那就是爱范文
时间：2023-03-14 02:55:24
导语：如何才能写好一篇那就是爱，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公文云整理的十篇范文，供你借鉴。
篇1
五年六班
杜晓琦
7月8日下午，我从书店出来，只见倾盆大雨是下个不停啊！就连书店门口都淹成了一条小河。这时已经6点半了，在书店门口的我焦急万分，正巧有没带任何雨具，还骑了车来，心想：这下糟了，什么都没带，还带了这么一大包的作业来，有什么用啊！反而拖我后腿嘛。
后来，我还是挽起裤管，光着脚丫穿过马路去学校牵车。当我走到马路边时，道路两旁的水长得非常快，又很急，瞒过了半个小腿儿，险些儿把我冲倒。
我骑着车，从学校后门冒雨直冲回家，在路上，雨不断地袭击我的全身，又像一个又一个的导弹向我袭来。一到新村小学那一条路段，积水就足已淹没一个一岁小孩。雨不停的下着，我坐在自行车上，就好似坐在一叶方舟上漂泊，又好像耍杂技一般，一会儿歪到这边；一会儿倒向那头；一会儿又向前倾。
路多难行呀！每前进一步都很艰难！但是，越是艰难险越要前进，骑着自行车往前冲，“冲啊??”我大声喊道。当时，我还发明了一个蛙泳式骑车法，因为是脚都是完全浸在水中的，所以就让脚以蛙泳式使车更快的前进。一转眼就被冲道广平仓的一家米店旁。雨越下越大，水越长越高，根本无法回家，只好停车去找公用电话。我淌在水中，漫步前行，看到水面上漂浮着一些很恶心的东西，比如：死蟑螂，，死老鼠，木块等垃圾。一不小心，脚拌到了一块大石头上，绊倒在湍急的黄泥水中，就要被水冲走。在这千钧一发的时刻，幸巧米店老板救了我，把我拉了上来。被拉上来时，我的衣服湿漉漉的，浑身发抖，牙齿“咯咯咯”地在打仗，我多么想回家换上干衣服，温暖温暖我这瘦弱的身躯。哎，这真是老天爷在捉弄我，被困在米店，想回家又回不了家，大人来家又来不了，真是‘恨铁不成钢’啊！
正巧，远处来了几个巡逻的民警，米店老板看到了，放声大喊：“嗨，前面的民警，这里有个小孩，先把她送回家吧！”又对我说“快回家吧！别着凉了，这是要感冒的！”这句话，使我的心顿时暖了些。闻讯赶来的民警搀扶这我往回家的路走去??走到半路上，突然停电了，那时天很黑，雨又下得很大，我边走边打着哈欠。因为水太急了，所以我差不多是高抬腿式走路的。只见一张方桌随谁飘来，重重地撞了我的大腿和脚趾一下，我忍这痛继续前进，民警似乎看出了什么，把他的风衣披在我肩头，说“再忍忍，就快到了！”这时我感受到了 民警无私的爱，这爱使我温暖。不一会儿，我终于到了，到了小山新村的大门前，我兴奋地向民警敬了个礼，奔回了家！
篇2
与己尾随 去承载背影
有没有一种深凝的眼神
会划破天空
让她辛酸
有没有一种深刻的情感
划过记忆
又仿佛成了生活
爱 离去了
却 感觉还在
那是 因为内心不停颤动
永恒吧！ 你走去的远方……
那将会是灵魂空间的生还
已习惯 心里挂念着你
已习惯 无时无刻心疼着你
已习惯抚摸着你的头 叫你小乖乖……
曾经 每一次用力的牵你
都是对你深深的爱
今夕
每一次想你的时候
心都 依然 那么用力
忧伤啊！！！
要丢弃 一个熟悉的世界
永恒吧
颤动的灵魂在深深的思索
走入另一个世界
就如爱你一般
去抚摸
那些贫穷和需要关爱的人们
篇3
具体分别为：
1、百变歌姬：滨崎步；
2、传奇歌姬：安室奈美惠；
3、性感歌姬：幸田来未；
4、国民歌姬：岛谷瞳；
5、魅惑歌姬：铃木亚美；
6、全才歌姬：大冢爱；
7、治愈歌姬：持田香织；
8、清新歌姬：奥村初音；
篇4
我狠狠地瞪了他一眼，可这家伙视而不见，依然坐在那看电视模特大赛。这个节目已经重播3遍了，可他还是盯着电视里的模特。
上个月，我的女上司因为老公长期不回家而离婚了，而女朋友的老公几天前也被发现有外遇，难道做老婆的都是这么命苦，抵不过时间的摧残？男人婚前婚后怎么差距这么大呢？看着花园里泛黄的枯草，我有一种悲凉的感觉。突然，两只猫跑了过来，它们在草地上嬉戏，互相追赶亲昵，其中一只猫还伸着懒腰，打个滚。它们在夕阳下的幸福、快乐的神情，让人觉得十分温暖。而我，跟老公有多久都没有像这两只猫一样快活地拥抱了？即使功课，也是例行公事。对，我现在必须把老公漠视的念头消灭在萌芽之中，我的家庭绝不能发生情感悲剧。
老公觉得我一定会跟往常一样，只要一生气睡觉时就会给他一个冰冷的后背。他倒乐得我不去“骚扰”他，然后酣然大睡，让我的火气自消自灭。但那天，他一打开卧室门就发现自己错了！出现在他面前的是一只妖娆的“猫”，头顶皮纹双耳发带，豹花低胸紧身内衣，半露白颈细胸，高臀低腰轻俯在床，充满诱惑的眼神，一脸的妩媚中还带着丝丝娇柔的鼻息。老公立刻惊呆了，瞬间眼神发亮，仿佛变成了一只饥渴的野猫。他弓身上床，有力量的身躯半拥半抱，给我一个体贴的依靠。他温柔的手臂在我的蛮腰与娇胸间游移，弹性的身体轻弹慢跳、前腾后跃、左闪右扭与我的美臀共同谱写交响曲，仿佛夕阳下一只猫与另一只猫的亲密纠缠。我们互相拥抱、按压、轻咬，互相交付、给予融合……温暖的被褥、弹性的大床和我猫一样柔软的身躯，与老公的激情和努力相得益彰。他猫咪一样的轻唤更如漫天花香，让我迷醉势不可挡，最终一切在巅峰中落下帷幕。而我这只呢喃的小猫，也安静地趴在老公的肩头美美睡去。
第二天清晨，当我睁开眼睛，老公已经做好了早餐。他说，为了奖励我这只“馋猫”，以后早餐都由他来做。其实，男人就这么简单，回报总是来的现世及时，他满心欢喜就会阳光灿烂。从这以后的日子，我时而用黑笔给熟睡的老公画出猫一样的胡子，时而偷偷在厨房里走着猫步吸附他的身体，时而如猫咪一样蜷缩在沙发上用诱惑的眼神向老公索吻，当他焚身，然后我再如猫一样地逃开……几番逃离，最终被这只“公猫”胜利俘虏，抱在怀里，大战尽酣。如果以前我跟老公的只是一种填饱肚子的喂养，而现在我们经常享用情调十足的盛宴。夜晚没有阳光，灿烂的星星是引爆两只猫激情最理想的武器。
又一个周末，电视里又在播放模特大赛的比赛实况。那些美女们高挑美貌，让我看得都直流口水，我便喊正在厨房做饭的老公来看。他说，我正给自己家的“猫”备食，哪有时间看那些电视里的模特走猫步！我偷偷笑了，不懂救赎自己已褪色爱情的女人是傻子，有方法救赎暗淡时光的女人才是天使。女人一定要像花一样努力绽放，即使老公的脚步已经挪移，但弥留的香气总会让他停下脚步更珍爱自己。
篇5
1
第一次看到她，她正在一个房间里舞蹈，舒缓的轻音乐，有些颓废，有些孤单，还有些暧昧。房间里没其他人，就她自己。干净的木质地板，她穿着粉色的薄纱吊带裙，光着脚，慢慢地摇摆着。她伸展着双手，好像怀里抱着一个英俊的情人。房间里的风扇吹着她短短的裙摆，露出白色的底裤，撩拨得我浑身是汗。后来，她慢慢褪去了身上的薄纱，滑润的肌肤，曼妙的身姿，在我的瞳孔里渐渐放大，仿佛自己也身置其中，与她一同起舞。我的手不由自主地触碰到自己的身体，欲望正一点点从各个部位袭来。
而她，仿佛应和着我的节奏，停止了舞动，躺在白色的床单上开始扭动自己的身体。浓密的黑发铺在偌大的床上，如一朵黑色的玫瑰，慢慢地盛开。她开始抚摩着自己的身体，就如我的手，带着电，火辣辣地在皮肤上滚出花来。她的动作越来越大，伴随着音乐的部分她的声音也宛如一首婉转千寻的歌，低落上扬着，直到身上有亮晶晶的汗珠滚下，然后紧绷扭动的双腿终于伸展开来。这时，音乐终止，而我，也大汗淋漓，仿佛完成了一段奇妙的旅程。
躺在汗湿的地板上，她的影子铺天盖地而来。我昏昏沉沉睡着，一觉醒来，房间里已漆黑一片，夜，不知不觉中来临。
我打开灯，懒散地找些方便面煮来吃。看着水冒着泡，由细微的一点到沸腾的一片，我又忍不住想到她。就在这时，我又听到声响，那种动静应该不是一人，我顾不得面，又凑过去看。此时，她赤条条的身上正压着一个肥壮的男人，男人的臀部在灯光下摆动，白得直晃眼，她的脸埋在白色的床单里，看不出任何表情。偌大的床仿佛大海里的一帆小舟，在男人的使劲颠簸里如遇到狂风暴雨般快要支离破碎的样子。男人不顾她的感受，双手乱抓，只顾着冲刺，她粉嫩的背上顿时出现红红的抓痕。很快，男人就坍塌在她的背上，如一条死鱼滑下来。她下床，无事一般坐在电扇前，海藻般的长发扬起，而我这边海浪又扑面而来。
这就是我的见闻，在我搬到这间房子的第三天，无意发现的一个小洞让我看到了隔壁的一切。后来，我知道她叫岚，那个男人在床上这样叫她。
2
她不工作，整天呆在家里，几乎足不出户。吃的用的，男人差不多隔两天就会买一些过来。男人一般都是傍晚的时候来，开着车，而车总是停在弄堂外。他也从不带她出去，来了就钻进门，直接爬上她的床。她从不看他，而他也仿佛特别热衷于突然袭击的方式。有时，他进来的时候，她正在睡觉，他也不说话，三下五去二，就直奔主题。她仿佛习惯了这样的对待，木然地应对，被动地接受。
他们很少说话，他的声音也大部分来源于床上，而她，在他离去后，洗手间里的水就哗哗响起。
我想，她一定不爱他，或者她只是他包的女人，或者她只是贪图他的钱吧。
她的衣柜里有很多漂亮的衣服，只是他走后，她才穿在身上，然后在舒缓的音乐翩翩起舞。舞蹈很优美，仿佛她只在一个人的时候，脚步才如此轻快。在音乐里，她会再一次把自己舒展来，一个人陶醉在自我的世界。
我不上班， 把观察她作为我生活的一部分。我有时感觉自己有些下作，曾试图堵上耳朵，把那个洞紧紧地粘住，但她的影子仿佛被敲进了脑海，隔壁有一点声响，我就迫不及待把耳朵贴上去，然后把那个洞重新撬开。
夏天的日子，闷热。我的心开始浮躁，心情一天比一天糟糕。每当看到那个男人压在她的身上，我就有冲进去把他拉起来狠扁一顿的冲动。而她，也多次出现在我的梦里，琴瑟合鸣。醒来，闷热的空气席卷而来，心里莫名升腾起怒火，灼烧着我的身体。
我被她莫名的吸引，那种感觉是从未有过的。我想，她需要拯救，不论是身体还是心灵。突然某一天，我觉得自己有了一种使命感，不知是欲望作祟还是男人的英雄主义，让我蠢蠢欲动。
3
就在那天晚上，天气尤其闷热，仿佛要下大雨似的。那个男人已经一个星期没来了，我躺在床上翻来覆去睡不着。
我又撬开那个洞，她的房间还是那样的音乐，她趴在床上睡着，风扇吹起她细薄的裙子，让我在房间里走来走去。最终，理智开了小差，我跑出门去。外面很黑，没什么人。我推下她房间的门，竟然开了。我小心翼翼地走进去，轻轻关上门。站在她床边的时候，她还没反应。看着翻滚的裙子下面她光洁的皮肤，我不顾一切地爬上了床。她依然趴着，面掩在床单里。我把男人的行为熟稔于心，学着男人的样子，不敢面对真实的脸。匆匆完事后，我又学着男人的样子离开。
回到隔壁，我觉得自己很不男人，说是拯救，而我最终做了窃玉偷香的人。透过那个洞，我看到她抱着双膝在流泪，眼泪顺着洁白的面颊往下滑，流在白色的床单上，如外面下起的雨。这让我更加感到自己的可耻。
我不知道她是否感觉到是另外一个人走进了她的房间，我不能面对她。我把那个洞重新填了起来，我想自己应该找个工作，或者我应该离开这个地方。
隔了天，隔壁的动静又来了。这次，和往常不一样，我忍不住看去，男人正在打她，打过之后又抱着她说爱她，她没什么表情，依然淡淡的样子。我突然想到自己，自己不是也做着同样欺凌的行为？
男人走后的那天晚上，我又走进了她的房间。亲吻她的时候，她突然扭过头来。我忙乱不知所以，而她淡淡地问我，上次是你吧。我不知道该如何回答，我抚摩着她被打青的眼角，说，为什么不反抗呢？她凑上来，吻住了我。
我想，她是渴望爱的，她抱着我的时候，我第一次感觉到她的无助和需要。她不问我从哪里来，也不问我为什么来，只是狠狠地抱紧我。
后来，我告诉她那个洞，她没说话。我叫她岚，她说还是我叫乐吧，音乐的乐。
我说，我喜欢看你跳舞，舞姿特别美。她说，好多年不跳，生疏了。
我抱着她旋转，随着音乐，我仿佛跳进了天堂。她第一次笑了，很美，也很忧伤。
自此，只要男人不在，就是我们约会的时间。一次，我说，跟我走吧。她点点头，又摇摇头，没有说话。
4
还没等我弄明白她点头摇头的意思，小娅就挺着大肚子寻来了。
小娅说，刘天明，孩子是你的，你要负责。
我不知道该如何对小娅解释，不是我不负责，而是我过不了她需要的日子。我只是她爸爸手下的一个小职员，她的喜欢让我感觉到负担，我觉得我们不是同类人。
面对她的示好，我只能逃避，并装出一付玩世不恭的模样来。我说，玩玩可以，但不要试图改变我。我以为她会对我失望，然后落荒而逃，没想到，她说，好啊，我们玩玩吧。
只一次，就玩出了火，小娅说她怀孕了。而我，只能悄然离开公司，选择蒸发。没想到，还是被逮个正着。
和小娅在门口纠缠的时候，乐开了门。看到我们，又关上门。
我对小娅说，让我想想吧。小娅走了，回头的时候狠狠地说，刘天明，孩子是你的，你逃到哪里我都能把你找出来。
我把自己锁在房间里整整一天。再见乐的时候，她说，其实爱一个人要用很低很低的姿态，别因为自己的自卑伤害了爱你的人。
我说，乐，我们走吧，我们才是同类人。
她大笑着说，其实我只是和你玩玩，为了打发寂寞。你倒认真了？
你爱他吗？他打你，连在床上都不看你的脸，你觉得他爱你吗？我问。
爱。她坚定地说。不管他怎么对我，我都爱他。他不看我，叫我另外的名字，那是他走不出对妻子的愧疚，他妻子叫岚。我爱他，所以宁愿做他的替补。另外，他能给我丰衣足食的生活，你能吗？
我看着她，仿佛看到了不认识的人，我想，我是看错她了，她只不过找我做他身体的替补，而我却荒唐地认为我能拯救她。说到底，我们只不过是彼此逃避现实的结果，欲望的补充罢了。
三天后，我随小娅离开了那个地方。我想，至少，小娅是爱我的，更何况，我需要对孩子负责。
那天，她的门一直没开。
5
我和小娅隆重举行了婚礼。几个月后，孩子出生，我想我的生活也就这样平稳安逸地过下去了。
不久，一个偶然的机会，让我知道小娅怀的孩子并不是我的，那所谓的亲近和喜欢只是为了她的肚子和名誉，而我莫名其妙做了顶缸爸爸。
我没有声张，时间教会了我隐忍，我也不再相信什么爱情。我更加努力地工作，出色的表现，我成了小娅爸爸公司最年轻的经理。
三年后，我和小娅平静分手，并开了新公司。
一次偶然的机会，在一个洽谈会后的晚宴上，我碰到了那个男人。他的臂弯里，挽着一个精致的女孩，不是她。
篇6
其实很久以来，很多的网球迷已经习惯甚至爱上了李娜这种直爽、有一说一的性格，然而这样一番话还是在中国大陆网络上激起了一番争吵。但细细想来，李娜的话并没有什么问题，因为她正在以个人身份参加职业巡回赛，而不是在代表国家队参加奥运会或者联合会杯的时候来说这些。就事论事，一个职业球员在参加一场商业运作赛事的时候这么说没错。而从网管中心单飞后李娜的身份就是一名职业球员，她这么说并不代表她不爱自己的国家。
近年来，越来越多的人提出“让体育回归体育本质”的呼声，有意无意问把“为国家比赛”和“为个人比赛”而对立了起来，其实毫无必要。以李娜法网折桂来说，李娜站在了罗兰加洛斯的球场上，一方面她为夺取第一个大满贯，另一方面她中国人的身份也吸引了大量中国观众，李娜的夺冠也让他们感到高兴和自豪。“让体育的归体育”，的确是个美好的愿望，因为它确实能做到的更多，抚平战争的创伤、团结国家精神……
体育虽然不能回归到纯粹的体育，但也不应该承受更多的体育以外的东西。中国体育长期以来就代表国家、代表人民，无形中给了运动员莫名的压力。1997年金州“十强赛”，为了国家、为了人民冲击世界杯，限制队员日常外出，最终场上队员心理压力过大，技术动作变形。最近的例子就是2010年冬奥会，周洋夺冠后没有“感谢国家”就遭到了体育总局领导的批评。当场上的运动员想的不仅仅是比赛，还有其他杂七杂八的东西，自然很难保证为了国家、为了人民争取些什么荣誉?
篇7
1 长链非编码RNA概述
1.1 非编码RNA的发现与分类
19世纪初，人类基因组计划研究发现，构成人体基因组的碱基对中，有约98%的核酸序列不编码蛋白质，研究者曾一度认为它们是“无功能序列”，但是现阶段，研究结论日渐倾向于这些无编码蛋白质的核酸序列能够在高等物种体内以特异性方式转录成核糖核酸（RNA）且这一结论日渐被证实，而这些不具备蛋白编码潜能的RNA转录本即被称为非编码RNA。
非编码RNA具有很高的异质性，尤其是在序列和结构上，目前，非编码RNA参考生物学功能、亚细胞定位、是否有poly结尾等要素可分为多种，长链非编码RNA是依据转录本长度进行划分的，同组核算序列还有小分子非编码RNA。
1.2 长链非编码RNA的定义与特点
长链非编码RNA通常是指长度超过200个核苷酸的非编码RNA转录本。这一物质组织表达谱广泛，对比mRNA，其细胞表达特异性强，但表达丰度不高。长链非编码RNA多存在于亚细胞结构中，尤其以细胞核中定位最多，依线粒体基因组编码不同可分为多种，如，IncND5、IncCytb等均由3个线粒体基因编码。长链非编码RNA与同类物质相比，序列相似性同intron区域类似，但相似性不足70%，序列保守性偏低。但是其启动子区域保守型通常高于蛋白编码基因。
2 长链非编码RNA在食管鳞癌中的研究进展
2.1 长链非编码RNA与肿瘤间关系
长链非编码RNA在发现之初，曾被研究者当作转录噪音，但随着现阶段基因领域研究不断地深入，对长链非编码RNA的认识已经由“无功能序列”转变到参与生物学进程中来，尤其是机体生理、病理之中。Wapinski O、Esteller M等学者研究证实，链非编码RNA异常可导致肿瘤类疾病，虽诱发机制尚不明确，但长链非编码RNA在许多肿瘤中兼具致癌、抑癌功能这一结论已经初具苗头[1，2]。基于此，探究肿瘤形成发展这一过程中，长链非编码RNA的分子生物医学论文机制对于临床探究癌症治疗方法而言意义重大。
2.2 长链非编码RNA在食管鳞癌中的研究
2.2.1 长链非编码RNA AFAP1-AS1
每年，全球新增食管癌患者多超过40万例，为提高食管癌临床诊断水平，做到早发现、早治疗，临床需进一步研发分子标记物，为临床诊断食管癌提供依据和参考。目前在食管鳞癌的临床科研中，仅有少数长链非编码RNA被发现与该疾病相关，与其它肿瘤类疾病相比，长链非编码RNA在食管鳞癌中的研究和探索起步较晚，亟待深入研究。2013年，Bhagat TD等研究者发现，与正常食管上皮细胞相比，患有食管鳞癌的细胞株中长链非编码RNA AFAP1-AS1异常，其主要表现为启动子区CPG岛甲基化程度低进而使得其呈高表达状态[3]。当siRNA介导以后，这一异常状态便能抑制鳞癌细胞增殖，使其侵袭或转移，因此，长链非编码RNA AFAP1-AS1在食管鳞癌研究中被视为促进其发展的一个重要因素。
2.2.2 长链非编码RNA HOTAIR
HOTAIR是利用高分辨率芯片技术，由Rinn为主的研究团队于2007年于纤维细胞中鉴定中发现的，当时其位于HOXC基因11与12之间的位点上，共编码核苷酸2158个，含6个外显子，2个结构域，具有序列保守性差、结构保守性高的特点。近年来，科研领域开始注重长链非编码RNA HOTAIR的基因表达并致力于探究其在消化道肿瘤形成、转移中的作用。Lv XB、Lian GY等通过研究食管鳞癌发现，食管癌患者长链非编码RNA HOTAIR表达水平均高于正常人群，且升高程度同TNM分期有关平[4]。线性回归研究分析结果显示，长链非编码RNA HOTAIR水平高者5年生存率降低，结合其它肿瘤的长链非编码RNA HOTAIR可以得出结论，长链非编码RNA HOTAIR可配合肿瘤恶性化，促进其浸润和转移。此外，研究还发现，长链非编码RNA HOTAIR对食管鳞癌作用的发挥主要是通过抑制Hox基因表达的方式来进行性，当Hox基因异常时，则可能会导致组织发育异常突变，最后导致细胞恶性转化，诱发癌症。
3 长链非编码RNA在食管鳞癌中的临床意义
3.1 长链非编码RNA在食管鳞癌中的作用
食管鳞癌的发生是细胞恶性转化的过程，在这一过程中，患者基因组的不稳定可对肿瘤变化产生影响。例如：长链非编码RNA ANRIL，当患者罹患食管鳞癌是，它可以采用调控抑癌基因P15的方式来参与肿瘤变化。
正常细胞在转化成鳞癌细胞的过程中，不同长链非编码RNA的不同表达对癌症细胞的生长作用功效不同，长链非编码RNA DQ786227可抑制BEAS-2B增殖和克隆，加速细胞凋亡，此时其表达上调。而当其处于过表达的状态时，会促进肿瘤生长。NcNRFR不同于长链非编码RNA DQ786227，其会在稳定过表达状态下会促进细胞恶化，鉴于不同长链非编码RNA在食管鳞癌中的表象各有差异，今后在这一领域的研究还需深入而细致。
3.2 过表达长链非编码RNA-LET或具有抑癌功效
长链非编码RNA-LET即低表达长链非编码RNA，经细胞培养、转染及RT-PCR检测、Transwell侵袭实验及细胞划痕实验证实，缺氧诱导银子可降低长链非编码RNA-LET表达，其主要渠道是凭借去乙酰化酶3和泛素蛋白酶体途径。当蛋白被降解以后，细胞侵袭能力增强，患者预后越差。有实验研究显示，食管癌细胞中，长链非编码RNA-LET表达比周边正常组织要低，当长链非编码RNA-LET呈过表达状态时，则其可抑制癌细胞侵袭和增殖，即提示长链非编码RNA-LET有抑癌功能，这与前文中提及的长链非编码RNA有致癌、抑癌双重功效观点一致。但由于研究深入程度有限，长链非编码RNA-LET抑癌作用的发挥途径目前尚未可知，有待突破。
4 结语
既往生物学研究证实，食管鳞癌发病同蛋白编码基因异常存在密切关联。随着研究的深入，现阶段，曾被视为“无功能序列”的暗物质——非编码RNA被发现也作用于肿瘤产生、发展、转移机制中，影响食管癌的发病与治疗。目前，长链非编码RNA在肿瘤疾病中的作用与影响已经逐步得到证实，但调控肿瘤机制的临床研究尚少，在食管鳞癌机制中的研究更为鲜见，望今后临床可充分借助荧光素酶报告基因技术、RNA免疫共沉淀等先进生物学技术进一步探究长链非编码在食管鳞癌中的作用机制，为将长链非编码RNA作为标记物开展食管鳞癌的临床分子治疗奠定理论基础。
参考文献
[1] Orly Wapinski，Howard Y，Chang.Long noncoding RNAs and human disease[J].Trends Cell Biol 2011，21（6）：354-361.
[2] Esteller M.Non-coding RNAs in human disease[J].Nat Rev Genet 2011（12）：861-874.
篇8
关键词：乙酰肝素酶；小片段干扰RNA；亚砷酸；胰腺癌，侵袭力
中图分类号：R285.5文献标识码：A文章编号：1673-7717(2011)12-2657-05
Research on Heparanase siRNA Combined with Arsenous Acid
Inhibiting Invasion of Pancreatic Cancer Cells in Vitro
ZHENG Jiaping1,2,YANG JianMin3,Ru QingJing1
(1.Zhejiang University of Traditional Chinese Medicine,Hanghzou 310053,Zhejiang,China;
2.Zhejiang Tumor Hospital,Hangzhou 310022,Zhejiang,China;
3.Zhejiang People's Hospital,Hangzhou 310014,Zhejiang,China)
Abstract:Objective：To observe invasion inhibiting effect of Hpa small-interfering RNA (siRNA) combined with arsenous acid on pancreatic cancer cells, so as to provide the theoretical foundation for further clinical use in the cancer treatment. Methods：Target gene (Hpa1-siRNA，Hpa2-siRNA，Hpa3-siRNA) fragments were diluted, annealed and connected with linear plasmid expression vector pGenesil-1.1, then pGenesil1.1/Hpa1-siRNA, pGenesil1.1/Hpa2-siRNA and pGenesil1. 1/Hpa3-siRNA were reconstructed. The Hpa-siRNA was transfected into SW1990 pancreatic cancer cell by DOTAP Liposomes meanwhile the empty control and negative control group were designed. Those target genes were respectively transfected into Hpa-mRNA and Hpa protein expression was detected by RT-PCR and Western blot respectively. Transwell cab model was employed to test the ability of SW1990 cell. Results： Expression of Hpa-mRNA and Hpa-protein in SW1990 were obviously suppressed by Hpa1-siRNA, Hpa2-siRNA, and Hpa3-siRNA, and efficacy in Hpa2-siRNA better than in Hpa1-siRNA and Hpa3-siRNA（P
Key words:Hparinase; small interfering RNA; arsenous acid; pancreatic cancer；invasive ability
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收稿日期：2011-07-19
基金项目：浙江省研究生创新科研资助项目(YK2008071)
作者简介：郑家平（1972-），男，浙江杭州人，博士研究生，研究方向：中西医结合防治肿瘤。胰腺癌的发病率占恶性肿瘤的1%~5%，近年来在世界范围内有明显增多的趋势，传统的治疗手段是手术切除为主，联合放疗和化学药物治疗。其五年生存率低于5%，超过90%患者在确诊后1年内死亡，平均存活期少于6月\[1\]。胰腺癌高度侵袭、转移的生物学特性是其预后不良的关键。因此，积极探索和阐明胰腺癌侵袭转移的分子机制，寻求有效抗侵袭、抗转移的治疗措施对改善预后具有重要意义。最近研究表明，Hpa高表达可促进胰腺癌的增殖、侵袭和转移，直接影响胰腺癌患者预后和生存时间\[2-6\]。
因此，Hpa基因有望成为胰腺癌生物治疗的新靶点。另外，一些研究发现\[7-12\]，亚砷酸对多种恶性肿瘤的侵袭和转移性尚具有明显抑制作用。因此我们观察Hpa-siRNA联合亚砷酸对胰腺癌侵袭联合抑制效果。从而为将来亚砷酸联合Hpa-siRNA治疗胰腺癌患者提供理论基础和实验依据。
1 材料和方法
1.1 材料
pGenesil-1.1质粒和大肠杆菌DH5α菌株由武汉晶赛生物有限公司构建和制备。胰腺癌SW1990细胞株购自中国科学院上海细胞库。亚砷酸冻干粉（10mg/支）由北京双鹭药业股份有限公司馈赠。Hpa基因序列自行设计，序列为：Hpa-F 5'- GAAAGACGGCTAAGATGC -3' Hpa-R5'- AAATGGTAGTTTCCTGCTC -3' 扩增片段大小为361bp。GAPDH452内参引物为：序列为GAPDH452-F 5'- ACCACAGTCCATGCCATCAC-3' GAPDH452-R 5'- TCCACCACCCTGTTGCTGTA-3' 扩增片段大小为452bp。紫外分光光度计（SHIMADZU），DNA Marker、Eco31I内切酶、SacI内切酶和T4DNA Ligase链接酶(TaKaRa)， 质粒小抽试剂盒（北京博大泰恒生物技术有限公司），水平电泳仪 DYY-III（北京六一仪器厂），胶回收试剂盒（北京博大泰恒生物技术有限公司），动物RNAout（天泽基因工程有限公司产品），ReverTra Ace-α-TM-RT-PCR Kit （东洋纺上海生物科技有限公司），PCR引物（武汉博洁公司），PCR system 2700(美国AB公司GenAmp)，Taq DNA 聚合酶（MBI 公司），HRP标记的羊抗兔IgG和 Rabbit anti-Hpa抗体（武汉三鹰），Rabbit anti-GAPDH多克隆抗体（武汉晶赛），PVDF膜（Life Science, USA），SuperSignal化学发光试剂（Pierce, USA），Transwell小室(CORNING)。
[WT5”FZ〗中华中医药 学刊
1.2 方法
1.2.1 目的基因设计、合成、与质粒连接、酶切 通过Pubmed网站搜索目的基因人肝素酶mRNA序列，并确定基因号为NM_001098540（1779 bp）或NM_006665（1810 bp）为本实验的目的基因。委托武汉晶赛生物有限公司设计挑选3条靶序列和干扰序列dsDNA模板引物，分别命名为Hpa1、Hpa2、Hpa3，引物结构：CACC+Sense+Loop+Antisense+终止信号+SacI。用30μL annealing buffer 溶解上述合成1OD Hpa1/Hpa2/Hpa3单链目的基因片段。取2μL（即2μL Hpa1/Hpa2/Hpa3A +2μL Hpa1/Hpa2/Hpa3-B）+16μL annealing buffer混匀。94℃水浴退火自然冷却至室温。取1μL退火产物+99μL H2O做100倍稀释。将稀释退火片段分别与线性化载体pGenesil-1.1的连接，分别命名为pGenesil-1.1/Hpa1-siRNA、pGenesil-1.1/Hpa2-siRNA、pGenesil-1.1/Hpa3-siRNA。各取5μL过夜连接产物转化感受态细胞DH5α，分别涂布于含卡那霉素抗性（终浓度为30μg/mL）的LB平板上，37℃恒温箱培养过夜。从每个培养皿上各挑取单克隆菌落接种于3mL含卡那霉素抗性（终浓度为30μg/mL）的LB培养液中，37℃恒温摇床（250r/min）培养过夜。用小提试剂盒小量提取质粒，并分别用SacI做酶切鉴定。
1.2.2 RT-PCR检测Hpa-mRNA表达 将NC（空白质粒组）、Hpa1-siRNA、Hpa2-siRNA、Hpa3-siRNA质粒载体、HK（无特异性Hpa-siRNA质粒阴性对照组）采用DOTAP脂质体法转染SW1990胰腺癌细胞48h。取转染后继续培养48 h的S W1990细胞，以TRIzol法提取总RNA，按逆转录试剂盒说明书步骤进行实验。cDNA反应系统见表1～2，第一步反应条件：75℃ 5min，短暂离心后置于冰上。第二步反应条件：42℃ 60min, 95℃ 5min。将合成好的cDNA 第一链放置-20℃保存。取上述合成cDNA 第一链为模板，进行PCR扩增获得361bp的Hpa基因片段，反应体系见表3。将上述反应体系置PCR扩增仪上 95℃变性5min，然后开始PCR循环：95℃ 25s50.0℃ 25s72℃ 22s，共35个循环，72℃延长3min，4℃保存。DNA电泳观察鉴定：取200μL PCR产物在2%琼脂糖凝胶中电泳，用DL2000 Marker作DNA分子量标准带，溴乙锭染色，紫外透射仪上观察并照相。如出现361bp 的电泳带，则为Hpa
2.4 亚砷酸联合Hpa-siRNA对SW1990胰腺癌细胞侵袭力的影响
见表5，见插页Ⅴ图6。
随着亚砷酸浓度从0.5，1.0，2.0mg/mL的递增，侵袭抑制率升高，分别为：7.78%、46.8%、76.8%，差异有统计学意义（χ2=71.633，P
胰腺癌高度侵袭、转移的生物学特性是其预后不良的关键。因此，积极探索和阐明胰腺癌侵袭转移的分子机制，寻求有效的抗侵袭、抗转移治疗措施对改善预后具有重要意义。最近研究表明，Hpa高表达可促进胰腺癌的增殖、侵袭和转移，对胰腺癌患者预后和生存时间有重要的影响\[2-6\]。因此，Hpa基因有望成为胰腺癌生物治疗的新靶点。我们的研究拟通过RNA干扰(RNA interference, RNAi)技术沉默Hpa基因，观察对胰腺癌侵袭性的影响。
RNA干扰(RNA interference, RNAi)是指外源双链RNA ( double-stranded RNA, dsRNA)导入细胞后，能特异性的诱导同源互补的mRNA降解，导致转录后水平基因表达沉默现象。RNAi作为一种沉默基因表达的新技术，能特异、有效的抑制靶基因的表达，已被广泛的应用于基因功能研究、病毒感染和肿瘤的基因治疗等领域。针对肿瘤发生发展过程中起关键作用的癌基因、抑癌基因、凋亡相关基因、生长因子、受体表达基因以及侵袭转移相关基因等，利用RNAi沉默靶基因的表达，可以抑制肿瘤细胞的增殖、诱导凋亡、增加药物敏感性、抑制血管生成、侵袭、转移等作用，为肿瘤治疗开辟了新的途径。小干扰RNA ( small-interfering RNA, siRNA)作为RNAi效应分子，是RNAi作用的主要介质。它呈发夹状结构，是一段长度约为21-23核苷酸的小双链RNA，经核酸酶降解mRNA而阻断其编码蛋白质的表达，即通过RNAi实现基因沉默\[7\]。
到目前为止，尚不清楚利用RNAi技术是否靶向沉默Hpa表达进而抑制胰腺癌侵袭性。因此，我们进行探索性研究，首先我们自行设计合成Hp-siRNA，利用质粒pGenesil-1.1作为载体有效转染SW1990胰腺癌细胞，进一步检测转染pGenesil-1.1-Hpa-siRNA质粒后SW1990胰腺癌细胞的Hpa蛋白和mRNA的表达，结果表明转染pGenesil-1.1-Hpa-siRNA质粒表达载体（含Hpa1，Hpa2，Hpa3三条干扰序列）的SW1990胰腺癌细胞蛋白和mRNA表达明显降低，其中Hpa2抑制效果优于Hpa1，Hpa3，具有统计学差异，P＜0.05。NC和HK组Hpa-mRNA和蛋白的表达无明显变化。因此，我们研究认为，Hpa2可靶向沉默Hpa基因的表达，且是特异性最高的Hpa-siRNA。另外，我们的研究结果提示Hpa基因还没有达到完全沉默，可能是由于Hpa-siRNA只能抑制Hpa基因表达，而不是敲除该基因。因此单纯siRNA疗效有限，需要联合其他有效的治疗手段。
三氧化二砷 ( Arsenic trioxide,As2O3 ) 俗称砒霜，人类用它治疗疾病已有 2400 年的历史。我国著名血液学专家陈竺等将三氧化二砷用于急性早幼粒细胞白血病的治疗,研究发现其通过诱导白血病细胞分化和凋亡从而发挥抗肿瘤作用\[8\],开创了恶性肿瘤治疗的新纪元。
随着人们对As2O3 的作用机理和适应证方面的衍生研究, 相继发现其对多种实体瘤有抑制作用\[9\]，多项体外研究结果显示可能的抑癌机制是通过多种途径、多种机制如阻滞细胞周期、激活Caspase以及改变GA DD的表达，抑制 surviving、 bcl-2 基因表达，增加Fas、Fas-L表达抑制肿瘤细胞增殖促进肿瘤细胞凋亡，从而发挥其抗胰腺癌的作用\[10-15\]。
体内实验进一步验证三氧化二砷组移植瘤体积和质量均显著低于模型组，三氧化二砷具有抑制人胰腺肿瘤形成和生长的作用，且具有剂量依赖性，联合紫杉醇具有协同作用\[16-17\]。
近年来人们发现三氧化二砷有抑制软组织肉瘤\[17\]、鼻咽癌\[18\]、胶质瘤\[19\]、宫颈癌\[20\]、肺癌\[21\]、胰腺癌\[22-23\]多种恶性肿瘤侵袭转移作用，可能机制与抑制MAPK信号通路或者下调转移相关基因如MMP-2、MMP-9、CD44、nm23的表达有关。另外人们还发现中药三氧化二砷 ( Arsenic trioxide,As2O3 )通过多种机制、途径抑制胰腺癌的侵袭力，因此我们尝试将Hpa-siRNA技术结合三氧化二砷，探讨两者的协同作用。
我们通过不同浓度梯度的亚砷酸进行体外细胞试验，结果表明，亚砷酸具有抑制胰腺癌侵袭力的作用，随着亚砷酸浓度从0.5，1.0，2.0mg/mL的递增，侵袭抑制率升高，分别为7.78%、46.8%及76.8%，差异有统计学意义（χ2=71.633，P
但是，上述实验结果需要将来在体内实验进一步验证。另外尚有待于进一步研究揭示两者协同放大作用的分子机制。
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篇9
关键词 纳洛酮 酒精中毒后意识障碍
doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2010.12.108
资料与方法
2006年1月～2008年12月收治急性酒精中毒后意识障碍患者20例,男17例,女3例;年龄20～46岁,平均33岁;血压98～165/60～84mmHg,脉搏60～108次/分;饮白酒量0.1～1.5kg,病程1～8小时。20例患者均有不同程度意识障碍,轻度中毒19例,表现为嗜睡、烦躁、颜面潮红、共济失调;重度中毒1例,饮酒量约1.5kg,就诊时表现为意识完全丧失、压眶反射消失、腱反射消失、呼吸抑制、紫绀、血压下降等。
治疗方法:20例患者经临床确诊为急性酒精中毒后意识障碍,给予常规治疗维生素B1,保护胃黏膜、保肝、维持水、电解质酸碱平衡,对症等基础上加用纳洛酮治疗。轻度中毒用纳洛酮0.8～2mg,分2～3次,每次加入25%葡萄糖液20ml静脉注射;重度中毒吸氧、气管插管、用呋塞米、甘露醇基础上加纳洛酮2.8～5mg,分3～5次,每次加入25%葡萄糖液20ml静脉注射。每2次间隔时间15～30分钟。
结 果
20例患者神志完全恢复正常,用纳洛酮至意识完全恢复时间为45分钟～2小时,重者8小时内。20例患者住院治疗1～5天,全部治愈出院,用药过程中无1例出现不良反应。
讨 论
急性酒精中毒是临床常见的症状,主要成分是乙醇,饮用酒中含乙醇2%～60%。成年人饮用过量可致中毒,成人引起中毒的乙醇量个体差异大,一般为75～80ml。乙醇是中枢神经系统抑制剂,作用于大脑,抑制皮质功能,以后渐及延脑和脊髓,抑制血管运动中枢、麻痹呼吸中枢及心脏,使血管扩张,最后致呼吸和循环衰竭而死亡。所以短时间内使患者神志迅速恢复清醒很重要。
本组资料用纳洛酮治疗急性酒精中毒20例,患者神志均恢复正常,疗效100%。纳洛酮治疗急性酒精中毒优于传统常规治疗,据文献报道,脑内和外周组织中可产生内源性阿片样物质,认为内源性阿片肽,特别是β-内啡肽的生理效应是导致休克、脑梗死、酒精中毒、安定中毒的病理生理环节。内啡肽还具有直接的细胞毒性作用,对感觉神经传入通路及运动神经传出通路均有抑制作用,并加重乙醇对网状结构和大脑边缘系统阻断神经元之间的传导,同时加重丘脑与大脑皮层之间冲动的交互传导,导致病人意识障碍加深,所以尽快抑制阿片样物质的作用是挽救患者生命的关键。纳洛酮是内源性阿片样物质的特意性拮抗剂,能逆转β-内啡肽而起抑制作用并能解除β-内啡肽对中枢系统的抑制作用[1]。20例患者治疗结果发现纳洛酮在治疗急性轻、重度酒精中毒过程中,能明显缩短患者苏醒时间快速降低血中毒物浓度水平,提示纳洛酮是治疗急性轻、重度酒精中毒的一种快速而可靠的良好药物,而且不良反应少,20例病人未见有血压升高及肺水肿等不良反应发生,并且治疗剂量与高于治疗剂量几十倍的使用其发生不良反应的关系不明确。鉴于纳洛酮半衰期短,血浆浓度衰减快,因此常需反复给药,具体作用需根据其病情及其血浆半衰期(40～90分)决定以避免发生反跳现象[2]。
参考文献
篇10
[关键词]艾纳香；废渣；乙酸乙酯部位；佐剂型类风湿关节炎
类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种慢性、进行性、以侵犯全身关节为主要特征的免疫性疾病，是一种常见的风湿性疾病。其发病率约为0.8%（0.3%～2.1%），女性发病率约是男性的3倍，家谱分析提示，患者具有遗传素质，可能与HLAD和DW抗原等相关。 然而其病因尚不清楚[1]，其主要病理特点是：骨膜慢性炎症、软骨吸收、骨破坏和骨纤维化。多种炎症因子和细胞因子与RA密切相关，迄今尚无疗效确切的药物。
艾纳香是菊科植物艾纳香Blumea balsamifera （L.） DC.新鲜或干燥地上部分[2]。全草含挥发油，主要成分为左旋龙脑[3]，现栽培于贵州、云南、广西，是苗、壮族的重要药物，具有祛风除湿、温中止泻、活血解毒、镇痛发汗、祛痰止咳、通经止血等功效[4]。近年来国内外对艾纳香的报道大多围绕艾纳香的温中止血功效探讨其妇科用药的作用机制[5-6]，而艾纳香祛风除湿功效对治疗风湿关节炎方面的影响却鲜有报道。但是民间验方中却屡次出现艾纳香治疗风湿关节炎的案例，且效果确切。
艾纳香为制取艾片的重要原料，主产区通常采其鲜叶和嫩枝用传统的土制水蒸气蒸馏法提取“艾粉”（为艾纳香制取冰片的粗级产品），再经提炼后可制得精制“艾片（天然左旋冰片）”。产地加工往往将提取“艾粉”后的叶子残渣丢弃，影响了其资源的有效利用。相关试验对艾纳香叶制取挥发油后的废渣进行了药理活性研究，探讨了其不同极性部位镇痛抗炎止血活性的差异，试验证明废渣乙酸乙酯部位有较强的活性。本文根据之前的研究结果进一步阐明废渣乙酸乙酯部位对类风湿关节炎的治疗效果，并初步阐明其机制。
1 材料
1.1 药物 艾纳香干燥的叶，采自贵州罗甸。由南京中医药大学陈建伟教授鉴定为菊科植物艾纳香B. balsamifera叶。经水蒸气蒸馏法提取挥发油之后，收集叶的废渣，烘干备用。
1.2 试剂 弗氏完全佐剂（FCA，美国Sigma公司）；吲哚美辛（美国Sigma公司）；50%，95%乙醇，乙酸乙酯均为分析纯；ELISA试剂盒（南京建成生物工程研究所）。
1.3 动物 清洁级SD雄性大鼠，体重（180±5） g，扬州大学比较医学中心，许可证号SUXR（苏）2012-0004。
2 方法
2.1 供试液的制备 将1.1项下所收集的叶子废渣以5倍量95%乙醇浸泡3 h，回流提取2 h，重复2次，再以50%乙醇回流提取1次；合并提取液滤液，以旋转蒸发仪浓缩，依次以石油醚、乙酸乙酯萃取，浓缩干燥取其乙酸乙酯部位（BBE），得率为2.43%，以0.5%CMC-Na稀释成浓度适宜的混悬液备用。
2.2 动物模型 适应性喂养7 d后，除空白组外大鼠用微量注射器于右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂（FCA）0.1 mL，7 d后在尾根部皮下再次注射FCA 0.1 mL加强免疫。约14 d左右可诱发成功佐剂型关节炎模型[7]。
2.3 动物分组和给药 36只大鼠适应性喂养7 d后，随机分为6组，每组6只，根据成年人每日艾纳香的用量（15～30 g）设计大鼠实验用药量，其中人使用的高剂量为大鼠实验用量的中剂量，其中各剂量均未出现大鼠用药死亡的现象。空白对照组（0.5%CMC-Na 10 mL・kg-1）、模型对照组（0.5%CMC-Na 10 mL・kg-1）、阳性对照组（3 mg・kg-1吲哚美辛）及BBE高、中、低剂量（21.6，10.8，5.4 mg・kg-1）组，各组动物均于第2次注射FCA加强免疫后开始灌胃给药，连续给药28 d。
2.4 体重和足肿胀度 于第2次注射FCA加强免疫后开始，每7 d（即给药当天，给药后第7，14，21，28 天）对所有大鼠进行体重检测，观察其体重变化，同时以测量足周长法观察其足肿胀情况。
2.5 关节炎指数 FCA所致多发性关节炎一般于注射FCA后10～14 d开始出现， 主要观察各组大鼠4只足爪各关节的肿胀程度。于第2次注射FCA加强免疫后第3天开始，每4 d观察并记录各关节病变，按0～4分评分： 0分，正常；1分，关节稍红肿；2分，关节轻度红、肿、热；3分，关节中度红、肿、热、轻度功能障碍；4分，关节重度红、肿、热、严重功能障碍，不能负重。每只大鼠4只足爪的最大积分为16分。
2.6 脾脏和胸腺指数 免疫28 d后，将各组大鼠都脱颈处死，取出脾脏和胸腺分别称重。脾脏（胸腺）指数（mg・g-1）=脾脏（胸腺）质量/体重。
2.7 病理切片 将大鼠处死后剪下膝关节，置于10%甲醛（福尔马林）中固定。经过2周的脱钙，再进行包埋、切片、苏木素和曙红染色等一系列的处理后制成病理切片，显微镜下观察其滑膜增生、炎症、血翳形成、骨侵蚀等病理情况。
2.8 血液指标 免疫28 d，禁食一晚后对各组大鼠进行眼眶取血。血液样本分为2组，一组取全血收集于含有EDTA的干净试管中，进行血常规检测；另一组去血清收集于不含有EDTA的试管中，用比色法测定血清中的超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）、一氧化氮（NO）、羟基自由基（OH・）、碱性磷酸酶（ALP）、谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、β-氨基半乳糖（NAG）、唾液酸（SA）水平以及采用酶联免疫吸附实验（ELISA）测定血浆中白介素-1（IL-1）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。
2.9 数据分析 所有数据采用Excel 2013统计软件进行统计分析，各组数据比较采用配对t检验，统计结果数据以±s表示，P
3 结果
3.1 体重和足肿胀度 空白组大鼠活泼，纳食正常，体重稳步上涨。模型组大鼠纳食减少，体重增长缓慢，致炎侧足跖和踝关节肿胀明显，在12 d前后出现肿胀高峰，部分大鼠在造模后期出现下肢活动受限。BBE治疗组给药后体型较模型组大，较活泼，未见明显活动受限，但体重变化较模型组无显著性差异，在治疗第15天前后不同程度地明显抑制了致炎足肿胀度，较模型组有显著性差异。BBE高剂量组和吲哚美辛阳性药组在12 d前后足肿胀度较模型组有显著性差异，见图1，2。
3.2 关节炎指数 造模的第12天之前，模型组、BBE组和吲哚美辛阳性药组的关节炎指数之间差异无显著性意义，且高于空白组。此后模型组的关节炎指数逐渐升高。BBE高、中剂量组药后关节炎指数逐渐降低，与模型组比较差异有显著性意义
4 讨论
据报道炎症介质像IL-1，IL-6，TNF-α等，在风湿病发病机制中扮演着很重要的角色，它们是由免疫细胞的浸润和基质金属蛋白酶（MMPs）的过度分泌所产生的。其中TNF-α尤为关键，它可以促进其他炎症因子像IL-1，IL-6的分泌[8]。TNF-α和IL-1共同刺激纤维细胞过度表达IL-33，MMPs和趋化因子[9]，然而IL-1则表现出更多的对软骨和骨关节侵蚀作用[10]，整个“超家族”中IL-1参与了整个破坏过程。这些过程又会导致组织基质的破坏和炎症的浸润。BBE对TNF-α和IL-1有显著的抑制作用，从而缓解风湿关节炎的各种症状。这种免疫抑制作用可以通过抑制CD4+来下调促炎因子的过度分泌[11]。而TNF-α和IL-1的下调与NF-κB 和MAPKs通道有着密切关系，有待进一步研究。
活性氧（ROS）是由正常的细胞代谢所产生，在对抗感染的防御体系中起着重要的作用。但是在风湿病理条件下，激活的单核白细胞核巨噬细胞大量聚集从而导致活性氧在关节和脏器内过度表达，并对细胞膜产生直接损伤[12]。而这种细胞损伤又会引起相关酶的显著增加，所释放的溶酶体酶类对关节软骨有着水解作用，水解产物，如SA的含量也会上调[13]。ROS还通过促进促炎细胞因子和MMPs的生产[14]对关节造成间接的损害。高浓度的NO阻碍了成骨细胞的生长和分化，这是由促炎因子对骨形成的抑制作用所引起的。BBE在体内呈现良好的抗氧化作用，表现在通过其治疗后，下调了血清中NO，MDA，OH・的水平，同时通过上调SOD和GSH水平来修复体内抗氧化系统，从而保护滑膜不受侵蚀，关节及脏器细胞膜不被破坏。细胞酶，如ALP，AST和ALT的升高是器官指数和骨缺损的重要指标，受损伤细胞释放的酶可以引起相关器官和骨的损伤。因此，BBE能够下调这些酶的水平，表明它具有效的抗关节炎活性，并对内脏和骨有针对性的保护作用。总之，BBE组治疗后可恢复体内紧张的氧化应激和过度增加的细胞酶，表明BBE具有抗氧化活性以及内脏和骨的保护作用。
通过上述试验和相关的指标分析发现，艾纳香叶废渣的乙酸乙酯部位确实具有抗风湿的效果，这归因于其乙酸乙酯部位具有免疫抑制、调节细胞因子和抗氧化等共同作用，为下面进一步研究其作用通道和有效成分奠定了基础。
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Anti-arthritic and anti-oxidative effect of ethyl acetate fraction of Blumea
balsamlfera residues in rat adjuvant-induced arthritis
XIA Yan， ZUO Jian， LI Xiang， CHEN Jian-wei*
（Nanjing University of Chinese Medicine， Nanjing 210046， China）
[Abstract]Objective： To study the effect of ethyl acetate fraction of Blumea balsamifera（BBE） residue on treating rats of adjuvant arthritis （AA） and its mechanism. Method： The rats were immunized with the Freund′s complete adjuvant （FCA）. After modeling， 28 days′ treatment with BBE was performed. During the experimental process， rat mass， toe girth， arthritic index （AI）， proliferation of immune organs and pathological section were measured. After treatment， blood samples were collected through fossa orbitalis vein for detection of serum SOD， MDA， GSH， NO， OH・， ALP， AST， ALT， NAG and SA content using colorimetric method and IL-1， IL-6， TNF-α content using ELISA method. Result： Administration with BBE （high dose） could significantly ameliorate joint swelling and arthritis index， effectively inhibit synovial hyperplasia， down-regulate the levels of MDA， NO， OH・， ALP， AST， ALT， NAG， SA， IL-1， IL-6， TNF-α and up-regulate the SOD and GSH levels in serum. Conclusion： The results suggested BBE possesses substantial anti-arthritis and antioxidant activities.