阿魏范文10篇

阿魏范文篇1

阿魏酸是桂皮酸的衍生物之一，有顺式和反式两种，顺式为黄色油状物，反式为白色至微黄色结晶物，一般系指反式体，相对分子质量194．19，熔点174℃。阿魏酸微溶于冷水，可溶于热水，水溶液中稳定性差，见光易分解，易溶于乙醇、甲醇、丙酮，难溶于苯、石油醚，pH稳定性好。

2阿魏酸的功能

2.1抗氧化生命机体时刻都会遭受内源或外源性活性氧类的侵袭，从而诱发一系列疾病，如动脉粥样硬化、癌症、白内障等；同时，皮肤衰老、皱纹的产生以及色斑、老年斑的形成也与自由基有着密切的联系，因此抗氧化损伤净化自由基是防治这些疾病的关键［1］。研究表明，阿魏酸具有很好的抗氧化活性，对过氧化氢、超氧自由基、羟自由基、过氧化亚硝基都有强烈的清除作用［2］。

阿魏酸不仅能猝灭自由基，而且能调节人体生理机能，抑制产生自由基的酶，促进清除自由基的酶的产生。据报道，阿魏酸能大大增加谷胱甘肽转硫酶和醌还原酶的活性，抑制酪氨酸酶活性，并能与膜磷脂酰乙胺结合，保护膜脂不受自由基的侵袭［3］。

阿魏酸因其强氧化能力和能抑制酪氨酸酶活力的作用而受到化妆品行业青睐，但其中还有另外一个原因就是阿魏酸在290～330nm附近有良好的紫外线吸收，而在305～310nm的紫外线最容易诱发皮肤色斑。所以，阿魏酸可抑制皮肤衰老、减少色斑生成以及美白皮肤，从而在化妆品中得到广泛应用［4］。

2.2抗血栓阿魏酸能有效地抑制血小板凝集，并且能抑制羟色胺、血栓素样物质的释放和选择性地抑制血栓素合成酶活性，使前列腺素和血栓素的比率升高［5］，因而它具有抗血栓作用。阿魏酸主要通过以下几种机制抑制血栓素释放：①选择性地抑制血栓素合成酶；②与血栓素发生拮抗作用；③通过抑制磷脂酶A2(PLA2)阻止花生四烯酸游离，从而阻断TXA2等的生成［6］。阿魏酸抑制血小板聚集还与它能增加C-AMP水平和抑制磷酸二酯酶的活性有关。

2.3降血脂作用在高脂饲料中添加0.2%的阿魏酸饲喂大鼠4周，老鼠血清胆固醇含量比不加阿魏酸的低得多，说明阿魏酸能降低血脂水平。阿魏酸降脂的机理被认为是它能竞争性地抑制肝脏中羟戊酸-5-焦磷酸脱氢酶活性，即阿魏酸有抑制肝脏合成胆固醇的作用［7］。

2.4防治冠心病阿魏酸能降低心肌缺血和耗氧量［8］，在临床上被用于治疗冠心病、心绞痛。导致冠心病的最主要、最基本的病因是动脉粥样硬化，动脉粥样硬化的诱因是脂质被自由基氧化。脂质氧化产物丙二醛与低密度脂蛋白生成具有细胞毒性作用的丙二醛-低密度脂蛋白，主要通过以下3个途径导致动脉粥样硬化［3］。

①丙二醛-低密度脂蛋白被单核细胞吞噬后，使细胞内胆固醇代谢发生障碍，造成胆固醇积累，形成泡沫细胞。②丙二醛-低密度脂蛋白使内皮细胞浆发生空泡变性，浆膜皱缩，导致细胞损坏和死亡。血管内皮细胞受损时，正常血管的抗血栓作用受到破坏，血小板在损伤处粘附、聚集并释放出胞浆中的活性物质，使血栓形成、内膜增厚、脂质浸润，促进动脉粥样硬化形成［9］。③抑制前列环素产生，引起TXA2的升高。TXA2通过抑制腺苷酸环化酶，使血小板和血管壁平滑肌内环磷酸腺苷(cAMP)减少，或做为Ca2+载体直接促进Ca2+内流和致密管系统的Ca2+释放，从而促进血小板聚集和局部血管收缩，加重内皮细胞损伤。而前列环素能起到扩张血管、限制血小板聚集和保护受损内皮细胞的作用。阿魏酸能通过抑制脂质氧化、降低血清中胆固醇含量和抗血栓作用而防治动脉粥样硬化，从而治疗冠心病［7，9，10，11］。

2.5抗菌消炎阿魏酸对感冒病毒、呼吸道合胞体病毒(RSV)和艾滋病病毒都有显著抑制作用。

Hirabayashi等将老鼠巨嗜细胞RAW264．7用流行性感冒病毒感染，发现采用阿魏酸和异阿魏酸处理时，干扰素-γ的产生分别下降43％和56％，活体实验也发现同样趋势［11］。采用同一细胞系观察阿魏酸对RSV诱导产生的炎症蛋白一2的影响，发现阿魏酸能大大降低该蛋白的产生［12］。而阿魏酸及其衍生物对艾滋病病毒的抑制作用使它成为一种潜在的化学治疗剂［13～15］。阿魏酸对病毒的抑制机理还可能与它能抑制黄嘌呤氧化酶的活性有关，因为该酶与一些炎症性疾病关系密切［16］。

阿魏酸对细菌的抑制作用表现得更为广谱。现已发现，阿魏酸能抑制宋内氏志贺氏菌、肺炎杆菌、肠杆菌、大肠杆菌、柠檬酸杆菌、绿脓杆菌等致病性细菌和11种造成食品腐败的微生物的繁殖［17～19］。阿魏酸对细菌N一乙酰转移酶有较强的抑制作用，这可能是其具有抗菌作用的主要原因［18，19］。

2.6抗突变和防癌作用最近，有关阿魏酸及其衍生物抑制结肠癌、直肠癌和舌癌的报道在增加。Kawabata等［20］采用偶氮甲烷(AOM)诱导F334鼠产生结肠癌，发现饲喂含有500mg／kg阿魏酸的异常病灶数下降27％。另有报道，阿魏酸的抗癌活性与其能激活解毒酶如谷胱甘肽转硫酶、醌还原酶的活性有关［21］。

除了以上介绍的功能外，阿魏酸还具有免疫调节［21］、提高精子活力、治疗男性不育［22］和清除亚硝酸盐等作用［23］。

3阿魏酸的制备方法

阿魏酸可通过化学合成和从植物材料中提取获得。

3.1化学合成阿魏酸化学合成多以香兰醛和丙二酸为原料，以无水吡啶为溶剂，哌啶作催化剂，通过缩合反应获得。但该法存在明显缺陷，因为它获得的阿魏酸是顺式和反式阿魏酸的混合物，且反应时间较长(可长达3周)，溶剂用量大，产率也很低［24］。

3.2从植物中提取可通过3条途径从植物中获得阿魏酸：①从阿魏酸与一些小分子的结合物中获得；②从植物细胞壁中获得；③通过组织培养获得。米糠中的醇提物中含有多种甾醇和萜类的阿魏酸酯，其中最典型的物质是γ-谷维素，它占米糠油的1.5％～2.8％。目前生产高纯度反式阿魏酸的工业化方法就是将谷维素在90～100℃温度下采用氢氧化钠或氢氧化钾水解8h，而后用硫酸将pH值调至酸性以沉淀出阿魏酸。

植物细胞壁是阿魏酸的最重要来源。研究表明，碱和微生物产生的阿魏酸酯酶可将结合于细胞壁上的阿魏酸游离出来。一般认为，采用4％的氢氧化钠在通氮条件下常温反应24h可释放出细胞壁中的所有阿魏酸。由于碱解法耗时太长，该法过去仅限于分析细胞壁物质中的阿魏酸含量。最近，我们通过提高提取温度，并加入适合的保护剂，发现0．5％的氢氧化钠浓度在较短时间内就能将麦麸中大部分阿魏酸游离出来［25］，为碱解法的实际应用提供了可能。

阿魏酸酯酶(EC3．1．1．1)是指能将阿魏酸甲酯、低聚糖阿魏酸酯和多糖阿魏酸酯中阿魏酸游离出来的一种酶［26］。真菌、细菌和酵母都能分泌阿魏酸酯酶。由于微生物在分泌阿魏酸酯酶的同时还分泌一些降解阿魏酸的酶系，目前采用微生物直接作用于细胞壁物质如蔗渣、麦麸等制备阿魏酸还未进入工业化生产水平，但在阿魏酸酯酶的研究上已进行了一些卓有成效的工作。①筛选了一批能高效分泌阿魏酸酯酶的微生物；②对该酶的酶学特性进行了详细研究，如酶的结构、最适温度、最适pH值及影响酶稳定性的其它因素；③探讨了阿魏酸酯酶与一些多糖降解酶的协同作用；④探讨了微生物产酶的影响因素和酶的工业化分离方法。今后，如果能在优化微生物产酶工艺上开展更多的研究，即可推动酶法制备阿魏酸的工业化生产。

采用植物组织培养法也是获得阿魏酸的一条重要途径。一些研究表明，对某些植物进行组织培养能使之产生较高产量的阿魏酸衍生物。如对糖甜菜、玉米进行细胞悬浮培养能获得水溶性的阿魏酸葡萄糖酯、阿魏酸蔗糖酯等［27］，含量高者可达20．0μmol／g愈伤组织(干重)。采用筋骨草进行组织培养产生的阿魏酸量更高，达150mg/L培养液，且大部分为游离阿魏酸［28］。可见组织培养法也是生产天然反式阿魏酸的一条重要途径。

4阿魏酸的分析方法

4.1高效液相色谱法用高效液相色谱法测定阿魏酸的含量，方法简单快速、结果准确、精密度高。其流动系统文献报道多采用酸性系统，主要有甲醇-水-磷酸系统、甲醇-水-冰乙酸系统、甲醇-乙腈-水-冰乙酸系统等，适当调整甲醇用量，可使阿魏酸与杂质峰分离度符合要求。

4.2薄层扫描法薄层扫描法也是常用的阿魏酸含量测定方法之一。该法快速、灵敏，但其灵敏度仍不够理想。

4.3高效毛细管电泳法毛细管电泳是目前应用最广泛的毛细管电泳的分离模式。其特点是简单、高效、快速、样品用量小、易自动化操作。

5阿魏酸的应用及展望

5.1医药品应用我国的某些中药材富含阿魏酸，如当归、川芎等，通常以阿魏酸作为有效成分来评价这些药材的优劣。现在已知阿魏酸及其衍生物有抗血栓形成、抗炎、止痛、抗紫外线辐射及抗自由基，以及调节人体免疫功能的作用，阿魏酸除了能有效降低人体血液粘度，清除血管壁血脂的沉积，促进血液微循环使皮肤得到滋养外，还能有效调节内分泌，降低皮肤色素的沉积，从而有助于皮肤抗衰老［29］。

5.2食品应用阿魏酸在我国保健品中的知名度首推深圳“太太口服液”，该产品标出的功效成分就是阿魏酸。一般情况下，阿魏酸在食品中的应用，主要是作为食品抗氧化剂而得到使用的。如添加在面条、肉制品中等，可明显提高食品的品质。此外，如与V、Vc并用，则有较强的协同作用，抗氧化效果更好。

5.3化妆品应用阿魏酸能改善皮肤品质，使其细腻、光泽、富有弹性，因其具有两大特点而被化妆品行业所青睐，一是在290～330nm附近有良好的紫外线吸收，而305～315nm的紫外线最易诱发皮肤红斑。二是阿魏酸有很强的抗氧化作用，并有抑制酪氨酸酶的作用，从而起到抑制皮肤老化、美白皮肤的效果［30］。

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阿魏范文篇2

【关键词】阿魏生物学特性生境

前言

阿魏是伞形科植物新疆阿魏Ferulasinkiangensis和阜康阿魏Ferulafukanensis的树脂［1］。含挥发油、树脂及树胶、阿魏酸和法尼弗醇等，是国内仅分布在新疆的一种重要珍稀药用植物资源，是维吾尔医常用药物之一，由于缺乏管理和采收不当，已经到了濒临灭绝的地步。阿魏味辛、温，有理气消肿、活血消疲、祛痰和兴奋神经的功效，其药用历史已有一千多年。维吾尔医还用来驱虫、治疗白癜风、胃病、关节炎等［2］。国内外只有5种具蒜样异臭的臭阿魏，才可供药用。新疆全有这5种臭阿魏，载入《中国药典》的有两种［3］。在石河子市南部山区，生长在带有砾石的黏质略带沙土壤和石质干山坡上，分布着一种呈苇状的野生臭阿魏，野生阿魏是早春短命植物，8年才能开花结果。一株阿魏的双悬果有9000粒种子左右，但发芽率仅为0.3％，第1年的主根仅如筷子粗细，3月中旬出苗，5月上旬开始回苗，留下膨大的肉质根以度严寒酷暑。如此往复，到第8年4月底，则迅速抽出粗壮幼嫩的茎，4月底始花，里面充满白色乳液状树脂。本研究从新疆阿魏的生物学特性入手，摸清新疆阿魏的生长习性，继而进行人工栽培试验及药材提取加工试验。使保护与利用紧密结合，挽救濒临灭绝的新疆阿魏这一珍稀药用植物资源，使其永久地为人类健康服务。

一、内容和方法

2005～2006年对生长于石河子南山的野生阿魏跟踪观测，对其生物学特性进行了观测和实验分析。

1.1物候期观察从3月底萌芽到5月中旬地上部分枯败、6月开花结实的不同时期，地上部分生长状况，形态特征变化进行观测记录。

1.2开花结果习性观测按文献［4］方法于20060426开花初期，选取石河子南山阿魏原生地标记5株，每4天观测记录1次花序开放数，直到开花末期，然后进行统计分析。

1.3对幼叶及挥发油进行营养化学元素成分分析取新疆阿魏树脂、基生叶提取挥发油，按国家标准分析方法进行氨基酸、钙和磷等化学成分分析。

1.4生境条件土壤特性研究取不同生境不同层次的土样,按国家标准分析方法进行氮、磷、钾、有机质、总盐和pH值分析测试。结果见表1。表1土样记录（略）

1.5生长量观测选取生长正常的阿魏5株，于生长季节各期测定其株高、冠幅。

1.6原产地与引种地环境因子比较原产地新疆石河子南山与引种地新疆石河子大学药学院植物园直线距离10km，位于天山北麓中段,准噶尔盆地南缘，其地理位置处在东经85°～86°30′,北纬43°30′～45°40′之间，地势相对平坦，且自东南向西北倾斜，地面坡降仅0.74‰，原产地海拔高度约468.2m，引种地海拔高度约442.9m。纵伸于沙漠南缘，为温带大陆性干旱荒漠气候，具有夏热冬冷、降水少而蒸发大、热量资源丰富、风沙繁多、气候干燥多变，昼夜温差大，日照充足，加上天山雪水灌溉等的特点，两地主要气候因子见表2。

二、结果

2.1物候期北疆野生阿魏一般在春季3月15日左右始出芽，3～4月为莲座叶丛期，5月15～20日莲座叶最大直径可达123cm(单叶长约1.3cm)；3月20日始见抽茎，一直持续到5月上旬；阿魏的初花期为4月29～5月9日，高0.5～1.5m，全株有强烈的葱蒜样臭味。复伞形花序生于茎枝顶端，单株总花期8d,盛花期为5月中旬,5月下旬仍有零星花开放；开花后10d，种子开始成熟，长椭圆背腹扁压，绿色至浅紫色至深褐色，4月中下旬开始枯败，直至6月下旬；7月至第2年3月中旬为休眠期。阿魏喜温暖干燥气候，15～30℃生长尤为迅速，较耐寒，地下肉质根可耐-20～-15℃低温，夏季生长在潮湿冲沟里的植株，其生长期稍长。两地主要气候因子比较（略）

2.2开花规律野生阿魏每日早6:30左右花始开放，约15min全部花序开放，10:30左右达到当日开花高峰。每个花序自开放到闭合延续4h左右，开花时间持续到下午7点左右。如图1所示，石河子南山野生阿魏从4月下旬初花期开始，每株花序开放数逐渐上升,至5月16日左右达高峰期，延续1周后急剧下降，但开花一直零散见于6月上旬，可见阿魏花期很短。见图1。

2.3株高、冠幅增长规律见图2。

2.4树脂及基生叶化学成分分析阿魏叶柔嫩，叶有微量阿魏胶，特别是处于莲座叶丛期的植株，其叶量丰富而鲜嫩，总氨基酸含量为24.46%,粗脂肪2.65%，粗纤维11.65%，粗灰分12.25%，钙1.26%,磷0.68%，17种氨基酸丰富而全面，其含量见表3。表3新疆阿魏树脂、基生叶氨基酸含量（略）

2.5生境土壤条件分析从野生阿魏两个不同的生境中取得土壤样品，对氮、磷、钾、总盐、有机质及pH值进行测试，结果见表4。从表4中可以看出，不同生境土壤条件差异不大，阿魏的土壤适应性较强，耐瘠薄能力较强，在有机质不算丰富，氮、磷和钾含量不高的土壤中，不影响其生长发育。表4不同居群生境中土壤成分分析（略）

三、讨论

3.1形态特征与生长特性阿魏ferulalehmanniiBoiss生于夏热冬寒，气温变化剧烈，日照时长，年均降水量仅为200mm左右的荒漠，土壤多为荒漠灰钙土，伴生植物多为蒿类，其生长气候要求冷凉、干旱少雨条件，具有耐寒、耐旱、喜光的特性。能充分利用春天雪融化后土壤水分条件良好的短促时间，迅速发育生长开花结实，年生长期仅50d，其余时间为休眠期。3月底出苗，4～5月开花，5～6月结实。为多年生草本，高50～150cm，主根粗大肥厚，圆柱形或纺锤形，有时分枝，表皮黑紫色。上端具有环纹。茎直立，基部有多数纤维状叶柄残基。基生叶有长柄。茎叶互生，3～4回羽状复叶。小叶片羽状深裂。复伞形花序顶生，花小黄色，双悬果扁，卵圆形紫红色，肋间脂管1～2个，结合面6个。莲座直径可达130cm；抽茎期为3月下旬。4月底，未抽茎的阿魏地上部份开始回苗，只剩下抽茎的植株。阿魏每年生育周期短，一年中累计的养分有限，延长生长期限才能开花结实；一半生长周期为8年，在营养生长阶段叶子排成莲座状，逐年增大，发育成熟时由丛生叶中抽出花茎，开花结实。千粒重7.8g，种子小而轻，易借风力传播，休眠期长达300d以上。

3.2抗逆性新疆阿魏在原生地石河子南山一带，最低气温达到－33℃。冻土层最深1.5m，最浅1.3m，未见有冻害现象；该植物适宜于土壤水分较好的干旱环境中生存，同时它也能在水分不充足的情况下正常生长开花结果，说明它具有一定的抗寒性、抗逆行；阿魏属植物耐旱，但土壤水分的多少直接影响植株的高度，如：长在较易积存水分的低凹地和冲沟边的植株要比其它地方的高大得多。但抗涝性较差，一但淹水时间太长或连阴雨天，就会导致地上嫩枝叶黄化，地下部分发黑腐烂；该植物抗病虫害，可能是由于本身具有杀虫作用。

3.3气候特征原产地石河子南山与引种地石河子大学药学院植物园均具有强烈的大陆性气候特征，两地主要气候因子（表1）基本相似，说明我们开展这项研究是遵循“气候相似论”的引种原则，具备引种成功的条件。

3.4生境土壤特性从植物生长发育的另一重要生态因子-土壤条件分析：我们调查了石河子南部山区的阿魏，其生境为黏质略带沙砾的荒地，土壤条件为旱中生性质，酸碱度中性偏碱，土壤有机质较为丰富，是否有耐盐碱特性尚需进一步研究。公务员之家:

3.5营养、药用价值阿魏幼叶营养价值较高，氨基酸含量较之一些蔬菜和牧草种类，其含量是很高的，且种类齐全，其他营养元素的含量也较高。作为药用的挥发油成分含量也达到10％。阿魏不仅是国际市场上不可缺少的中草药之一，而且还是新疆早春荒漠上的重要牧草之一，能否让8年期间的基生叶不浪费，代替匮乏的阿魏原植物药材，有待于进一步研究。

深入地研究珍稀植物的生物学特性，对于有效保护和合理开发利用都具有重要意义。利用地产野生种质资源进行原生地保护与引种驯化相结合，在新疆推广栽培阿魏具有科学依据，也有基础条件，此项研究表明野生资源原生地生境条件、土壤条件类似于引种地石河子大学药学院植物园，都适合阿魏生长要求。

【参考文献】

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阿魏范文篇3

【关键词】RP-HPLC法红药阿魏酸

【Abstract】ObjectiveToestablishamethodforthedeterminationofferulicacidinHongyaotabletsbyRT-HPLC.MethodsThedeterminationwasperformedonPhenomenexC18columnwithmethanol-1%glacialaceticacid(30:70)asthemobilephase.Thecolumntemperaturewasambient.Thedetectionwavelengthwas320nmandtheflowratewas1.0ml/min.ResultsTherewasagoodlinearrangewithin0.402~2.008μgofferulicacid(r=0.9999).Theaveragerecoveryratewas99.5%withRSD1.2%(n=5).ConclusionThemethodissimpleandaccurate.ItcanbeusedforthequalitycontrolofHongyaotablets.

【Keywords】RP-HPLC;Hongyaotablets;ferulicacid

红药片是由三七、川芎、当归、白芷、土鳖虫等中药制成的中药复方制剂,收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第二十册,具有活血止痛,去瘀生新之功效。临床用于跌打损伤,风湿麻木。是常用中成药。该产品现行标准仅有显微鉴别,不能很好反映产品质量,为保证该产品安全有效,本文参考有关文献[1,2],对样品处理方法和色谱分离系统进行优化,用高效液相色谱法测定当归、川芎的有效成分阿魏酸的含量。该方法简便、快速、重现性好,可作为该产品质量控制的方法。现报告如下。

1仪器与试药

Agilent1200Series液相色谱仪;AG135电子分析天平;SB3200超声仪。

甲醇为色谱纯(SCRC国药集团化学试剂有限公司),其余试剂均为分析纯,阿魏酸对照品(供含量测定用,批号:0773-9910,中国药品生物制品检定所),红药片(市售三批,批号:070309,070802,071107)。

2方法与结果

2.1色谱条件色谱柱:PhenomenexC18(4.6mm×150mm,5mm);流动相:甲醇-1%冰醋酸(30:70);柱温:25℃;检测波长:320nm;流速:1ml/min。阿魏酸与其他组分达到基线分离,以阿魏酸峰计算柱效,其理论板数6500。

2.2对照品溶液的制备精密称取阿魏酸对照品9.97mg,置200ml棕色量瓶中,加流动相超声溶解并稀释到刻度,即得。

2.3供试品溶液的制备取红药片10片,精密称定,研细,精密称取2g,置10ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,超声处理(功率250W,频率80kHz)20min,静置,滤过,取续滤液,即得。

2.4线性关系的考察精密称取阿魏酸对照品10.04mg,置100ml棕色量瓶中,加甲醇溶解并制成梯度溶液,按上述色谱条件进样10μl,测定峰面积,以峰面积积分值为纵坐标,阿魏酸质量为横坐标绘制标准曲线。回归方程为:Y=5358X-79.48,r=0.9999,表明阿魏酸在0.402~2.008μg内线性关系良好。

2.5精密度试验在上述色谱条件下,取阿魏酸对照品溶液重复进样6次10μl,记录峰面积,RSD为1.2%。

2.6稳定性试验取对照品溶液,于室温下避光放置,在0、3、5、8h不同时间段内重复进样3次,每次10μl,峰面积变化不大,表明该溶液基本稳定,能满足测定需要。

2.7加样回收试验精密称取已知含量的样品5份,每份加入精密称量的对照品储备液溶液适量混匀,照样品含量方法操作,计算回收率见表1。表1加样回收试验

2.8样品测定取3批样品,按“供试品溶液的制备”项下制备供试品溶液,分别精密吸取对照品溶液和样品溶液各10μl,分别进样,测定峰面积,计算阿魏酸的含量。结果见表2。色谱图见图1。

3讨论

阿魏酸是当归、川芎等中药的有效成分之一,它的特性是易溶于醇类等极性溶剂,通过比较,提取样品时选用甲醇为最佳。阿魏酸不稳定,见光、加热均易分解,所以样品超声溶解时水浴温度在30℃以下,并注意有关操作应尽量在避光条件下快速进行。

可以考虑利用阿魏酸的特点,考察含此类中成药的效期,也提示此类药品应避光、阴凉处保存。表2样品含量测定结果

【参考文献】

阿魏范文篇4

关键词：阿魏酸葡糖酯；阿魏酸木糖脂；抗氧化性；脂氧合酶

Theantioxygenationofferulaicacidglycolipide

LVXiao-zhuo,JIANGWei,WUZan-min.SchoolofPublicHealth,TianjinMedicalUniversity,Tianjin300070,China

【Abstract】Theresistancetooxidationofsyntheticalferulaicacidglycolipidewasinvestigated.Theresultwasshown,applewasdippedin0.62%ferulaicacidglycolipide,themostinhibitoreffectivenessofglucoseferulaicestersandxyloseferulaicesterwasshownrespectivelytobe36.92%afterfourdaysand19.47%aftereightdays,thefastigiumofreleaseethanewaspostponedrespectivelytobesixdaysandfourdays.

【Keywords】Glucoseferulaicesters;xyloseferulaicester;antioxygenation;Lipoxygenase

植物的衰老行为中的主要矛盾是活性氧，乙烯的产生和脂氧合酶（Lipoxygenase，简称LOX）起了协同作用［1,2］，所以抗氧保鲜剂，主要考察对脂氧化酶活性的抑制，及对乙烯的抑制作用，这样可能达到预期的效果。由于阿魏酸及其衍生物是一种营养性的安全可靠的食品添加剂，本文通过苹果考察了合成阿魏酸葡糖酯的抗氧化性，即利用紫外光谱和气相色谱法系统的考察了阿魏酸对脂氧化酶活性的抑制和内源乙烯释放的抑制效果，通过测试证实阿魏酸糖酯具有较好的抗氧化性，探索开发出一种安全高效的果蔬保鲜剂。

1实验部分

1．1实验药品与仪器阿魏酸葡萄糖酯，阿魏酸木糖脂（天津工业大学提供）；亚油酸（化学纯，许昌元化生物科技有限公司）；氢氧化钠（分析纯，天津市东丽区天大化学试剂厂）；乙酸-乙酸钠缓冲液（0.1mol/L，pH4.6～5.8）；磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.1mol/L,pH5.8～7.4）；紫外光度计［UV-2401PC，岛津仪器（苏州）有限公司］；气相色谱仪（GC-Agilent6890N，美国安捷伦科技有限公司）；高速离心机（LG10-2.4A型，北京医用离心机厂）

1．2实验方法

1．2．1苹果的处理将5g左右的合成阿魏酸葡糖酯或阿魏酸木糖酯加热溶于800ml去离子水中待温度降至室温时，将反复洗过无伤、大小均一的最新市售的红富士苹果浸入到浓度约为0.62%的溶液中，待5min后取出，室温下放置待测。

1．2．2底物的制备10mmol/L亚油酸钠（反应底物）溶液的制取［3］：称取70mg的亚油酸钠，7mlTritonX-100和4ml无氧水，用0.5mol/L氢氧化钠滴定至溶液澄清，定容25ml，分装于1.5ml的安瓿瓶中，-18℃保存备用。

1．2.3粗酶液的提取称取2.0g果肉放入研钵中，在液氮中充分研磨，然后将研钵内的果肉转移至离心试管中，取9ml缓冲液充分冲洗研钵后将其转至离心试管中。在10000r/min下离心15min，取上层清液。

1．2．4LOX活性最适pH值的测定本文通过紫外分光光度计测定LOX活性最高时的pH值［4，5］，具体方法是：将一定pH值的缓冲液作参比进行基线测定，然后取0.025ml10mmol/L亚油酸钠溶液，缓冲液2.775ml和相应缓冲液下酶液0.200ml混合均匀，在30℃恒温水浴中反应1min。立即测定吸光度值A1并计时，过1min后，记录吸光度值A2。两次测量的差值(A2-A1)为ΔA。

LOX活性单位：酶活力果肉质量×反应时间

LOX活性单位：ΔOD234nm×g-1min-1

由于每次取果肉为2.0g，ΔOD=ΔA×10002

本实验以1min内3ml体系在234nm的吸光度增加0.001作为一个酶活力单位（U），波长设定为234nm；测定不同缓冲液下的LOX活性，需要重新校正基线。

1．2．5阿魏酸糖酯对LOX活性的影响分别提取未用阿魏酸糖酯处理的、用阿魏酸葡糖酯处理的及用阿魏酸木糖酯处理的苹果果肉的粗酶液，将最适pH值的缓冲液倒入比色皿中，进行基线测定，然后移取0.025ml亚油酸钠，缓冲液2.775ml，酶液0.200ml于样品池中，在30℃恒温水浴中反应1min，立即测量A1并计时，过1min后，再进行测量A2,求出ΔA，每隔2天进行测量1次，持续22天。

1．2．6乙烯的定性与定量本实验中利用气相色谱通过纯乙烯对果肉释放的乙烯进行定性和定量，定量分析采用气相色谱外标法［6］。

气相色谱条件［7］：进样量8ml，检测器FID。N2流速：35ml/min，H2流速：50ml/min，AIR流速：375ml/min，色谱柱温：50℃，进样口温度：120℃，检测器温度：150℃。

1．2．7阿魏酸糖酯对乙烯释放量的影响将处理过的苹果，每次均匀取果肉10g，放入135ml医用药瓶中，将瓶用胶塞封严。过13.5h后进行气相色谱测试，每次进样8ml，通过气相色谱的积分面积从标准曲线上查出对应的乙烯体积x。

乙烯释放量（y)=释放乙烯的体积（x）果肉质量×释放时间

［单位：nl/(g·h)］2结果与讨论

2．1LOX活性最适pH值的测定本文以离体烟台优级红富士苹果试验材料，在pH4.8～7.4范围内测定了LOX活性变化。从图1中可以明显看出最适pH值为6.4，在pH6.4附近，LOX活性也较高。因此应选pH=6.4为酶活性测定的pH值。

图1苹果中LOX最适pH值测定

2．2未处理、葡糖酯处理、木糖酯处理的LOX活性变化从图2可以看出三个处理LOX活性总体都呈上升趋势，未处理的红富士苹果的LOX均高于木糖脂和葡糖酯，阿魏酸葡糖酯抑制效应在处理后4天最明显，抑制率为36.92%，16天后开始上升。阿魏酸木糖酯抑制效应在处理后8天最明显，抑制率为19.47%，12天后开始上升。

图2未处理、葡糖酯处理、木糖酯处

理的LOX活性变化由此可以得出阿魏酸葡糖酯和阿魏酸木糖酯对离体后的红富士苹果的LOX活性有较好的抑制作用，且阿魏酸葡糖酯的抑制作用比阿魏酸木糖酯的效果要更好一些。这是可能是由于葡糖酯有五个羟基，更容易使脂氧合酶失去活性，而木糖酯有4个羟基，其抑制效果要逊于葡糖酯

2.3未处理、葡糖酯处理、木糖酯处理的苹果乙烯释放量变化通过在相同色谱条件下测定纯乙烯和果肉释放气体，证实释放气体为乙烯。并由不同浓度的纯乙烯做出标准曲线，利用外标法对不同时间释放的乙烯进行定量。

图3未处理、葡糖处理、木糖酯处理的

苹果乙烯释放量变化

由图3可见，阿魏酸葡糖酯和阿魏酸木糖酯处理的苹果，明显抑制苹果果实内源乙烯发生，分别推迟释放乙烯高峰期为6天和4天出现，而且后期抑制释放量仍是阿魏酸葡糖酯比阿魏酸木糖酯的抑制作用效果更好一些。

3结论

实验结果表明合成的阿魏酸葡糖酯和阿魏酸木糖酯对离体后的红富士苹果果实有一定的抗氧化保鲜效果：其中对于果实的LOX（脂氧合酶）活性，阿魏酸葡糖酯抑制效应在处理后4天最明显，抑制率为36.92%，阿魏酸木糖酯抑制效应在处理后8天最明显，抑制率为19.47%，对于果实的内源乙烯释放，阿魏酸葡糖酯和阿魏酸木糖酯分别推迟乙烯高峰期6天和4天出现。结果表明阿魏酸葡糖酯的抗氧作用比阿魏酸木糖酯的效果要更好。由于阿魏酸本身无毒，所合成的糖脂也无毒无味，对人体没有副作用，可以预测该类型的食品保鲜剂的开发具有广阔的前景。

【参考文献】

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5陈昆松，徐昌杰，许文平，等.猕猴桃和桃果实脂氧合酶活性测定方法的建立.果树学报，2003，20（6）:436-438.

阿魏范文篇5

2005～2006年对生长于石河子南山的野生阿魏跟踪观测，对其生物学特性进行了观测和实验分析。

1.1物候期观察从3月底萌芽到5月中旬地上部分枯败、6月开花结实的不同时期，地上部分生长状况，形态特征变化进行观测记录。

1.2开花结果习性观测按文献［4］方法于20060426开花初期，选取石河子南山阿魏原生地标记5株，每4天观测记录1次花序开放数，直到开花末期，然后进行统计分析。

1.3对幼叶及挥发油进行营养化学元素成分分析取新疆阿魏树脂、基生叶提取挥发油，按国家标准分析方法进行氨基酸、钙和磷等化学成分分析。

1.4生境条件土壤特性研究取不同生境不同层次的土样,按国家标准分析方法进行氮、磷、钾、有机质、总盐和pH值分析测试。结果见表1。表1土样记录（略）

1.5生长量观测选取生长正常的阿魏5株，于生长季节各期测定其株高、冠幅。

1.6原产地与引种地环境因子比较原产地新疆石河子南山与引种地新疆石河子大学药学院植物园直线距离10km，位于天山北麓中段,准噶尔盆地南缘，其地理位置处在东经85°～86°30′,北纬43°30′～45°40′之间，地势相对平坦，且自东南向西北倾斜，地面坡降仅0.74‰，原产地海拔高度约468.2m，引种地海拔高度约442.9m。纵伸于沙漠南缘，为温带大陆性干旱荒漠气候，具有夏热冬冷、降水少而蒸发大、热量资源丰富、风沙繁多、气候干燥多变，昼夜温差大，日照充足，加上天山雪水灌溉等的特点，两地主要气候因子见表2。

2结果

2.1物候期北疆野生阿魏一般在春季3月15日左右始出芽，3～4月为莲座叶丛期，5月15～20日莲座叶最大直径可达123cm(单叶长约1.3cm)；3月20日始见抽茎，一直持续到5月上旬；阿魏的初花期为4月29～5月9日，高0.5～1.5m，全株有强烈的葱蒜样臭味。复伞形花序生于茎枝顶端，单株总花期8d,盛花期为5月中旬,5月下旬仍有零星花开放；开花后10d，种子开始成熟，长椭圆背腹扁压，绿色至浅紫色至深褐色，4月中下旬开始枯败，直至6月下旬；7月至第2年3月中旬为休眠期。阿魏喜温暖干燥气候，15～30℃生长尤为迅速，较耐寒，地下肉质根可耐-20～-15℃低温，夏季生长在潮湿冲沟里的植株，其生长期稍长。表2两地主要气候因子比较（略）

2.2开花规律野生阿魏每日早6:30左右花始开放，约15min全部花序开放，10:30左右达到当日开花高峰。每个花序自开放到闭合延续4h左右，开花时间持续到下午7点左右。如图1所示，石河子南山野生阿魏从4月下旬初花期开始，每株花序开放数逐渐上升,至5月16日左右达高峰期，延续1周后急剧下降，但开花一直零散见于6月上旬，可见阿魏花期很短。见图1。

2.3株高、冠幅增长规律见图2。

2.4树脂及基生叶化学成分分析阿魏叶柔嫩，叶有微量阿魏胶，特别是处于莲座叶丛期的植株，其叶量丰富而鲜嫩，总氨基酸含量为24.46%,粗脂肪2.65%，粗纤维11.65%，粗灰分12.25%，钙1.26%,磷0.68%，17种氨基酸丰富而全面，其含量见表3。表3新疆阿魏树脂、基生叶氨基酸含量（略）

2.5生境土壤条件分析从野生阿魏两个不同的生境中取得土壤样品，对氮、磷、钾、总盐、有机质及pH值进行测试，结果见表4。从表4中可以看出，不同生境土壤条件差异不大，阿魏的土壤适应性较强，耐瘠薄能力较强，在有机质不算丰富，氮、磷和钾含量不高的土壤中，不影响其生长发育。表4不同居群生境中土壤成分分析（略）

3讨论

3.1形态特征与生长特性阿魏ferulalehmanniiBoiss生于夏热冬寒，气温变化剧烈，日照时长，年均降水量仅为200mm左右的荒漠，土壤多为荒漠灰钙土，伴生植物多为蒿类，其生长气候要求冷凉、干旱少雨条件，具有耐寒、耐旱、喜光的特性。能充分利用春天雪融化后土壤水分条件良好的短促时间，迅速发育生长开花结实，年生长期仅50d，其余时间为休眠期。3月底出苗，4～5月开花，5～6月结实。为多年生草本，高50～150cm，主根粗大肥厚，圆柱形或纺锤形，有时分枝，表皮黑紫色。上端具有环纹。茎直立，基部有多数纤维状叶柄残基。基生叶有长柄。茎叶互生，3～4回羽状复叶。小叶片羽状深裂。复伞形花序顶生，花小黄色，双悬果扁，卵圆形紫红色，肋间脂管1～2个，结合面6个。莲座直径可达130cm；抽茎期为3月下旬。4月底，未抽茎的阿魏地上部份开始回苗，只剩下抽茎的植株。阿魏每年生育周期短，一年中累计的养分有限，延长生长期限才能开花结实；一半生长周期为8年，在营养生长阶段叶子排成莲座状，逐年增大，发育成熟时由丛生叶中抽出花茎，开花结实。千粒重7.8g，种子小而轻，易借风力传播，休眠期长达300d以上。

3.2抗逆性新疆阿魏在原生地石河子南山一带，最低气温达到－33℃。冻土层最深1.5m，最浅1.3m，未见有冻害现象；该植物适宜于土壤水分较好的干旱环境中生存，同时它也能在水分不充足的情况下正常生长开花结果，说明它具有一定的抗寒性、抗逆行；阿魏属植物耐旱，但土壤水分的多少直接影响植株的高度，如：长在较易积存水分的低凹地和冲沟边的植株要比其它地方的高大得多。但抗涝性较差，一但淹水时间太长或连阴雨天，就会导致地上嫩枝叶黄化，地下部分发黑腐烂；该植物抗病虫害，可能是由于本身具有杀虫作用。

3.3气候特征原产地石河子南山与引种地石河子大学药学院植物园均具有强烈的大陆性气候特征，两地主要气候因子（表1）基本相似，说明我们开展这项研究是遵循“气候相似论”的引种原则，具备引种成功的条件。

3.4生境土壤特性从植物生长发育的另一重要生态因子-土壤条件分析：我们调查了石河子南部山区的阿魏，其生境为黏质略带沙砾的荒地，土壤条件为旱中生性质，酸碱度中性偏碱，土壤有机质较为丰富，是否有耐盐碱特性尚需进一步研究。

3.5营养、药用价值阿魏幼叶营养价值较高，氨基酸含量较之一些蔬菜和牧草种类，其含量是很高的，且种类齐全，其他营养元素的含量也较高。作为药用的挥发油成分含量也达到10％。阿魏不仅是国际市场上不可缺少的中草药之一，而且还是新疆早春荒漠上的重要牧草之一，能否让8年期间的基生叶不浪费，代替匮乏的阿魏原植物药材，有待于进一步研究。

深入地研究珍稀植物的生物学特性，对于有效保护和合理开发利用都具有重要意义。利用地产野生种质资源进行原生地保护与引种驯化相结合，在新疆推广栽培阿魏具有科学依据，也有基础条件，此项研究表明野生资源原生地生境条件、土壤条件类似于引种地石河子大学药学院植物园，都适合阿魏生长要求。

【参考文献】

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［3］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.广州:化学工业出版社，2005:130.

［4］高洪文,马明荣.菊苣开花及种子形成规律的研究［J］.草业科学,1993,10(3):62

阿魏范文篇6

阿魏酸钠(sodiumferulate，SF)是我国自行研发的一类新的非肽类内皮素受体拮抗剂，作用广泛，具有多种生理功能，可拮抗内皮素引起的血管收缩、升高血压及血管平滑肌细胞增殖；增加NO的合成，松弛血管平滑肌；抑制血小板聚集、抗凝血；抑制胆固醇合成，降低血脂，清除自由基，防治脂质过氧化损伤；抗炎及抗细胞凋亡等作用。血管内皮细胞(vascularendothelialcell，VEC)位于血液和组织之间，直接和血液接触，很容易受到血液中病理生理变化的影响，具有易损伤的功能性界面，凡接受损伤刺激和心血管危险因素，均首先作用于血管内皮，导致内皮细胞功能障碍。内皮细胞功能障碍主要表现为舒张和收缩因子、促凝和抗凝物质、生长抑制和生长促进物质的生成释放不平衡，引起生理系统多方面的变化，是多种血管性疾病的关键环节[1]。研究表明，吸烟、缺乏运动、年龄增加、雌激素减少、动脉硬化、高血压、糖尿病、血脂异常、冠心病、心力衰竭、血管外科与介入治疗等多种因素，均可造成内皮细胞损伤[2]。而SF在保护VEC、防治和减轻疾病发生发展过程中所造成的VEC损伤有明显效果。

1VEC功能

VEC具有复杂的功能，其主要功能包括:(1)屏障保护功能:完整的血管内皮能保障血液循环顺利进行，保持内环境稳定，防止出血和血细胞与内皮下的平滑肌细胞及其他组织接触而引起血小板聚集、凝血与血栓形成等[3]；(2)选择通透性:VEC通过舒张和收缩运动改变毛细血管通透性，调节血液循环和血管内外物质交换；(3)增殖修复功能:VEC合成和分泌多种结缔组织成分，具有增殖和修复功能，维持血管壁的完整性[4]；(4)分泌调节功能:内皮细胞合成和分泌一氧化氮(NO)、前列环素(PGI2)、VEC超极化因子(EDHF)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、内皮素(ET)、血栓素A2(TXA2)、VEC收缩因子(EDCF)、凝血因子Ⅷ相关抗原和黏附分子等一系列活性物质，还能产生活性氧如超氧阴离子(O－·)等[37]。其中分泌调节功能是VEC最复杂的功能。血管内皮可通过自分泌和旁分泌产生多种活性物质，调节自身及相关组织的构建和功能。

2血管内皮功能障碍的发生机制

血管内皮功能障碍又称为血管内皮功能紊乱、血管内皮功能失常和血管内皮功能失调等。目前评价内皮功能障碍（endothelialdysfunction，EDF）的金标准仍是内皮细胞依赖性血管舒张功能障碍[8]。换言之，EDF最特征性的表现即是内皮依赖的血管舒张功能障碍。现已清楚，多数心血管系统疾病、糖尿病、妊娠高血压综合征、长期吸烟、器官移植、缺血再灌流损伤和氧化应激等都伴有或轻或重的EDF。EDF已成为有关疾病或损害发生的始发因素、病理生理改变或发病机制，两者互为因果形成恶性循环，明显影响疾病的发展、转归与治疗效果，是目前医药科学研究最活跃的领域之一。目前对EDF发生的精确机制仍不清楚，不同的疾病及其状态、不同的引发因素所致的EDF，其发生机制也有所不同。

2.1内皮细胞产生的活性物质异常导致EDF内皮细胞自分泌或旁分泌的活性物质可分为作用相反而又相互联系的两大类，其共同调节、维持血液循环内环境的平衡与稳定。一旦内皮细胞产生的活性物质异常，这种平衡受到破坏便可能引起EDF。如NO和ET、PGI2和TXA2等就是这样一些作用相反的生物活性物质,它们的分泌如果异常就可能引起EDF。实际上，很多有关EDF的研究就是把这些活性物质作为观测指标，如妊娠高血压综合征患者在出现VEC及血管壁损害时，血浆中ET1、TXA2和凝血因子Ⅷ相关抗原水平升高，而NO和PGI2水平降低[9]。这表明内皮细胞所分泌的活性物质异常是引起EDF的重要因素。

2.2氧化应激活性氧产物增加导致EDF目前有比较充分的资料说明，细胞内的氧化还原状态是影响内皮细胞内环境的决定性因素，而NO是调节内皮功能的关键分子。研究表明，内环境中NO与活性氧类(reactiveoxygenspecies，ROS)两者之间的平衡是调节内皮细胞正常氧化还原状态和维持正常内皮功能所必需的。EDF时血管失去原有的舒张能力，其原因至少部分是由于氧化应激使O－·等ROS产物增加引起NO氧化灭活所致[3]。因为NO的灭活还会引起平滑肌细胞增殖与迁移，促进核转录因子NFκB和致炎分子的表达，从而促进炎症，诱发血栓形成。已经明确的心血管危险因素如血脂紊乱、血压升高、糖尿病和吸烟等，都可使血管壁产生氧化应激，O－·增加导致EDF。而且若多种危险因素同时存在，还能产生协同效应从而进一步恶化血管内皮功能。据报道，内皮细胞中的一氧化氮合酶(NOS)、环氧酶、脂氧酶、黄嘌呤氧化酶、NAD(P)H氧化酶、CYP氧化酶类等,都可参与氧化应激产生ROS[1013]。研究发现，冠脉内皮细胞内CYPC9在生理状态下就能产生ROS参与调节血管紧张度和内环境[14]。由于NO本身就是反应性自由基,当ROS产物如O－·、H2O2和脂类过氧化物自由基增多时,NO会与之反应从而将其清除。NOO－·反应速率极快，比O－·与超氧化物歧化酶(SOD)的反应快3倍[1516]。生理状态下ROS主要由SOD、过氧化氢酶等酶促清除，但当ROS异常增多或酶促清除能力不足时，NO首当其冲，在清除ROS的同时，自身也被氧化灭活，从而导致EDF。

3SF对VEC的保护作用

3.1SF对VEC内分泌的平衡的影响近十余年来，随着心钠素(atrialnatriureticpeptide，ANP)、内皮素(endothelin，ET)的相继发现，人们对心脏、血管、内皮细胞功能的传统认识有了根本的改变。心脏不再是单一的血液循环动力器官，血管也不仅仅是血流管道，内皮细胞除了是血液和组织间代谢交换的屏障外，它与心脏、血管一样，均具有重要的内分泌功能。它们可以产生和分泌多种生物活性物质，在调节血压和体液平衡中起重要作用；在各种高血压、心、脑血管以及其他多种疾病的发病机制中具有重要的病理生理学意义；在正常的生理状况下，它们维持血管的紧张度和局部血流的稳定；而在疾病状态下，它们分泌或代谢的异常影响疾病的发生和发展。王峰等研究发现SF是一种新的非肽类ET拮抗剂，可拮抗ET1与其受体结合，还能降低血浆ET1的浓度[17]。研究显示，经皮冠状动脉内成形术（PTCA）后，ET1水平明显增加，且局部浓度增加更多[18]。术后应用SF，可能在受体水平阻滞ET1的作用，增加NO水平，从而抑制内膜的增生，为预防术后再狭窄提供了一个新的治疗手段[19]。ET1通过激活ETA受体抑制NO释放和分泌，SF能阻断这一过程，从而增加NO合成和释放[19]。SF通过拮抗ET的作用可明显使冠心病心绞痛病人血浆ET下降，NO上升，具有扩张血管、改善心肌缺氧缺血作用[20]。ET和NO生成异常在缺血再灌注损伤中具有重要作用，拮抗ET的作用或促进NO的生成均可减轻器官的缺血再灌注损伤。SF对兔缺血再灌注损伤心肌ET和NO生成的影响研究发现，与单纯的缺血再灌注损伤组相比，SF治疗组血浆ET水平明显下降，血清NO水平明显升高[21]。由于血小板聚集受TXA2和PGI2平衡的调控，TXA2可使血小板聚集，PGI2则抑制血小板聚集，因此SF抗血小板聚集、抗血栓形成等作用可能与调节TXA2和PGI2平衡有密切关系。研究表明，SF和阿司匹林合用可显著降低脑血栓患者血浆中TXA2与PGI2的比值，对预防脑血栓形成有一定效果[22]。TXA2和PGI2在体内不稳定，分别迅速转变为稳定而无生物活性的血栓素B2(TXB2)和6酮前列腺素F1α(6ketoPGF1α)，通常以测定TXB2和6ketoPGF1α来反映TXA2和PGI2的生成量。王烨等发现SF能抑制缺氧性肺动脉高血压大鼠血小板聚集，降低血浆TXB2及6ketoPGF1α含量，即给予治疗组大鼠SF200mg·kg1·d1共2周，可使治疗组大鼠血小板聚集率、血浆TXB2、6ketoPGF1α较缺氧组有显著下降[23]。李友清等报道SF能明显降低脑组织中TXB2及6ketoPGF1α的含量，与其抑制犬心脏停跳复苏后脑组织花生四烯酸的代谢有关[24]。

3.2清除自由基，防治脂质过氧化损伤内皮细胞的损伤不仅受外界因素的影响，而且自身也参与损伤过程。生物体内产生氧自由基的途径很多，可由内皮细胞产生，也可由中性粒细胞或巨噬细胞的呼吸爆发产生。如内皮细胞受损后，黏附分子的表达增多造成白细胞、血小板在血管壁的黏附、聚积、释放，白细胞的激活可以释放多种细胞因子进一步损伤内皮细胞。体内产生的自由基极易损害细胞脂质中的不饱和脂肪酸，引起脂质过氧化反应。过氧化脂质的代谢产物丙二醛（MDA）通过蛋白质一级氨基集团反应与蛋白质交联，造成细胞功能的破坏。正常状态下，体内存在一套完整的清除自由基的系统，使自由基的产生和清除保持动态平衡。体内清除自由基的反应可分为酶促清除和非酶促清除两种:前者通过SOD、过氧化物和谷胱甘肽酶系，将自由基转化为无毒性的水；后者是指维生素E、维生素C、还原型谷胱甘肽、尿酸、胡萝卜素、血浆铜蓝蛋白等非酶性抗氧化剂对自由基的清除，从而阻止了脂质过氧化物(LPO)的形成[25]。研究表明:SF可明显增加SOD活性，减低LPO含量，清除氧自由基，抑制脂质过氧化损伤；SF对－·、羟自由基和过氧化氢有直接清除作用，亦能与膜磷脂酸乙醇胺结合，阻止膜脂质被自由基侵袭，从而发挥抗脂质过氧化作用[26]。杨艳秋等证实，SF可明显增加SOD活性，减低过氧化脂质含量[27]。SOD含量明显升高，说明SF是一种很强的天然抗氧化剂，能缓解自由基对组织的损伤反应。

3.3调节代谢甘油三酯（TG）是公认的动脉粥样硬化（AS）独立危险因素，已知TG致AS的机制主要有:促使氧自由基产生，加速低密度脂蛋白(LDL)氧化及对内皮细胞的损伤；促进黏附分子表达，使血中单核细胞更多地黏附于内皮表面及促进泡沫细胞形成[46]。实验研究发现，SF抑制家兔主动脉粥样斑块形成的同时还降低血清TG，但对TCh、HDLch、LDLch无影响。研究证实了高脂饮食可引起高脂血症，而高脂血症是AS的主要原因[28]。因此，SF具有抗AS作用，其作用机制可能与降低血中TG脂的含量、抗氧化、抗凋亡，减轻内皮细胞的损伤有关[29]。以上进一步证实SF可以通过降脂，对代谢异常的调节，阻止其对VEC的进一步损害。

3.4抗炎及抗细胞凋亡等作用内皮细胞是机体一类重要的细胞群,在血管通透性屏障、免疫防御及炎症反应中起着极其重要的作用[3031]。SF能够减轻由炎性介质——组胺引起的大鼠脑表面跨毛细血管电阻下降，说明它对组胺造成的脑毛细血管通透性增加具有改善作用，因而能够促进炎症的改善[32]。SF抗凋亡作用可能是通过削弱了TNFα生物毒性作用，保护了线粒体膜，提高了bcl2表达，降低了bax表达，形成异源二聚体bcl2/bax抑制细胞凋亡；也可能是封闭了TNFα的作用位点，使其不能发挥致凋亡效应或者降低TNFα导致的VEC中iNOSmRNA表达增加，逆转TNFα导致的细胞间黏附分子1（ICAM1）重排，从而发挥抗凋亡作用[3334]。

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阿魏范文篇7

【关键词】高效液相色谱法妇月康胶囊阿魏酸

DeterminationofFerulicAcidinFuyuekangCapsule

Abstract：ObjectiveToestablishamethodforthedeterminationofferulicacidinFuyuekangCapsules.MethodsHPLCmethodwasusedinthequantitativeanalysisusingauBondapakC18(4.0mm×250mm)column.Themobilephasewasmethylalcohol-5%glacialaceticacid(22∶78)anddetectingwavelengthwas322nm.ResultsThecalibrationcurvewaslinearintherangeof0.0725～0.2900μgforferulicacid(r=0.9999,n=5).Theaveragerecoverywas99.46%andRSDwas1.26%.ConclusionThismethodissimple,sensitive,accurateandavailableforthequalitycontrolofFuyuekangCapsules.

Keywords：HPLC；FuyuekangCapsule；Ferulicacid

妇月康胶囊是由当归、川芎、甘草（炙）、干姜（炭）、益母草、等8味中药组成，其主要功能为活血、祛淤、止痛。用于产后恶露不行，少腹疼痛，也可试用上节育环后引起的阴道流血，月经过多。当归为本方的君药之一，且当归、川芎的有效成分均为阿魏酸。故选择阿魏酸作为控制该产品质量的定量指标，通过高效液相色谱法建立其含量测定方法。

1仪器与试药

Model2000二元高压梯度高效液相色谱系统（美国SSI公司），包括Model500型紫外/可见可变波长检测器，LaballianceInstrumentSeriesⅣPump，阿魏酸对照品（中国药品生物制品检定所，含量测定用批号07739809），妇月康胶囊（自制），水为重蒸馏水，甲醇为色谱纯，冰醋酸等均为分析纯。

2方法与结果

2.1色谱条件色谱柱：uBondapakC18(4.0mm×250mm)；流动相：甲醇5%冰醋酸溶液（22∶78）；检测波长：322nm；流速：1.0ml/min；柱温：25℃；进样量：10μl。

2.2对照品溶液的制备

取阿魏酸对照品适量，精密称定，用甲醇制成每毫升含阿魏酸14.5μg的溶液。

2.3供试品溶液的制备

取本品内容物约4.0g，精密称定，加甲醇甲酸（95∶5）溶液40ml，超声处理30min，放冷，滤过，用少量甲醇甲酸（95∶5）溶液分次洗涤容器和残渣，洗液滤过，合并滤液，70℃水浴上蒸干，残渣加30ml水溶解，加盐酸调节pH值至2～3，用乙醚提取5次，30ml/次，合并乙醚液，挥干，残渣用甲醇溶解，移置10ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，即得。

2.4线性关系考察

分别精密吸取阿魏酸对照品溶液5.0，7.5，10.0，12.5，15.0，20.0μl进样，按上述色谱条件测定，以对照品量（X）为横坐标，峰面积值（Y）为纵坐标，绘制标准曲线，得阿魏酸回归方程：Y=3317067X＋11069.7（r=0.9999）。阿魏酸在0.0725～0.2900μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。

2.5精密度实验

精密吸取阿魏酸对照品溶液10μl，重复进样5次，测定峰面积值，RSD=1.43%，小于2%。

2.6重现性实验取同一批号的样品5份，分别按上述方法测定含量。结果见表1。表1重现性实验结果（略）

2.7稳定性实验精密吸取同一供试品溶液,分别于0，1，2，4，8h后进样10μl，测定阿魏酸峰面积，结果表明,供试品溶液在8h内稳定性良好,RSD为1.15%。

2.8阴性对照实验

按照本品处方，取当归、川芎外的其余药材，按制备工艺要求，制成不含当归、川芎的胶囊内容物，按供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液并测定。阴性溶液色谱中，与对照品相应的位置上无干扰，见图1。

2.9回收率实验精密称取已知含量的样品5份，分别精密加入等量的阿魏酸对照品，按供试品溶液制备方法制备并测定。结果见表2。表2回收率测定结果（略）

2.10样品测定依法测定样品4批次。结果见表3。表3样品测定结果（略）

3讨论［1，2］

本实验经对阿魏酸对照品溶液进行紫外扫描发现,在322nm处有最大吸收,故选择322nm作为测定波长。通过对乙腈-0.085%磷酸溶液（17∶83）、乙腈-2%冰醋酸（20∶80）、甲醇-5%冰醋酸(25∶85)等多种流动相进行比较实验,发现甲醇-5%冰醋酸溶液(22∶78)的系统分离效果最好,且柱效高,故选择本系统为流动相。制备供试品溶液选择提取溶媒时，曾对甲醇、甲醇-甲酸（95∶5）、醋酸乙酯和水进行了比较，其中用水提取，在乙醚萃取时乳化现象严重，干扰测定。其余三种则以甲醇-甲酸（95∶5）提取效率最高,故提取溶剂选择甲醇-甲酸（95∶5）溶液。但甲醇-甲酸（95∶5）提取液颜色较深干扰测定，故本研究在此基础上，结合阿魏酸的理化性质，又进行初步纯化，用乙醚萃取。对萃取次数及超声提取20～40min的结果进行比较,结果表明,超声30min,萃取5次，阿魏酸即可提取完全。

实验结果表明：本法简便、灵敏、准确，可用于妇月康胶囊的质量控制。

【参考文献】

阿魏范文篇8

【关键词】阿魏酸葡糖酯;阿魏酸木糖脂;抗氧化性;脂氧合酶

Theantioxygenationofferulaicacidglycolipide

LVXiao-zhuo,JIANGWei,WUZan-min.SchoolofPublicHealth,TianjinMedicalUniversity,Tianjin300070,China

【Abstract】Theresistancetooxidationofsyntheticalferulaicacidglycolipidewasinvestigated.Theresultwasshown,applewasdippedin0.62%ferulaicacidglycolipide,themostinhibitoreffectivenessofglucoseferulaicestersandxyloseferulaicesterwasshownrespectivelytobe36.92%afterfourdaysand19.47%aftereightdays,thefastigiumofreleaseethanewaspostponedrespectivelytobesixdaysandfourdays.

【Keywords】Glucoseferulaicesters;xyloseferulaicester;antioxygenation;Lipoxygenase

植物的衰老行为中的主要矛盾是活性氧,乙烯的产生和脂氧合酶(Lipoxygenase,简称LOX)起了协同作用[1,2],所以抗氧保鲜剂,主要考察对脂氧化酶活性的抑制,及对乙烯的抑制作用,这样可能达到预期的效果。由于阿魏酸及其衍生物是一种营养性的安全可靠的食品添加剂,本文通过苹果考察了合成阿魏酸葡糖酯的抗氧化性,即利用紫外光谱和气相色谱法系统的考察了阿魏酸对脂氧化酶活性的抑制和内源乙烯释放的抑制效果,通过测试证实阿魏酸糖酯具有较好的抗氧化性,探索开发出一种安全高效的果蔬保鲜剂。

1实验部分

1.1实验药品与仪器阿魏酸葡萄糖酯,阿魏酸木糖脂(天津工业大学提供);亚油酸(化学纯,许昌元化生物科技有限公司);氢氧化钠(分析纯,天津市东丽区天大化学试剂厂);乙酸-乙酸钠缓冲液(0.1mol/L,pH4.6~5.8);磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液(0.1mol/L,pH5.8~7.4);紫外光度计[UV-2401PC,岛津仪器(苏州)有限公司];气相色谱仪(GC-Agilent6890N,美国安捷伦科技有限公司);高速离心机(LG10-2.4A型,北京医用离心机厂)

1.2实验方法

1.2.1苹果的处理将5g左右的合成阿魏酸葡糖酯或阿魏酸木糖酯加热溶于800ml去离子水中待温度降至室温时,将反复洗过无伤、大小均一的最新市售的红富士苹果浸入到浓度约为0.62%的溶液中,待5min后取出,室温下放置待测。

1.2.2底物的制备10mmol/L亚油酸钠(反应底物)溶液的制取[3]:称取70mg的亚油酸钠,7mlTritonX-100和4ml无氧水,用0.5mol/L氢氧化钠滴定至溶液澄清,定容25ml,分装于1.5ml的安瓿瓶中,-18℃保存备用。

1.2.3粗酶液的提取称取2.0g果肉放入研钵中,在液氮中充分研磨,然后将研钵内的果肉转移至离心试管中,取9ml缓冲液充分冲洗研钵后将其转至离心试管中。在10000r/min下离心15min,取上层清液。

1.2.4LOX活性最适pH值的测定本文通过紫外分光光度计测定LOX活性最高时的pH值[4,5],具体方法是:将一定pH值的缓冲液作参比进行基线测定,然后取0.025ml10mmol/L亚油酸钠溶液,缓冲液2.775ml和相应缓冲液下酶液0.200ml混合均匀,在30℃恒温水浴中反应1min。立即测定吸光度值A1并计时,过1min后,记录吸光度值A2。两次测量的差值(A2-A1)为ΔA。

LOX活性单位:酶活力果肉质量×反应时间

LOX活性单位:ΔOD234nm×g-1min-1

由于每次取果肉为2.0g,ΔOD=ΔA×10002

本实验以1min内3ml体系在234nm的吸光度增加0.001作为一个酶活力单位(U),波长设定为234nm;测定不同缓冲液下的LOX活性,需要重新校正基线。

1.2.5阿魏酸糖酯对LOX活性的影响分别提取未用阿魏酸糖酯处理的、用阿魏酸葡糖酯处理的及用阿魏酸木糖酯处理的苹果果肉的粗酶液,将最适pH值的缓冲液倒入比色皿中,进行基线测定,然后移取0.025ml亚油酸钠,缓冲液2.775ml,酶液0.200ml于样品池中,在30℃恒温水浴中反应1min,立即测量A1并计时,过1min后,再进行测量A2,求出ΔA,每隔2天进行测量1次,持续22天。

1.2.6乙烯的定性与定量本实验中利用气相色谱通过纯乙烯对果肉释放的乙烯进行定性和定量,定量分析采用气相色谱外标法[6]。

气相色谱条件[7]:进样量8ml,检测器FID。N2流速:35ml/min,H2流速:50ml/min,AIR流速:375ml/min,色谱柱温:50℃,进样口温度:120℃,检测器温度:150℃。

1.2.7阿魏酸糖酯对乙烯释放量的影响将处理过的苹果,每次均匀取果肉10g,放入135ml医用药瓶中,将瓶用胶塞封严。过13.5h后进行气相色谱测试,每次进样8ml,通过气相色谱的积分面积从标准曲线上查出对应的乙烯体积x。

乙烯释放量(y)=释放乙烯的体积(x)果肉质量×释放时间

[单位:nl/(g·h)]

2结果与讨论

2.1LOX活性最适pH值的测定本文以离体烟台优级红富士苹果试验材料,在pH4.8~7.4范围内测定了LOX活性变化。从图1中可以明显看出最适pH值为6.4,在pH6.4附近,LOX活性也较高。因此应选pH=6.4为酶活性测定的pH值。

图1苹果中LOX最适pH值测定

2.2未处理、葡糖酯处理、木糖酯处理的LOX活性变化从图2可以看出三个处理LOX活性总体都呈上升趋势,未处理的红富士苹果的LOX均高于木糖脂和葡糖酯,阿魏酸葡糖酯抑制效应在处理后4天最明显,抑制率为36.92%,16天后开始上升。阿魏酸木糖酯抑制效应在处理后8天最明显,抑制率为19.47%,12天后开始上升。

图2未处理、葡糖酯处理、木糖酯处

理的LOX活性变化由此可以得出阿魏酸葡糖酯和阿魏酸木糖酯对离体后的红富士苹果的LOX活性有较好的抑制作用,且阿魏酸葡糖酯的抑制作用比阿魏酸木糖酯的效果要更好一些。这是可能是由于葡糖酯有五个羟基,更容易使脂氧合酶失去活性,而木糖酯有4个羟基,其抑制效果要逊于葡糖酯

2.3未处理、葡糖酯处理、木糖酯处理的苹果乙烯释放量变化通过在相同色谱条件下测定纯乙烯和果肉释放气体,证实释放气体为乙烯。并由不同浓度的纯乙烯做出标准曲线,利用外标法对不同时间释放的乙烯进行定量。

图3未处理、葡糖处理、木糖酯处理的

苹果乙烯释放量变化

由图3可见,阿魏酸葡糖酯和阿魏酸木糖酯处理的苹果,明显抑制苹果果实内源乙烯发生,分别推迟释放乙烯高峰期为6天和4天出现,而且后期抑制释放量仍是阿魏酸葡糖酯比阿魏酸木糖酯的抑制作用效果更好一些。

3结论

实验结果表明合成的阿魏酸葡糖酯和阿魏酸木糖酯对离体后的红富士苹果果实有一定的抗氧化保鲜效果:其中对于果实的LOX(脂氧合酶)活性,阿魏酸葡糖酯抑制效应在处理后4天最明显,抑制率为36.92%,阿魏酸木糖酯抑制效应在处理后8天最明显,抑制率为19.47%,对于果实的内源乙烯释放,阿魏酸葡糖酯和阿魏酸木糖酯分别推迟乙烯高峰期6天和4天出现。结果表明阿魏酸葡糖酯的抗氧作用比阿魏酸木糖酯的效果要更好。由于阿魏酸本身无毒,所合成的糖脂也无毒无味,对人体没有副作用,可以预测该类型的食品保鲜剂的开发具有广阔的前景。

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阿魏范文篇9

【关键词】当归六黄汤阿魏酸高效液相色谱法

当归六黄汤出自李东垣《兰室秘藏》，由当归、生地黄、熟地黄、黄连、黄柏、黄芩、黄芪7味中药组成。用于发热盗汗，面赤心烦，口干唇燥，大便干结，小便黄，舌红苔黄，脉数。主治阴虚火旺证。临床上常用于治疗阴虚火旺所致的盗汗。随着人们生活水平的提高、生活节奏的加快，近年出现了中药配方颗粒。中药配方颗粒是以批量的单味中药饮片为原料，分别加水煎煮、浓缩、干燥而得，经单剂量包装，使用时按处方混合后开水冲服，与中药汤剂的分煎相似。传统中药汤剂是按方配药，加水共煎而得，即合煎。中药配方颗粒汤剂与传统汤剂的化学成分、药效是否有明显的差异，中药配方颗粒是否应广泛应用于临床，还存在争论。本实验以当归中阿魏酸为指标性成分，采用HPLC法比较该方“分煎”和“合煎”制得的汤剂中阿魏酸的含量是否有差异，从中药复方汤剂中有效成分的含量方面为中药配方颗粒应用于临床提供一定理论依据。

一、仪器与试药

Aglient1100高效液相色谱仪(包括真空脱气机，自动进样器，四元泵，DAD检测器)，HP1100/WIND3D化学工作站。阿魏酸对照品（批号:110773-200611，供含量测定用）购自中国药品生物制品检定所；甲醇为色谱纯；水为纯净水；其它试剂均为分析纯。

药材经贵阳中医学院生药实验室董丽莎教授鉴定，当归为伞形科植物当归Angelicasinensia(Oliv.)Diels的干燥根，黄芩为唇形科植物黄芩ScutellariabaicalensisGeorgi的干燥根，黄连为毛茛科植物黄连CoptischinensisFranch.的干燥根茎，黄柏为芸香科植物黄皮树PhellodendronchinenseSchneid.的干燥树皮，黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao的干燥根，地黄为玄参科植物地黄RehmanniaglutinosaLibosch.的新鲜或干燥块茎。

二、方法与结果

2.1色谱条件色谱柱为DIKMAODS-C18(5μm，4.6mm×250mm)；以0.085％磷酸－乙腈为流动相梯度洗脱，0～31min乙腈14.5％，31～40min乙腈60％，40～48min乙腈14.5％；流速1.0ml/min；检测波长326nm，柱温35℃。

2.2对照品溶液的制备精密称定阿魏酸对照品适量，加70％甲醇制成每毫升含12.48μg溶液，备用。

2.3供试品溶液制备分别精密称取干燥的当归六黄汤分煎与合煎浸膏粉约1.0g，置250ml圆底烧瓶中，加70％甲醇100ml，称重，加热回流30min，放冷，补重，过滤，取续滤液过0.45μm微孔滤膜即得供试品溶液。

2.4阴性样品的制备按照处方比例称取除当归外的各味药材干浸膏粉，混合均匀，称取适量，按照“2.3”项下的方法制备，在“2.1”项的色谱条件下进行测定，在阿魏酸出峰位置阴性对照液无干扰。

按照处方称取除当归外的各味药材，加20倍量的水，煎煮至10倍量，浓缩，减压干燥。得干浸膏粉,称取适量，按照“2.3”项的制备方法进行制备，在“2.1”项下的色谱条件下进行测定，在阿魏酸出峰位置阴性对照液无干扰。对照品、样品色谱见图1～3。

2.5线性关系考察分别精密吸取对照品溶液1，2，4，6，8，10ml于10ml容量瓶中，加70％甲醇稀释至刻度,摇匀。在上述色谱条件下进样10μl，按上述色谱条件测定峰面积。以峰面积积分值(A)为纵坐标，进样量(X)为横坐标，绘制标准曲线，计算得回归方程为A=5613.1C-0.8186,r=0.9997，阿魏酸在0.01248～0.1248μg范围内线性关系良好。

2.6精密度实验精密吸取阿魏酸对照品溶液10μl，连续进样6次,在上述色谱条件下测定峰面积，结果RSD＝0.31％，表明精密度良好。

2.7重复性实验精密称取同一批分煎浸膏粉、合煎浸膏粉各6份，按上述供试品溶液的制备方法和色谱条件测定，计算阿魏酸的含量，RSD分别为0.0104%（n＝6）、0.8841%（n＝6）。结果表明该方法具有良好的重复性。

2.8稳定性实验精密称取分煎浸膏粉、合煎浸膏粉各1.0g,按供试品溶液的制备方法处理，分别在0，1.5，3，4.5，6h进样，按上述色谱条件下测定，RSD分别为2.40％，2.22％，表明当归六黄汤分煎、合煎样品溶液在6h内稳定。

2.9加样回收率实验分别精密称取已知含量分煎浸膏粉、合煎液浸膏粉各9份，加入适量阿魏酸对照品溶液，按供试品溶液制备方法处理，上述色谱条件下测定，RSD分别为2.05%，1.95%。

2.10样品含量测定按照供试液制备方法分别处理6份样品，在“2.1”项色谱条件下进行测定，结果分煎样品与合煎样品平均含量（mg/处方）分别为：5.411，2.973。

2.11当归六黄汤分煎样品与合煎液样品中平均含量的比较

2.11.1两种供试品精密度的比较当归六黄汤分煎、合煎样品阿魏酸含量分别为n1=61=5.411，n2=6，2=2.973,计算得S1=0.000753，S2=0.000632；f1=6-1=5，f2=6-1=5查表得F0.05，5,5=5.05根据公式F＝S12S22＝1.42

2.11.2两种样品中阿魏酸平均含量的比较可求得合并标准偏差为：S=∑（x1i-1）2＋∑（x2i-2）2(n1-1)+(n2-1)=7.1×10-4t=︳1-2Sn1n2n1+n2=5947.69查表，当置信度为95%，f=n1+n2-2=10时，t0.05,10=2.23。t>t0.05,10，故两种供试品阿魏酸的平均含量之间存在显著性差异。即当归六黄汤分煎样品与合煎液样品中阿魏酸平均含量之间存在显著性差异。

三、讨论

对提取溶媒进行考察，根据文献资料采用不同浓度的甲醇与乙醇回流提取，实验结果表明用70％甲醇为提取溶媒时，阿魏酸的含量较高，且峰形较好。

由于阿魏酸为弱酸，在酸性溶剂中能抑制分解，根据文献资料采用甲酸∶甲醇(5∶95)为流动相，样品峰与杂质峰分离度达不到要求。采用甲醇-水(35∶65)为流动相样品峰拖尾且与杂质峰R<1.5，采用2005版《中国药典》Ⅰ部当归中阿魏酸测定项下所用流动相乙腈－0.085％磷酸（17∶83），样品峰与杂质峰R<1.5，峰形难看。调整流动相比例进行梯度洗脱，0～31min乙腈14.5％，31～40min乙腈60％，40～48min乙腈14.5％,分离度、保留时间、峰形均好于《中国药典》方法，故最后采用此流动相。

当归六黄汤分煎样品中阿魏酸含量比合煎样品高。组方中黄连、黄柏均含有小檗碱,在合煎过程中酸碱可能发生中和反应,从而导致合煎样品中阿魏酸含量偏低。但中药复方成分复杂，其原因还需作进一步深入的考察。

【参考文献】

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阿魏范文篇10

美国Waters公司2695型高效液相色谱仪，2996型紫外检测器，empower工作站。Milli-Q纯水器（密理博上海贸易有限公司）。硅胶G（青岛海洋化工厂）。逍遥软胶囊（自制）。柴胡等药材购自哈尔滨市药材公司，经黑龙江中医药大学生药教研室鉴定为《中国药典》正品。芍药苷对照品、阿魏酸对照品、甘草酸单铵盐对照品、柴胡皂苷a对照品、对照药材（购自中国药品生物制品检定所）。甲醇、乙腈（色谱纯）；水（超纯水）；其余为分析纯。

2方法与结果

2.1鉴别

2.1.1柴胡的薄层鉴别取逍遥软胶囊适量，取出内容物，称取10g于回流提取器内，加甲醇50ml回流提取30min，过滤，滤液挥干，加入2%氢氧化钠水溶液15ml超声溶解残渣。用20ml水饱和正丁醇振摇萃取两次，分取正丁醇层，蒸干，残渣用甲醇溶解，定容至5ml，作为供试品溶液。另取柴胡皂苷a对照品，加甲醇制成每毫升含1mg的溶液，作为对照品溶液。取对照药材、缺柴胡阴性对照品，同法分别制成对照药材、阴性对照溶液。取供试品溶液、对照品溶液、对照药材、阴性对照液各5μl，点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿甲醇水（30∶12∶1）为展开剂展开，两次展开后喷以对二甲氨基苯甲醛-95%乙醇-浓硫酸（1∶100∶10）溶液，105℃烘5min。供试品溶液、对照药材与对照品溶液相应位置上显相同颜色斑点，阴性对照液无此斑点，薄层色谱图见图1。

2.1.2白芍的薄层鉴别取逍遥软胶囊适量，取出内容物，称取10g，至回流提取器内，加甲醇50ml回流提取30min，过滤，滤液挥干，残渣溶于15ml正丁醇液中，移入分液漏斗，加入20ml正丁醇饱和水振摇萃取2次，分取正丁醇层，蒸干，残渣用甲醇溶解，定容至5ml，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加甲醇制成每毫升含1mg的溶液，作为对照品溶液。取对照药材、缺白芍阴性对照品，同法分别制成对照药材、阴性对照溶液。取供试品溶液、对照品溶液、对照药材、阴性对照液各5μl，点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿甲醇醋酸乙酯（10∶5∶1）为展开剂，在氨蒸气饱和下展开。取出晾干后喷以10%H2SO4乙醇液，100℃烘5min。供试品溶液、对照药材与对照品溶液相应位置上显相同颜色斑点，阴性对照液无此斑点，薄层色谱图见图2。

2.1.3当归的薄层鉴别供试品处理方法同“2.1.2”项。另取阿魏酸对照品，加甲醇制成每毫升含1mg的溶液，作为对照品溶液。取对照药材、缺当归阴性对照品，同法分别制成对照药材、阴性对照溶液。取供试品溶液、对照品溶液、对照药材、阴性对照液各5μl，点于同一硅胶G薄层板上，以乙醇丙酮氯仿冰醋酸（1∶4∶10∶1）为展开剂展开，取出晾干，喷以2%三氯化铁的50%乙醇溶液-2%铁氰化钾的50%乙醇液（1∶1）进行显色。供试品溶液与对照品溶液相应位置上显相同颜色斑点，阴性对照液无此斑点，薄层色谱图见图3。

2.1.4甘草的薄层鉴别取逍遥软胶囊适量，取出内容物，取5g于回流提取器内，加乙醚40ml回流提取30min，过滤，药渣加甲醇30ml置水浴上加热回流1h，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml，使溶解，用水饱和正丁醇萃取3次，每次20ml，合并正丁醇萃取液，加入20ml正丁醇饱和水振摇萃取2次，分取正丁醇层，蒸干，残渣用甲醇溶解，定容至5ml，作为供试品溶液。另取甘草酸单铵盐对照品，加甲醇制成每毫升含1mg的溶液，作为对照品溶液。取对照药材、缺甘草阴性对照品，同法分别制成对照药材、阴性对照溶液。取供试品溶液、对照品溶液、对照药材、阴性对照液各5μl，点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿甲醇水（30∶12∶1）为展开剂展开，两次展开后喷以对二甲氨基苯甲醛95%乙醇浓硫酸（1∶100∶10）溶液，105℃烘5min。供试品溶液、对照药材与对照品溶液相应位置上显相同颜色斑点，阴性对照液无此斑点，薄层色谱图见图4。

2.2含量测定

2.2.1色谱条件C18色谱柱（220mm×4.6mm，5μm）（大连物理化学研究所），流速1ml·min-1，柱温30℃，芍药苷、阿魏酸的流动相均为甲醇水（1﹪HAC）(25∶75)，芍药苷检测波长232nm，阿魏酸检测波长323nm。

2.2.2标准曲线考察精密称取芍药苷对照品6.8mg，置10ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度。分别用微量移液管精密移取150，400，600，800，1000μl的对照溶液，置2ml量瓶中，定容。精密称取阿魏酸对照品5.2mg，置25ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度。分别用微量移液管精密移取阿魏酸对照品溶液400，800，1200，1600，2000μl置2ml容量瓶，定容，备用。HPLC进样10μl，按含量测定方法测定峰面积，并以峰面积的积分值为纵坐标，对照品进样量为横坐标建立标准曲线，计算回归方程，芍药苷回归方程为：Y=2.37×106X-6.08×104（r=0.9999），在51～340μg·ml-1范围内呈良好的线性关系。阿魏酸回归方程为：Y=1.01×107X-7.1×104（r=0.9999），在41.6～208μg·ml-1范围内呈良好的线性关系。

2.2.3样品的含量测定取本品10粒，剪开，倾出内容物，加入甲醇50ml超声3h后取续滤液10ml，经0.45μm滤膜过滤，滤液作为供试品溶液。分别精密注入芍药苷对照品溶液、阿魏酸对照品溶液、供试品溶液各10μl，进行HPLC测定。结果表明：供试品芍药苷峰、阿魏酸峰与对照品峰保持一致，且与其他组分可以很好地分离。用外标法计算芍药苷、阿魏酸的含量，色谱图见图5～8。表1指标成分标准曲线方程（略）

2.2.4精密度及重现性实验精密度实验：精密吸取对照品溶液10μl，连续进样5次，测定峰面积积分值，结果芍药苷、阿魏酸RSD值分别为1.41%，1.37%。重现性实验：取样品，按测定法进行5次测定，结果芍药苷、阿魏酸RSD值分别为1.01%，1.33%。

2.2.5回收率实验取供试品适量，精密称定，定量加入芍药苷、阿魏酸对照品溶液，按样品测定项下，测定峰面积，计算回收率。结果芍药苷的平均回收率为98.2%，RSD=1.41%(n=6)。阿魏酸的平均回收率为100.5%，RSD=1.37%(n=6)。

2.2.6样品测定用本实验测定方法对3批逍遥软胶囊进行测定，结果见表2。表2样品含量测定结果（略）

3讨论

逍遥丸中白芍的TLC鉴别，一般采用中性氧化铝柱或聚酰胺柱处理［3］，研究中发现不经此步骤处理也可以排除干扰。

关于逍遥软胶囊制剂质量控制的研究较多，然而通常只是对白芍、当归、甘草定性的较多［4,5］，本实验同时研究了柴胡的定性分析条件，并同时对芍药苷、阿魏酸定量分析，能更好地控制制剂质量。

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