小鼠血浆钙和磷含量影响论文

摘要：血浆钙磷

斯氏小体(corpusclesofStannius,CS)是硬骨鱼类独有的内分泌腺，其分泌的斯钙素(stanniocalcin,STC)具有抑制鱼类鳃、肠的钙转运和促进肾小管对磷酸盐的重吸收以调节钙、磷代谢的功能。现已证实，人和哺乳动物中也存在有STC，其生理功能表现在抑制肠对钙的吸收、促进肠对磷酸盐的吸收及促进肾小管对磷酸盐的重吸收以调节钙、磷代谢，并且对鱼的鳃钙转运也有抑制功能。那么鱼类CS分泌物能否对哺乳动物的钙、磷代谢产生影响呢?鱼类CS匀浆液对大鼠血清钙、磷含量的影响已有报道，而鱼类CS匀浆液能否也对小鼠血清钙、磷代谢产生影响，国内外未见报道。为此，我们观察了鲤鱼CS匀浆液对小鼠血浆钙、磷代谢的影响。

1材料方法

(1)实验材料实验用昆明种小鼠由本院实验动物房提供，共计48只，体重19～26g,雌性2只雄性46只。用于制备CS匀浆液的鲤鱼(Cyprinuscarpio)购自当地集贸市场，体重380～520g，均为雌性，性腺发育至Ⅳ期。

(2)鲤鱼CS匀浆液的制备按仇存网等的方法，取出鲤鱼CS称重后，加入一定比例的生理盐水制备成10mg/ml、5mg/ml、2.5mg/ml的CS匀浆液，3000r/min离心5min后，取上清液备用。

(3)实验方法取小鼠48只，随机分为6组。正常对照组腹腔注射生理盐水，另一组腹腔注射5mg/ml的鲤鱼CS匀浆液；其余4组在腹腔注射5mmol/LCaCl2溶液的基础上，一组腹腔注射生理盐水，另外3组分别腹腔注射2.5mg/ml、5mg/ml和mg/ml的鲤鱼CS匀浆液。上述6组注射剂量均为0.2ml/10g体重。注射2h后眼眶静脉丛采血，肝素抗凝，6000r/min离心5min后取血浆备用。

(4)血浆钙、磷含量的测定血浆钙、磷含量的测定分别按邻甲酚酞络合酮(OCPC)法和钼蓝法进行，所用试剂均为北京中生生物工程高技术公司生产，操作步骤严格按产品说明进行，722-光栅分光光度计(上海第三分析仪器厂)比色测定。

(5)统计学方法实验数据采用单因素方差分析进行统计学处理，结果用均数±标准差(±s)表示。

2结果

按上述实验方法测得各组血浆钙和血浆磷水平见表1。经方差分析表明摘要：(1)仅注射5mg/ml鲤鱼CS匀浆液和注射5mmol/LCaCl2溶液的小鼠和正常对照组小鼠相比，血浆钙水平分别出现极显著降低(P＜0.01)或升高(P＜0.01)；而血浆磷水平分别出现升高(无显著性差异)和显著降低(P＜0.05)，说明5mg/ml鲤鱼CS匀浆液对正常小鼠具有降血钙功能。(2)在给小鼠腹腔注射5mmol/LCaCl2溶液基础上，分别腹腔注射不同浓度的鲤鱼CS匀浆液的小鼠和仅注射5mmol/LCaCl2溶液的小鼠相比，三组小鼠血浆钙水平均出现极显著下降（P＜0.01)，而血浆磷水平只在鲤鱼CS匀浆液达5mg/ml以上时，才出现升高现象(P＜0.01)；但和正常对照组小鼠相比，仅注射10mg/ml鲤鱼CS匀浆液的小鼠血浆钙出现极显著下降(P＜0.01),血浆磷水平均无显著性差异，这说明鲤鱼CS匀浆液具有缓解因注射5mmol/LCaCl2溶液而出现的高血钙和低血磷状况。GroupPlasmacalcium

(mmol/L)

Plasmaphosphorus

(mmol/L)

Normalcontrol1.689±0.0661.845±0.134

CShomogenate(5mg/ml)1.550±0.097**1.976±0.271

CaCl2(5mmol/L)1.806±0.074**1.686±0.131*

CaCl2+CS(2.5mg/ml)1.699±0.107##1.823±0.133

CaCl2+CS(5mg/ml)1.695±0.038##1.891±0.115##

CaCl2+CS(10mg/ml)1.558±0.038##1.878±0.169##

*P＜0.05,**P＜0.01,vsnormalcontrol;##P＜0.01,vsCaCl2(5mmol/L)group

3讨论

鱼类CS匀浆液对哺乳动物钙、磷代谢的影响效应已有报道。Leung等首先观察到CS具有降低大鼠血钙的功能，他们给幼年雄性大鼠静脉注射美洲鳗鲡的CS粗提液后，大鼠出现剂量-依赖性的低血钙反应。但Ukawa等分别给雄性大鼠注射适应于三种不同生活环境的鱼(淡水鳗鲡、1/3海水金鱼及海水隆头鱼)CS匀浆液后，3小时内未观察到血清钙和血清磷浓度的显著性变化。而Patel等给雄性大鼠注射鲤鱼CS匀浆液后1小时，大鼠即出现明显的低血钙和高血磷现象，且雌鱼CS匀浆液较雄鱼CS匀浆液的功能更加显著。尽管这些作者的实验结果不完全一致，但仍然可以说明鱼类CS匀浆液能对大鼠血钙和血磷水平生产影响。

从我们在小鼠上的实验结果来看，给小鼠腹腔注射雌性鲤鱼CS匀浆液2h后能够使小鼠出现血钙降低和血磷升高的现象，并且能使小鼠因注射5mmol/LCaCl2溶液出现的高血钙和低血磷现象得以缓解，并存在剂量依靠效应。这些结果进一步证实鲤鱼CS分泌物能够影响哺乳动物钙、磷代谢，但影响途径和机制有待进一步探索。