习用金银花抑菌功能论文

【摘要】目的探讨川产习用金银花的抑菌作用。方法平板打孔法。结果川产习用金银花在体外对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、福氏志贺菌、卡他球菌有比较明显的抑制作用，对溶血性链球菌和鼠伤寒沙门菌不太敏感。结论为川产习用金银花的利用和深入研究提供了科学参考。

【关键词】川产习用品种；金银花；体外抑菌;平板打孔法

前言

金银花FlosLonicerae为常用中药，具有清热解毒、通经活血、疏风散热之功效。2005年版《中国药典》规定金银花为忍冬科Caprifoliaceae植物忍冬LonicerajaponicaThunb.的干燥花蕾或初开的花，但我国作为中药金银花流通及使用的品种却是复杂的［2］。四川地处西南，为我国金银花主要产区之一，品种比较复杂。为了客观评价其品质，我们测定了川产金银花主要有效成分绿原酸的含量。本实验以道地正品金银花河南密县“密银花”作对照，用平板打孔法对川产金银花品种细毡毛忍冬L.similisvar.similis，淡红忍冬L.acuminata，红腺忍冬L.hypoglauca，峨嵋忍冬L.similisvar.omeiensis进行了体外抑菌作用研究。

一、材料

1.1药物川产习用金银花细毡毛忍冬、淡红忍冬、红腺忍冬、峨嵋忍冬经成都中医药大学万德光教授鉴定，“密银花”委托河南中医学院曹继华教授采集鉴定。

1.2菌种金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）、溶血性链球菌（Staphylococcushaemolyticus）、大肠杆菌（Escherichiacoli）、福氏志贺菌（Shigellaflexneri）、鼠伤寒沙门菌（Salmonellatyphimurium）、肺炎球菌（pneumonococcus）由四川卫生干部学院微生物教研室提供；卡他球菌（Branhamellacatarrhlis）、表皮葡萄球菌（Staphylococcusepidermidis）由成都中医药大学微生物教研室提供。

1.3试剂琼脂粉和蛋白胨（购自广州海洋生物有限公司）、牛肉浸出粉（购自灵武市泰运生化制品有限公司）、脱纤维兔血（自制）、分析纯氯化钠等。

二、方法

2.1培养基的制备

2.1.1营养肉汤培养基取蛋白胨、牛肉浸出粉、氯化钠、蒸馏水，按《中国药典》规定比例混合，微温溶解后，调节pH为弱碱性，煮沸，滤清，调节pH值使灭菌后为7.2±0.2，在115℃灭菌30min。

2.1.2营养琼脂培养基照上述营养肉汤培养基的处方及制法，按《中国药典》规定比例加入适量琼脂，调节pH值使灭菌后为7.2±0.2，在115℃灭菌30min。

2.1.3血琼脂培养基将营养琼脂培养基加热溶化，待冷至50℃左右，以无菌操作加入10%无菌脱纤维兔血，摇匀，置冰箱备用。

2.2菌液的制备于实验前将上述保存菌种于相应的琼脂平板上划线，于37℃培养箱内培养48h，取出，用白金环挑起典型菌落接种营养肉汤管中，为了溶血性链球菌、肺炎球菌的生长，后二者需要在血琼脂培养基中培养，经过37℃下培养24h，将菌液稀释成1×107cfu·ml-1，供实验备用。公务员之家:

2.3供试液的制备称取川产习用金银花药材及“密银花”各5g，分别加蒸馏水适量，煎煮3次，第1次40min，后两次各30min，分别合并水煎液，浓缩至6ml，分别定容于消过毒的10ml容量瓶中，各得500mg·ml-1的供试液，冰箱中保存备用。

2.4抑菌实验将溶血性链球菌、肺炎球菌菌液0.1ml滴在血琼脂培养基上，其它菌液0.1ml滴在营养琼脂平板上，用无菌L型玻棒涂布均匀。用6mm直径打孔器打孔，每平板打孔3个，除取孔内琼脂，并向每孔内加药液约0.1ml，放置37℃培养箱内培养18～24h，观察并记录抑菌环直径。结果见表1。表1抑菌实验结果（略）

三、小结

参照《微生物和检验技术》判定结果，抑菌圈直径≥20mm为高敏；抑菌圈直径为10～19mm为中敏；抑菌圈直径<10mm为钝敏。可见川产4种习用金银花对金黄色葡萄球菌高敏，而“密银花”对其为中敏；5种金银花对溶血性链球菌和鼠伤寒沙门菌基本都为钝敏（抑菌环直径没有大于10mm）；肺炎球菌对峨嵋忍冬高敏，对细毡毛忍冬和红腺忍冬中敏，对淡红忍冬和“密银花”钝敏；卡他球菌对红腺忍冬和峨嵋忍冬高敏，对其它3种金银花中敏；表皮葡萄球菌对峨嵋忍冬高敏，对细毡毛忍冬和淡红忍冬中敏，对红腺忍冬和“密银花”钝敏；大肠杆菌对细毡毛忍冬和峨嵋忍冬高敏，对其它3种金银花中敏；福氏志贺菌对细毡毛忍冬、淡红忍冬和峨嵋忍冬高敏，对其它两种金银花中敏。

【参考文献】

［1］国家药典委员会.中国药典,Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005：152.

［2］徐炳声.中药金银花原植物的研究［J］.药学学报，1979，14（1）：23.

［3］苟占平，万德光.HPLC法测定5种1变种金银花中绿原酸含量［J］.中国中医药信息杂志，2004，11（5）：421.

［4］国家药典委员会.中国药典,Ⅱ部［S］.北京：化学工业出版社，2005：附录83.

［5］王彩玉.常用细菌培养基制备及注意事项［J］.卫生职业教育，2004，23（12）：102.

［6］杨建江，韩文瑜，杜锐，等.30种中草药对耐药性猪链球菌的抑菌试验［J］.中兽医医药杂志，2004，23（2）：14.