的影响。癌症2002；21（4）：370

28王成斌。乌贼墨对H22癌细胞内Ca++浓度、细胞核Ca++/Mg++-ATP酶活性及c-fos表达的影响。山东医科大学学报2000；（4）：422

29司维柯，李鹏，姚婕。苦参碱对HepsG2细胞代谢水平和基因水平的影响。第三军医大学学报2002；24（11）：1346

30张慧珠，杨林，任雷鸣，等。中药活性成份逆转肿瘤细胞多药耐药作用的体外筛选。华北煤炭医学院学报2003；5（5）：265

31冯正权，郭勇，朱宁希，等。复方三根制剂逆转多药耐药的实验研究。中国肿瘤2003；12（6）：370

32王宝成，郭军，狄剑时，等。榄香烯乳剂与肿瘤多药耐药的基础研究。中国肿瘤临床1996；23（2）：143

33陈泽雄，陈雯，彭俊生，等。中药复方抗癌抑制人结肠癌细胞株端粒酶活性。中国胃肠外科杂志1999；2（2）：117

34肖正明，宋景桂，徐朝晖，等。贯众水提物对体外培养人肝癌细胞增殖及代谢的影响。医学研究通讯2000；29（5）：5

抗肿瘤范文篇5

摘要:目的观察异十三基二胺(D79)的体内外抗肿瘤作用。方法应用锥虫蓝排染法、MTT法检测D79对多种体外培养肿瘤细胞的细胞毒作用;Bliss法观察D79急性毒性实验;在可耐受剂量下观察D79对小鼠移植性实体瘤U14、腹水瘤EAC、HAC的抑制率。结果D79显著杀伤多种体外肿瘤细胞,药物作用48h,IC501.24~3.36μg/mL;D79的LD50为36.49mg/kg(静脉注射)。D79抑制小鼠移植性实体瘤U14体内生长、提高移植性腹水瘤EAC、HAC小鼠生存时间的作用呈剂量依赖性。结论D79有较强的体内外抗肿瘤作用。

关键词:抗肿瘤药;肿瘤细胞,培养的;肿瘤移植;异十三基二胺

ABSTRACT:ObjectiveToobservetheantitumoreffectofallotritridecyldiamidogen(D79)invivoandinvitro.MethodsThecytotoxiceffectsofD79onvarioustumorcellslinesculturedinvitroweredeterminedbytrypanbluedyeexclusiontest,MTTmethod.AcutetoxicityofD79wasevaluatedbyBlissmethod:atatolerabledoselevel,D79wasadministratedtotreattransplantedsolidtumorU14andascetictumorsEACandHAC.Tumorweightinhibitionandlifeextensionwereobserved.ResultsD79inducedsignificantgrowtharrestinvariousmalignanttumorcelllinesculturedinvitro.IC50ofthesetumorcellsexposedtothedrugfor48hoursrangedfrom1.24~3.36μg/mL.LD50ofD79was36.49mg/kg(mice,iv).D79inhibitinvivogrowthofimplantedsolidtumorU14andprolongedlivetimeimplantedascetictumorsEACandHACofmiceinadosedependmentmanner.ConclusionD79hadobviousantitumoractivityinvivoandinvitro.

KEYWORDS:antineoplasticagents;tumorcells,cultured;neoplasmstransplantation;allotritridecyldiamidogen

2000年,Yang等证实末端支链饱和脂肪酸13甲基肉豆蔻酸(13MTD)体内外抗肿瘤作用并发现其主要通过诱导肿瘤细胞凋亡发挥作用[1]。异十三基二胺(D79)是在13MTD基础上合成的一种新型胺类化合物,其化学结构明显区别于当前常规抗肿瘤药物。笔者研究其体内外抗肿瘤作用,初步结果报告如下。

1材料和方法

1.1材料

1.1.1药品

2%D79溶液(福建省振华851生物制药有限公司,批号040507);RPMI1640培养基干粉(美国Gibco公司);小牛血清(美国HyClone公司);胰蛋白酶(美国Difco公司);锥虫蓝及噻唑蓝(MTT,美国Sigma公司);环磷酰胺(上海华联制药厂生产,批号040202);氟尿嘧啶(250mg/10mL,天津金耀氨基酸有限公司,批号0501182);其余试剂均为国产分析纯。

1.1.2仪器

6孔及96孔细胞培养板(美国Coster公司);生物安全柜(HFSafe1200型)及气体培养箱(BB5060,上海力申科学仪器有限公司);全自动酶标仪(Mod550,美国BioRad公司);倒置显微镜及正置显微镜(日本Olympus公司);微量称质量仪(BP221S,德国Sartorius公司);电子天平(TD6001B,余姚市金诺天平仪器有限公司);振荡器(2002型,常州国华电器有限公司)。

1.1.3动物及瘤株

昆明种小鼠,体质量(20±2)g,雌雄不限,由福建医科大学实验动物中心(合格证号:医动字2306号)。每次实验使用同一性别小鼠。小鼠子宫颈癌实体型瘤株(U14)、小鼠艾氏腹水瘤(EAC)及肝癌腹水瘤(HAC)均引自福建医科大学药学系。

1.1.4肿瘤细胞

人慢性粒细胞白血病细胞株(K562)、人早幼粒白血病细胞株(HL60)、小鼠黑色素瘤细胞株(B16)、人肝癌细胞株(HEPG2)、人胃腺癌细胞株(SGC7901)均引自福建医科大学药学系。

1.2方法

1.2.1细胞培养

K562、HL60、B16、HEPG2、SGC7901细胞株培养于含10%小牛血清、青霉素100IU/mL、链霉素100μg/mL的RPMI1640培养液中,每3天换液一次,每5天传代一次。细胞均置于37℃、体积分数为0.05的CO2,饱和湿度的气体培养箱中。

1.2.2锥虫蓝排染法

取对数生长期的HL60、K562细胞,以全培养液稀释成5×104mL1单细胞悬液,接种于96孔细胞培养板,每个浓度复种4孔,每孔190μL,置于气体培养箱培养。12h后D79组每孔加不同浓度D7910μL,对照组加等量溶剂。共培养48h后每孔加0.4%锥虫蓝100μL,染色5min。计数各组拒染活细胞数,按下式计算抑制率：

抑制率%=(1药物组活细胞数/对照组活细胞数)×100%

直线回归法测该药的半数抑制浓度(IC50)。实验重复3次[2]。

1.2.3MTT法

取对数生长期的B16、HEPG2、SGC7901细胞,0.25%胰酶PBS液消化后,全培养液稀释成5×104mL1单细胞悬液,接种于96孔细胞培养板,每个浓度复种4孔,每孔190μL。置于气体培养箱内,12h后D79组每孔加不同浓度D7910μL,对照组加等量溶剂,共培养48h。反应结束前4h每孔加入MTT(1mg/mL)50μL。继续培养4h,吸尽上清,每孔加入DMSO200μL充分溶解MTT还原产物。酶标仪550nm检测光密度(Dλ)并计算抑制率。直线回归法计算IC50。实验重复3次[2]。

抑制率%=[1药物组D(550nm)值/对照组D(550nm)值]×100%

1.2.4D79急性毒性实验

根据文献[3]方法,小鼠静脉注射(iv)不同剂量D79,连续观察7d。

1.2.5小鼠移植性肿瘤接种及传代

1.2.5.1U14实体瘤接种传代[4]

取肿瘤生长旺盛的小鼠,无菌操作摘取实体肿瘤,称质量,按1∶4比例加入无菌生理盐水,磨成匀浆,取0.2mL接种于小鼠右腋部皮下。

1.2.5.2EAC、HAC腹水瘤接种传代[4]

取肿瘤生长旺盛的小鼠,无菌操作抽取腹水,称体积后按1∶4比例加入无菌生理盐水,取0.2mL接种于小鼠腹腔内。

1.2.6D79对小鼠移植性肿瘤的抑制作用

根据急性毒性实验结果,选择3个剂量(10.0,7.0,4.9mg・kg1・d1)连续腹腔注射(ip)。接种肿瘤后按体质量随机分组,设阴性对照组、阳性对照组及D79组。阳性对照组给予环磷酰胺或氟尿嘧啶[1，3],阴性对照组给予等量溶剂,D79组按给予剂量分为高、中、低剂量组;于接种当日开始给药(ip),连续10d。U14荷瘤小鼠于实验第12天取瘤称质量,计算瘤质量抑制率。EAC、HAC荷瘤小鼠记录实验小鼠生存时间,并计算生命延长率。

瘤质量抑制率%=(1药物组平均瘤质量/阴性对照组平均瘤质量)×100%

生命延长率%=(药物组平均生存时间/阴性对照组平均生存时间1)×100%

1.3统计学处理

数据以x±s表示。采用SPSS11.5统计软件处理,差异显著性检验采用方差分析。

2结果

2.1D79对多种肿瘤细胞的体外细胞毒作用

D790.25~4.00μg/mL作用48h,对多种体外培养肿瘤细胞均产生显著杀伤作用,抑制率随药物剂量的增加而升高,IC501.24~3.36μg/mL(表1)。表1D79对肿瘤细胞的体外细胞毒作用（略）

2.2D79小鼠急性毒性实验

小鼠ivD79后未发现明显异常。死亡小鼠解剖观察主要脏器未发现明显异常。D79急性毒性实验结果见表2。表2小鼠静脉注射D79急性毒性实验（略）

2.3D79对小鼠移植性肿瘤U14的抑制作用

结果见表3。表3D79对小鼠移植性肿瘤U14的抑制作用（略）

2.4D79对小鼠移植性肿瘤EAC、HAC的抑制作用

结果见表4。表4D79对小鼠移植性肿瘤EAC、HAC的抑制作用（略）

3讨论

恶性肿瘤是本世纪人类面临最大威胁的疾病之一。目前临床常用抗肿瘤药物广泛存在对肿瘤选择差、毒副作用大以及易产生耐药性等缺点，因此,寻找疗效好、毒副作用小的新型抗肿瘤药已成为人类战胜恶性肿瘤的当务之急。D79是在13MTD基础上合成的一种新型胺类化合物,其化学结构明显区别于当前常规抗肿瘤药物[5],因此可能不易与临床常规抗肿瘤药物发生交叉耐药。

13MTD对多种体外培养肿瘤细胞具有杀伤作用,抑制裸鼠原位移植人前列腺癌细胞株及肝癌细胞株肿瘤的生长,其体内外抗肿瘤作用主要通过诱导肿瘤细胞凋亡发挥作用[1]。本实验中,D79对K562、HL60、B16等5种体外培养肿瘤细胞均有显著杀伤作用,并且作用呈剂量依赖性。对人早幼粒白血病细胞株HL60最敏感,对人肝癌细胞株HEPG2最不敏感,平均IC50在1.24~3.36μg/mL。D79小鼠急性毒性实验结果Bliss法计算LD50=36.49mg/kg(iv),其LD95是32.34~41.18mg/kg(iv)。D79在可耐受剂量下,其对小鼠移植性宫颈癌U14实体瘤和肝癌HAC及EAC腹水瘤亦有明显的剂量依赖性抑制作用。D79体内外抗肿瘤作用明显强于13MTD[1]。D79是在13MTD基础上合成的一种新型胺类化合物,因此笔者推测D79可能亦通过诱导肿瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用。

D79有较强的体内外抗肿瘤作用,有望成为一种广谱、强效、毒性小的新型抗肿瘤药物,笔者将进一步研究其抗肿瘤作用机制。

参考文献：

[1]YangZH,LiuSP,ChenXD,etal.Inductionofapoptoticcelldeathandinvivogrowthinhibitionofhumancancercellsbyasaturatedbranchedchainfattyacid13methyltetradecanoicacid[J].CancerRes,2000,60(3):505509.

[2]林心建,黄自强,李常春.洋地黄毒甙体外抗人癌细胞株的作用[J].福建医学院学报,1996,30(1):1718.

[3]徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].2版.北京:人民卫生出版社,1991:201206.

抗肿瘤范文篇6

1风险管理

1.1风险识别

在集中调配抗肿瘤药物前的准备阶段，由护士长、药学岗长、科室骨干及肿瘤护理小组、感控科核心成员组成风险控制小组，对所有涉及的相关人员进行访谈，并使用肿瘤护理小组提供的职业防护知识调查问卷进行调研，了解PIVAS人员防护知识掌握情况及需求。同时查询相关资料文献，采用“头脑风暴法”，讨论分析PIVAS抗肿瘤药物接触的所有环节，查找可能发生危害的部位。1.1.1识别抗肿瘤药物的危害相关研究发现，抗肿瘤药物可通过皮肤、呼吸道、消化道进入体内，导致脱发、月经失调、口腔溃疡等现象产生[3]。接触时间长短、抗肿瘤药物的类型及剂量大小与产生的危害程度有关[4]。抗肿瘤药物一旦发生溢出，处理不当将直接对操作人员的健康造成危害。1.1.2识别风险环节（1）抗肿瘤药品进入PIVAS：抗肿瘤药品由厂家生产，经流通经营渠道送至医院，存放库房等环节，终端运送至PIVAS进行使用。在运输、贮藏等环节均有可能发生药品破损。如果接触药品的人员在这些过程中未采取任何防护措施，尤其是在打开外包装发现药品破碎时，可直至导致工作人员吸入粉尘或被液体药物污染，导致职业暴露风险。虽然储运中产生危害的可能性比较小，却不容忽视。（2）抗肿瘤药品存放：抗肿瘤药品进入PIVAS后，需要按照药品的性质要求进行贮藏，药瓶表面可能残留部分粉尘，这与药物生产过程有关。因此，在抗肿瘤药物的贮藏保管环节中，若药品保管不当，未封闭贮存而长期暴露于敞开环境中，也存在人员职业暴露的风险。（3）排药核对：在排药、核对过程中，操作人员不可避免地接触药瓶，许多PIVAS人员的危险防护意识较差，尤其处于上述岗位人员，有些甚至徒手操作[5]。若未提前采取相应的防护措施，如不小心打碎药瓶，将直接造成呼吸道和皮肤的伤害。（4）抗肿瘤药物调配：调配过程中最容易发生抗肿瘤药物的溢出。针头从西林瓶拔出时，使用针头、针筒转移药物时，打开安瓿，从针管中排气，针管中药物过多（大于容积3/4）时，很容易造成药物喷溅或外泄溢出[6]。而在安瓿打开及注射器扎入输液袋口加入药液时，易发生利器伤害而导致职业暴露风险。（5）成品核对：仓内配制完毕的抗肿瘤输液需封入密封袋内，密封袋的包装均由仓内调配人员在每袋输液调配完毕时封袋，再放入药筐中传出仓外核对，此时接触密封袋和药框的手套上可能携带残余的抗肿瘤药物，若仓外核对者防护措施不到位，亦可能直接导致暴露污染。（6）抗肿瘤药物的输液打包运输至病区：核对完毕的输液，由专人负责打包封箱运送至病区，此环节操作人员若未采取合适的防护措施，也有可能象上述环节同样的原因导致暴露污染。（7）清场和清洁消毒环节：抗肿瘤药物调配完毕30min方可进行清场工作，配药仓内外各个有可能接触抗肿瘤药的角落都可能存在药物残留污染，往往重视仓内的清场工作，却对仓外的环境清场意识不足。（8）抗肿瘤垃圾处理环节：在上述的每一个环节中都会产生和抗肿瘤物品相关的垃圾，而国内普遍的“指南”只规范了仓内配药过程中产生的抗肿瘤垃圾的处理，《静脉用药集中调配质量管理规范》及《医疗废弃物管理条例》只提及医疗垃圾的处理，未具体提及关于抗肿瘤垃圾的特殊处理要求。因此，在处理垃圾的过程中，若处理人员没有较高的自我防护意识和相应的防护措施，发生垃圾处置不当、垃圾袋破损等情况，均可能导致职业暴露危害。（9）仪器维护：仪器维护人员多为仪器厂家或院内设备维护人员，对于抗肿瘤药物的危害及防护知识缺乏，往往不进行防护就作业，而仪器内面无法清洁部位，如生物柜排风管道即可能存在药物残留，易导致职业暴露危害。

1.2风险评估

以上9个环节，运用风险管理工具—FMEA风险指数评估系统进行风险评估，根据职业暴露风险发生的频度、严重度和风险可侦测度（风险易被发现的可能性）三个方面进行评价，计算：风险指数RPN值（riskprioritynumber）=发生频率（O）×严重度（S）×可侦测度（D），即RPN=O×S×D，确认风险指数大小，风险指数RPN越高，说明风险水平越高（见表1）。根据表1，风险控制小组人员讨论打分，记录每项均分，再计算风险指数，针对风险识别到的9个环节进行了风险评估，见表2。

1.3制定调配管理规范

针对各风险环节的分析评测，发现调配过程为风险评估指数最高的环节，因此重点加强调配过程中的风险管理，制定了相应的防护、操作规范，并且制订了药品发生溢出时的处理规范。严格按照《静脉用药集中调配质量管理规范》进行操作与防护，更加注重细节管理。1.3.1保证调配环境安全抗肿瘤药物调配必须在细胞毒药物调配专用的生物安全柜中进行，操作前确保仓内温度≤18℃，同时还需保证调配仓压力稳定，要求配药人员入仓前检查温度及压力，确保参数在正常范围内方可入仓操作。生物安全柜每季度进行检测，按要求定期更换滤过器，确保运行状态良好，以防止药物外泄。1.3.2抗肿瘤药调配人员资质管理调配抗肿瘤药物人员上岗前必须经过评估及专门培训，必须有充分的自我防护意识、熟练的药物调配技术及经验，经考核认证合格后方可从事抗肿瘤药物调配。1.3.3备齐完善的防护用物严格按防护要求备齐防护用物，包括一次性防护衣、双层无粉乳胶手套(中间加一层PE薄膜手套)、N95口罩、防护眼镜。并在调配间内备好无菌橡胶手套，要求操作中每30分钟更换一次橡胶手套。操作台上铺一次性一面防渗透、一面可吸收的垫巾，使用带鲁尔接口的螺口注射器，另备利器盒、封口袋、溢出处理箱等。1.3.4细化操作动作，提高安全操作水平人工调配要求：每次操作前首先旋紧针头，以避免注射器乳头与针头脱落分离导致药液溢出。操作中尽量避免排气动作，若必须进行排气，用单手回套针帽的方法，套上护针帽后再进行排气，以防止排气过程中药液溢出。调配西林瓶药物时，操作中使用负压抽吸技术，进针时西林瓶应与针筒呈45°角，针头洞斜面向上，稍用力进针。一旦针头穿过橡皮塞后立即使针头和针筒呈垂直状态[7]。此动作可减少针头拔出时的药液喷溅溢出，同时在整个抽吸药液过程中始终保持瓶内负压，以减少药物喷溅。调配安瓿药品时，用纱布包裹安瓿，反向向对侧打开安瓿以避免药物向操作者方向喷溅。操作完毕用酒精棉片及时清除输液袋口残余药液，避免对仓外人员以及病区护士的危害。1.3.5操作后垃圾处理每调配完毕一袋输液，立即将空西林瓶弃入操作台内的利器盒内；安瓿瓶装入厚密封袋内封口后弃入利器盒内；注射器不必卸下针头，整体直接弃入利器盒内；其余所有用物除印章及笔以外，一律直接弃入利器盒中；垫巾由四周向中间卷起包裹后弃入利器盒内。所有药物调配完毕将利器盒完全封闭，从生物柜内取出后直接放入双层医疗垃圾袋中，同时脱下外层橡胶手套及防护服弃入垃圾袋中。防护服脱下时需注意不要用手接触防护服的外面，用内面包裹外面后脱下弃去。将两层垃圾袋逐层扎好从指定的传递窗传出，保证出仓垃圾袋完好，必要时外层加套垃圾袋，防止污染仓外人员。1.3.6发生溢出事件的处理（1）药物喷溅溢出于垫巾上的处理：对于调配过程中，发生药物喷溅溢出至垫巾上时，将污染垫巾由四周向中间卷起包裹后弃入利器盒，立即更换新的垫巾继续进行调配工作。除此以外的溢出事件一律按照溢出事件处理流程办理。（2）溢出事件处理：对于所有的溢出事件，首先应确定为大溢出或小溢出事件，再进行处理。国内常规是按照污染量进行区分,宜遵循ISOPP建议，根据污染面积大小区分，避免小剂量药物在泼洒后可能造成的较大面积污染。在调配仓内和摆药控制区均设置了溢出处理箱，箱内包括两付乳胶手套、护镜、N95口罩、胶带（标识污染面积）、吸附剂、塑料背面吸水垫、一次性毛巾及至少2只厚医疗垃圾袋、收集玻璃碎片的一次性刷子及利器盒。张贴了抗肿瘤药物溢出处理流程并配图说明，包括了11个步骤：①保持冷静；②按SOP操作；③穿防护服；④封闭污染环境，设置警示标志；⑤选用合适的方法清理；⑥二步清洁；⑦清理的废弃物丢弃在专用医疗垃圾袋；⑧防护服丢弃在专用医疗垃圾袋中；⑨仔细冲洗身体；⑩医生检查；輥輯訛记录。一旦发生溢出事件，只需根据流程操作应对处理。溢出处摆放警示牌，并用胶带围圈标识，严禁其他人员接近和扩大污染。溢出处理工作应首先从污染边界开始，逐渐向污染中心进行，以避免污染扩大。

1.4风险监控与系统管理

1.4.1建立职业暴露风险管控小组，并建立监督机制药学部、护理部、感染控制科，实施风险管理监督。由PIVAS护士长、药学岗长及科室骨干组成风险管理质控小组，定期检查各项防护措施的落实情况，讨论现存及潜在风险，按照PDCA的程序进行持续管控。1.4.2建立培训考核制度相关科室定期对所有人员进行职业防护知识的培训与考核，包括药师、护士、实习生、后勤维修人员等，考核内容包括理论知识和操作技能两方面，新进人员必须经过培训、认证考核后方可从事抗肿瘤药物调配。1.4.3防护要求制度化制定防护操作规范，要求所有人员在可能接触抗肿瘤药品的所有环节，必须戴橡胶手套，一次性口罩，一次性发帽。操作中动作轻柔，防止打碎药品导致职业暴露危害。1.4.4强化职业暴露后的支持系统，建立人员健康档案每年为工作人员进行体检，包括血常规、胸部X片、B超等，发生溢出或外泄事件直接导致皮肤或眼睛污染时，立刻进行检查，登记在溢出事件登记本上，同时上报保健科备案，并给予人文关怀。抗肿瘤药物调配岗位实行轮班制。对于怀孕、哺乳人员调离PIVAS岗位[8]。1.4.5建立反馈机制定期收集操作人员对于职业防护方面的意见和建议，并听取反馈意见，做好持续改进工作。

2统计学方法

应用SPSS20.0统计软件包，计量资料用均数±标准差（x±s）描述，风险管理应用前后风险指数（RPN）对比，均数比较应用Mann-Whitney秩和检验；计数资料用百分比描述，改进前后效果比较应用χ2检验；P<0.05或P<0.01表示差异有统计学意义。

3效果评价

我院PIVAS在集中调配抗肿瘤药物工作准备阶段即开始进行了风险管理，开展集中调配抗肿瘤药物工作以来，未发生一起和抗肿瘤药物相关的职业伤害事件，也未发生过与抗肿瘤药物相关的环境污染事件。3.1风险指数RPN值比较应用风险管理进行风险控制前及控制后6个月，计算风险指数RPN值并进行比较，见表2。结果显示应用风险管理后，PIVAS人员对于风险及风险环节有了正确认识，主动在各个风险环节采取正确防护手段，主动防护意识明显增强，评估出的风险指数明显降低，差异具有统计学意义（P<0.05）。3.2对抗肿瘤药物危害及防护知识认知率比较开展抗肿瘤药物集中调配工作前及风险管理实施后6个月，对PIVAS人员及相关工作人员进行针对性问卷调查，内容为专项知识5个方面，并统计每项内容答题正确率，见表3。结果显示，所有人员对抗肿瘤药物危害认知率和防护知识的认知率等明显提高，能做到主动缜密防护及规范调配操作，与应用前比较差异有统计学意义（P<0.01）。

4讨论

4.1本研究认为，风险管理可以增强操作人员的主动防护意识，而防护意识不足主要来源于对风险的认识不足。包健安等[5]对抗肿瘤药物职业暴露的研究显示，抗肿瘤药物对环境的影响随着PIVAS运行年限的增长，污染有自仓内向仓外扩散的趋势，且越来越严重，其结果和人员的防护意识不足及思想松懈明显相关。通过运用风险管理，通过风险的识别与评估，可以明显提高PIVAS人员对抗肿瘤药物危害的认知率，提高其对每个工作风险环节的主动防范意识，让每个人都能够主动采取有效应对措施，正确的应用防护用品，按规范标准进行调配操作。4.2通过长效的风险监控与系统管理，可以强化操作人员对抗肿瘤药物危害的风险认知，并对风险事件进行有效监管，对于人员的调度排班有明确的制度，有效地降低了抗肿瘤药物对接触人员的职业危害，保护了PIVAS的工作环境及操作人员的健康，可减少因职业危害所导致的经济损失。4.3风险管理的运用，调动了PIVAS人员的主观能动性，通过对风险识别、评估、制定实施对策以及风险监控与系统管理多个方面，学会了风险管理的方法及管理工具的运用，树立预防为先意识，风险发生前做好评估并正确应对，使之有效降低风险程度。4.4随着抗肿瘤药物临床使用与调配量的不断增加，调配人员职业暴露风险日益增大，应受到政府相关部门的足够重视[5]。虽然进行了风险管理，操作人员的职业暴露仍然存在，难免受到职业伤害，希望PIVAS管理部门能够制定统一的风险管理标准，提高防护要求，增加经费投入，比如增加自动调配装置，在PIVAS内建立缓冲区域，在风险环节增加防护设施等，以减少PIVAS人员的职业暴露风险。

作者:孙翠萍 严定强 杨军军 单位:南京大学医学院附属鼓楼医院

参考文献

[1]李钧，李志宁.药品质量风险管理[M].北京：中国医药科技出版社，2011：2.

[2]HuangYW,JianL，ZhangMB,etal.AninvestigationofoxidativeDNAdamageinpharmacytechniciansex-posedtoantineoplasticdrugsintwoChinesehospitalsusingtheurinary8-OHdGassay[J]．BES,2012,25(1):109-16.

[3]胡连英，梁素芳，林杏连．抗肿瘤药物对护士的职业危害及防护对策[J].护理实践与研究，2007，4（11）：19-20．

[4]张丽芹.抗肿瘤药物的危害及接触人员的防护措施[J].临床合理用药，2015，3（8）：141.

[5]包健安，沈国荣，缪丽燕，等.多中心PIVAS集中调配人员抗肿瘤药物职业暴露评估[J].中国医院药学杂志，2016，36（9）：701-6.

[6]胡雁，陆箴琦.实用肿瘤护理[M].上海：科学技术出版社，2007：58.

抗肿瘤范文篇7

【关键词】中西医结合抗肿瘤免疫学

在众多的对肿瘤治疗方法的探索中，各种治疗方式的结果大多不如预期有效［1］，而传统的化疗药具有明显的毒副作用及耐药性，从天然产物中提取可以用于临床的有效成分激发机体免疫系统的活性一直是多年来学术界感兴趣的重要研究课题。我国传统医学不但具有独特的优势，而且与西医相比，中医更重视整体认识疾病发生的条件，强调“治未病”。中医认识到正虚是疾病的重要内因，即所谓“邪之所凑，其气必虚”。正虚学说已被现代医学认识和承认。西医比较能融合现代科学成就，认识病症具体、深入。越来越多的意向认为中西医应当互相补充，但如何互相补充又是摆在人们面前的一个迫切需要解决的难题。我们认为，这种结合或补充，不但在于临床实践中的摸索，而且还应同时解决理论上的问题，只有这样才能被国际医学界认可。现将中西医结合抗肿瘤的免疫学机制研究综述如下。

1对非特异性免疫抗肿瘤的影响

机体免疫机能状态的异常及肿瘤免疫逃逸是肿瘤发生的重要原因，同时肿瘤细胞及其产生的肿瘤性免疫抑制因子往往导致荷瘤机体免疫机能低下，由于肿瘤细胞抗原性较弱或抗原调变等因素导致肿瘤特异性免疫往往难以奏效，因此非特异性免疫在机体抗肿瘤免疫方面发挥着重要作用。机体的非特异性免疫包括单核巨噬细胞及NK细胞所构成的机体肿瘤免疫监视中的第一道防线。

1.1中西医联合对巨噬细胞抗肿瘤的影响榄香烯是从姜科植物温郁金中提取的抗癌有效成分。将其用专利方法制备出Hca-F榄香烯复合瘤苗HSP70（HSP70HTCV），分析其对小鼠腹腔或脾脏巨噬细胞功能的影响及抗免疫作用的机制，发现HSP70HTCV免疫小鼠脾脏巨噬细胞分泌TNF的能力高于HSP70BCG免疫小鼠的脾脏巨噬细胞，且巨噬细胞吞噬中性红的能力亦明显增强，由此得出结论［2］，HSP70HTCV免疫诱导的巨噬细胞对肿瘤细胞有更强的杀伤活性。

1.2中西医联合对NK细胞抗肿瘤的影响艾迪注射液联合化疗药物环磷酰胺、长春新碱、阿霉素等对恶性淋巴瘤进行的临床治疗研究中，两个疗程后，治疗组NK细胞活性明显高于对照组，能够提高化疗的耐受性，治疗后KPS有明显地提高，对肝肾功能、骨髓功能无明显影响［3］。艾迪注射液是由人参、黄芪、刺五加、斑蝥等组成，主要含有人参皂苷、黄芪皂苷、黄芪多糖、刺五加多糖及去甲斑蝥素。研究者认为此药可作为临床抗肿瘤治疗的辅助药物。那么，分析其药物成分，再结合现代药理学研究，国内外学者对人参、黄芪、刺五加免疫学机制抗肿瘤作用的研究中均得到肯定的结果［4~9］，如研究显示人参皂苷Rg1和Rh1均可不同程度地增强正常人外周血DC刺激T细胞的增殖及LPAK细胞对肿瘤细胞的杀伤能力，推测Rg1和Rh1可能促进DC合成分泌IL-2和IL-12并提高DC表面共刺激分子的表达，从而增强DC的抗原递呈能力［6］；而斑蝥有抑制肿瘤生长的作用，经去甲基处理的斑蝥素在保持其原有疗效的同时，可促进骨髓造血干细胞向粒－单核细胞分化而使白细胞增加［10］。当然，中药复方制剂的分析是不能仅以每一成分的作用进行简单的叠加的。另外，艾迪注射液抗瘤作用的免疫学机理也是多方面的［11］，同时诸如艾迪注射液与化疗药物联合这样通过增强NK细胞活性发挥抗癌作用的药物也还有香菇多糖［12］、益肺颗粒［13］等。

2对特异性免疫抗肿瘤的影响

机体对肿瘤的免疫应答包括细胞和体液免疫，两者相互协作共同杀伤肿瘤细胞，但以细胞免疫为主。

2.1对细胞免疫的影响参与抗肿瘤细胞免疫应答的主要有T细胞、树突状细胞以及前文中所提及的对特异性细胞免疫起重要调节作用的NK细胞和巨噬细胞等。

2.1.1对T细胞的作用

αβT细胞：αβT细胞包括MHCI类分子限制的CD8+CTL细胞和MHCⅡ类分子限制的CD4+辅助性T细胞，两者活化都需要双信号刺激。第一信号是抗原刺激信号，指从肿瘤细胞脱落下的肿瘤抗原，经APC摄取，加工成抗原多肽，并与细胞表面MHCⅡ类分子结合递呈给CD4+TH细胞。在肿瘤细胞合成的肿瘤肽，与MHCI类分子结合后共同表达于细胞表面，而被CD8+CTL细胞识别。黄芪注射液联合MHCI类限制性肿瘤抗原多肽Mut1致敏的树突状细胞（DC）对肺癌小鼠的治疗作用及免疫学原理的研究中，发现以肿瘤抗原多肽致敏的DC与黄芪注射液联合治疗能更有效的促进荷瘤宿主的免疫应答，具有显著的体内抑制肺癌转移的效果［14］。再说第二类信号，即协同刺激信号，T细胞除通过TCR与Ag-MHC分子复合体接受抗原信号外，还要通过APC或肿瘤细胞表面协同刺激信号，才能使T细胞有效地活化。活化的CD4+T细胞可产生大量细胞因子，促进CD8+T细胞活化，激活巨噬细胞，参与抗肿瘤作用。放化疗法配合艾灸神阙穴治疗晚期鼻咽癌就有一定的抗肿瘤和抗放化疗损伤作用［15］，还有如百合固金汤口服联合利君派舒静脉滴注治疗肺癌［16］，治疗组IL-2，CD3，CD4，CD4/CD8均明显上升，与治疗前比较，差异有非常显著性意义(P＜0.01)。

γδT细胞：γδT细胞分化发展早于αβT细胞，多分布在全身各处上皮组织内，所发挥的细胞毒作用可能不受经典MHC分子限制，且能杀伤对NK细胞不敏感的靶细胞，因此γδT细胞与NK细胞同样被认为是抗肿瘤免疫监视功能的第一道防线。已有研究发现此类细胞能在体外杀伤骨髓瘤和淋巴瘤的细胞系［17］等。循环的Vγ9Vδ2T细胞可选择性的表达自然杀伤细胞受体蛋白1A（NKRP1A），NKRPIA分子的表达受IL-12水平的调控，效应性T细胞在杀伤肿瘤时可以释放IL-12，如此可吸引更多的NKRPIA+的γδT细胞浸润肿瘤组织。肺瘤平膏即可上调DC与抗原递呈功能相关膜分子MHC-Ⅱ，CD80，CD83，CD86及CD40的表达，并促进DC分泌IL-12水平，提高机体的抗肿瘤免疫监视功能［18］。那么，IL-12水平上升后是否对γδT细胞产生影响，作者并未做出进一步实验加以证实，同时也未见其他相关报道。

2.1.2对树突状细胞的作用树突状细胞具有很强的递呈抗原的能力，能显著刺激T细胞的活化增殖，起抗肿瘤作用。现代研究认为人体免疫功能状态即中医所指的“正气”，当机体的免疫功能低下，尤其是细胞免疫功能低下时，免疫监视机能下降，DC功能低下，正气亏虚，机体易患肿瘤。“久病入络”“久痛入络”，表明“络”既是组织细胞实现功能协调的物质载体，又是疾病在体内传变的中心环节［19］。因而应用中药扶正培本，通络解毒，通过干预和调节肿瘤患者DC的抗原递呈功能，可能是今后中西医结合防治肿瘤的重要切入点之一［20］。这是在中医理论框架内，把中医扶正培本治则即提高机体抗邪机能的机制与DC抗原递呈功能有机地结合，应用扶正培本为主的中药或复方制剂，作为外源免疫调节剂，通过多途径干预和调节患者DC表面分子的表达，调节其抗原递呈功能，提高患者抗肿瘤机能，抑制肿瘤形成、增殖、侵袭与转移。这不但在中西医结合理论上进行了阐明，而且又研究了其实际应用价值，可谓中西医结合解决抗肿瘤问题的典范。

2.2对体液免疫的影响肿瘤抗原刺激所产生的抗体是通过免疫监视而产生保护性作用的，能被抗体所识别的肿瘤抗原可能是T细胞活化剂［21］。在用琼脂扩散法测定36例放疗加艾灸和30例单纯放疗病人治疗前后的IgG，IgA，IgM后，发现艾灸组免疫球蛋白明显高于单纯放疗组，尤其IgG有非常显著的意义［22］。针刺曲池、合谷、足三里等穴，对恶性肿瘤放化疗患者血清IgG，IgA，IgM含量具有双向调节作用［23］。在肿瘤患者体内存在早期阶段就出现的针对肿瘤抗原而产生的免疫应答［24］，抗肿瘤抗原的抗体出现常与正常体细胞的交叉反应，引起了许多肿瘤病人的瘤外综合征［25］。平消胶囊主要成分为郁金、马钱子粉、仙鹤草、五灵脂、白矾、火硝、干漆(制)、枳壳(熬炒)等药物，与放疗联合后能明显降低血清VCA-IgA，EA-IgA抗体水平，改善生活质量，提高近期和远期疗效［陈绪元，代晓波，张菊，等.平消胶囊与放疗联合治疗对鼻咽癌血清VCA-IgA,EA-IgA影响研究.平消胶囊治疗肿瘤论文汇编(西安正大有限公司编)，2003：122］。这些机制体现了中西医结合治疗恶性肿瘤从体液免疫水平分析，不但发挥了“免疫激发剂”的作用，而且还发挥了“免疫抑制剂”的作用，从多方面调节机体的免疫水平，正符合中医辨证治疗，以扶正培本为主的特色及优势。

3结语

中西医结合一直是一个有争议的话题，因为它们具有两个不同的理论体系。目前中西医结合存在的问题是：①还没有真正在发病机理及治疗机理方面将中西医的理论真正揉合起来或对应起来；②对抗肿瘤药物的筛选多为将对肿瘤治疗有一定作用的中医药与放化疗或其它现行西医疗法及药物合用，观察效果，较为肤浅、生硬，没有从机制上加以阐明；③中医“辨证施治”“异病同治，同病异治”的理论优势没有体现出来，大多为将一种中药与某种西医疗法连续应用，没有随机体免疫状况或肿瘤发展状况的变化而调整治疗方案；④结合中，中医药大多为辅助治疗，几乎没有调整的价值；⑤对于中晚期患者的治疗远期生存率不高；⑥没有对中西药各成分之间的作用进行研究。

当然，在近几十年中西医结合方面也取得了很多成绩，如扶正类中药在对放化疗耐药性及副作用治疗方面有优势，中医药在辅助西医治疗中取得了很大进展。另外，中医药在肿瘤预防及康复领域具有令世人瞩目的成就，并且从中西医结合角度得到了国际医学界的认可。相信，通过加强国内外合作研究，与最新研究成果结合（如计算机模拟等），通过强调高效、实用、综合，中西医结合会得到全面发展，中西医结合抗肿瘤研究会取得突破性的进展。

【参考文献】

［1］CajewskiTF,MengY,HarlinH.Immunesuppressioninthetumormicroenvironment［J］.JImmunother，2006,29(3):233.

［2］邢嵘，康晓楠，高志红，等.榄香烯复合瘤苗HSP70与HSP70BCG对巨噬细胞功能影响的比较［J］.中国免疫学杂志,2004,20(8):540.

［3］王莉，陈绍斌，冯建明.艾迪注射液联合化疗治疗恶性淋巴瘤22例［J］.陕西中医,2007,28(4):440.

［4］KangKS,KangBC,LeeBJ,etal.PreventiveeffectofepicatechinandginsenosideRb(2)ontheinhibitionofgapjuctionalinter,cellularcommunicationbyTPAandH(2)O(2)［J］.CancerLett,2000,152(1)：97.

［5］TatsukaM,MaedaM,OtaT.AnticarcinogeniceffectandenhancementofmetastaticpotentialofBALB/c3T3cellsbyginsenosideRh(2)［J］.JpnJCancerRes,2001,92(11):1184.

［6］，郝钰，邱全瑛，等.人参皂甙Rg1，Rh1对树突状细胞刺激T细胞增殖及LPAK抗瘤活性的影响［J］.中国免疫学杂志,2003,19(4)：248.

［7］FeiXF,WangBX,TashiroS,etal.ApoptoticeffectofginsenosideRh2onhumanmalignantmelanomaA375-S2cells［J］.ActaPharmacolSin,2002,23(4)：315.

［8］朱飞跃，张卓，曹朝晖，等.黄芪对急性白血病患者血清黏附分子水平影响的临床研究［J］.现代生物医学进展,2007,7(3)：384.

［9］梁丽坚，蔡宇，梁少玲.刺五加提取物抗肿瘤作用的实验研究［J］.时珍国医国药,2006,17(7)：1187.

［10］方菌.抗肿瘤药物研究Ⅱ：去甲斑蝥素去氧脱氢类似物的合成与抗癌活性［J］.药学学报,1993,28(12)：931.

［11］严英,钟秀驰,周伟生，等.中药制剂介入治疗恶性肿瘤的药理与临床研究概述［J］.中药新药与临床药理，2000，11(3)：187.

［12］王文武，戴西湖，欧阳学农，等.香菇多糖联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌［J］.中国肺癌杂志,2006,9(1)：78.

［13］张志娣，黄挺，杨少山，等.益肺颗粒联合化疗预防肺癌术后转移疗效观察［J］.中医药学刊,2005,23(4)：643.

［14］董晓辉，董竞成.黄芪注射液增强树突细胞的抗癌作用［J］.中国实验方剂学杂志,2005,11(1)：25.

［15］成拯，姜翼，陈凯.放化疗法配合艾灸神阙穴治疗晚期鼻咽癌42例近期疗效观察［J］.新中医，2005，37(4)：58.

［16］李东芳，田道法，黎月恒，等.中西医结合疗法治疗肺癌合并感染的临床疗效及对血清细胞因子变化的影响［J］.新中医,2006,38(12)：44.

［17］WilhelmM,KunzmannV,EcksteinS,etal.GammadeltaTcellsforimmnetherapyofpatientswithlymphoidmalignancies［J］.Blood，2003，102(1)：200.

［18］郑红刚，朴炳奎，林洪生，等.肺瘤平膏及其拆方对树突状细胞抗原递呈功能影响的分子机制研究［J］.中华中医药学刊,2007,25(6)：1133.

［19］李燕，赵燕，黄启福，等.中医络病理论的现代认识［J］.北京中医药大学学报,2002,25(3)：2.

［20］熊露，田少霞，林洪生，等.调节DC抗原递呈功能－中西医结合抗肿瘤免疫治疗思路研究［J］.中国中西医结合杂志,2004,24(9)：847.

［21］SimonAK,GallimoreA,JonesE,etal.Fasligandbreakstolerancetoself-antigensandinducestumorimmunitymediatedbyantibodies［J］.CancerCell,2002,2(4)：315.

［22］俞志冲，徐兰风，詹臻，等.艾灸对宫颈癌放疗患者免疫球蛋白的影响［J］.上海针灸杂志,2002,21(6)：15.

［23］赵蓉，张永兴.针刺对放化疗患者免疫功能的调节作用［J］.中国针灸,1994,14(1)：38.

抗肿瘤范文篇8

1.1MTT检测法

1.1.1肿瘤细胞的传代培养子宫内膜腺癌（JEC，遵义医学院微生物学教研室吴中明教授提供）、人肝癌SMMC7721（中科院上海生命研究院）用含10%小牛血清的RPMI－1640(Lot#1165062,GIBCO)培养液稀释成1×105·ml－1的细胞悬液，每个培养瓶2ml，置37℃、5％的CO2环境中进行体外培养，待瘤细胞在培养瓶底长至约80％细胞融合时，分瓶传代培养。

1.1.2分组实验分为空白对照组（NS）、阳性对照组（5-fliorouracil，5Fu，10-4mol·L-1。上海旭东海普药业有限公司，批号：031001），5个10倍梯度的试药组（10-4～10-8mol·L-1的染料木素，﹥95%，陕西赛德高科生物股份有限公司）和与10-4mol·L-1的染料木素相对应的溶媒对照组（含0.5%乙醇的NS）。

1.1.3操作用RPMI-1640完全培养液分别将肿瘤细胞稀释配制成5×104·ml－1的细胞悬液，接种于96孔培养板，每孔100μl，置37℃,5%的CO2环境中，进行体外培养，24h后加药，每孔10μl，设5个平行孔，空白对照组加入等量生理盐水；结束培养（24，48，72，96h）前4h，每孔加入5mg·ml－1的MTT溶液10μl，结束培养后小心吸弃上清液，每孔加入DMSO150μl，待甲臢完全溶解后于酶标仪（Sunrise,Australia）570nm处读出各孔的OD值。实验重复3次。

1.1.4评价指标评价指标为平均细胞抑制率(IR)。细胞抑制率（%）=(1一实验孔OD值/对照孔OD值)×100％。IR>50％为敏感，在30％～50％为低度敏感，小于30％为不敏感。

1.2台盼蓝排染法及生长曲线的绘制将对数生长期细胞制成浓度为5×104·ml－1细胞悬液，接种于24孔板，每孔1ml。置37℃,5%的CO2环境中培养24h，再行无血清培养48h。更换完全培养基，每孔加入药物100μl（空白对照组加等体积的生理盐水），每组各时间点均设2个平行孔。分别于药物作用1～7d，消化收集细胞，按台盼蓝排染法，用血细胞计数板在光镜下计数活细胞数。以时间为横坐标，活细胞数为纵坐标，绘制细胞生长曲线。

1.3统计学处理实验所得数据用±s表示，采用t检验进行各组间比较。

2结果

2.1MTT检测

2.1.1染料木素对JEC细胞体外增殖的影响MTT检测结果显示，随染料木素浓度的增加和时间的延长，染料木素对JEC细胞生长的抑制作用逐渐增强。结果见表1。其中，10-4mol·L-1的染料木素作用JEC细胞24，48，72和96h的抑制百分率分别为36.10%，55.00%，58.73%和62.21%，与5Fu间无显著差异（P>0.05）。表1染料木素对JEC细胞体外增殖的影响(略)

2.1.2染料木素对SMMC-7721细胞体外增殖的影响MTT检测结果显示，随着染料木素浓度的增加和时间的延长，染料木素对SMMC-7721的抑制作用逐渐增强。结果见表2。表2染料木素对SMMC7721细胞体外增殖的影响(±略)

2.2染料木素对JEC和SMMC-7721细胞生长的影响

2.2.1染料木素对JEC细胞生长的影响染料木素对JEC细胞的生长曲线显示，随着染料木素浓度的增加，生长曲线逐渐下移，10-4mol·L-1染料木素的生长曲线呈现与5Fu相似的下降趋势。见图1。

2.2.2染料木素对SMMC-7721细胞生长的影响染料木素对SMMC-7721细胞的生长曲线显示，随着染料木素浓度的增加，生长曲线逐渐下移。见图2。

3讨论

MTT检测结果显示，染料木素对JEC和SMMC-7721细胞体外增殖均有不同程度的抑制作用，呈现剂量和时间依赖性。其中，在96h10-4mol·L-1的染料木素对JEC细胞的抑制百分率达62.21%，对SMMC-7721细胞的抑制百分率为31.87%。表明染料木素对JEC细胞敏感，对SMMC-7721低度敏感。该结果与染料木素对胃癌HGC227细胞系［6］、人肺癌细胞A549和人低分化胃腺癌细胞BGC-823［7］等的抑制作用相似。随着染料木素浓度的增加，JEC和SMMC-7721细胞的生长曲线均逐渐下移。其中，在10-4mol·L-1的染料木素作用下，JEC细胞的生长曲线呈现与5Fu相似的下降趋势，进一步表明染料木素具有一定的抗肿瘤作用。

染料木素是一种很有潜力的癌症化学预防剂，来源丰富，作用复杂，受到广泛关注。研究表明，染料木素具有雌激素作用、抗氧化作用以及抑制拓朴异构酶活性、抑制酪氨酸蛋白激酶活性、诱发细胞程序性死亡、抑制血管生成［2］等作用，但仍不能完全阐明其作用机制。染料木素抗肿瘤的机制有待深入研究。

【参考文献】

［1］WisemanH.RoleofDietaryPhyto-oestrogensintheProtectionAgainestCancerandHeartDisease［J］.BiochemSocTrans.1996,24(3):795.

［2］郑杰.金雀异黄素［J］.国外医学·卫生学手册,1998,25(5):260.

［3］PollardM，etal.InfluenceofIsoflavonesinSoyProteinIsolatesonDevelopmentofInducedProstate-relatedCancersinL-WRats［J］.Nutr-Cancer.1997,28(1):41.

［4］张义,赵春燕,孙亚芹，等.大豆异黄酮的抗肿瘤研究［J］.长春中医学院学报，2006，24（1）：60.

［5］AnnRKennedy:TheEvidenceforSoybeanProductsasCancerPreventiveAgents［J］.J.Nutr.1995,125:733.

［6］MatsukawaY,MaruiN,SakaiT,etal.GenisteinarrestscellcycleprogressionatG2-M［J］.CancerRes,1993,53(6):1328.

［7］马磊,楼凤昌.槐角中的抗癌活性成分［J］.中国天然药物，2006，4（2）：151.

抗肿瘤范文篇9

【关键词】葫芦钻；抗肿瘤

Abstract:ObjectiveToinvestigatetheantitumoractivityofYaoHerb--Huluzuan.MethodsTheantitumoractivityinvitroagainsthumancancercelllines--hepatocarcinomaBEL-7404wasdeterminedbyMTTmethod.Theantitumoractivityinvivowasevaluatedbytheprolongationratiosoflife-spanandtheinhibitionratiosofthetumorweightoftransplantedmouseS180、H22solidandascitescarcinomamodelfedonextractedsubstancesfromHuluzuan.ResultsWhenthedoseofwater,alcoholextractedsubstancesfromHuluzuanwas20mg/ml,theinhibitionratiosofthetumorcellinvitrowasinexcessof50%.Bothmaximumtolerateddoseofwater,alcoholextractedsubstancesfromHuluzuanwere150g/kg.Inthreetimesoftheexperiment,prolongationratiosoflifespanathighandlowdoseofwater,alcoholextractedsubstancesexceed50%onmiceS180ascitescarcinomamodelinaverage,andathighdoseofalcoholextractedsubstancesexceeded50%onmiceH22ascitescarcinomamodelinaverage,inhibitionratiosathighandlowdoseofwater、alcoholextractedsubstancesexceed30%onmiceS180solidcarcinomamodelandexceed50%onmiceH22solidcarcinomamodelinaverage.ConclusionWater,alcoholextractedsubstancesfromHuluzuanhasantitumoractivitytosomeextent.

Keywords:Huluzuan；Antitumor

葫芦钻为天南星科植物石柑子Pothoschinensis(Raf.)Merr.的全草，为广西瑶医老班药“五虎、九牛、十八钻、七十二风”之一，瑶族传统治癌“打药”［1］，具有理气止痛，清热解毒的功效。根据民间用药经验，开展抗肿瘤作用实验研究，作者通过体内药效实验和体外药效实验评价葫芦钻提取物的抗肿瘤效果。

1材料

1.1药材葫芦钻采自广西金秀瑶族自治县，经广西民族医药研究所戴斌主任药师鉴定为天南星科植物石柑子。

1.2动物昆明种小鼠，体重18～22g，雌雄兼用，SPF级，购自广西医科大学实验动物中心（生产许可证号：SCXK桂20030003），动物分组分笼饲养，自由饮水，喂全价颗粒饲料，动物室温度（24±2）℃，相对湿度50%～60%。

1.3主要药品与试剂RPMI1640培养基为Gibco公司的产品；MTT为Sigma公司的产品；小牛血清为杭州四季清公司的产品；DMSO（二甲基亚砜）为Sigma公司的产品；其余试剂均为分析纯。

1.4细胞系人肝癌细胞BEL7404引自中国科学院上海细胞生物研究所细胞库；用RPMI1640培养液（含10%的小牛血清，100ku·L-1青霉素，100mg·L-1链霉素）37℃，5%CO2，相对湿度100%培养，0.25%胰蛋白酶消化传代。

1.5瘤株小鼠S180，H22腹水瘤株和小鼠S180，H22肉瘤株均由广西中医药研究所引进，本实验室冷冻保存，用昆明种小鼠接种传代。

2方法

2.1葫芦钻提取物的制备葫芦钻水提物：取药材加10倍量水水煎两次，1h/次，滤液合并浓缩，4℃冰箱保存备用；葫芦钻醇提物：取粗粉加5倍量95%乙醇回流提取3次，第1次2h，第2，3次各1h，合并滤液减压回收乙醇至无醇味，浓缩，4℃冰箱保存备用。

2.2体外药效实验MTT法测定：BEL7404经胰蛋白酶处理制成单细胞悬液，接种96孔板，每孔接种3000个细胞/100μl，含10%FBS的RPMI1640培养液，培养24h后，实验组分别加入最终浓度为1，5，10，20mg/ml葫芦钻水提物和醇提物的培养液，对照组则加入等体积溶剂的培养液。每组均设7个平行孔。置37℃，5%CO2培养箱培养5d后，加入MTT20μl，4h后弃上清，每孔加入DMSO100μl，1h内在BioRad550MicoplateReader上用波长546nm比色，测定OD值，按下式计算药物对肿瘤细胞生长的抑制率［2］。

肿瘤细胞生长抑制率(%)=（1实验组平均OD值/对照组平均OD值）×100%

2.3急性毒性实验在预试验基础上，取40只昆明种小鼠，体重18～22g，雌雄各半，随机分为两组。以动物能耐受的最大浓度，最大容积的剂量，灌胃给药，葫芦钻水提物3.75g生药/ml，葫芦钻醇提物3.75g生药/ml，0.4ml/10g体重。给药后连续观察7d，逐日观察记录动物反应情况［3］。

2.4体内药效实验［4］

2.4.1对S180，H22腹水瘤小鼠生存天数的影响在无菌条件下，抽取小鼠腹腔内连续传代的S180，H22细胞，从右下腹部注入受体动物腹腔内，每鼠0.2ml。接种24h后随机分组，每组10只。接种次日葫芦钻水提物高、低剂量组（37.5，12.5g/kg），葫芦钻醇提物高、低剂量组（37.5，12.5g/kg），模型对照组（蒸馏水），连续ig给药10d后，停止给药，正常饲养，直到自然死亡，逐日记录荷瘤小鼠的存活状况，按下式计算各组平均生命延长率。

生命延长率=治疗组平均存活天数-对照组平均存活天数对照组平均存活天数×100%

上述实验均重复3次，并计算3次的平均值。

2.4.2对S180，H22肉瘤小鼠的抑瘤作用分别选择接种7d后的S180，H22肉瘤（腹水型）小鼠，颈椎脱臼致死，固定于板上，消毒腹部皮肤，用无菌空针抽吸含瘤细胞腹水，接种于受体动物右前肢腋部皮下，每鼠0.2ml。24h后将已接种的小鼠随机分为对照组、治疗组（高，低剂量组），每组10只。治疗组每天ig给药1次，连续10d，对照组ig等量的蒸馏水。于停药后第2天处死，称体重和瘤重，按下式计算抑瘤率。

肿瘤抑制率=对照组瘤重－给药组瘤重对照组瘤重×100%

上述实验均重复3次，并计算3次的平均值。

2.5统计学处理应用t检验进行统计学分析，数据以±s表示。

3结果

3.1MTT法不同浓度葫芦钻水、醇提取物对人肝癌细胞株BEL7404的抑制。结果见表1。

表1不同浓度葫芦钻水、醇提取物对体外培养的人肝癌细胞BEL7404的影响（略）

结果显示，葫芦钻水、醇提取物对体外培养的人肝癌细胞BEL7404增殖都表现较强的抑制作用，抑制率与提取物浓度正相关。当葫芦钻水、醇提取物浓度为20mg/ml时，抑制率均＞50%，且葫芦钻醇提取物作用效果强于葫芦钻水提物。

3.2葫芦钻水提物日总剂量为150g/kg，葫芦钻醇提物日总剂量为150g/kg，给药当天动物出现便溏现象，其后观察7d，对小鼠体重、行为、进食、皮毛、眼和黏膜、呼吸、四肢活动均无任何影响。说明葫芦钻水、醇提取物的急性毒性小。

3.33次实验结果显示，葫芦钻水、醇提取物高、低剂量组对S180腹水瘤小鼠平均生命延长率均＞50%，葫芦钻醇提物高剂量组对H22腹水瘤小鼠平均生命延长率＞50%。结果见表2。

表2葫芦钻提取物对S180和H22腹水瘤小鼠存活期的影响（略）

与模型组比较，※P<0.05，※※P<0.01；n=10

3.43次实验结果显示，葫芦钻水、醇提取物高、低剂量组对S180肉瘤小鼠平均瘤重抑制率均＞30%，对H22肉瘤小鼠平均瘤重抑制率均＞50%，结果见表3。

表3葫芦钻提取物对S180和H22肉瘤小鼠的抑制作用（略）

与模型组比较※P<0.05※※P<0.01;n=10

4讨论

寻找具有抗癌作用强，抗癌谱广，副作用小的天然活性化合物是抗癌药物研究的重要途径。近年来对传统瑶药开展抗肿瘤作用的筛选研究，发现瑶药葫芦钻具有一定的抗肿瘤作用。本研究结果显示，通过MTT法检测葫芦钻水、醇提取物对人肝癌细胞生长有抑制作用。当药物浓度低于5mg/ml时，对肿瘤细胞的抑制作用不明显。随着药物浓度升高至20mg/ml，药物对肿瘤细胞生长的抑制较明显，抑制率在50%以上。且葫芦钻醇提物的作用效果强于水提物。急性毒性实验中，葫芦钻水、醇提取物的最大耐受剂量均是150g/kg，急性毒性较小。从实验结果可以看出，葫芦钻水、醇提取物在改善S180腹水瘤小鼠存活率方面作用非常明显，生命延长率为73.65%～97.43%，与模型组比较，平均生存期延后10d以上。葫芦钻醇提物高剂量组在改善H22腹水瘤小鼠存活率方面作用明显，生命延长率为54.75%。葫芦钻水、醇提取物对S180肉瘤和H22肉瘤均具有明显的抑制作用，对S180肉瘤平均抑制率＞30%，对H22肉瘤平均抑制率＞50%，与模型组比较有显著性差异（P<0.01）。这些说明葫芦钻提取物具有较强的体内和体外抗肿瘤作用，有进一步研究的价值。本研究结果为葫芦钻的临床抗肿瘤应用及抗肿瘤活性成分的进一步分离筛选提供了依据和资料。

【参考文献】

［1］戴斌，丘翠嫦，李钊东，等．瑶医用药品种调查报告［J］.中草药，1997，28（12）：746.

［2］张均田．现代药理实验方法（上册）［M］．北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，1998：819.

抗肿瘤范文篇10

恶性肿瘤的预防、诊断和治疗等方面取得了不少成功的经验，恶性肿瘤是当今严重危害人类健康和生命的疾病之一。尽管人类经过了近百年的努力。但全世界每年仍有900万新发癌症患者，每年有500万人死于癌症。国是一个癌症多发性国家，现有260万癌症患者、每年新发病患者180万、死亡人数140万。癌症仍然是给人类带来灾难的头号杀手。开发研究生产疗效好、广谱性强、副作用小的抗癌药物仍然是医学界的重要课题。

上世纪60年代初期已有部分品种开始生产销售。40多年来，国抗肿瘤药物的研究开发始于上世纪50年代末期。国抗肿瘤药物生产已由个别品种发展到系列化产品，研发和销售也有了长足的进步。特别是近十年来，研发(包括仿制)及市场营销上的成就令人瞩目。

国抗肿瘤药物生产企业已有近百家(包括中药制剂生产厂家)其中，目前。原料药厂20多家，制剂厂和中药厂有60多家。迄今为止，国抗肿瘤药物已发展到七大类160多个品种。世界卫生组织XX年4月公布的22个基本抗肿瘤药物，国全部都可以生产。国年产抗肿瘤药物30多吨，生产企业主要分布在江苏、浙江、广东、山东、上海等地。但产品仍不能满足日益增长的临床需求。总体说来，抗肿瘤药物市场需求大于供应。

解患肿瘤病人家庭的抗肿瘤药品的消费情况和大众对抗肿瘤药品的态度，所以。一方面，有助于企业从消费者角度研究细分的抗肿瘤用药情况;另一方面，有助于医药生产企业和流通企业更好地了解目标消费者的需求，并进一步了解抗肿瘤药品的市场竞争情况，从而使企业能“对症下药”把更多、更好的药品快速销售到消费者手中。

来了解抗肿瘤药品市场的竞争状况和消费者对抗肿瘤药的需求喜好及对医药企业的期望。由此使恒瑞医药能很好的把握消费者的心态，本次调研主要是为了通过对消费者对抗肿瘤药的认识、解和用药态度调查。掌握抗肿瘤用药市场的发展趋势，从而采取有力的合理的措施来推广其主打产品—艾恒。

一、从渠道方面分析。对于抗肿瘤用药，绝大多数消费者是到药店和医院购买，两者比例之和达95.2%，其中到药店购买的家庭为58.7%，去医院的为36.5%;而通过其他渠道购买的极少。为什么居民选择到药店的比较多，而到医院的相对较少呢?这其中一个很主要的原因就是，我国医药体制和医疗保障制度造成的二者所占药品销售比重较大，但是由于各处销售药品的价格高低不一，药店的药品价格相对低一些，而抗肿瘤类药品一般都是需要长期服用的，所以到药店的购买比例会较高;而在医院购药的家庭中，很大一部分是有医保可以报销的。所以，现阶段企业要做好药品市场，一定要了解我国目前的医药体制，同时也要关注医疗改革。

另一方面，药品渠道的选择还与抗肿瘤用药的特点有关。抗肿瘤用药大部分为处方药，需要通过医生处方才能购买。因此，患者前几次看病或服药一段时间复查都需要到医院，在诊治后就地购药;但是肿瘤的治疗一般需要长期吃药，在医院得到确诊后，一般病人都会考虑自己去药店购买相同的药。

从上面的分析我们可以知道，渠道的选择对医药企业来说很关键，其中要考虑的因素主要为消费者的主观方面和我国的医药制度客观方面。

二、从药品性质分析。调查结果表明，在城市居民家庭购买的各种抗肿瘤用药中，西药占到七成以上，达73.3%，而中药只占26.7%。这表明在治疗肿瘤的药物方面，对于中药的研制开发生产具有很大的空间，因为在药物治疗方面，中药的副作用小是一大优势。对于医药企业来讲，选择做消费者认可的药物种类，可以使企业减少和消费者的沟通障碍，从而减少不必要的营销费用。同样，好的药品命名策略、传播策略等也可以为企业减少很多运营成本。所以，详细了解消费者的基本情况，有助于企业进行经营决策。尽管西药市场竞争已经很激烈，但是依然有市场空间，仍然有商业机会。

对于本次调研，尽管从消费者角度调查出消费者比较认可的是西药，但是我们不能否认位列后面的中药将来就没有商业机会，不能成为未来的主要药物，因为一切都在变化中。且既然西药竞争已经趋近红海，那么另僻蹊径开发中药的蓝海压力就会小很多。虽然同时会存在很多风险，但是在其他企业涉足尚浅的时候率先造势，有利于企业打造领头企业的品牌形象，能够抢占先机，获取较高的市场占有率。

三、从消费者的购药主要依据分析。调查询问了城市居民家庭在购买各种抗肿瘤用药时所想到的首要根据，结果表明，89.9%的家庭提及是由医生推荐的比例远远高于其他原因。这是由于抗肿瘤用药多是处方药，患者对肿瘤疾病的认知了解有限，服用什么药品受医生的专业推荐影响很大。另外，10.1%的家庭表示根据过去的使用经验来购买某一抗肿瘤用药。

同时，我们还可以从另外一种横向角度解读这组数据。在购买的首要原因中，决定并影响消费者购买的人员依次是医生、家人和朋友、药店店员，在所有原因占比中，分别是89.9%、8.3%和1.8%。这一方面反映出医生对于抗肿瘤用药的销售是何等重要，药店店员的推荐是多么微不足道，另一方面也说明老百姓医药知识的缺乏，需要企业加强对百姓健康知识的普及。

过去的使用经验也是决定患者购买的一个很重要的因素，它实际反映了医药企业实现产品的一次销售和多次销售问题。很多医药企业只关心重点渠道中的关键因素，如医院的医生，但是很少有企业会关注消费者的消费过程，消费者是如何进行多次购买的。鉴于肿瘤疾病的特殊性质，患者往往要长期服药才能保持较好的身体状态，所以在第一次购买后，医药企业更要关注他们的二次购买以及重复购买问题。企业同时还要关心产品每次销售后的患者使用情况，细致入微的售后服务相对于医药企业实现第一次销售，是一种投入少而销售效果更佳的营销措施。所以，企业不要只关心产品的前期销售，还要提供药品的售后服务。

过去的使用经验是患者对过去该药品疗效的一种肯定，这实际和占比6.9%的药效可靠是很相关的。在决定购买的首要原因中，关于药效有很多不同层次的直接提法，如药效可靠、起效快、副作用小、质量好、有持久功效/长效，如果将其合并则有14.6%的比重，加上一些隐含药效较好的原因，如医生推荐、过去的使用经验等，则可以毫不夸张地讲，药效是消费者在购买抗肿瘤药品时第一考虑的因素，这也是企业在营销中要考虑的一个重要问题。当然，另一方面，药品的安全性也是影响消费者购药的重要因素之一。医药企业要特别注意自身的形象，调查中显示，如果制药企业发生药品安全问题，则会使消费者对企业的信任大大降低，从而影响企业形象，并直接打击消费者的购买信心。