ELISA测定HIV抗体对艾滋病的诊断价值分析

【摘要】目的探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）测定人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体对艾滋病（AIDS）的诊断价值。方法选择2019年1月—12月于深圳市龙岗区第三人民医院治疗的AIDS高危人群或疑似HIV感染患者1820例，采集清晨空腹静脉血，采用ELISA、胶体金法检查HIV抗体，并以蛋白印迹诊断HIV抗体结果作为金标准，计算胶体金法、ELISA的敏感度、特异度及准确率、阴性预测值、阳性预测值，以及与蛋白印迹诊断结果的一致性。结果1820例AIDS高危人群或疑似HIV感染患者经蛋白印迹证实阳性、阴性各有21例、1799例；胶体金法诊断HIV抗体阳性、阴性各有372例、1448例，其中漏诊7例，误诊358例；ELISA诊断HIV抗体阳性、阴性各有56例、1764例，其中漏诊1例，误诊36例。以蛋白印迹诊断结果作为金标准，ELISA诊断HIV抗体敏感度（95.24%）、特异度（98.00%）及准确率（97.97%）、阴性预测值（99.94%）、阳性预测值（35.71%）均高于胶体金法（66.67%，80.10%，79.95%，99.52%，3.76%），有统计学差异（P<0.05）；胶体金法诊断HIV抗体结果与蛋白印迹诊断结果的一致性差（Kappa=0.051，P=0.000）；ELISA诊断HIV抗体结果与蛋白印迹诊断结果的一致性较为理想（Kappa=0.511，P<0.001）。结论ELISA用于HIV抗体筛查中敏感度、特异度及准确率、阴性预测值、阳性预测值均较高，且与蛋白印迹诊断结果的一致性较佳，能够提高AIDS检出率，可作为筛查HIV抗体较为准确的方法于临床推广。

【关键词】艾滋病;人类免疫缺陷病毒;酶联免疫吸附试验;胶体金法;蛋白印迹;诊断效能;一致性

艾滋病（AIDS）作为一种免疫性疾病，具有较强的传播性，多由于人类免疫缺陷病毒（humanimmunodeficiencyvirus，HIV）经血液途径、性接触途径及母婴途径等感染所致，若未能及时诊断并治疗会破坏人体免疫系统，造成患者反复感染，威胁生命安全。随着我国AIDS从局部暴发到广泛流行，其防治策略也逐渐从道德宣传和出入境防范转变为主动对公众进行AIDS知识的宣传教育，各级地方政府、人民医院、学校都参与到AIDS防治的宣传教育中。加强HIV抗体检测，有利于及时发现HIV病毒并对其传播进行阻断[1，2]。酶联免疫吸附试验（enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA）、胶体金法为筛查HIV抗体的重要方法，但目前何种方法检测结果更为准确尚无确切结论[3，4]。本研究探讨ELISA测定HIV抗体对AIDS的诊断价值，并与胶体金法诊断HIV抗体结果进行比较，从而实现AIDS早发现、早诊断、早治疗，现报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选择2019年1月—12月于深圳市龙岗区第三人民医院治疗的AIDS高危人群或疑似HIV感染患者1820例。其中男943例、女877例；年龄28~59岁，平均年龄（42.19±3.26）岁；体质量指数（bodymassindex，BMI）18.2~29.7kg/m2，平均（23.49±1.56）kg/m2；受教育程度：小学及以下、初中、高中、高中以上各有459例、318例、586例、457例；婚姻状况：未婚、再婚、离异/丧偶各有906例、893例、21例；职业：无工作、有工作各有146例、1674例；性取向：男男性行为、异性性行为各有820例、1000例。

1.2入选标准

纳入标准：①依从性较高，能够积极配合临床诊治，未患有精神疾病，理解及认知功能正常；②患者均进行ELISA、胶体金法检查HIV抗体。排除标准：①存在严重机体感染；②合并恶性肿瘤；③肝、肾功能不全；④已确诊为HIV感染者或者确诊为AIDS患者。

1.3方法

1.3.1仪器及试剂全自动酶免仪（AE115）由深圳市爱康生物科技有限公司提供，仪器性能良好，均经过校准；ELISA试剂、胶体金试剂分别由珠海丽珠试剂有限公司、广州万孚生物技术股份有限公司提供，所有试剂均在有效期范围内使用。1.3.2检测方法采集患者清晨空腹静脉血6mL，3000转/min离心10min，离心后取上清液，采用胶体金法、ELISA测定检测HIV抗体。胶体金法检测时取待测样本50μL分别加于试纸板条加样区，将1滴稀释液加在加样区上方，于30min内观察并记录结果。ELISA采用常规操作进行检测，严格依据试剂盒说明书完成各项操作过程，初筛阳性标本进行双孔复试。

1.4评价指标

①记录胶体金法、ELISA诊断HIV抗体结果。②以蛋白印迹诊断HIV抗体结果作为金标准，计算胶体金法、ELISA诊断HIV抗体敏感度、特异度、准确率、阴性预测值、阳性预测值。③计算胶体金法、ELISA诊断HIV抗体结果与蛋白印迹诊断结果的一致性。

1.5统计学方法

采用SPSS22.0统计学软件分析数据，计数资料以%表示，采用χ2检验，一致性采用Kappa检验（Kappa>0.75表明一致性极好，0.4~0.75表明一致性较为理想，<0.4表明一致性差），P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1蛋白印迹诊断结果

1820例患者经蛋白印迹证实阳性、阴性各有21例、1799例。

2.2胶体金法、ELISA诊断

HIV抗体结果胶体金法诊断HIV抗体阳性、阴性各有372例、1448例，其中漏诊7例，误诊358例；ELISA诊断HIV抗体阳性、阴性各有56例、1764例，其中漏诊1例，误诊36例；以蛋白印迹诊断结果作为金标准，ELISA诊断HIV抗体敏感度、特异度、准确率、阴性预测值、阳性预测值高于胶体金法，有统计学差异（P<0.05）。见表1、表2。

2.3胶体金法、ELISA诊断

HIV抗体结果与蛋白印迹诊断结果的一致性分析胶体金法诊断HIV抗体结果与蛋白印迹诊断结果的一致性差（Kappa=0.051，P=0.000）；ELISA诊断HIV抗体结果与蛋白印迹诊断结果的一致性较为理想（Kappa=0.511，P<0.001）。

3讨论

据统计，2018年新增HIV感染者中多数来自于男男性行为人群、吸毒者、性工作者等高危人群以及他们的伴侣。全球新增HIV感染者人数从1997年的290万下降至2018年的170万，但仍然低于2020年的目标50万，控制HIV新增、减少HIV传播仍面临很大的挑战。AIDS作为一种传染性疾病，会对人体免疫系统进行攻击，降低患者免疫功能，导致多种感染，增加恶性肿瘤发生风险[5]。1981年美国诊断出首例AIDS患者，近年来AIDS病毒感染率较高，目前我国AIDS患者及HIV感染患者约占总人口的0.06%。目前临床仍缺乏较为有效的抗HIV药物及预防疫苗，而这也是导致AIDS患者死亡率较高的重要原因。目前在毒品交易泛滥及人口流动性强、性解放的社会环境中，HIV感染者已从高危人群不断向一般人群扩散，传播速度较快[6]。AIDS具有较强的潜伏期，发病早期患者无典型症状，极易被忽视，进而通过多种不同途径传播给他人。因此对公众进行警示性教育，将艾滋病疫情情况进行公布，对患者的HIV抗体进行早期检测以明确诊断，有利于控制传染源，将传播途径切断，进而达到良好的防治效果[7，8]。HIV病毒感染人体后，约10d左右血浆中便可检测到HIV核酸，约2~3周后血浆中可出现p24抗原，并可产生ＩgM抗体，随后ＩgG抗体贯穿HIV感染的后续阶段。故在HIV感染人体后，HIV核酸为体内首先出现的生物标记物，其次为p24抗原，最后为抗体。为有效控制AIDS流行传播，制订适宜的HIV抗体实验室检测策略，对AIDS的疫情监测、诊断和治疗有重要意义。选取高精度、高质量的试剂与检测方法是检测高危HIV感染人群最为重要的步骤，以获得更为准确的检测结果。胶体金法检测HIV抗体时，保存及携带方便，具有检测速度快及操作简便等优点，但其诊断特异性及敏感度并不高[9]。ELISA测定HIV抗体简便易行，是将HIV抗原或抗体包被在固相载体上，加入酶标记的特异性二抗，根据酶作用底物后的显色颜色对试验结果进行判断，属于一种半定量的检测技术[10]。其能够对HIV抗体直接检测，也能对血液标本、组织标本中微量HIV抗体进行检测，且不会受类风湿因子干扰，诊断敏感度及特异度较高[11]。但由于HIV抗原及其他反转录病毒间会发生交叉反应，故采用ELISA测定HIV抗体也会存在假阳性现象，增加与受检者之间的纠纷[12]。本研究探讨了ELISA测定HIV抗体对AIDS的诊断价值，并与胶体金法诊断HIV抗体结果进行比较。结果显示，1820例AIDS高危人群或疑似HIV感染患者经蛋白印迹证实阳性、阴性各有21例、1799例；以蛋白印迹诊断结果作为金标准，ELISA诊断HIV抗体敏感度、特异度及准确率、阴性预测值、阳性预测值高于胶体金法（P<0.05）；胶体金法诊断HIV抗体结果与蛋白印迹诊断结果的一致性差（Kappa=0.051，P=0.000）；ELISA诊断HIV抗体结果与蛋白印迹诊断结果的一致性较为理想（Kappa=0.511，P<0.001）。提示与胶体金法相比，ELISA测定HIV抗体敏感度、特异度、阴性预测值、阳性预测值较高，与蛋白印迹诊断结果的一致性较为理想，能够准确筛查HIV抗体，降低误诊及漏诊率，最大限度发现HIV感染患者，有利于为AIDS的早期诊断及治疗提供参考。虽然本次研究中ELISA用于筛查HIV抗体中的准确率、敏感度及特异度均高于胶体金法，检查结果准确、便捷且快速，可作为筛查HIV抗体一种成本效益最优的检测方法；但ELISA测定中也存在假阳性及假阴性现象，会导致漏诊、误诊的发生，故临床上应该加强对HIV相关检查方法的研究，以期为AIDS的诊断、预防及治疗提供确切指导，使AIDS的检测策略更加完善。综上所述，ELISA诊断HIV抗体效能优于胶体金法，且与蛋白印迹诊断结果的一致性较为理想，有利于提高AIDS的检出率，为其防治提供依据。

作者：何奕斌 单位：深圳市龙岗区第三人民医院