活血定眩丸的毒理学研究论文

1器材

1.1动物KM小鼠，SPF级，雌雄各半，体重(20±2)g，合格证号：SCXK（甘）2004-0006-0000025；Wistar大鼠80只，SPF级，雌雄各半，体重(90±10)g，合格证号：SCXK（甘）2004-0006-0000025，由甘肃中医学院实验动物中心提供。

1.2药物活血定眩丸（由甘肃中医学院附属医院提供，批号070501）因丸剂中含有一定量的辅料，动物实验配制供试样品浓度达不到实验要求的剂量，故采用与丸剂相同工艺方法制得该药的浸膏（1g浸膏相当于2.242g生药），实验前用蒸馏水配制成实验所需浓度用于急性和长期毒性实验。

1.3仪器

CD-1200型血细胞分析仪（美国，雅培）；ALCYON300型全自动生化分析仪（美国，雅培）；电子显微镜BX60-32FB3-F01型（日本，OLYMPUS）；切片机RM2135型（德国，徕卡）；全自动组织包埋机TEC-V.CM-JZ型(日本，樱花)；自动组织脱水剂VIP-JJZ-JZ型（日本，樱花）。

2方法与结果［2～4］

2.1小鼠急性毒性实验

2.1.1方法

经对小鼠预试验，结果显示不能测出活血定眩丸剂对小鼠的LD50，故进行对动物的最大给药量测定。取KM小鼠40只，雌雄各半，按体重随机分为两组，分别为给药组和空白对照组，每组20只。于禁食12h后（不禁水），给药组以最大给药浓度（1.86g生药/ml），0.4ml/10g体重的给药体积，对照组以等体积的生理盐水，灌胃2次/d，间隔6h，给药后观察14d，记录动物的死亡及毒副反应症状。实验结束时，将全部动物处死，解剖，肉眼观察各主要脏器组织病变情况。计算小鼠口服活血定眩丸的最大给药量。

2.1.2结果

1日内灌服活血定眩丸148.8g生药/kg体重后，动物活动、进食进水、毛发未见任何异常。观察14d动物无死亡。肉眼尸检未见主要脏器组织明显异常。由此可见，活血定眩丸小鼠口服最大给药量>148.8g生药/kg体重。此剂量相当于临床成人（按60kg计）每日口服剂量0.2242g生药/kg体重的663倍。体重变化情况见表1。表1活血定眩丸对急性毒性实验小鼠体重的影响(略)

结果显示，给药组与对照组小鼠的体重变化无显著性差异。

2.2大鼠长期毒性实脸

2.2.1方法取Wistar大鼠80只，按体重随机分为4组，雌雄各半，每组20只，分别为活血定眩丸高、中、低剂量组和空白对照组，给药量分别为每日22.42，11.21，2.242g生药/kg（分别相当于临床日用药剂量的100倍，50倍，10倍），给药体积为1.5ml/100g体重，各剂量组用等体积不等浓度给药，空白对照组给予等体积生理盐水溶液1次/d，每周给药7d，连续灌服6周。给药前及给药期间每周称体重1次，并按平均体重调整给药剂量，实验期间每天观察大鼠一般状态、体征、摄食量、饮水及粪便状况。发现有中毒反应的动物应取出单笼饲养，重点观察。发现死亡或濒死动物应及时尸检。于末次给药结束后24h，每组取一半的大鼠从腹主动脉取血，检查血液学和血液生化学指标，取血后，立即剖取脑、心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、睾丸、子宫等脏器称重，根据体重计算器官重量系数，并对心、肝、脾、肺、肾、脑、胃、小肠、大肠、垂体、脊髓、骨髓、淋巴结、膀胱、睾丸、附睾、卵巢、子宫、胸腺、肾上腺等组织做病理学检查。

2.2.2结果

用药组及对照组大鼠在8周实验期间均未见异常症状，动物的活动、体重、摄食量、大便和毛发光泽程度等未见异常。80只大鼠无一死亡。

活血定眩丸剂对大鼠体重增长的影响：在活血定眩丸连续给药及停药恢复期间，各组大鼠体重变化一致，无明显异常。结果见表2。表2活血定眩丸剂对实验大鼠体重的影响(略)

结果显示，给药6周及停药2周后，活血定眩丸各给药组大鼠体重变化与对照组相似，未见明显的体重改变。

活血定眩丸剂对大鼠血液学的影响：活血定眩丸剂连续给药42d时各剂量组大鼠外周血象检查均在正常范围。结果见表3。表3活血定眩丸剂对实验大鼠血液学的影响(略)

结果显示，给药6周及停药2周后，活血定眩丸各给药组大鼠各项血液学指标与对照组相似，未见明显改变。

活血定眩丸剂对大鼠血液生化指标的影响：活血定眩丸剂连续给药6周及停药恢复2周时，各剂量组与空白对照组比较无明显差异。实验结果见表4。表4活血定眩丸剂对实验大鼠血生化指标的影响(略)

结果显示，给药6周及停药2周后，活血定眩丸各给药组大鼠各项血液生化学指标与对照组相似，未见明显血液生化学改变。

活血定眩丸对大鼠主要脏器重量系数的影响：连续给药6周及停药2周，各组动物体质、脏器质量无显著性差异，其脏器系数（g/100g体重）亦无显著性差异。结果见表5。表5活血定眩丸对大鼠脏器系数的影响(略)

结果显示，给药6周及停药2周后，活血定眩丸各给药组大鼠脏器系数与对照组相似，未见明显的脏器系数改变。

活血定眩丸对大鼠重要器官组织病理形态的影响：连续给药6周及停药恢复2周后，放血处死各组大鼠，尸解对脏器进行肉眼观察未发现异常现象。给药各组动物各个脏器组织病理切片检查未见明显病变（主要脏器的病理切片见图1～10）。说明活血定眩丸高，中，低3个剂量连续服用6周，对大鼠主要脏器无明显器质性损伤。

3结论

活血定眩丸成人临床每日用量为0.2242g生药/kg体重，小鼠1日口服最大给药量为148.80g生药/kg。相当于成人用量的663倍。表明该药无明显急性毒性作用。

活血定眩丸以22.42，11.21，2.242g生药/kg体重3个剂量灌胃(分别为成年人临床日用剂量100，50，10倍)，1次/d，连续给药6周，与灌胃蒸馏水的空白对照组比较，对大鼠一般状态(外观形态、活动、饮食、大便形状等)、生长发育(体重增大)、外周血象、血液生化、病理学检查未见明显毒性作用；停药恢复2周后亦未见明显的迟缓毒性反应。实验结果表明，该药长期使用不会引起机体结构和功能的改变，无毒副作用，提示按临床规定的疗程、剂量用药时是安全的。

【参考文献】

［1］宋敏，蒋宜伟，邱桐.活血定眩丸对椎动脉型颈椎病兔血液流变学，ET，NO的影响［J］.甘肃中医学院学报，2005，22(6)：23.

［2］谢秀琼.中药新试剂开发与应用，第3版［M］.北京：人民卫生出版社,2006:721.

［3］中华人民共和国卫生部药政管理局.中药新药研究指南(药学、药理学、毒理学)［M］.北京：人民卫生出版社，1994：199.

［4］国家食品药品监督管理局.中药新药研究的技术要求［S］.1999.

【摘要】目的观察动物口服活血定眩丸的急性毒性和长期毒性反应。方法以最大浓度、最大体积的活血定眩丸灌服小鼠，测定l日最大给药量。以高、中、低3个剂量的活血定眩丸灌服大鼠连续6周，观察大鼠的生长发育、血液学、血液生化学、脏器系数、组织病理学变化及停药后2周上述指标的变化。结果小鼠2次/d灌服活血定眩丸的最大给药>148.8g生药/kg体重,此剂量相当于临床成人每日口服剂量0.2242g生药/kg体重的663倍。长期毒性实验显示，大鼠摄食量、活动、体重、血液学、生化指标检查、脏器重量系数、病理学检查均未见明显异常，与对照组相比均无明显差异。结论活血定眩丸的急性毒性和长期毒性实验均未见有明显毒性反应。

【关键词】活血定眩丸毒理学急性毒性长期毒性